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甘草总黄酮及其成分体外抗炎活性及机制研究

中国中药杂志 2013年第1期38卷 99-104页

作者：杨晓露刘朵卞卡章丹丹上海中医药大学穆拉德中药现代化研究中心上海201203 美国乔治华盛顿大学生物化学与分子生物学系美国华盛顿dc20052

目的:考察甘草总黄酮(TFGR)及其成分对干扰素-γ(IFN-γ)和脂多糖(LPS)协同诱导巨噬细胞RAW264.7炎症模型的抗炎机制。方法:应用溶剂萃取和大孔树脂富集纯化制备甘草醇提物、组分及总黄酮,紫外分光光度法测定总黄酮的含量;IFN-γ和LPS... 详细信息

目的:考察甘草总黄酮(TFGR)及其成分对干扰素-γ(IFN-γ)和脂多糖(LPS)协同诱导巨噬细胞RAW264.7炎症模型的抗炎机制。方法:应用溶剂萃取和大孔树脂富集纯化制备甘草醇提物、组分及总黄酮,紫外分光光度法测定总黄酮的含量;IFN-γ和LPS协同诱导细胞炎症模型;Greiss反应法测定各层次提取物及黄酮类单体对细胞上清液中亚硝酸盐含量的影响;FRAP法测定总抗氧化能力;RT-PCR法考察TFGR及异甘草素对细胞内诱导型一氧化氮合酶iNOS,COX-2,IL-1β,IL-6,PPAR-γmRNA的影响;Western blot法考察TFGR及异甘草素对细胞iNOS,COX-2及MAPK信号转导通路的影响。结果:甘草乙酸乙酯部位与其他提取物相比,在相同剂量时对亚硝酸盐含量的抑制率最高。乙酸乙酯提取物经大孔树脂富集的甘草总黄酮(甘草苷占60.08%)呈剂量依赖性抑制细胞上清液中亚硝酸盐的含量且优于乙酸乙酯提取物,并对刺激后的细胞活力有保护作用,且总抗氧化能力也强于其他提取物;TFGR抑制iNOS,IL-6 mRNA并提高PPAR-γ基因水平,抑制iNOS,COX-2,p-ERK的蛋白表达;甘草黄酮类单体异甘草素能抑制iNOS,COX-2基因和蛋白表达水平和IL-1β,IL-6的基因表达,还能上调PPAR-γ的基因表达。结论:活性导向的分离提示乙酸乙酯部位是甘草抗炎活性组分之一,由此活性组分富集得到的TFGR呈剂量依赖性抑制细胞上清液中亚硝酸盐含量,部分通过丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)中的细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路抑制iNOS和COX-2基因和蛋白的表达而达到抗炎效果。其中异甘草素可能为TFGR抗炎的活性成分。

关键词：甘草总黄酮巨噬细胞炎症作用机制

甘草总黄酮对慢性浅表性胃炎大鼠胃粘膜损伤的保护作用

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南方医科大学学报 2013年第2期33卷 299-304页

作者：林晓春陈育尧白殊同郑君佟丽南方医科大学中医药学院广东广州510515

目的研究甘草总黄酮对慢性浅表性胃炎大鼠胃粘膜损伤的保护作用,探讨其相关药理机制。方法采用0.02%氨水合并饥饱失常刺激制备大鼠慢性浅表性胃炎模型,模型复制成功后动物随机分为模型对照组、维酶素对照组及甘草总黄酮高、中、低剂量组... 详细信息

目的研究甘草总黄酮对慢性浅表性胃炎大鼠胃粘膜损伤的保护作用,探讨其相关药理机制。方法采用0.02%氨水合并饥饱失常刺激制备大鼠慢性浅表性胃炎模型,模型复制成功后动物随机分为模型对照组、维酶素对照组及甘草总黄酮高、中、低剂量组,连续灌胃给药30 d。采用HE染色观察胃组织病理学变化;阿利新蓝-糖蛋白结合法(AB-PAS)染色,检测胃粘膜上皮细胞粘蛋白合成、分泌功能;ELISA法测定血清中前列腺素E(2PGE2)含量;胃体部、幽门部微循环血流量评价胃微循环状况。结果与正常对照组比较,浅表性胃炎模型组大鼠胃黏膜损伤率、胃组织病理学评分、粘蛋白含量显著改变;与模型对照组比较,试药组血清PGE2水平显著升高,上皮细胞粘蛋白指数及酸性粘蛋白指数提高,上皮细胞粘蛋白分泌功能增强和黏膜屏障完整性得到恢复,大鼠胃黏膜损伤率显著下降。同时,胃微循环血流量改善。结论甘草总黄酮抑制慢性浅表性胃炎大鼠胃粘膜损伤,保护和修复损伤的粘膜组织,这种作用与提高PGE2水平相关。

