检索结果-南通市图书馆

作者：孙曼婷昆明理工大学

学位级别：硕士

原发性肝癌是常见的消化系统肿瘤之一,其发病率和死亡率呈现逐渐上升的趋势,全世界每年约有800000例患者罹患HCC,且预后较差,是死亡率第三高的癌症。目前肝癌的治疗手段包括手术治疗、化学药物治疗、放射治疗等,其中肝癌的药物治疗仍是... 详细信息

原发性肝癌是常见的消化系统肿瘤之一,其发病率和死亡率呈现逐渐上升的趋势,全世界每年约有800000例患者罹患HCC,且预后较差,是死亡率第三高的癌症。目前肝癌的治疗手段包括手术治疗、化学药物治疗、放射治疗等,其中肝癌的药物治疗仍是主要治疗手段之一。目前临床上使用的传统抗肝癌药物最大的缺点是缺乏组织选择性,在体内分布广泛,使其在发挥药效的同时往往产生严重的全身性毒副作用。因此,开发和研究高效低毒的新型抗癌药物已成为肝癌化疗药物研发的重点。我们前期研究发现结构全新的吲哚酰肼类化合物IHZ-1能够通过抑制PI3K/AKT/m TOR信号通路以及激活ROS/JNK途径阻断肝癌细胞的周期进程并诱导细胞凋亡。活性氧（ROS）广泛参与细胞的各项生命活动,并在凋亡和自噬的过程中扮演重要角色。研究显示部分诱导癌细胞凋亡的化合物也能诱导癌细胞发生自噬。自噬的双效性体现在低水平的自噬可以作为细胞清除自身受损细胞器的自我保护机制,而超过阈值的高水平自噬能够诱发自噬性细胞死亡。因此,研究IHZ-1上调的ROS能否激活自噬以及自噬发生后对肝癌细胞凋亡的影响,一方面能够进一步阐明IHZ-1的抗肝癌作用机制,另一方面也为部分化疗药物激活自噬后疗效降低的问题提供解决策略。为了研究IHZ-1激活ROS是否诱导了自噬的发生,我们选取Hep G2和Huh7两株肝癌细胞展开深入研究。首先采用吖啶橙染色检测IHZ-1处理后肝癌细胞中酸性细胞器的数量,结果显示5μM和10μM IHZ-1处理后Hep G2细胞中酸性细胞器数量显著提高,但Huh7细胞中的酸性细胞器数量并没有明显的变化。由于酸性细胞器数量对于自噬发生只是一个间接检测指标,为了进一步研究IHZ-1是否诱导肝癌细胞发生自噬,我们采用Real Time-PCR技术检测自噬相关基因的转录水平,结果显示Beclin1、Atg5和ULK1的转录水平在IHZ-1处理后均有不同程度的提高。进一步的研究发现IHZ-1能够诱导转染了GFP-LC3-II质粒的肝癌细胞出现大量的GFP-LC3-II点状聚集,Western Blot的结果也进一步验证了IHZ-1的确上调了LC3-I向LC3-II的转化水平,然而自噬底物P62的表达并未降低,提示IHZ-1激活的自噬流可能并不完整。为了进一步验证IHZ-1是否诱导了完整的自噬流。采用自噬抑制剂氯喹（CQ）与IHZ-1联合处理肝癌细胞,结果显示与氯喹单独处理组相比,联合处理组P62水平下调,以上结果表明IHZ-1在两种肝癌细胞中均激活了自噬且自噬流是完整的。为了进一步研究IHZ-1所诱导的自噬对凋亡的影响,我们采用CQ和IHZ-1联合处理肝癌细胞检测其凋亡水平,结果显示与IHZ-1处理组相比,CQ和IHZ-1共处理组凋亡水平显著提高,说明抑制自噬能够提高IHZ-1对肝癌细胞的促凋亡作用。综上所述,IHZ-1能够增加ROS的累积进而激活肝癌细胞发生自噬,而抑制自噬能够增强IHZ-1对肝癌细胞的促凋亡作用,提示IHZ-1刺激活化的细胞自噬可能是肝癌细胞的自我保护机制。我国已经开始步入老龄化社会,逐渐增加的老年人口及快速老龄化进程导致一系列与年龄有关疾病患病率的增加,比如癌症。近年来研究显示,引起个体衰老的众多因素中,衰老细胞的累积是驱动衰老和衰老相关疾病发生、发展的重要因素。衰老细胞的累积及无法及时清除将造成组织微环境的破坏或将诱发衰老相关疾病,因此清除衰老细胞或许是治疗或缓解与年龄相关疾病的有效手段。在2011年首次报道了在小鼠体内清除衰老细胞可以延长寿命以及延缓衰老相关疾病。同时,进一步的研究发现将衰老细胞注射到年轻小鼠体内能够让正常小鼠的寿命缩短最多35%,而靶向清除这些衰老细胞不但能够延长小鼠寿命,同时可以延缓肿瘤的发生发展,维持组织和器官的功能。然而转基因模型和药物的局限性使清除衰老细胞的策略在生理条件下的应用受到限制。因此,开发靶向清除衰老细胞的抗衰老药物成为该领域的研究热点,其中基于衰老细胞具有高表达抗凋亡家族蛋白的特性,靶向衰老细胞的抗凋亡及促生存通路而开发出了选择性清除衰老细胞的化合物,被称作“senolytics”。意为:裂解衰老细胞的化合物。本课题前期发现中药黄芪中的单体成分环黄芪醇（cycloastragenol,CAG）具有选择性清除衰老细胞和抑制衰老相关分泌表型（senescence-associated secretory phenotype,SASP）的作用,其机制可能通过抑制抗凋亡蛋白Bcl-2而诱导衰老细胞凋亡,同时通过下调磷酸化的P38MAPK/NF-κB、JAK/STAT3蛋白抑制IL-6等SASP的表达,提示CAG可能具有“senolytic”的抗衰老活性。为了进一步研究CAG在体内的“senolytic”活性及抗衰老作用,采用颈背部皮下注射D-gal建立衰老小鼠模型,连续注射8周并在第6周同时灌胃给予低浓度（20mg/kg）和高浓度（40mg

