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作者：颜坤山东农业大学

学位级别：硕士

本文以转正义甜椒甘油-3-磷酸酰基转移酶(CaGPAT)基因烟草和野生型烟草为实验材料,研究了转基因烟草类囊体膜脂组成的变化,高温胁迫对转基因烟草光合速率和荧光特性的影响,以及高温解除后转基因烟草光合功能的恢复过程。为更好的研究G... 详细信息

本文以转正义甜椒甘油-3-磷酸酰基转移酶(CaGPAT)基因烟草和野生型烟草为实验材料,研究了转基因烟草类囊体膜脂组成的变化,高温胁迫对转基因烟草光合速率和荧光特性的影响,以及高温解除后转基因烟草光合功能的恢复过程。为更好的研究GPAT基因的功能,以“中椒二号”甜椒子叶为外植体,通过农杆菌介导的叶盘法,将该基因转化甜椒,现已获得转基因甜椒植株。主要结果如下: 1、转基因烟草类囊体膜的单半乳糖甘油二脂(MGDG),双半乳糖甘油二脂(DGDG),硫代异鼠李糖甘油二脂(SQDG)和磷脂酰甘油(PG)的饱和程度均上升,其中MGDG饱和程度增加了16.2%,上升幅度最为显著。 2、不同高温处理后,转基因烟草植株Pn下降幅度显著小于野生型植株,说明高温胁迫下转基因烟草光合能力强于野生型。 3、高温胁迫下,转基因烟草和野生型的Fv/Fm、Fv’/Fm’、qP、ΦPSⅡ均显著下降,但转基因烟草均显著高于野生型,表明转基因烟草的PSⅡ耐高温能力高于野生型。 4、在长时间高温胁迫后恢复过程中,转基因烟草的WK与野生型无显著差异,而Vj、MO、Fv’/Fm’、qP恢复较快,表明转基因烟草类囊体膜脂饱和程度的变化对放氧复合体的恢复过程没有影响,对受体侧电子传递能力和捕光能力的恢复有促进作用。转基因烟草的Fv/Fm、PI也相对恢复较快,说明转基因烟草PSⅡ总体性能恢复较快。 5、本研究成功获得转基因甜椒,并筛选出一个有效的甜椒转化体系:芽诱导培养基为MS+5mg/L 6-BA+1mg/L IAA+10mg/L AgNO;芽伸长培养基为MS+1-2mg/L GA3+1mg/L IAA;生根培养基为MS+0.5mg/L IAA。体系优点是药品低廉,操作简单;缺点是转化率相对较低。因此,该体系还需大量的后续工作来完善。

关键词：甜椒甘油-3-磷酸酰基转移酶基因转基因烟草类囊体膜脂高温胁迫 PSⅡ光抑制甜椒转化体系

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高温胁迫对转甜椒甘油-3-磷酸酰基转移酶基因烟草PSⅡ光化学活性的影响

高温胁迫对转甜椒甘油-3-磷酸酰基转移酶基因烟草PSⅡ光化学活性...

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作者：赵世杰山东农业大学

学位级别：硕士

植物在生长发育过程中经常会遭受到强光、高温、低温、干旱和涝害等逆境胁迫,从而影响植物正常的生理生化代谢过程。温度是限制植物生长、发育及产量的重要环境因子,特别是近年来,随着工业发展,大量排放CO,大气中的CO浓度不断升高,形成... 详细信息

