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非病毒基因载体聚乙二醇-聚乙烯亚胺的合成及其结合DNA能力的研究

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功能材料 2008年第2期39卷 297-300,304页

作者：罗昕潘仕荣冯敏张璇张未温玉婷中山大学附属第一医院广东广州510080 中山大学药学院广东广州510080

以IPDI为偶联剂,合成了PEG-PEI接枝共聚物,用FT-IR、1HNMR对共聚产物进行结构表征确认,通过1H NMR计算出共聚物的分子量,并通过琼脂糖凝胶电泳试验考察共聚物与DNA的结合能力。结果表明,成功合成了PEG-PEI共聚物,当PEG接枝量为10%、25%... 详细信息

以IPDI为偶联剂,合成了PEG-PEI接枝共聚物,用FT-IR、1HNMR对共聚产物进行结构表征确认,通过1H NMR计算出共聚物的分子量,并通过琼脂糖凝胶电泳试验考察共聚物与DNA的结合能力。结果表明,成功合成了PEG-PEI共聚物,当PEG接枝量为10%、25%时,PEG-PEI结合DNA的能力没有受到明显影响;当PEG接枝量为50%时,PEG-PEI结合DNA的能力有所下降。

关键词：非病毒基因载体聚乙二醇聚乙烯亚胺异佛尔酮二异氰酸酯琼脂糖凝胶电泳

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黄海海燕酸性粘多糖的分离、纯化及鉴定

高技术通讯 2005年第10期15卷 94-97页

作者：郭承华韩宝芹刘万顺刘传琳董新伟郑舜泽中国海洋大学海洋生命学院青岛266003烟台大学化学生物理工学院烟台264005 中国海洋大学海洋生命学院青岛266003 烟台大学化学生物理工学院烟台264005 韩国木浦大学食品产业技术研究中心木浦534-729

利用碱提法从黄海海燕中提取了多糖,粗品中糖和蛋白含量分别为28.6%和50.8%;Serag法脱蛋白后,糖含量57.1%,蛋白含量13.8%;二次酶解后,糖和蛋白含量分别为63.2%和7.0%;粗品除蛋白、脱色后,用25%、42%、66%、88%乙醇分级沉淀分别得到多糖... 详细信息

利用碱提法从黄海海燕中提取了多糖,粗品中糖和蛋白含量分别为28.6%和50.8%;Serag法脱蛋白后,糖含量57.1%,蛋白含量13.8%;二次酶解后,糖和蛋白含量分别为63.2%和7.0%;粗品除蛋白、脱色后,用25%、42%、66%、88%乙醇分级沉淀分别得到多糖Ⅰ、多糖Ⅱ、多糖Ⅲ和多糖Ⅳ,糖含量分别为20.6%、20.7%、29.2%、19.9%,蛋白含量分别为29.2%、27.8%、59.5%、65.7%;多糖Ⅰ依次用离子交换层析(DEAE-52)和葡聚糖凝胶(G-75)进行分离、纯化,结果表明分子中带有同一种电荷,硫酸基离子鉴定反应为阳性,并至少含有三个组分;用葡聚糖凝胶(G-100)对其分子量进行测定,其平均分子量约为10kD;琼脂糖凝胶电泳结果表明,该糖带负电.研究结果为海燕资源的开发利用提供了科学依据.

关键词：海燕酸性粘多糖分离纯化鉴定鉴定反应黄海离子交换层析平均分子量琼脂糖凝胶电泳

非病毒基因载体材料聚谷氨酸-聚丙烯亚胺的合成及与DNA的结合稳定性

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中国药学杂志 2014年第22期49卷 2002-2007页

作者：张璇杨叶雅胡海梅蔡青青深圳市精神卫生中心广东深圳518020 深圳市心理健康重点实验室广东深圳518020 广东药学院生命科学与生物制药学院广州510224 中国科学院深圳先进技术研究院广东深圳518055

