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玻璃珠法提取堆肥微生物总DNA及其DGGE分析

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商丘师范学院学报 2010年第12期26卷 82-86页

作者：郭艳张进良邓昌彦朱能武商丘师范学院生命科学系河南商丘476000 华中农业大学动物科技学院湖北武汉430070 华南理工大学环境科学与工程学院污染控制与生态修复广东省高校重点实验室广东广州510006

采用玻璃珠法从高温堆肥样品中进行了微生物总DNA的提取,以细菌16S rRNA基因V3区通用引物进行了PCR扩增,随后用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术对其微生物多样性进行评估.结果表明,玻璃珠法能够快速、有效地获得高质量的堆肥微生物总DNA,所... 详细信息

采用玻璃珠法从高温堆肥样品中进行了微生物总DNA的提取,以细菌16S rRNA基因V3区通用引物进行了PCR扩增,随后用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术对其微生物多样性进行评估.结果表明,玻璃珠法能够快速、有效地获得高质量的堆肥微生物总DNA,所得的DNA分子片段在15kb以上,使用细菌16S rRNA基因通用引物(27F和1492R)对总DNA进行PCR扩增,获得了近全长的16S rDNA序列(约1.5kb);DGGE分析结果表明,用该方法提取到的DNA种类较为丰富,多样性较好,能够进一步应用于群落结构分析.因此,玻璃珠法提取的DNA可以用于堆肥微生物的分子生态学研究及微生物群落结构分析.

关键词：玻璃珠法堆肥微生物总DNA DGGE 16S rDNA

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莱茵衣藻玻璃珠法转化线性质粒

生物技术 2018年第5期28卷 467-472页

作者：黄亚萍王川冯秀芳张宇四川理工学院生物工程学院四川自贡643000

[目的]研究线性质粒的转化,提高衣藻外源基因的转化效率。[方法]进行p SP108质粒单酶切试验,采用玻璃珠法转化线性质粒并对转化的关键条件进行优化,最后经抗性筛选、PCR及RT-PCR验证转化情况。[结果]经Bam HⅠ、XbaⅠ、EcoRⅠ、SacⅠ单... 详细信息

[目的]研究线性质粒的转化,提高衣藻外源基因的转化效率。[方法]进行p SP108质粒单酶切试验,采用玻璃珠法转化线性质粒并对转化的关键条件进行优化,最后经抗性筛选、PCR及RT-PCR验证转化情况。[结果]经Bam HⅠ、XbaⅠ、EcoRⅠ、SacⅠ单酶切制备的p SP108线性质粒均能成功转化,Bam HⅠ酶切后转化率最高,质粒最佳用量为4μg,最佳震荡时间为25 s,博来霉素最适筛选浓度为15μg/m L。[结论]为构建衣藻生物反应器提供实验基础。

关键词：莱茵衣藻玻璃珠法单酶切线性质粒转化

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实验室血标本促凝新方法——玻璃珠法

临床和实验医学杂志 2006年第8期5卷 1198-1198页

作者：强卫民渭南市第一医院检验科陕西渭南714000

目前各中小医院生化检验采血器材多为一次性塑料注射器和一次性塑料试管,故血液在体外不能有效地启动内源凝血系统(也不能有效地启动外源凝血系统,因为注射器一次性到位采集静脉血,故血样标本中的凝血因子Ⅲ极少),而使血标本迅速凝固.

关键词：血标本实验室玻璃珠法促凝一次性塑料试管塑料注射器新方生化检验凝血系统凝血因子Ⅲ

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微柱凝胶法和玻璃珠法测定血型凝集度的比较

中国卫生检验杂志 2014年第21期24卷 3116-3118页

作者：韩升波吴辉郭亚郑州市中医院检验科河南郑州450007 新乡医学院公共卫生学院河南新乡453003

目的比较微柱凝胶法和玻璃珠法测定血型凝集度的一致性和优劣性。方法收集2013年5月-2013年6月本院血型测定标本1 185份,分别用微柱凝胶法和玻璃珠法测定,记录结果和凝集侧的凝集度情况,同时用试管法做结果对照,然后观察2种方法的一致性... 详细信息

