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甜瓜枯萎病菌ELISA检测方法的初步建立

浙江农业学报 2018年第12期30卷 2081-2086页

作者：延涵杨瑞秀盖晓彤李刚赵治国高增贵内蒙古出入境检验检疫局检验检疫技术中心内蒙古呼和浩特010020 沈阳农业大学植物免疫所辽宁沈阳110866

采用甜瓜枯萎病病菌菌丝蛋白作为抗原,制备该病菌菌丝蛋白的多克隆抗体,建立检测甜瓜枯萎病菌的间接ELISA检测方法。利用检测技术对田间病样和土壤中的病原菌含量进行了定性、定量检测,表现出方便、特异性强、灵敏度高的特点。可运用此... 详细信息

采用甜瓜枯萎病病菌菌丝蛋白作为抗原,制备该病菌菌丝蛋白的多克隆抗体,建立检测甜瓜枯萎病菌的间接ELISA检测方法。利用检测技术对田间病样和土壤中的病原菌含量进行了定性、定量检测,表现出方便、特异性强、灵敏度高的特点。可运用此方法对甜瓜枯萎病进行田间检测。

关键词：甜瓜枯萎病菌多克隆抗体 ELISA

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甜瓜枯萎病菌原生质体的制备及再生条件筛选

分子植物育种 2021年第16期19卷 5475-5481页

作者：毛建才李俊华王豪杰闫淼翟文强新疆农业科学院哈密瓜研究中心乌鲁木齐830091

获得甜瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f. sp. melonis)具有再生功能的原生质体,是构建其高效遗传转化体系的重要途径之一。本研究采用单因素分析法分析了甜瓜枯萎病菌菌丝摇培时间、裂解酶浓度、酶解时间和温度、渗透压稳定剂的种类和... 详细信息

获得甜瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f. sp. melonis)具有再生功能的原生质体,是构建其高效遗传转化体系的重要途径之一。本研究采用单因素分析法分析了甜瓜枯萎病菌菌丝摇培时间、裂解酶浓度、酶解时间和温度、渗透压稳定剂的种类和浓度及p H对原生质体释放的影响,并对再生培养基种类和培养基琼脂浓度等再生条件进行优化,建立了高效制备甜瓜枯萎病菌原生质体的稳定体系。结果表明,将分生孢子培养18 h后收集菌丝体,以1.2 mol/L的KCl作为稳定剂,在pH 6.0的条件下,加入10 mg/m L的裂解酶,32℃酶解4 h,获得的原生质体产量最高,在琼脂浓度为0.5%(W/V)的SR固体培养基中进行原生质体再生,再生率最高,可达26.32%。本研究结果为甜瓜枯萎病菌的分子生物学研究和抗病育种提供技术支持。

关键词：甜瓜枯萎病菌原生质体优化

甜瓜枯萎病菌的生物学特性及防治药剂的室内筛选

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上海农业学报 2010年第1期26卷 129-132页

作者：赵杰庄隽怡唐亚芹顾振芳上海市南汇区种植业技术推广中心上海201300 上海市七宝中学上海201101 上海交通大学农业与生物学院上海200240

研究了甜瓜枯萎病菌的生物学特性，并对防治药剂进行了室内初步筛选。结果表明：菌丝生长的适宜温度范围为5～35℃，最适温度30℃，菌丝和孢子的致死温度为58℃；光暗交替条件下产孢量最大。生理生化特性测定结果表明：甜瓜枯萎病菌对... 详细信息

研究了甜瓜枯萎病菌的生物学特性，并对防治药剂进行了室内初步筛选。结果表明：菌丝生长的适宜温度范围为5～35℃，最适温度30℃，菌丝和孢子的致死温度为58℃；光暗交替条件下产孢量最大。生理生化特性测定结果表明：甜瓜枯萎病菌对孔雀石绿不敏感，对淀粉和硝态氮的利用能力强。采用生长速率法测定了9种杀菌剂对病菌的抑制作用，其中多菌灵和氟硅唑的毒力较高，EC30分别为2．2671mg／L和13．3418mg／L。

关键词：甜瓜枯萎病菌生物学特性生化特性抑制作用杀菌剂筛选

甜瓜枯萎病菌拮抗细菌在不同耕作土壤中的分布及其功能研究

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甜瓜枯萎病菌拮抗细菌在不同耕作土壤中的分布及其功能研究

作者：金扬秀浙江大学

学位级别：硕士

从杭州菜园地、嘉兴大棚甜瓜田采集不同来源根际土壤和非根际土壤共14批(每批3份)，利用平板稀释法和对峙法测定细菌、枯萎病菌数量及拮抗细菌的分布，结果显示，轮作后细菌总量明显增加，枯萎病菌数量降低，细菌和真菌比值(B／F值)增... 详细信息

