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琥珀散通过LncRNA MALAT1/miR-142-3p促进自噬缩小子宫内膜异位症裸鼠异位病灶的机制

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中华中医药杂志 2023年第9期38卷 4142-4147页

作者：张悦健林陶秀何甜甜霍超越高路益杨思晨杨梦萍罗伯茨宋泽马小娜北京中医药大学第三临床医学院北京100029 北京中医药大学第三附属医院北京100029

目的:观察琥珀散对子宫内膜异位症(EMT)裸鼠异位病灶的干预作用,并从LncRNA MALAT1/miR-142-3p介导自噬研究其作用机制。方法:将30只7周龄雌性免疫缺陷小鼠随机分为模型组、琥珀散组(29 g/kg)与地诺孕素组(0.001 g/kg),每组10只。从5例... 详细信息

目的:观察琥珀散对子宫内膜异位症(EMT)裸鼠异位病灶的干预作用,并从LncRNA MALAT1/miR-142-3p介导自噬研究其作用机制。方法:将30只7周龄雌性免疫缺陷小鼠随机分为模型组、琥珀散组(29 g/kg)与地诺孕素组(0.001 g/kg),每组10只。从5例寒凝血瘀型EMT患者月经血中提取经血源间充质干细胞(MenSCs)以制备人MenSCs植入式EMT裸鼠模型。采用HE染色法及人类白细胞抗原α(HLAA)免疫荧光法评价模型。造模成功后连续给药21 d。实时荧光定量PCR和免疫印迹法测定各组异位病灶组织中LncRNA MALAT1、miR-142-3p及自噬标志分子(Beclin1和LC3Ⅱ)的表达情况。结果:造模后,3组注射区均有囊泡样组织形成,病理切片见子宫内膜腺体和间质,免疫荧光示HLAA阳性,系造模成功。与模型组比较,琥珀散组异位病灶体积显著缩小(P琥珀散能明显缩小EMT裸鼠异位病灶体积,其作用机制可能是其促进LncRNA MALAT1诱骗miR-142-3p以上调Beclin1进而增强异位内膜自噬。

关键词：子宫内膜异位症琥珀散竞争性内源RNA LncRNA MALAT1 miR-142-3p 自噬经血源间充质干细胞异位病灶机制

琥珀散对人MenSCs植入式子宫内膜异位症裸鼠异位病灶及Beclin1、ZEB1表达的影响

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药物评价研究 2023年第2期46卷 294-304页

作者：张悦健何甜甜林陶秀霍超越杨思晨高路益杨梦萍罗伯茨宋泽李长香马小娜北京中医药大学第三临床医学院北京100029 北京中医药大学第三附属医院北京100029 北京中医药大学中医学院北京100029

目的探究琥珀散对人经血源间充质干细胞(MenSCs)植入式子宫内膜异位症(EMT)裸鼠的异位病灶及Bcl-2同源结构域蛋白抗体(Beclin1)、锌指E盒同源结合蛋白1(ZEB1)表达的影响。方法将裸鼠随机分为对照组、模型组、地诺孕素(0.001 g·kg^(-1)... 详细信息

目的探究琥珀散对人经血源间充质干细胞(MenSCs)植入式子宫内膜异位症(EMT)裸鼠的异位病灶及Bcl-2同源结构域蛋白抗体(Beclin1)、锌指E盒同源结合蛋白1(ZEB1)表达的影响。方法将裸鼠随机分为对照组、模型组、地诺孕素(0.001 g·kg^(-1))组和琥珀散(29 g·kg^(-1))组,每组10只。从EMT患者及健康女性的月经血中提取MenSCs,并借助成脂、成骨诱导分化鉴定其干细胞属性。将EMT MenSCs注射至裸鼠腹部皮下,制备EMT裸鼠模型,对照组植入正常人MenSCs。至第7天每组随机抽取1只裸鼠,开腹观察异位病灶生长情况,并借助HE染色和人类白细胞抗原A(HLAA)免疫荧光法评价模型。自造模成功连续给药21 d,末次给药后第2日取材,观测EMT异位病灶体积及血管分布;切取异位病灶组织,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blotting、免疫组织化学及免疫荧光技术分别测定组织中Beclin1与ZEB1在mRNA及蛋白水平的表达。结果EMT源及正常MenSCs为长梭形,呈辐射状向周边集落扩散,且经成脂、成骨诱导分化后均有脂滴、钙结节形成。造模7 d后,对照组未见异位病灶形成,其余各组均有囊泡样病灶形成,且周围血管形成丰富,病理切片均可见子宫内膜腺体和间质,HLAA均阳性表达。与模型组比较,琥珀散能显著缩小EMT裸鼠异位病灶体积(P琥珀散组ZEB1表达显著降低(P琥珀散组ZEB1表达显著降低(P琥珀散组Beclin1大量分布在异位内膜、腺腔以及腺上皮细胞与间质细胞的胞核及胞浆中,Beclin1表达显著增加(P琥珀散组ZEB1蛋白在异位内膜、腺腔、腺上皮细胞及周围间质细胞的胞核与胞浆中的分布均明显减少,地诺孕素组、琥珀散组ZEB1蛋白表达阳性率显著降低(P琥珀散可能通过上调Beclin1、下调ZEB1表达,缩小EMT裸鼠异位病灶,改善周围血管分布。