关键词： IHZ-1 肝癌自噬环黄芪醇衰老 SASP

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环黄芪醇的应用及结构修饰的研究进展

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实用医药杂志 2019年第10期36卷 941-946页

作者：楚治良高春芳刘欣张静郭宇冰韩静解放军第989医院河南洛阳471031 洛阳中联达盛生物科技有限公司

环黄芪醇是黄芪甲苷的苷元,主要存在于中药黄芪中,可以通过黄芪甲苷制备得到。研究发现该化合物可以提高端粒酶的活性,从而延缓细胞衰老。同时,环黄芪醇还具有很好的抗艾滋病病毒(HIV)、预防和治疗腹主动脉瘤、抗炎和抗氧化应激等药理... 详细信息

环黄芪醇是黄芪甲苷的苷元,主要存在于中药黄芪中,可以通过黄芪甲苷制备得到。研究发现该化合物可以提高端粒酶的活性,从而延缓细胞衰老。同时,环黄芪醇还具有很好的抗艾滋病病毒(HIV)、预防和治疗腹主动脉瘤、抗炎和抗氧化应激等药理活性。目前文献报道环黄芪醇可通过生物转化或化学修饰的方法制得多种新结构化合物。故对环黄芪醇的应用及结构修饰的研究现象进行综述,为进一步探索新的具有药物活性的环黄芪醇类衍生物提供理论依据。