从杭州菜园地、嘉兴大棚甜瓜田采集不同来源根际土壤和非根际土壤共14批(每批3份)，利用平板稀释法和对峙法测定细菌、枯萎病菌数量及拮抗细菌的分布，结果显示，轮作后细菌总量明显增加，枯萎病菌数量降低，细菌和真菌比值(B／F值)增加，同时土壤中细菌数量越多，拮抗细菌的比例越高，尤其以大蒜与甜瓜轮作细菌数量最多，拮抗细菌比例也最高;细菌数量以菜园土壤中最高，甜瓜根际土壤次之，非根际土壤中数量最少。从14批土壤中共分离获得840个细菌分离物，在离体条件下测定他们对甜瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum *** melonis)的拮抗能力，结果显示43个菌株具有拮抗性，占总检测数的5.11％，其中分离自甜瓜根际土壤和非根际土壤的拮抗菌株为17个和10个，分别占5.67％和3.33％;分离自菜园蔬菜根际的拮抗菌株16个，占6.67％。经复筛后从中获得15个拮抗性较好的菌株，平板对峙法测定拮抗指数大小，结果表明，拮抗指数在2.0以上的拮抗细菌有9个，其中大多数来自根际土壤，1.0～2.0之间的有4个，1.0以下的有2株。数据显示，土壤中细菌数量的多少与拮抗细菌的分布有一定的关系，细菌总量与拮抗细菌数成正比;菜园土中细菌数量与拮抗细菌比例高于大棚甜瓜土壤;甜瓜大棚根际土壤细菌数量与拮抗细菌比例都明显高于非根际土壤，而且根际土壤中筛选出的拮抗细菌普遍拮抗指数高，离体拮抗作用强。选取离体拮抗作用较好的9个拮抗菌株进行拮抗稳定性和抑菌谱测定，筛选出拮抗作用较稳定且抑菌谱宽的拮抗菌株7个，各菌株的培养滤液对菌丝生长和分生孢子萌发的抑制作用测定表明，它们均表现不同程度的抑菌活性，其中菌株Hc2和Hc3的抑制作用最强，培养滤液稀释50％时能完全抑制菌丝生长;凹玻片法测定拮抗细菌培养滤液与分生孢子悬浮液混合后抑制孢子萌发率的结果表明，Ec50值越低，抑制力越强，Hc3菌株的培养滤液在5％时抑制率也达50％。对7株拮抗细菌处理盆栽甜瓜种子后发现，Hc1，Hc2，Hc3和Jt6四个拮抗细菌表现较好的促生作用，其中菌株Hc2对芽和胚根的促生效果最好;Hc1、Hc3和Jt6则对幼苗的生长有一定的促进作用。在对甜瓜幼苗的防效试验中，4株拮抗细菌在处理后10天有很好的防效，相对防效最高可达65.4％，但是在处理后20天，防效显著降低。 16个桔抗菌株的细菌学、Biolog和分子生物学（RenPCR）鉴定表明，阴性粘抗菌株大多数属于Pseudomonas spp，是土壤中的优势菌株，部分属于Burkholderta SPP．;Biolog 鉴定相《性在 0．50 以上的种有尸ae峪lviosa;Wu订d;Presinovorans;叭o删censC P v个法广人。州和 Bu啪oWM c叩acm。

关键词：不同耕作土壤拮抗细菌甜瓜枯萎病菌生物特性鉴定

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内吸性杀菌剂对甜瓜枯萎病菌的室内毒力测定

长江蔬菜 2009年第6X期 67-69页

作者：赵杰倪秀红顾振芳上海市南汇区种植业技术推广中心 201300 上海交通大学农业与生物学院

采用生长速率法测定了几种内吸性杀菌剂对甜瓜枯萎病菌的毒力。试验结果表明,多菌灵和氟硅唑的毒力最高,其EC50分别为2.2671mg/L和13.3418mg/L;而且枯萎病菌对多菌灵和氟硅唑的敏感性也较高;多菌灵和氟硅唑对枯萎病菌的联合毒力测定结... 详细信息

采用生长速率法测定了几种内吸性杀菌剂对甜瓜枯萎病菌的毒力。试验结果表明,多菌灵和氟硅唑的毒力最高,其EC50分别为2.2671mg/L和13.3418mg/L;而且枯萎病菌对多菌灵和氟硅唑的敏感性也较高;多菌灵和氟硅唑对枯萎病菌的联合毒力测定结果表明,两种药以6:1和1:6混配,具有增效作用。

关键词：内吸性杀菌剂甜瓜枯萎病菌毒力测定

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几种杀菌剂对甜瓜枯萎病菌的室内毒力测定

上海交通大学学报（农业科学版） 2006年第4期24卷 386-388,393页

作者：赵杰周超英顾振芳南汇区农业技术推广中心上海201300 上海交通大学农业与生物学院上海201101

采用生长速率法和抑菌圈法测定了9种杀菌剂对甜瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum ***)的毒力。抑菌圈法测定结果表明多菌灵和咯菌腈对甜瓜枯萎病菌的毒力最高,其3d的EC50分别为783.7905mg·L-1和975.2145mg·L-1;生长速率法测定结果表明:... 详细信息