关键词：甘草总黄酮慢性浅表性胃炎胃粘膜

甘草总黄酮抑制慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜腺体萎缩及机制研究

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中国药理学通报 2014年第1期30卷 113-117页

作者：郑君林晓春陈育尧白殊同佟丽南方医科大学中医药学院广东广州510515

目的探讨甘草总黄酮抑制慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠胃黏膜腺体萎缩及相关作用机制,评价萎缩性胃炎的治疗作用。方法采用去氧胆酸钠溶液自由饮用,同时配合酒精灌服刺激的多因素方法诱导CAG大鼠模型,模型复制成功后将动物随机分为模型对照... 详细信息

目的探讨甘草总黄酮抑制慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠胃黏膜腺体萎缩及相关作用机制,评价萎缩性胃炎的治疗作用。方法采用去氧胆酸钠溶液自由饮用,同时配合酒精灌服刺激的多因素方法诱导CAG大鼠模型,模型复制成功后将动物随机分为模型对照组、维酶素对照组、甘草总黄酮高、低剂量组,药物组分别连续灌胃给药30 d后,HE染色观察胃组织病理学变化;测定大鼠胃液分泌量、ELISA检测胃蛋白酶活性及血清中GAS、IL-1β、IL-6水平。结果与正常对照组比较,模型对照组大鼠胃黏膜萎缩率、胃组织病理评分明显改变,胃液分泌量、胃蛋白酶活性、血清胃泌素含量明显下降(P甘草总黄酮给药30 d后,甘草总黄酮高、低剂量组大鼠胃液分泌量、胃蛋白酶活性以及血清GAS明显升高(P甘草总黄酮能够有效抑制慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜损伤,促进胃分泌功能,提高胃泌素水平及胃蛋白酶活性以增强胃黏膜的防御功能,同时抑制炎症因子的释放,减少黏膜炎症发生。

关键词：甘草总黄酮慢性萎缩性胃炎腺体萎缩胃蛋白酶活性胃泌素促炎因子

甘草总黄酮对阿司匹林损伤人胃黏膜上皮细胞的保护作用及机制研究

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中国全科医学 2018年第32期21卷 3971-3975页

作者：李跃文万强浙江省金华市中医医院脾胃病科 321017 浙江中医药大学附属第二医院浙江省名老中医专家传承工作室浙江省杭州市310005 江西中医药大学附属医院心血管病科江西省南昌市330006

目的探讨甘草总黄酮对阿司匹林损伤人胃黏膜上皮细胞(GES-1)的保护作用及可能机制。方法 2017年3—11月,选取GES-1细胞株,分为6组,对照组:加DMEM培养基;阿司匹林组:阿司匹林18.5 mmol/L与GES-1共同培养24 h;甘草总黄酮低组、甘草总黄酮... 详细信息

目的探讨甘草总黄酮对阿司匹林损伤人胃黏膜上皮细胞(GES-1)的保护作用及可能机制。方法 2017年3—11月,选取GES-1细胞株,分为6组,对照组:加DMEM培养基;阿司匹林组:阿司匹林18.5 mmol/L与GES-1共同培养24 h;甘草总黄酮低组、甘草总黄酮中组、甘草总黄酮高组:GES-1分别以甘草总黄酮(3、6、12mg/L)预处理2 h后再加阿司匹林18.5 mmol/L共同培养24 h;PD98059组:GES-1以甘草总黄酮12 mg/L预处理2 h后,加PD98059 10μmol/L处理1 h,再加阿司匹林18.5 mmol/L共同培养24 h。采用MTT法检测细胞增殖抑制率,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,采用Western blotting法检测细胞磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK1/2)、B淋巴细胞癌2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。结果与对照组比较,阿司匹林组、甘草总黄酮低组、甘草总黄酮中组、甘草总黄酮高组、PD98059组细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、LDH活性、MDA含量、p-ERK1/2、Bax表达升高,SOD活性、Bcl-2表达降低(P甘草总黄酮中组、甘草总黄酮高组、PD98059组细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、LDH活性、MDA含量、p-ERK1/2、Bax表达降低,SOD活性、Bcl-2表达升高(P甘草总黄酮低组、甘草总黄酮中组、甘草总黄酮高组比较,PD98059组细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、LDH活性、MDA含量、p-ERK1/2、Bax表达降低,SOD活性、Bcl-2表达升高(P甘草总黄酮可通过促增殖、抗凋亡、抗氧化应激等途径减轻阿司匹林诱导的GES-1损伤,其机制可能与抑制ERK1/2信号通路有关。