关键词：环黄芪醇黄芪甲苷化学修饰生物转化

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环黄芪醇的药理作用研究进展

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中医学报 2020年第5期35卷 983-989页

作者：李曼王志菲上海中医药大学基础医学院中西医结合基础研究室上海201203

环黄芪醇作为黄芪中一种极具药用价值的次生代谢产物,对心血管疾病、脑卒中、脂肪肝、腹主动脉瘤等疾病均有保护作用,可激活端粒酶、调节免疫力、促进伤口愈合及毛发生长等。但目前对于环黄芪醇的药理作用研究还存在一些问题:①相关体... 详细信息

环黄芪醇作为黄芪中一种极具药用价值的次生代谢产物,对心血管疾病、脑卒中、脂肪肝、腹主动脉瘤等疾病均有保护作用,可激活端粒酶、调节免疫力、促进伤口愈合及毛发生长等。但目前对于环黄芪醇的药理作用研究还存在一些问题:①相关体外实验发现环黄芪醇在一定浓度下具有细胞毒性作用,提示环黄芪醇并非绝对安全,其对细胞的毒性作用尚需深入研究,同时在动物体内的安全性还需进一步验证;②对于环黄芪醇的研究多局限于激活端粒酶这一作用靶点,虽使其在相关保健产品开发中存在优势,但一定程度上限制了对其更深层次和更广范围的研究,目前虽已有环黄芪醇对腺苷酸活化蛋白激酶(AMP activiated protein kinase,AMPK)通路、法尼醇X受体(famesoid X receptor,FXR)转录因子和沉默信息调节蛋白(silent mating type information regulation,SIRT1)蛋白调节作用的探讨,为其药理作用靶点做了一定的补充,但仍缺乏相关的药理活性和作用机制研究。尽管对环黄芪醇的药理作用研究还存在一些问题,但不可否认其药用价值,今后需进一步加强其对心脏纤维化、充血性心力衰竭和心律失常等疾病的保护作用研究,以及对于改善心血管疾病风险指标、调节内皮细胞稳态作用的理论和实验研究,以更好地应用于临床。同时,充分挖掘环黄芪醇在治疗脑缺血和精神类疾病方面的潜力,将其对脑部神经血管疾病的作用作为未来研究的一个新方向。

关键词：环黄芪醇黄芪药理作用药物代谢动力安全性脑缺血精神类疾病药物作用靶点

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环黄芪醇对破骨细胞分化过程中氧化应激相关基因的转录水平的影响

环黄芪醇对破骨细胞分化过程中氧化应激相关基因的转录水平的影响

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2019楚天骨科高峰论坛暨第二十六届中国中西医结合骨伤...

作者：王刚马超陈凯张程张梓屹刘予豪王超文森特·库克陈晓俊颜新昊庞凤翔陈雷雷何伟徐家科广州中医药大学第一临床医学院西澳大学分子生物学实验室广州中医药大学第一附属医院关节骨科广州中医药大学岭南医学研究中心中医骨伤科学实验室

目的:观察环黄芪醇(cycloastragenol,CAG)对破骨细胞分化过程中氧化应激相关基因的转录水平的影响。方法:取12周龄C57BL/6小鼠下肢骨髓分离骨髓巨噬细胞(bone marrow macrophages, BMMs)。通过MTS法检测不同浓度的CAG对BMMs活力的影响... 详细信息