关键词：子宫内膜异位症经血源间充质干细胞琥珀散异位病灶 Beclin1 ZEB1

基于真实世界数据琥珀散加减治疗子宫内膜异位症的辨证及用药规律探讨

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药物评价研究 2023年第7期46卷 1396-1405页

作者：张悦健陈晓瑶杨思晨杨梦萍程曦李娟孙新慧马小娜北京中医药大学第三临床医学院北京100029 湖北省军区孝感离职干部休养所湖北孝感432000 北京中医药大学第三附属医院北京100029

目的分析琥珀散加减治疗子宫内膜异位症(EMT)的辨证特点及用药规律。方法采用频次分析、关联规则分析、聚类分析和因子分析等方法对北京中医药大学第三附属医院妇科专家门诊2018年1月1日—2022年12月31日诊断为EMT且使用琥珀散加减的... 详细信息

目的分析琥珀散加减治疗子宫内膜异位症(EMT)的辨证特点及用药规律。方法采用频次分析、关联规则分析、聚类分析和因子分析等方法对北京中医药大学第三附属医院妇科专家门诊2018年1月1日—2022年12月31日诊断为EMT且使用琥珀散加减的患者真实世界数据进行挖掘与分析。结果共纳入260例EMT患者,675张处方,6种证型,以寒凝血瘀证(58.52%)和肾虚血瘀证(29.63%)为主。涉及240味中药,药性以温、寒、平为多,药味以辛、苦、甘为主,归经主要在肝、脾、心和肾经,功效主要分布在活血化瘀药、补虚药、清热药和理气药,药物炮制以醋制为主。高频(>200次)中药共15味,依序为乌药、当归、肉桂等,6味中药涉及炮制,地黄主用熟地黄,莪术、三棱、延胡索和五灵脂醋制占比超80%,麦芽生、炒、焦俱用,以生为主。240味中药共产生3 620条有效的关联规则。高频中药系统聚类分析得出5类,因子分析获得5个公因子。除琥珀散原方组成外,生麦芽、陈皮、木香、五灵脂和白芍也被纳入。结论琥珀散加减治疗EMT的真实世界特征为:证型以寒凝血瘀证最多,其次为肾虚血瘀证,临床遣方用药除温经通络、活血消癥外,亦须行气消食、活血止痛、养血调经,为临床应用琥珀散加减治疗EMT提供了一定的参考。

关键词：琥珀散子宫内膜异位症真实世界中医证型用药规律数据挖掘

基于CXCL12/CXCR4轴探讨琥珀散含药血清促进子宫内膜异位症患者经血源间充质干细胞自噬活性的作用机制

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药物评价研究 2023年第7期46卷 1424-1430页

作者：张悦健林陶秀何甜甜李长香马小娜北京中医药大学第三临床医学院北京100029 北京中医药大学中医学院北京100029 北京中医药大学第三附属医院北京100029

目的基于CXCL12/CXCR4轴探讨琥珀散对子宫内膜异位症(EMT)经血源间充质干细胞(MenSCs)自噬活性的调控作用。方法从EMT患者和健康女性志愿者的月经血中分离提取EMT MenSCs(E-MenSCs)和正常MenSCs(HMenSCs)。采用12只7周龄雄性SD大鼠制... 详细信息

目的基于CXCL12/CXCR4轴探讨琥珀散对子宫内膜异位症(EMT)经血源间充质干细胞(MenSCs)自噬活性的调控作用。方法从EMT患者和健康女性志愿者的月经血中分离提取EMT MenSCs(E-MenSCs)和正常MenSCs(HMenSCs)。采用12只7周龄雄性SD大鼠制备空白血清和含药血清(ig给予大鼠琥珀散9.9 g·kg^(-1),临床等效剂量)。将细胞分为3组:对照组(H-MenSCs)、模型组(E-MenSCs)和琥珀散组(E-MenSCs),对照组和模型组使用20%空白血清干预,琥珀散组使用20%含药血清干预,均干预48 h。分别采用CCK-8法、透射电镜、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blotting法检测3组细胞的细胞活力、自噬体和自噬溶酶体表达、CXCL12和CXCR4的mRNA水平和CXCL12/CXCR4及自噬标志分子(Beclin1和LC3Ⅱ)的蛋白表达量。结果与对照组比较,模型组的细胞活力、CXCL12和CXCR4的mRNA和蛋白表达水平均显著提高(P琥珀散组的细胞活力、CXCL12和CXCR4的mRNA及蛋白表达水平均显著下调(P琥珀散含药血清能够上调E-MenSCs自噬活性,其作用机制可能与其抑制CXCL12/CXCR4轴有关。

