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甘蓝型油菜凸耳隐性细胞核雄性不育系的转育及育性表现

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种子 2005年第7期24卷 19-22页

作者：魏忠芬张太平王军李德文贵州省农科院油料研究所贵阳550006 贵州省农业厅贵阳550001

以自育的甘蓝型油菜双低细胞核隐性核不育材料98116A为母本与甘蓝型油菜凸耳双低品系T2632为杂交父本进行杂交转育,在F1可育株自交的同时进行去雄与杂交父本进行正反交,在杂交后代中选取生长健壮具有凸耳性状的可育株自交,并调查自交后... 详细信息

以自育的甘蓝型油菜双低细胞核隐性核不育材料98116A为母本与甘蓝型油菜凸耳双低品系T2632为杂交父本进行杂交转育,在F1可育株自交的同时进行去雄与杂交父本进行正反交,在杂交后代中选取生长健壮具有凸耳性状的可育株自交,并调查自交后代中的育性分离比例,自交4个世代后进行兄妹交,即获得双低的凸耳甘蓝型油菜隐性细胞核雄性不育系,该不育系的不育株率远高于98116A,其不育株率达到90%以上,而且其育性遗传恢复机理也发生了改变。该不育系在油菜隐性核不育两系杂优育种的研究与利用中具有重大的研究价值和应用前景。

关键词：细胞核雄性不育系甘蓝型油菜凸耳育性表现杂交父本不育株率甘蓝型油莱隐性核不育杂交转育不育材料杂交后代育性分离自交后代育性遗传研究价值杂优育种可育株双低正反交兄妹交母本去雄世代两系

辐照诱导的新雄性不育系过氧化物酶和脂酶同工酶分析

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核农学报 2005年第4期19卷 304-306页

作者：林宝刚张明龙王桂荣浙江大学原子核农业科学研究所浙江杭州310029

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳法,对甘蓝型油菜细胞质雄性不育系Polima、Shan2A、Ogu和辐照处理的新雄性不育系Xin1和Xin2及其保持系Shan2B的种子进行了脂酶和过氧化物酶分析,结果表明:5个细胞质雄性不育系比保持系Shan2B多1条迁移率为0... 详细信息

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳法,对甘蓝型油菜细胞质雄性不育系Polima、Shan2A、Ogu和辐照处理的新雄性不育系Xin1和Xin2及其保持系Shan2B的种子进行了脂酶和过氧化物酶分析,结果表明:5个细胞质雄性不育系比保持系Shan2B多1条迁移率为0.45的脂酶(EST)谱带;Xin1、Shan2A和Polima各有4条过氧化物酶(POD)谱带,保持系缺少1条迁移率为0.61的POD谱带,推测这一同工酶的表达可能与雄性不育相关。

关键词：甘蓝型油菜细胞质雄性不育脂酶过氧化物酶过氧化物酶(POD) 细胞质雄性不育系同工酶分析辐照诱导聚丙烯酰胺凝胶甘蓝型油莱

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甘蓝型油菜无菌苗培养方法的优化

河南农业科学 2009年第6期38卷 35-37,41页

作者：李旭娇田保明范兴福师恭耀宋铮裴振强王伯楠孙丹丹高树广郑州大学生物工程系河南郑州450001 河南省标准研究院河南郑州450002

以甘蓝型油菜种子为试验材料,研究了用于无菌苗培养的种子的不同消毒方法,及种子贮存时间和贮存温度对种子消毒效果的影响,最终确定适于组织培养和转基因用苗的油菜种子的最佳消毒方法和培养方法。结果表明：组织培养和转基因油莱无菌... 详细信息

以甘蓝型油菜种子为试验材料,研究了用于无菌苗培养的种子的不同消毒方法,及种子贮存时间和贮存温度对种子消毒效果的影响,最终确定适于组织培养和转基因用苗的油菜种子的最佳消毒方法和培养方法。结果表明：组织培养和转基因油莱无菌苗培养的最佳条件为：选用新收的油菜种子,4℃冰箱中保存,70%酒精表面消毒0.5-1 min后,用0.1%HgCl2消毒10 min,无菌水冲洗5-6次,无菌水浸泡种子4-5 h,接种至pH值为5.8的MS培养基,25℃暗培养1-2 d,转至16 h/d光照下生长4-5 d即可作为组织培养和转基因用无菌苗。