目的合成非病毒基因载体材料聚谷氨酸-聚丙烯亚胺,并考查其与DNA的结合能力及稳定性。方法以G2.0聚丙烯亚胺(PPI)为引发剂,通过开环聚合的方法,合成了聚丙烯亚胺-聚谷氨酸苄脂多臂接枝聚合物,再以G1.0聚丙烯亚胺或G2.0聚丙烯亚胺作为氨... 详细信息

目的合成非病毒基因载体材料聚谷氨酸-聚丙烯亚胺,并考查其与DNA的结合能力及稳定性。方法以G2.0聚丙烯亚胺(PPI)为引发剂,通过开环聚合的方法,合成了聚丙烯亚胺-聚谷氨酸苄脂多臂接枝聚合物,再以G1.0聚丙烯亚胺或G2.0聚丙烯亚胺作为氨解试剂进行氨解合成了新型树枝状的聚谷氨酸-聚丙烯亚胺聚合物(MP-g-PPI)。采用红外光谱(IR)、1HNMR对聚合产物进行结构表征,通过琼脂糖凝胶电泳实验考察聚合物与DNA的结合能力,通过离心法考察了聚合物与DNA形成复合物的沉淀稳定性,通过MTT法考察聚合物在Hela细胞中的毒性,并通过测定发荧光细胞百分数获得复合物在Hek-293细胞中的转染率。结果成功合成了聚谷氨酸-聚丙烯亚胺聚合物,此聚合物可有效的与DNA结合成纳米复合物,可通过一定的空间斥力阻止复合物的聚集,且毒性较PEI 25K低,可有效介导基因的转染。结论聚谷氨酸-聚丙烯亚胺聚合物可与DNA形成稳定的复合物,此聚合物有望成为新型的非病毒基因载体材料。

关键词：聚丙烯亚胺聚谷氨酸-聚丙烯亚胺聚合物基因载体琼脂糖凝胶电泳沉淀稳定性转染

β-K_4H_3[SiW_9O_(37)(CpTi)_3]·11H_2O环戊二烯钛多酸衍生物与DNA作用研究

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高等学校化学学报 2003年第2期24卷 214-215页

作者：李建新王英王晓红刘巨涛李玉新黄百渠刘景福东北师范大学化学学院东北师范大学遗传与细胞研究所长春130024

The interaction between β-K 4H 3 [SiW 9O 37(CpTi) 3]·11H 2O and DNA was investigated by agarose gel electrophoresis. The results suggest that β-K 4H 3[SiW 9O 37(CpTi) 3]·11H 2O can degrade the genomic DNA. The treatment of plasmid DNA with β-K 4H 3 [SiW 9O 37(CpTi) 3]·11H 2O resulted in a fast moving band in front of the three normal conformations(super coiled DNA, linear DNA and relaxed circular DNA) in agarose gel electrophoresis . These results indicate that this chemical material may have the ability to specifically cleavage DNA or to alter conformation of DNA molecules.

关键词：环戊二烯钛多酸衍生物 DNA β-K4H3[SiW9O37(CpTi)3]·11H2O 琼脂糖凝胶电泳药物设计构象抗肿瘤药物抗肿瘤活性切割作用

Cu(phen)_2^(2+)与6-巯基嘌呤及DNA间的相互作用

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化学通报 2005年第9期68卷 702-708页

作者：刘彩红李红李洪清张全新华南师范大学化学系华南师范大学化学系生命科学学院广州510631 广州市疾病预防控制中心毒理科广州510080

在TrisNaCl(pH=7.2)缓冲溶液中,应用伏安法、电子吸收光谱分析、溴化乙锭荧光分析、粘度测量和琼脂糖凝胶电泳等技术研究了Cu(phen)22+(phen=1,10邻菲咯啉)与6巯基嘌呤(6MP)及DNA间的相互作用。结果表明,Cu(phen)22+与6MP发生了明显的... 详细信息

在TrisNaCl(pH=7.2)缓冲溶液中,应用伏安法、电子吸收光谱分析、溴化乙锭荧光分析、粘度测量和琼脂糖凝胶电泳等技术研究了Cu(phen)22+(phen=1,10邻菲咯啉)与6巯基嘌呤(6MP)及DNA间的相互作用。结果表明,Cu(phen)22+与6MP发生了明显的相互作用,其作用产物不仅与小牛胸腺DNA具有更强的相互作用,并且在H2O2和抗坏血酸存在下对质粒pBR322DNA具有更强的断裂能力,与DNA的作用模式可能为部分插入模式。