关键词：琥珀散子宫内膜异位症经血源间充质干细胞 CXCL12/CXCR4轴自噬含药血清

琥珀散联合亮丙瑞林预防腹腔镜子宫内膜异位症术后复发的效果

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临床医学工程 2023年第12期30卷 1717-1718页

作者：张钰霈庄婷婵咸倩倩洛阳市妇幼保健院妇科河南洛阳471000

目的探讨琥珀散联合亮丙瑞林预防腹腔镜子宫内膜异位症(EMT)术后复发的效果。方法90例行腹腔镜手术的EMT患者随机分为两组各45例。对照组采用亮丙瑞林缓释微球治疗,观察组在对照组基础上采用琥珀散治疗。比较两组的激素水平、血清指标... 详细信息

目的探讨琥珀散联合亮丙瑞林预防腹腔镜子宫内膜异位症(EMT)术后复发的效果。方法90例行腹腔镜手术的EMT患者随机分为两组各45例。对照组采用亮丙瑞林缓释微球治疗,观察组在对照组基础上采用琥珀散治疗。比较两组的激素水平、血清指标及术后复发率。结果治疗后,两组的E_(2)、FSH、LH、CA-125、IL-6水平均低于治疗前,且观察组的E_(2)、FSH、LH、CA-125、IL-6水平均低于对照组(P琥珀散联合亮丙瑞林可抑制EMT患者术后雌激素的释放,调节内分泌及炎性因子,降低术后复发率。

关键词：琥珀散亮丙瑞林子宫内膜异位症术后复发

基于PI3K/AKT信号通路探讨琥珀散对子宫内膜异位症小鼠的影响及作用机制研究

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环球中医药 2023年第10期16卷 1967-1974页

作者：孙新慧郭亚楠霍超越林陶秀 ROBERTS SONG ZE 张文娟何甜甜张晨赛佳洋马小娜北京中医药大学第三附属医院妇科 100029

目的探讨琥珀散干预磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidy linositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/AKT)信号通路对子宫内膜异位症发生发展的影响及机制。方法选用BALB/c小鼠,随机分为正常组、疾病模型组、琥珀散组、西药组,每组1... 详细信息

目的探讨琥珀散干预磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidy linositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/AKT)信号通路对子宫内膜异位症发生发展的影响及机制。方法选用BALB/c小鼠,随机分为正常组、疾病模型组、琥珀散组、西药组,每组10只。造模后琥珀散组按成人临床用药量等效量的2倍给予14.3 g/kg灌胃,连续给药4周;西药组将LY294002溶于二甲基亚砜后腹腔注射,以0.04 g/kg进行计算,每周腹腔注射一次,给药4周;正常组、疾病模型组给予相同体积的生理盐水灌胃,连续给药4周。给药结束后,采用ELISA法检测各组小鼠血清内TP53、丝氨酸苏氨酸蛋白激酶B1(serine/threonine protein kinase 1,AKT1)、血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor-A,VEGF-A)和丝裂原激活蛋白激酶3(mitogen-activated protein kinase 3,MAPK3)的含量,采用免疫组化法检测各组小鼠内膜组织中PI3K、AKT的表达。结果与正常组相比,疾病模型组血清TP53、AKT1、VEGF-A和MAPK3的含量均显著升高(P琥珀散组与西药组血清TP53、AKT1、VEGF-A和MAPK3的含量无明显差异(P>0.05);与疾病模型组相比,琥珀散组与西药组血清TP53、AKT1、VEGF-A和MAPK3的含量显著降低(P琥珀散组、西药组异位内膜组织PI3K、AKT的蛋白含量表达显著降低(P琥珀散可下调TP53、AKT1、VEGFA和MAPK3的表达,抑制PI3K/AKT信号通路,而发挥对EMs的多靶点调控作用。