关键词：甘蓝型油莱无菌苗消毒方法优化

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甘蓝型油菜DH系培养技术优化

安徽农业科学 2008年第32期36卷 13972-13974,14059页

作者：李超林茂肖华贵杨斌饶勇贵州省油料研究所贵州贵阳550006 西南大学农学与生物科技学院重庆400716

[目的]研究消毒处理方式、培养基成分和胚状体培养方法对油菜游离小孢子培养的影响。[方法]以B5培养基为基础培养基，添加不同浓度的蔗糖、琼脂及不同激素组合进行试验，对油莱DH系的组培技术进行优化。[结果]含2％Cl^-的NaCIO消毒15min... 详细信息

[目的]研究消毒处理方式、培养基成分和胚状体培养方法对油菜游离小孢子培养的影响。[方法]以B5培养基为基础培养基，添加不同浓度的蔗糖、琼脂及不同激素组合进行试验，对油莱DH系的组培技术进行优化。[结果]含2％Cl^-的NaCIO消毒15min与0．1％HgCl，消毒10min培养效果较好，都能达到良好的消毒和产胚效果；在游离小孢子提取的过程中，B5液体培养基中蔗糖浓度为2％时能达到较好的产胚效果；小孢子培养首先在32℃暗培养5～7d，然后25℃暗培养12～15d，最后25℃振荡暗培养3～7d胚状体就可完全成熟；1／2MS培养基（附加1．2％琼脂＋0．02％NAA＋2．0mg／L6-BA＋3．4mg／L AgNO3＋2％蔗糖）有利于胚的分化和苗的形成，其褐化程度小，玻璃化程度低。[结论]该研究结果有助于甘蓝型油菜DH系的规模化生产及高效转化体系的建立。

关键词：甘蓝型油莱 DH系培养基胚状体

甘蓝型油菜乙酰辅酶A羧化酶3个亚基基因的克隆及其表达

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安徽农业科学 2008年第10期36卷 4002-4006页

作者：武玉永谭秀华马立新滨州医学院遗传学教研室山东烟台264003 湖北大学生命科学学院分子微生物学与基因工程实验室湖北武汉430062

[目的]为构建乙酰辅酶A羧化酶的叶绿体表达载体奠定基础：[方法]以从甘蓝型油菜叶片中提取的叶绿体基因组DNA为模板进行PCR扩增，克隆羧基转移酶β亚基基因.以从开花20～29d后油菜幼胚中提取的总RNA为模板进行RT-PCR扩增，克隆生物素羧... 详细信息

[目的]为构建乙酰辅酶A羧化酶的叶绿体表达载体奠定基础：[方法]以从甘蓝型油菜叶片中提取的叶绿体基因组DNA为模板进行PCR扩增，克隆羧基转移酶β亚基基因.以从开花20～29d后油菜幼胚中提取的总RNA为模板进行RT-PCR扩增，克隆生物素羧化酶和生物素羧基载体蛋白的。cDNA序列。最后，乙酰辅酶A羧化酶的3个亚基基因被克隆到大肠杆菌表达载体中：[结果]SDS-PAGE分析结果表明乙酰辅酶A羧化酶的3个亚基基因分别被克隆到大肠杆菌表达载体中。乙酰辅酶A羧化酶的3个亚基基因在大肠杆菌中的表达产物分别为76．6、44．0和81．5kD，其融合蛋白分别占总菌体蛋白的12％、10％和6％。

关键词：甘蓝型油莱乙酰辅酶A羧化酶基因克隆基因表达

甘蓝型油菜千粒重主效QTLSWA7精细定位

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甘蓝型油菜千粒重主效QTLSWA7精细定位

作者：程爽杭州师范大学

学位级别：硕士

本课题组前期借助分子标记和QTL定位等生物学手段在9个环境下利用282个SG-DH （Sollux/Gaoyou）群体对甘蓝型油菜的19条连锁群进行了千粒重QTL的初定位,其中在第7条连锁群上发现了一个主效QTLSWA7,并且在7个环境中稳定表达,位于标记EST... 详细信息