关键词：铜配合物 6-巯基嘌呤 DNA 相互作用小牛胸腺DNA 6-巯基嘌呤相互作用琼脂糖凝胶电泳吸收光谱分析 pBR322 作用模式缓冲溶液荧光分析

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一种预染色凝胶电泳法的研究

核技术 2014年第7期37卷 58-63页

作者：钟睿博刘雨双张萍刘竟然赵国芬张峰内蒙古农业大学生命科学学院呼和浩特010018

凝胶电泳是常用的生化分离鉴定技术。生物分子大多在可见光区完全透明,因此在凝胶电泳之后,需要对凝胶进行染色处理才能观察到结果,而且常规的染色方法一般步骤比较繁琐耗时。本文开发了一种新型的预染色凝胶电泳方法(Pre-Staining Gel ... 详细信息

凝胶电泳是常用的生化分离鉴定技术。生物分子大多在可见光区完全透明,因此在凝胶电泳之后,需要对凝胶进行染色处理才能观察到结果,而且常规的染色方法一般步骤比较繁琐耗时。本文开发了一种新型的预染色凝胶电泳方法(Pre-Staining Gel Electrophoresis,PSGE),可以直观地显示电泳结果,并简化凝胶电泳操作。利用PSGE成功分析了蛋白质与两性高分子聚合物的共价偶联和物理吸附的效率,展示了PSGE的巨大应用开发潜力。

关键词：琼脂糖凝胶电泳预染色共价偶联物理吸附蛋白质两性高分子聚合物

黄癸素对拓扑异构酶的影响及联合羟喜树碱的抗肿瘤作用

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药学学报 2011年第4期46卷 390-394页

作者：林菁王希福建医科大学药学院药理学系福建福州350004 附属口腔医院福建福州350002

观察黄癸素联合应用羟喜树碱对肿瘤细胞的协同抑制作用,并探讨黄癸素对拓扑异构酶的影响。采用MTT法检测黄癸素联合应用羟喜树碱对体外培养肿瘤细胞增殖的抑制作用,计算IC50和联合指数(CI值)判断药物协同作用效果;通过琼脂糖凝胶电泳法... 详细信息

观察黄癸素联合应用羟喜树碱对肿瘤细胞的协同抑制作用,并探讨黄癸素对拓扑异构酶的影响。采用MTT法检测黄癸素联合应用羟喜树碱对体外培养肿瘤细胞增殖的抑制作用,计算IC50和联合指数(CI值)判断药物协同作用效果;通过琼脂糖凝胶电泳法测定黄癸素对SW480细胞DNA拓扑异构酶活性的影响。结果显示,与两药单用比较,黄癸素联用羟喜树碱对SW480、SGC-7901、SW1116细胞的抑制作用更显著,IC50显著降低,两药联用对各种人癌细胞株的CI值均小于1,HepG2、SW480、SGC-7901、SW1116细胞的CI值最低分别达0.447、0.626、0.161和0.178,表现为较显著的协同效果。琼脂糖凝胶电泳法结果显示,经黄癸素(2.0～8.0 mg·L-1)处理的SW480细胞拓扑异构酶Ⅰ、Ⅱ的活性均有所降低。研究表明,黄癸素可抑制拓扑异构酶的活性,与典型的TopoⅠ抑制剂羟喜树碱合用具有良好的协同抑制肿瘤细胞增殖作用,该结果可能与两药在作用机制方面的协同有关。

关键词：黄癸素羟喜树碱协同作用琼脂糖凝胶电泳 DNA拓扑异构酶

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三种基因转录因子在大鼠耳蜗大上皮嵴的表达

中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2005年第9期40卷 664-666页

作者：张媛胡吟燕宋巍郭维维翟所强解放军总医院耳鼻咽喉科研究所北京100853

目的检测Math1、Hes1及Hes5在大鼠耳蜗大上皮嵴(greaterepithelial ridge,GER)的表达,初步探讨各基因对毛细胞分化和再生的作用。方法分别取出生当天(P0),出生后第1天(P1)、第3天(P3)、第4天(P4)和第5天(P5)大鼠耳蜗,利用机械分离和酶... 详细信息