关键词：子宫内膜异位症琥珀散磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路小鼠作用机制

基于“凡血证总以祛瘀为要”探讨琥珀散治疗子宫内膜异位症痛经的临床应用思路

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现代中医临床 2022年第5期29卷 31-34页

作者：林陶秀张文娟郭亚楠孙新慧霍超越何甜甜马小娜北京中医药大学第三附属医院北京100029

子宫内膜异位症(EMT)是好发于育龄期妇女的常见激素依赖性疾病。痛经是EMT的典型临床表现之一,归属于“血证”范畴。基于“凡血证总以祛瘀为要”理论,结合EMT痛经的病因病机,指出EMT痛经的治疗当以活血化瘀、温阳止痛为主。琥珀散有活... 详细信息

子宫内膜异位症(EMT)是好发于育龄期妇女的常见激素依赖性疾病。痛经是EMT的典型临床表现之一,归属于“血证”范畴。基于“凡血证总以祛瘀为要”理论,结合EMT痛经的病因病机,指出EMT痛经的治疗当以活血化瘀、温阳止痛为主。琥珀散有活血化瘀、温阳止痛之效,治疗寒瘀导致的妇科疾病有明显疗效,结合临床医案加以阐析。

关键词：琥珀散子宫内膜异位症痛经血证祛瘀

琥珀散对子宫内膜异位症大鼠TNF-α、IL-6及IL-1表达的影响

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中华中医药杂志 2018年第3期33卷 1047-1051页

作者：李冰冰刘雁峰马小娜郝秀芳王峥朱秀娟北京中医药大学东直门医院北京100700 北京中医药大学第三附属医院北京100029

目的:观察琥珀散对子宫内膜异位症(EMs)模型大鼠异位病灶生长的抑制作用,及对在位和异位内膜组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1表达的影响。方法:将54只SD大鼠随机分为空白组,疾病模型组,琥珀散高、中、低剂量组,达... 详细信息

目的:观察琥珀散对子宫内膜异位症(EMs)模型大鼠异位病灶生长的抑制作用,及对在位和异位内膜组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1表达的影响。方法:将54只SD大鼠随机分为空白组,疾病模型组,琥珀散高、中、低剂量组,达那唑组,每组9只,除空白组外,其余各组均采用自体腹壁移植法建立EMs模型,连续给药3周后取材。观察大鼠异位病灶大小及形态,免疫组化法测定各组内膜TNF-α、IL-6、IL-1的表达。结果:与疾病模型组比较,琥珀散各剂量组及达那唑组干预后异位病灶体积显著减小(P琥珀散高、低剂量组TNF-α表达显著降低(P琥珀散各剂量组IL-6表达均显著降低(P琥珀散高、中剂量组IL-1表达显著降低(P琥珀散高、中剂量组TNF-α表达显著降低(P琥珀散高、中、低剂量组IL-6、IL-1表达显著降低(P琥珀散可以降调EMs大鼠在位及异位内膜组织中TNF-α、IL-6、IL-1的表达,调节免疫机制,从而发挥治疗作用的。

关键词：子宫内膜异位症琥珀散炎性因子

琥珀散加减辨治子宫内膜异位症疼痛(血瘀证)的疗效作用机制

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中国实验方剂学杂志 2017年第17期23卷 205-210页

作者：刘洁云郭洁吴雅俊王军涛潍坊市益都中心医院山东潍坊262500 南昌大学医学院南昌330031 山东省医学科学院附属医院济南250021

目的:探讨琥珀散加减辨治子宫内膜异位症(EMs)疼痛(血瘀证)的临床疗效及对致炎细胞因子水平的影响。方法:将138例符合要求的EMs疼痛患者,采用随机区组分化,按数字表法分为对照组和观察组各69例。对照组采用口服米非司酮片治疗,12.5 mg/... 详细信息

目的:探讨琥珀散加减辨治子宫内膜异位症(EMs)疼痛(血瘀证)的临床疗效及对致炎细胞因子水平的影响。方法:将138例符合要求的EMs疼痛患者,采用随机区组分化,按数字表法分为对照组和观察组各69例。对照组采用口服米非司酮片治疗,12.5 mg/次,1次/d。观察组采用琥珀散加减辨证治疗,1剂/d。两组疗程均为连续治疗6个月。经期疼痛情况采用视觉模拟评分(VAS)评分,并对非经期的盆腔痛、性交疼痛、盆腔压痛、骶韧带触痛结节和血瘀证进行治疗前后评分;检测治疗前后血清血栓素B2(TXB2),6-酮前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α),癌抗原125(CA125),雌激素(E2),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-8(IL-8)水平。结果:观察组临床总有效率为95.38%,对照组为81.25%,观察组高于对照组(χ~2=6.269,P琥珀散加减辨证治疗EMs疼痛(血瘀证)患者,能明显缓解患者的疼痛症状,并能降低雌激素、前列腺素和血清TNF-α,IL-6,IL-8等因子水平,起到改善EMs病情的作用。

关键词：子宫内膜异位症疼痛血瘀证琥珀散辨证治疗炎症因子