目的比较微柱凝胶法和玻璃珠法测定血型凝集度的一致性和优劣性。方法收集2013年5月-2013年6月本院血型测定标本1 185份,分别用微柱凝胶法和玻璃珠法测定,记录结果和凝集侧的凝集度情况,同时用试管法做结果对照,然后观察2种方法的一致性,并比较2种方法测定结果凝集侧的凝集度情况。结果 2种方法测定的凝集度灵敏度相差不大,但玻璃珠法测定凝集度的特异性要比微柱凝胶法高一些。4+凝集度的判定,玻璃珠法比凝胶法要高(A侧凝集度玻璃珠法为93.8%,凝胶法为86.4%;B侧凝集度玻璃珠法为94.3%,凝胶法为87.8%),因此对于一些凝集度低的血型抗原应用玻璃珠法检测更加准确一点。结论玻璃珠法测定血液凝集度的特异性相对较高,适用于一些特殊血型的检测。

关键词：玻璃珠法微柱凝胶法凝集度

微柱凝胶法和玻璃珠法测定血型凝集度效果比较

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深圳中西医结合杂志 2021年第9期31卷 111-112页

作者：谭荣朝陈文锋黄桂蓉阳江市妇幼保健院广东阳江529500

目的:比较对照微柱凝胶法和玻璃珠法对血型凝集度进行测定的临床效果。方法:选取2020年10月至2020年12月阳江市妇幼保健院2370份血型测定标本,均进行微柱凝胶法和玻璃珠法测定,以试管法结果作为对照,对两种方法的测定结果一致性,凝集度... 详细信息

目的:比较对照微柱凝胶法和玻璃珠法对血型凝集度进行测定的临床效果。方法:选取2020年10月至2020年12月阳江市妇幼保健院2370份血型测定标本,均进行微柱凝胶法和玻璃珠法测定,以试管法结果作为对照,对两种方法的测定结果一致性,凝集度一致性进行分析。结果:血液样本的试管法初检结果显示,720份为A型血、610份B型血、832份O型血、208份AB型血,微柱凝胶法、玻璃珠法测定的结果与试管法完全相同,符合率均达到100.0 %。在凝集度测定上,微柱凝胶法和玻璃珠法测定的A侧、B侧凝集度1+、2+、3+、4+的比率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:血型凝集度测定过程中,微柱凝胶法和玻璃珠法均可以作为血型凝集度检测的重要途径。

关键词：血型凝集度测定微柱凝胶法玻璃珠法试管法

Ⅳ型胶原蛋白酶联免疫双抗体夹心法与玻璃珠法测定的相关分析

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医学检验进修杂志 2000年第1期7卷 17-18页

作者：侯毅鞠刘晓冬吉林军医学院临检教研室132013

目的建立血清Ⅳ型胶原蛋白浓度测定的酶联免疫试验（ＥＬＩＳＡ）方法，用来替代玻璃珠法（日本试剂盒），辅助诊断肝硬化。方法两种方法同时测定８例健康人和３４例肝纤维化病人的血清，并作相关分析。结果两种方法的相关系数Ｒ... 详细信息

目的建立血清Ⅳ型胶原蛋白浓度测定的酶联免疫试验（ＥＬＩＳＡ）方法，用来替代玻璃珠法（日本试剂盒），辅助诊断肝硬化。方法两种方法同时测定８例健康人和３４例肝纤维化病人的血清，并作相关分析。结果两种方法的相关系数Ｒ＝０．８８呈相关性。结论ＥＬＩＳＡ法可以用来替代玻璃珠法，７并具有操作简便，结果准确，价格低廉的特点，有推广应用的价值。

关键词： Ⅳ型胶原 ELISA 玻璃珠法肝纤维化

东北山葡萄酵母菌基因组DNA提取方法的比较研究

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安徽农业大学学报 2014年第6期41卷 1017-1019页

作者：王晓娥陈长武吉林工程技术师范学院食品工程学院长春130052

利用液氮研磨法、蜗牛酶法和玻璃珠法提取东北山葡萄分离的酵母菌株S60基因组DNA,采用琼脂糖凝胶电泳、微量核酸蛋白测定仪和PCR方法检测基因组DNA的纯度和浓度。结果显示,蜗牛酶法提取的酵母菌基因组DNA纯度最好、浓度最高;液氮研磨法... 详细信息