植物在生长发育过程中经常会遭受到强光、高温、低温、干旱和涝害等逆境胁迫,从而影响植物正常的生理生化代谢过程。温度是限制植物生长、发育及产量的重要环境因子,特别是近年来,随着工业发展,大量排放CO,大气中的CO浓度不断升高,形成“温室效应”,气温持续升高,导致作物产量降低,品质下降,给农业生产造成越来越严重的损失,因此,高温对作物产量和品质的影响日益受到人们的重视。生物膜上各种脂类的饱和程度与植物对温度逆境的响应有着密切的关系。甘油-3-磷酸酰基转移酶（GPAT: EC2.***.1.15）作为甘油脂合成途径中的第一个酶,对不同底物的选择性差异影响类囊体膜甘油脂的饱和程度,因此GPAT在植物膜系统对温度的响应过程中起重要作用。本文以转正义甜椒甘油-3-磷酸酰基转移酶（CaGPAT）基因烟草和野生型烟草为实验材料,研究了转基因烟草类囊体膜脂组成的变化、高温胁迫下转基因烟草PSII对光能的吸收、电子传递能力及光化学活性的影响,为转基因改良作物新品种,提高抗逆性提供理论参考。主要结果如下:1、转甜椒GPAT基因烟草类囊体膜脂类的相对含量变化不大,PG含量稍有上升。但是,类囊体膜脂的单半乳糖甘油二脂（MGDG）,双半乳糖甘油二脂（DGDG）,硫代异鼠李糖甘油二脂（SQDG）和磷脂酰甘油（PG）的饱和程度均上升,其中MGDG饱和程度增加了16.2%,上升幅度最为显著。2、随着胁迫温度的升高,转基因烟草植株与野生型植株Pn,Fv/Fm,ΦPSⅡ,Fv’/Fm’,qP不断降低,二者变化趋势相同,在35℃时无明显差异,40～48℃之间转基因植株下降的幅度明显小于野生型,48℃胁迫下差异最为显著。随着胁迫温度的升高,转基因烟草植株Fo,NPQ上升幅度小于野生型植株,说明转基因烟草植株PSⅡ在高温下能够维持较高的光化学活性,从而在一定的程度上维持较高的光合速率,提高了转基因烟草耐高温能力。3、在35～44℃温度范围内,转基因烟草和野生型烟草的Q还原程度和还原速率均增加,表明Q到Q的电子传递的受到抑制。转基因烟草的电子传递受抑制程度小,表明转基因植株改变膜脂组分后PSⅡ的电子受体耐高温的能力显著提高。高温损伤电子传递体,导致受体接受电子的能力减弱,电子受体库因而变小,Q氧化还原次数也随之减小,野生型烟草PSⅡ的电子受体库耐受高温的能力小于转基因烟草。4、48℃高温胁迫后,转正义甜椒GPAT基因烟草膜系统受伤害程度较轻,F/F,Ψo和Fv’/Fm’的变化幅度较小,Fv/Fm,ΦPSII维持在相对较高的水平。这说明转基因烟草PSⅡ供体侧放氧复合体和受体侧电子传递以及捕光色素复合体受高温影响较小,因此能在高温下维持相对较高的光化学效率。

关键词：转基因烟草甜椒甘油-3-磷酸酰基转移酶基因类囊体膜脂脂肪酸组分高温胁迫 PSⅡ光化学活性

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高温胁迫下转甜椒正义甘油-3-磷酸酰基转移酶基因(GPAT)烟草缓解PSⅡ光抑制

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中国农业科学 2007年第11期40卷 2468-2473页

作者：颜坤陈娜曲妍妍郭峰孟庆伟赵世杰山东农业大学生命科学学院/作物生物学国家重点实验室中国科学院植物研究所

【目的】探讨类囊体膜脂组成与高温光抑制的关系。【方法】以转甜椒正义甘油-3-磷酸酰基转移酶基因(GPAT)的烟草植株为试验材料,测定了类囊体膜脂组成,高温胁迫后的光合参数和叶绿素荧光参数。【结果】转基因烟草植株类囊体膜的单半乳... 详细信息

【目的】探讨类囊体膜脂组成与高温光抑制的关系。【方法】以转甜椒正义甘油-3-磷酸酰基转移酶基因(GPAT)的烟草植株为试验材料,测定了类囊体膜脂组成,高温胁迫后的光合参数和叶绿素荧光参数。【结果】转基因烟草植株类囊体膜的单半乳糖甘油二脂(MGDG),双半乳糖甘油二脂(DGDG),硫代异鼠李糖甘油二脂(SQDG)和磷脂酰甘油(PG)的饱和程度均上升,其中MGDG饱和程度增加了16.2%,上升幅度最为显著。随胁迫温度的升高,转基因烟草植株与野生型植株Fv/Fm,ΦPSⅡ和Pn逐渐下降,但转基因植株下降幅度小于野生型,48℃时差异最为显著。【结论】转基因烟草植株类囊体膜脂脂肪酸饱和度增加,提高了PSⅡ热稳定性,缓解了PSⅡ光抑制。

关键词：甜椒甘油-3-磷酸酰基转移酶基因烟草类囊体膜脂高温胁迫 PSⅡ光抑制

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