本课题组前期借助分子标记和QTL定位等生物学手段在9个环境下利用282个SG-DH （Sollux/Gaoyou）群体对甘蓝型油菜的19条连锁群进行了千粒重QTL的初定位,其中在第7条连锁群上发现了一个主效QTLSWA7,并且在7个环境中稳定表达,位于标记EST12a到ZAAS864之间,遗传距离为40.3cM,平均加性效应为0.148g。随后,刘玉霞在此基础上对SWA7精细定位,利用BC3F2/BC3F3（基因型/表现型,下同）和BC4F1/BC4F2世代群体将目标区间锁定在标记sR0282R至ZAA864之间4.3cM的遗传距离（刘玉霞,未发表）,两亲本间等位基因的差异达0.231g。前人的研究结果为后续SWA7精细定位和图位克隆打下了良好的基础。本研究在以上基础进行,通过对目标区间标记辅助选育,材料包含受体亲本Gaoyou目标基因组片段的近等替换系BC4F2、BC5F1、BC4F3、BC5F2和BC6F1共5个世代,借助白菜第7条连锁群的基因组序列信息发展位置特异性标记。进一步对QTL目标区间进行确认和精细定位,主要研究结果如下：一、近等替换系的培育本研究根据前期构建的近等替换系的基础上,发展了BC4F3、BC5F2和BC6F1共3个世代的近等替换系,株系的选取原则为不同染色体分离片段重叠覆盖目标区间。二、SWA7目标区间的确认利用BC4F2/BC4F3、BC5F1/BC5F2这2个世代的单株的基因型和自交后代株系的表现型对刘玉霞精细定位的SWA7QTL区间进行确认。通过单标记的关联分析和近等替换系之间的比对,发现标记sR0282R至ZAA864之间确实存在一个主效QTL,在这个区间内,Sollux和Gaoyou等位基因间存在显著差异（P＜0.001）,均值差平均为0.217g。三、目标区间分子标记的加密将目标QTL区间确认在标记sR0282R至S158-7后,借助白菜第7条连锁群上基因组序列信息针对目标区域发展位置特异性标记,在标记RF36至S158-7增加了22个分子标记。四、SWA7的精细定位利用BC4F3、BC5F2和BC6F13个世代单株基因型和相应的自交后代表现型对SWA7进行精细定位。通过单标记关联分析以及近等替换系间的比对分析,将目标区间预测至标记N7-109至A07-2,物理臣离为78kb。亲本等位基因千粒重的均值差为0.230g。五、生物信息学分析对SWA778kb的物理距离进行生牧信息学分析,发现该区间包含约12个ORF（基因）。目前针对这12个ORF序列发展的标记三在做进一步的精细定位,同时在近等替换系材料（和双亲）中筛选差异基因，重点首先放在与抗性相关和与糖类、脂质代谢相关的4个ORF三：

关键词：甘蓝型油莱千粒重近等替换系精细定位

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双低油菜新品种“沪油16”的选育

上海农业学报 2003年第3期19卷 13-15页

作者：孙超才赵华王伟荣李延莉钱小芳方光华上海市农业科学院作物育种栽培研究所上海201106

“沪油16”是采用品种(系)间杂交方法育成的甘蓝型双低油菜新品种,种子含油率41.22％、芥酸含量为0.71％、硫苷含量为20.62μmol/g。该新品种在上海市油菜区域试验和生产试验中,平均菜籽产量达2387.3kg/hm2,比双低油菜品种“沪油12”增... 详细信息

“沪油16”是采用品种(系)间杂交方法育成的甘蓝型双低油菜新品种,种子含油率41.22％、芥酸含量为0.71％、硫苷含量为20.62μmol/g。该新品种在上海市油菜区域试验和生产试验中,平均菜籽产量达2387.3kg/hm2,比双低油菜品种“沪油12”增产11.4％。沪油16适应于我国长江中下游冬油菜主产区种植。

关键词：双低油菜新品种 “沪油16” 选育甘蓝型油莱杂交育种