利用液氮研磨法、蜗牛酶法和玻璃珠法提取东北山葡萄分离的酵母菌株S60基因组DNA,采用琼脂糖凝胶电泳、微量核酸蛋白测定仪和PCR方法检测基因组DNA的纯度和浓度。结果显示,蜗牛酶法提取的酵母菌基因组DNA纯度最好、浓度最高;液氮研磨法提取的基因组DNA浓度虽然较高,但含有较多的蛋白等杂质;玻璃珠法提取的酵母菌基因组DNA纯度和浓度均最低。

关键词：东北山葡萄液氮研磨法蜗牛酶法玻璃珠法 DNA提取

用于PCR检测的扩展青霉基因组DNA提取方法比较

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西北农业学报 2011年第2期20卷 198-201页

作者：何鸿举焦凌霞樊明涛刘晓娇吕丽娟魏新元西北农林科技大学食品科学与工程学院陕西杨凌712100 河南科技学院食品学院河南新乡453003

为寻找一种经济、简便、高效的基因组DNA提取方法,进一步开展扩展青霉的分子生物学研究,采用氯化苄法、玻璃珠法、玻璃珠+氯化苄法、试剂盒法4种方法提取扩展青霉的基因组DNA,并测定DNA质量浓度以及进行PCR和电泳分析,比较不同提取方法... 详细信息

为寻找一种经济、简便、高效的基因组DNA提取方法,进一步开展扩展青霉的分子生物学研究,采用氯化苄法、玻璃珠法、玻璃珠+氯化苄法、试剂盒法4种方法提取扩展青霉的基因组DNA,并测定DNA质量浓度以及进行PCR和电泳分析,比较不同提取方法的效果。结果表明,4种方法均可提取到基因组DNA,其抽提质量优劣依次为试剂盒法、玻璃珠+氯化苄法、玻璃珠法、氯化苄法。其中玻璃珠+氯化苄法提取效率接近试剂盒法,效果良好,并且此法成本低廉、操作简单、结果稳定,可代替昂贵的试剂盒法用于扩展青霉基因组DNA的提取。

关键词：氯化苄法玻璃珠法 DNA提取 PCR

适用于提取新生隐球酵母菌及白色假丝酵母菌总核糖核酸快速方法研究

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中华医院感染学杂志 2012年第24期22卷 5460-5462页

作者：徐赤宇刘翠杰吴建华仇芸赵瑾朱红梅温海济南军区总院皮肤科山东济南250031 第二军医大学附属长海医院皮肤科上海200433 第二军医大学附属长征医院皮肤科上海200003

目的探讨快速可以兼顾提取高质量的新生隐球酵母菌和白色假丝酵母菌总核糖核酸(RNA)的试验方法,为各种功能基因的表达研究奠定基础。方法针对新生隐球酵母菌荚膜株和荚膜缺陷株新生隐球酵母菌H99及白色假丝酵母菌国际标准菌株ATCC 6454... 详细信息

目的探讨快速可以兼顾提取高质量的新生隐球酵母菌和白色假丝酵母菌总核糖核酸(RNA)的试验方法,为各种功能基因的表达研究奠定基础。方法针对新生隐球酵母菌荚膜株和荚膜缺陷株新生隐球酵母菌H99及白色假丝酵母菌国际标准菌株ATCC 64548采用冷酸洗玻璃珠联合Yeast RNA kit法提取总核糖核酸(RNA),用紫外线分光光度计测量其OD260、OD280的值,并且进行琼脂糖凝胶电泳,同时应用RT-PCR鉴定RNA质量。结果提取的新生隐球酵母菌荚膜株和荚膜缺陷株总RNA产量分别为0.6μg/107细胞、1.5μg/107细胞,且OD260/OD280比值在1.8～2.0,电泳显示提取的总RNA呈现28SrRNA,18SrRNA和5srRNA 3条清晰的条带;提取的白色假丝酵母和菌丝相总RNA产量分别为2.3μg/107细胞、3.1μg/107细胞,且OD260/OD280比值在1.8～2.0,电泳显示提取的总RNA呈现28SrRNA、18SrRNA和5SrRNA 3条清晰的条带。结论冷酸洗玻璃珠联合Yeast RNA kit法,快速高质量适用于大小样本的新生隐球酵母菌和白色假丝酵母菌总RNA提取,满足各种类型分子生物学研究需要以及临床鉴别诊断治疗不同种类真菌感染。

关键词：新生隐球酵母菌白色假丝酵母菌总核糖核酸 YeastRNAkit法玻璃珠法