关键词：上皮细胞甘草总黄酮阿司匹林动力传导,细胞

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甘草总黄酮对艰难梭菌的体内外抗菌作用研究

动物医学进展 2024年第9期45卷 61-66页

作者：孙剑峰任丽蓉黄博刘希望甘肃省动物疫病预防控制中心甘肃兰州730000 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所/农业农村部兽用药物创制重点实验室/甘肃省新兽药工程重点实验室甘肃兰州730050

考察甘草总黄酮对艰难梭菌的抑菌活性及其抗菌机制,为艰难梭菌感染(CDI)的防治和甘草的高效利用提供依据。用微量肉汤稀释法、计数法测定了甘草总黄酮对艰难梭菌的最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)、生长曲线和杀菌曲线。通过扫描... 详细信息

考察甘草总黄酮对艰难梭菌的抑菌活性及其抗菌机制,为艰难梭菌感染(CDI)的防治和甘草的高效利用提供依据。用微量肉汤稀释法、计数法测定了甘草总黄酮对艰难梭菌的最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)、生长曲线和杀菌曲线。通过扫描电镜观察、碘化丙啶(PI)摄取试验、胞外蛋白和ATP含量的测定,检测了甘草总黄酮对细菌细胞膜完整性的影响。建立了小鼠CDI模型,以体重变化和存活率为指标,评价了甘草总黄酮的体内抗菌活性。结果表明,甘草总黄酮对艰难梭菌的MIC和MBC分别为12.5μg/mL和25μg/mL,具有快速杀菌的特征。甘草总黄酮可显著破坏细菌细胞膜,导致ATP和蛋白等胞内物质的泄露,使细菌形态发生显著改变,进而导致菌体死亡。甘草总黄酮可显著缓解CDI小鼠的体重下降,7 d存活率为100%,疗效与万古霉素相当。甘草总黄酮具有显著的体内外抗艰难梭菌活性,破坏细菌细胞膜的完整性是其可能的抗菌机制。

关键词：艰难梭菌甘草总黄酮抗菌作用细胞膜

甘草总黄酮对鸡产气荚膜梭菌坏死性肠炎的治疗作用

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中国兽医学报 2019年第4期39卷 716-721页

作者：刘宗争邓旭明王建锋吉林大学动物医学学院吉林长春130062 广州市日锋畜牧有限公司广东广州510000

选择具有显著抗炎效果的甘草总黄酮为受试化合物,考察其抗产气荚膜梭菌所致鸡坏死性肠炎的效果,为甘草总黄酮在坏死性肠炎的治疗应用提供依据。选择AA^+肉鸡,经口给予产气荚膜梭菌ATCC13124菌悬液建立肉仔鸡坏死性肠炎模型,之后使用甘... 详细信息

选择具有显著抗炎效果的甘草总黄酮为受试化合物,考察其抗产气荚膜梭菌所致鸡坏死性肠炎的效果,为甘草总黄酮在坏死性肠炎的治疗应用提供依据。选择AA^+肉鸡,经口给予产气荚膜梭菌ATCC13124菌悬液建立肉仔鸡坏死性肠炎模型,之后使用甘草总黄酮对造模成功的肉鸡进行治疗,通过剖检考察肉鸡肠道的病变情况、病变评分、日增重及器官指数等指标以评估甘草总黄酮对坏死性肠炎的治疗效果。结果显示,通过经口攻菌成功建立了肉仔鸡坏死性肠炎模型;剖检发现,经甘草总黄酮治疗的模型鸡其肠道病变程度明显缓解,病变损伤评分显著低于感染组,炎性因子含量显著降低;治疗组肉鸡日增质量及器官指数与健康肉鸡差异不显著。结果表明,甘草总黄酮能够缓解产气荚膜梭菌所致坏死性肠炎对肉鸡肠道的损伤,具有作为抗生素替代品治疗坏死性肠炎的潜力。

关键词：肉鸡产气荚膜梭菌坏死性肠炎甘草总黄酮中药提取物

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甘草总黄酮对氧自由基清除作用的实验研究

中国中西医结合杂志 2001年第S1期21卷 26-28页

作者：蒋晓秋吴碧华曾昭淳李梨胡常林重庆医科大学生化教研室重庆400016 重庆医科大学第二临床学院神经科

目的:观察甘草总黄酮对超氧阴离子和羟自由基的清除作用。方法:采用分光光度法,测定用黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶系统产生的超氧阴离子;利用 Fenton 反应,使生成的羟自由基与苯甲酸反应生成具有荧光的羟苯甲酸,以羟苯甲酸荧光值的大小表示羟... 详细信息