目的:观察环黄芪醇(cycloastragenol,CAG)对破骨细胞分化过程中氧化应激相关基因的转录水平的影响。方法:取12周龄C57BL/6小鼠下肢骨髓分离骨髓巨噬细胞(bone marrow macrophages, BMMs)。通过MTS法检测不同浓度的CAG对BMMs活力的影响。通过重组谷胱甘肽S转移酶重组核因子κB受体活化因子配体蛋白(Recombinant Glutathione S-transferase-recombinant receptor activator of Factor-κB ligand protein, GST-rRANKL)联合巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony-stimulating factor, M-CSF)诱导破骨细胞(osteoclast, OCL)形成,通过抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase, TRAcP)染色鉴定阳性细胞(>3个核)数量以确定CAG对破骨细胞分化的影响。通过RAW264.7细胞系构建核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)-抗氧化转录元件(antioxidant response element, ARE)荧光素酶报告基因检测CAG对细胞内ARE转录活性的影响。通过实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, qPCR)检测CAG对氧化应激相关基因的表达的影响。结果:CAG 0μmol·L-1,5μmol·L-1和10μmol·L-1各组经MTS法所测的吸光值分别为0.975±0.049,1.004±0.066,0.993±0.013,差异无统计学意义(F=0.294,P=0.756),其中5或10μmol·L-1组与0μmol·L-1组的吸光值无明显差异(P=0.6845,P=0.8525)。RANKL联合CAG 0μmol·L-1,5μmol·L-1和10μmol·L-1各组TRAcP染色阳性的破骨细胞数量(核数目>3个)分别为172.7±10.12,66.33±4.041,50±2.646,差异有统计学意义(F=317.8,P<0.000 1),其中5μmol·L-1组和10μmol·L-1组染色阳性的破骨细胞数量均显著低于0μmol·L-1组(P<0.000 1,P<0.000 1),并呈剂量效应。空白对照组,RANKL组和RANKL+10μmol·L-1 CAG组干预48小时后的ARE转录活性分别为622 748±27 270,348 114±1 407,653 747±2 878,差异有统计学意义(F=337.8,P<0.000 1),其中RANKL组的ARE转录活性低于空白对照组(P<0.000 1),而RANKL+10μmol·L-1CAG组的ARE转录活性高于RANKL组(P<0.000 1)。以空白对照组作为参照时,空白对照组、RANKL组、RANKL+10μmol·L-1CAG组的Nrf2 mRNA表达量、Nrf2与Kelch样ech相关蛋白1(kelch like ech associated protein 1,Keap1)比值、血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HMOX1)mRNA表达量、过氧化氢酶(catalase,CAT)mRNA表达量的倍数关系分别为(1.015±0.376,0.568±0.062,1.436±0.085),(1.004±0.107,0.790±0.021,1.078±0.080),(1.001±0.060,0.309±0.023,0.635±0.059)、(1.004±0.107,0.790±0.021,1.078±0.080),差异均有统计学意义(F=30.04,P<0.0007;F=11.02,P=0.0098;F=8 227,P<0.000 1;F=147.5,P<0.000 1);RANKL组上述四项指标均低于空白对照组(P=0.013,P=0.027,P<0.000 1,P<0.000 1),而RANKL+10μmol·L-1CAG组上述四值均有升高(P=0.0005,P=0.0003,P=0.0004,P=0.0072)。结论:CAG能够在不影响BMMs细胞活力的情况下抑制RANKL诱导的破骨细胞形成,这可能与其能够增强ARE的转录活化水平,进而上调氧化应激相关基因Nrf2、HMOX1、CAT的表达有关。

关键词：环黄芪醇破骨细胞氧化应激

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环黄芪醇对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

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承德医学院学报 2015年第3期32卷 186-188页

作者：易忠良高维娟承德医学院河北承德067000 河北中医学院

目的:探讨环黄芪醇对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤脑组织的保护作用。方法:采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注(缺血2h再灌注24h)模型并给予环黄芪醇干预,评价大鼠的Garcia JH神经功能评分,并采用TTC染色法计算大鼠的脑梗死灶容积百... 详细信息

目的:探讨环黄芪醇对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤脑组织的保护作用。方法:采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注(缺血2h再灌注24h)模型并给予环黄芪醇干预,评价大鼠的Garcia JH神经功能评分,并采用TTC染色法计算大鼠的脑梗死灶容积百分比。结果:环黄芪醇中、高剂量组大鼠神经功能评分明显高于模型组(P环黄芪醇能提高脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能评分、缩小脑梗死体积,对局灶性脑缺血再灌注脑组织损伤具有保护作用。