目的检测Math1、Hes1及Hes5在大鼠耳蜗大上皮嵴(greaterepithelial ridge,GER)的表达,初步探讨各基因对毛细胞分化和再生的作用。方法分别取出生当天(P0),出生后第1天(P1)、第3天(P3)、第4天(P4)和第5天(P5)大鼠耳蜗,利用机械分离和酶消化相结合的方法分离出相对纯化的GER细胞。Trizol法提取GER细胞总RNA,逆转录聚合酶链反应检测Math1、Hes1及Hes5在GER的表达,琼脂糖凝胶电泳检测结果。结果Math1在P0～P5大鼠GER均有表达,Hes1只在P0～P3大鼠GER有表达,而Hes5在P0～P5大鼠GER中均无表达。结论Math1的表达水平可能只有累积至一定量,才能诱导GER增殖、分化成毛细胞,并且此过程可能同时受Hes1的控制。

关键词：逆转录聚合酶链反应转录因子毛细胞,内基因转录因子大鼠耳蜗上皮聚合酶链反应检测琼脂糖凝胶电泳细胞分化

一株宽宿主谱大肠埃希菌噬菌体的RNA比较分析及其环境微生物杀灭效应观察

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中华流行病学杂志 2005年第5期26卷 356-360页

作者：徐焰彭道荣熊鸿燕张小宁苏明权孙怡群郝晓柯第四军医大学西京医院检验科西安710032 第三军医大学预防医学院军队流行病学教研室

目的通过比较研究一株分离自医院污水的宽宿主范围大肠埃希菌(***)噬菌体与野生型单一宿主谱***噬菌体的核酸序列和微生物杀灭效应等生物学特性的改变探讨噬菌体识别特异性机制和将噬菌体作为生物消毒剂应用于环境污水净化的可行性。方... 详细信息

目的通过比较研究一株分离自医院污水的宽宿主范围大肠埃希菌(***)噬菌体与野生型单一宿主谱***噬菌体的核酸序列和微生物杀灭效应等生物学特性的改变探讨噬菌体识别特异性机制和将噬菌体作为生物消毒剂应用于环境污水净化的可行性。方法采用抗体沉淀盐酸胍一步法分别提取单一宿主谱***噬菌体f2株及宽宿主谱***噬菌体株的RNA,通过琼脂糖凝胶电泳鉴定其纯度;采用简并引物逆转录聚合酶链反应(RTPCR)及随机引物随机扩增多态性DNA(RAPD)PCR比较分析噬菌体宿主谱改变时核酸序列组成的变化;通过以上两噬菌体对环境样本中活菌和***的杀灭效果的观察,比较分析宿主谱改变对噬菌体的微生物杀灭效应这一生物学特性的影响。结果噬菌体核酸分析试验证实,f2噬菌体及宽噬噬菌体均为6000bp左右的单链RNA噬菌体。RAPDPCR结果显示,两噬菌体基因cDNA扩增出的RAPDDNA片段有明显的差异,其中26条为可区分的DNA带型。利用简并引物进行的RTPCR反应显示,噬菌体f2cDNA在450bp附近出现重复性较好的扩增片段,而宽噬噬菌体cDNA在相同条件下未出现扩增产物。环境水样本微生物杀灭试验结果显示,宽宿主谱株噬菌体对环境水样本中的***杀灭率为36.75%～56.28%,对水样本中活菌杀灭率为30.84%～47.96%;而噬菌体f2对环境水?

关键词：大肠埃希菌宿主谱 RNA 效应 E.coli 分析及逆转录聚合酶链反应琼脂糖凝胶电泳随机扩增多态性生物学特性宽噬噬菌体微生物杀灭率核酸序列比较分析简并引物核酸分析 RAPD 生物消毒剂特异性机制 f2噬菌体 DNA片段