目的:观察甘草总黄酮对超氧阴离子和羟自由基的清除作用。方法:采用分光光度法,测定用黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶系统产生的超氧阴离子;利用 Fenton 反应,使生成的羟自由基与苯甲酸反应生成具有荧光的羟苯甲酸,以羟苯甲酸荧光值的大小表示羟自由基的生成量。结果:于黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶系统中加入甘草总黄酮能有效地清除超氧阴离子,半抑制浓度(IC_(50))为226 mg/L,且随着加入药物浓度的增加,清除作用加强;甘草总黄酮还能显著地清除和抑制另一种损伤力更强的氧自由基即羟自由基,该作用明显优于甘露醇,其清除羟自由基的 IC_(50)是甘露醇 IC_(50)的1/255,其抑制羟自由基生成的 IC_(50)是甘露醇 IC_(50)的1/139。结论:甘草总黄酮有可能作为一种新的天然抗氧化剂应用于临床。

关键词：甘草总黄酮超氧阴离子羟自由基抗氧化剂

甘草总黄酮对肝癌可溶性细胞间黏附分子-1及可溶性E-上皮钙黏蛋白的影响

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广西医科大学学报 2006年第1期23卷 68-69页

作者：赵世元王乃平农智新钟振国广西民族医院中心实验室南宁530001 广西中医学院药学系

目的:探讨甘草总黄酮抗肝癌作用及其机制。方法:用Walker256肝癌细胞和Wistar大鼠建立大鼠肝癌模型,A组:空白对照组(10只);B组:阳性对照药替加氟片组(20只);C组:甘草总黄酮低剂量组(20只);D组:甘草总黄酮高剂量组(20只);E组:模型组(20只... 详细信息

目的:探讨甘草总黄酮抗肝癌作用及其机制。方法:用Walker256肝癌细胞和Wistar大鼠建立大鼠肝癌模型,A组:空白对照组(10只);B组:阳性对照药替加氟片组(20只);C组:甘草总黄酮低剂量组(20只);D组:甘草总黄酮高剂量组(20只);E组:模型组(20只)。用ELISA法检测各组血清中可溶性细胞间黏附分子(sICAM-1)和上皮型钙黏蛋白(E-cad)含量。结果:E组的sICAM-1和E-cad含量明显高于其他各组(P0·05);E组的肝重系数明显大于其他各组(P甘草总黄酮可明显降低肝癌大鼠血清中sICAM-1和E-cad,其抗肝癌机制可能是干预由E-cad介导的细胞信号转导作用,开发甘草总黄酮作为肝癌的预防和治疗药物具有一定的价值。

关键词：甘草总黄酮细胞间黏附分子-1 上皮钙黏蛋白

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甘草总黄酮诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

广西医科大学学报 2005年第2期22卷 235-237页

作者：赵世元王乃平钟振国农志新广西壮族自治区民族医院中心实验室南宁530001 广西中医学院

目的:观察甘草总黄酮是否能诱导人肝癌细胞株BEL-7404凋亡,探其作为肿瘤化学预防药物的可能性。方法:体外培养人肝癌细胞株BEL-7404,并用MTT法检测甘草总黄酮对肿瘤细胞生长的抑制作用,流式细胞仪分析细胞周期,电子显微镜观察细胞形态,... 详细信息

目的:观察甘草总黄酮是否能诱导人肝癌细胞株BEL-7404凋亡,探其作为肿瘤化学预防药物的可能性。方法:体外培养人肝癌细胞株BEL-7404,并用MTT法检测甘草总黄酮对肿瘤细胞生长的抑制作用,流式细胞仪分析细胞周期,电子显微镜观察细胞形态,琼脂糖凝胶电泳检测DNA图谱的变化。结果:甘草总黄酮能显著地抑制人肝癌细胞株的生长,并且具有时间和计量的依赖性,发生作用后细胞生长有明显的凋亡特征性改变。流式细胞仪检测出现亚G1峰及DNA电泳呈梯形条带等。结论:甘草总黄酮具有抗增殖和诱导人肝癌细胞株BEL-7404发生凋亡的作用,并可导致细胞周期停滞于G1/M期,具有潜在的抗肿瘤价值,值得进一步研究。

关键词：甘草总黄酮肝癌细胞凋亡