关键词：环黄芪醇缺血再灌注大鼠局灶性脑梗死

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环黄芪醇对脑缺血再灌注大鼠神经元凋亡和TERT表达的影响

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中国病理生理杂志 2015年第10期 1858-1858页

作者：高维娟河北中医学院

目的:观察环黄芪醇对脑缺血再灌注大鼠神经元凋亡和端粒酶逆转录酶(telomerase reverse transcriptase,TERT)表达的影响。方法:制作大鼠右侧大脑中动脉栓塞模型,缺血2 h再灌注24 h。用免疫组织化学法和蛋白印迹法检测大鼠缺血侧皮质中T... 详细信息

目的:观察环黄芪醇对脑缺血再灌注大鼠神经元凋亡和端粒酶逆转录酶(telomerase reverse transcriptase,TERT)表达的影响。方法:制作大鼠右侧大脑中动脉栓塞模型,缺血2 h再灌注24 h。用免疫组织化学法和蛋白印迹法检测大鼠缺血侧皮质中TERT蛋白的表达。用TUNEL染色法检测大鼠缺血侧半暗带区神经元的凋亡指数。结果:模型组较假手术组TERT的表

关键词：环黄芪醇凋亡指数神经元凋亡脑缺血再灌大鼠

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基于Nrf2通路探讨环黄芪醇调控H_(2)O_(2)致HT22细胞氧化应激损伤的作用

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中医药信息 2021年第12期38卷 7-12页

作者：郝任娟陆韵薇于顾然南京中医药大学附属医院江苏南京210029

目的:探讨环黄芪醇对H_(2)O_(2)处理的HT22细胞氧化应激损伤的保护作用,并对其潜在机制进行研究。方法:首先采用MTT法检测经不同浓度环黄芪醇处理的HT22细胞活性差异,对环黄芪醇的有效浓度进行筛选。将细胞分为5组,其中空白组和H_(2)O_... 详细信息

目的:探讨环黄芪醇对H_(2)O_(2)处理的HT22细胞氧化应激损伤的保护作用,并对其潜在机制进行研究。方法:首先采用MTT法检测经不同浓度环黄芪醇处理的HT22细胞活性差异,对环黄芪醇的有效浓度进行筛选。将细胞分为5组,其中空白组和H_(2)O_(2)组不加入环黄芪醇,其余3组根据筛选结果分别加入不同浓度的环黄芪醇(50、75、100μmol/L)培养24 h。然后除空白组外,其余4组均加入H_(2)O_(2)作用4 h。采用DCFH-DA活性氧探针检测各组细胞中ROS的生成水平;免疫荧光染色检测各组细胞中Nrf2的入核情况;蛋白免疫印迹法检测各组细胞凋亡相关蛋白的表达情况。结果:本实验中,使用环黄芪醇作用于细胞的有效浓度分别为50、75、100μmol/L。随着环黄芪醇浓度的增加,环黄芪醇的保护作用也随之增强。环黄芪醇可抑制细胞中ROS的产生,促进Nrf2的入核,降低凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax的表达,增加CleavedCaspase-3、Bcl-2的表达,减少细胞色素C的释放,并表现出浓度依赖性。结论:环黄芪醇对H_(2)O_(2)导致的HT22细胞的氧化应激损伤呈现出保护作用,这种保护作用可能是通过激活Nrf2通路来实现的。

关键词：环黄芪醇 HT22 氧化应激 Nrf2 凋亡

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正交试验优化黄芪甲苷制备环黄芪醇的工艺研究

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现代中医药 2015年第5期35卷 188-190页

作者：廖然谢伟南华大学附属南华医院药剂科湖南衡阳421000 陕西步长制药有限公司陕西西安710075

目的建立一种制备较高纯度的环黄芪醇的方法,并进行制备工艺优化。方法以黄芪甲苷为前体化合物,经过氧化→还原→水解→萃取,从而获得环黄芪醇。对各环节中影响环黄芪醇产率的因素进行正交试验优化各参数。结果影响环黄芪醇提取率的因... 详细信息