采用生长速率法和抑菌圈法测定了9种杀菌剂对甜瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum ***)的毒力。抑菌圈法测定结果表明多菌灵和咯菌腈对甜瓜枯萎病菌的毒力最高,其3d的EC50分别为783.7905mg·L-1和975.2145mg·L-1;生长速率法测定结果表明:多菌灵和多菌灵-五氯硝基苯对病原菌的抑制率最高,7d的EC50分别为2.4757mg·L-1和3.3570mg·L-1。

关键词：杀菌剂甜瓜枯萎病菌毒力多菌灵

干酪乳杆菌IMAU10041抗甜瓜枯萎病菌的作用及理化性质

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天津科技大学学报 2011年第3期26卷 12-15,23页

作者：戚薇颜虎魏玉洁王海宽工业发酵微生物教育部重点实验室天津科技大学生物工程学院天津300457

从60株乳酸菌中筛选出22株具有抗甜瓜枯萎病菌活性的乳酸菌菌株,其中9株具有较强抗甜瓜枯萎病菌活性.对这9株乳酸菌的抗植物致病真菌谱进行研究发现,9株菌对番茄早疫病菌(Alternaria solani)、甜瓜疫霉菌(Phytophthora drechsleri Tuck... 详细信息

从60株乳酸菌中筛选出22株具有抗甜瓜枯萎病菌活性的乳酸菌菌株,其中9株具有较强抗甜瓜枯萎病菌活性.对这9株乳酸菌的抗植物致病真菌谱进行研究发现,9株菌对番茄早疫病菌(Alternaria solani)、甜瓜疫霉菌(Phytophthora drechsleri Tucker)、苹果炭疽病菌(Glomerella cingulate)、灰葡萄孢霉菌(Botrytis cinerea)的生长均有抑制作用.其中干酪乳杆菌IMAU10041对甜瓜枯萎病菌具有较强的抑制作用,并且对甜瓜疫霉和番茄早疫病菌有较高的抑菌活性.分别经过调节pH、加热、蛋白酶处理干酪乳杆菌IMAU10041的发酵滤液后,发现干酪乳杆菌IMAU10041发酵液具有一定的热稳定性;在pH 4.0时具有最大抑菌活性,在碱性条件下抑菌活性迅速失活;发酵液经胰蛋白酶、中性蛋白、蛋白酶K处理后失去部分抑菌活性,这表明干酪乳杆菌IMAU10041发酵液中可能含有一定的蛋白类抑菌物质.

关键词：植物致病真菌抗真菌活性甜瓜枯萎病菌乳酸菌干酪乳杆菌

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植物水浸液对甜瓜枯萎病菌的抑菌活性初探

上海农业科技 2009年第4期 112-112页

作者：赵杰乔天杰唐赵莲上海市南汇区种植业技术推广中心 201300 上海市南汇区第二初级中学 201300 上海市南汇区青少年科技艺术指导中心 201300

农业可持续发展和环境保护要求开发出高效、安全、低毒、低抗性的新型农药,为开发新型植物杀菌剂,笔者就4种植物对甜瓜枯萎病菌的抑菌活性进行了测定,结果表明,加拿大一枝黄花根茎水浸液效果最好。

关键词：植物水浸液甜瓜枯萎病菌抑菌活性

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狼毒大戟根提取物抑菌活性及其提取方法初探

中国蔬菜 2010年第16期 67-73页

作者：孙瑞艳陈亚彤范海延于佳霖潘健沈阳农业大学生物科学技术学院辽宁沈阳110161

以连续回流提取法从狼毒大戟根中提取得到抑菌活性物质,采用生长速率法进行离体抑菌试验确定其对多种植物病原真菌的抑菌活性。狼毒大戟根提取物对黄瓜枯萎病菌、菜豆炭疽病菌、甜瓜枯萎病菌等9种供试病原真菌菌丝生长均有一定的抑制作... 详细信息

以连续回流提取法从狼毒大戟根中提取得到抑菌活性物质,采用生长速率法进行离体抑菌试验确定其对多种植物病原真菌的抑菌活性。狼毒大戟根提取物对黄瓜枯萎病菌、菜豆炭疽病菌、甜瓜枯萎病菌等9种供试病原真菌菌丝生长均有一定的抑制作用。通过单因素试验和正交试验确定最优提取工艺为:以90%乙醇作为溶剂,料液比1︰20,在提取温度为65℃和提取溶剂pH为10.0条件下提取90min,提取次数为2次。

关键词：狼毒大戟有机溶剂提取物抑菌活性黄瓜枯萎病菌菜豆炭疽病菌甜瓜枯萎病菌