目的建立一种制备较高纯度的环黄芪醇的方法,并进行制备工艺优化。方法以黄芪甲苷为前体化合物,经过氧化→还原→水解→萃取,从而获得环黄芪醇。对各环节中影响环黄芪醇产率的因素进行正交试验优化各参数。结果影响环黄芪醇提取率的因素主次顺序为还原反应液与H2SO4质量比例>黄芪甲苷与KIO4比例>水解反应时间>黄芪甲苷与BH4Na比例,最佳制备条件组合为黄芪甲苷与KIO4摩尔比为1/10,黄芪甲苷与BH4Na摩尔比为1/2,还原反应液与H2SO4质量比为1/300,水解反应时间为48 h。结论该制备工艺稳定可靠,产率较高,易于产业化推广。

关键词：环黄芪醇制备工艺正交试验

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中药单体环黄芪醇的制备方法

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实用医药杂志 2019年第9期36卷 822-824页

作者：楚治良王好锋韩静王晓娜龚慧高春芳解放军第989医院科研部

目的探索一种温和的环黄芪醇最佳制备方法。方法以黄芪甲苷为原料,采用温和的双相酸水解法制得环黄芪醇,并以环黄芪醇的收率为考察指标,采用正交试验的方法对影响试验的因素进行科学分析。结果将黄芪甲苷粉末加入到含18%盐酸的20%甲醇... 详细信息

目的探索一种温和的环黄芪醇最佳制备方法。方法以黄芪甲苷为原料,采用温和的双相酸水解法制得环黄芪醇,并以环黄芪醇的收率为考察指标,采用正交试验的方法对影响试验的因素进行科学分析。结果将黄芪甲苷粉末加入到含18%盐酸的20%甲醇水溶液(v/v)与三氯甲烷的双相混合反应体系中,在室温条件下剧烈搅拌6d,环黄芪醇收率为46.27%。结论采用温和的双相酸水解法制备环黄芪醇,可以减少强酸对环黄芪醇的裂解,明显提高环黄芪醇的收率,操作方法简单,条件温和,有利于应用推广。

关键词：黄芪甲苷环黄芪醇双相酸水解法正交试验

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酵母合成环黄芪醇的研究进展

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北京化工大学学报（自然科学版） 2023年第3期50卷 14-26页

作者：袁瑛姿钟泓卉杨雨潼姚欢张晓玲王峥魏勇军郑州大学药学院郑州450001 郑州大学合成生物学实验室郑州450001 北京化工大学生命科学与技术学院北京100029

黄芪是一种重要的中药材,为豆科植物黄芪的干燥根,含有黄酮类、多糖类、皂苷类等多种成分。环黄芪醇主要由黄芪中的黄芪甲苷转化而成,具有抗氧化、抗衰老等多种生物活性。但是现有的环黄芪醇生产策略依赖于中药提取,难以大规模生产。合... 详细信息

黄芪是一种重要的中药材,为豆科植物黄芪的干燥根,含有黄酮类、多糖类、皂苷类等多种成分。环黄芪醇主要由黄芪中的黄芪甲苷转化而成,具有抗氧化、抗衰老等多种生物活性。但是现有的环黄芪醇生产策略依赖于中药提取,难以大规模生产。合成生物学技术的快速发展为构建酵母细胞工厂用于高效生产多种植物天然产物提供了基础,也为环黄芪醇的大规模高效合成提供了解决方案。本文综述了现有环黄芪醇的制备方法,对环黄芪醇合成途径及关键酶、萜类合成代谢途径调控等进行了阐述和讨论。未来,通过表达环黄芪醇的关键合成酶基因,并设计和构建酿酒酵母细胞工厂以提高萜类合成代谢通量,有望实现环黄芪醇的酵母合成。

关键词：环黄芪醇酿酒酵母微生物细胞工厂氧化角鲨烯环化酶细胞色素P450

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