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山东医药 2018年第2期58卷 17-20页

作者：刘曼程玉田焕娜郝美玲李春辉承德医学院附属医院河北承德067000 承德医学院

目的观察Hedgehog(Hh)信号通路特异性抑制剂环靶胺对人胃癌细胞侵袭转移的影响,并探讨其机制。方法用不同浓度的环靶胺处理人胃癌细胞MGC-803,MTT法检测细胞的增殖能力,Transwell小室观察细胞的迁移、侵袭等转移能力,qRT-PCR法检测Hh信... 详细信息

目的观察Hedgehog(Hh)信号通路特异性抑制剂环靶胺对人胃癌细胞侵袭转移的影响,并探讨其机制。方法用不同浓度的环靶胺处理人胃癌细胞MGC-803,MTT法检测细胞的增殖能力,Transwell小室观察细胞的迁移、侵袭等转移能力,qRT-PCR法检测Hh信通路相关蛋白Smo、Gli-1和转移相关因子基质金属蛋白酶9(MMP-9)mRNA表达,Western blotting法检测Gli-1、MMP-9蛋白表达。结果随着环靶胺浓度的增加和作用时间的延长,胃癌细胞增殖抑制率逐渐增加(P均环靶胺处理胃癌细胞24 h,40μmol/L处理的细胞侵袭和转移的穿膜细胞数均少于0μmol/L(P均环靶胺能通过抑制Hh信号通路下调MMP-9表达,从而抑制胃癌细胞MGC-803的侵袭和转移。

关键词：胃癌环靶胺 Hedgehog信号通路 Smo基因 Gli-1基因基质金属蛋白酶细胞增殖细胞侵袭细胞转移

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Sonic hedgehog通路促进胃癌细胞生长与增殖的研究

Sonic hedgehog通路促进胃癌细胞生长与增殖的研究

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作者：万建华西南大学

学位级别：硕士

分泌信号蛋白的HH家族在从果蝇到人类这些多样化的动物门类的发展中起着一个重要作用,HH通路同样参与了成体组织中的干细胞增殖的调控,而且此通路的异常激活与多种人类癌症有关,自从果蝇中的HH通路被首次发现并被克隆之后已经取得了很... 详细信息

分泌信号蛋白的HH家族在从果蝇到人类这些多样化的动物门类的发展中起着一个重要作用,HH通路同样参与了成体组织中的干细胞增殖的调控,而且此通路的异常激活与多种人类癌症有关,自从果蝇中的HH通路被首次发现并被克隆之后已经取得了很多研究进展,许多HH通路相关的组件在果蝇中已经被鉴定和分析了,尽管如此,在脊椎动物中此通路仍有很多不解之处。在Hedgehog信号途径被发现与肿瘤的发生发展相关之前我们已经发现这一通路在哺乳动物的形态发生和胚胎发育过程中都扮演了一个十分重要的角色。其中在哺乳动物中就至少了发现三种同源基因：Sonic HH（SHH）、Desert HH（DHH）和Indian HH（IHH）,它们均参与了胚胎发育、器官成熟及肿瘤形成。其中对SHH的研究最清楚,完整的SHH信号途径的相关蛋白分子包括：12跨膜的蛋白受体Patched（PTCH）、7跨膜的蛋白Smoothened（SMOH）、转录因子GLI以及胞质蛋白Fused和Fused抑制蛋白[Su（Fu）]。SHH信号途径的紊乱以及其信号相关成分的突变会导致肿瘤的发生与发展。所以加强对SHH信号途径的进一步了解,将有助于更好地调控SHH信号通路,深入了解细胞增殖与组织肿瘤之间的相互关系。目前的研究已经发现sonic hedgehog通路活性的异常激活与基底细胞癌、肺癌、前列腺癌、消化道肿瘤和口腔癌等的形成均有着重要关系,并发现其对很多肿瘤细胞的增殖,分化以及凋亡起着调控作用,所以说sonic hedgehog通路是一条在肿瘤中普遍存在的一条信号通路,尤其在最近几年越来越多的研究表明,soni c hedgehog信号通路的异常激活同样与胃癌的发生密切相关,在这项课题中我们主要以通过酶消化法获得的胃癌原代细胞GAM-016和胃癌细胞系MKN-45作为研究对象探索sonic hedgehog通路对胃癌细胞增殖及胃肿瘤生长的影响,并对其中的调控机制进行进一步的揭示,前期的研究结果表明当sonic hedgehog通路活性被药物cyclopamine抑制之后,胃癌细胞的生长增殖受到了很大的抑制,就是说sonic hedgehog通路可以促进细胞的生长增殖,接着在对其中的作用机制进行研究之后我们又发现sonic hedgehog通路能够调控胃癌细胞的细胞周期和存活：首先SHH通路的抑制导致细胞在细胞周期的G1期滞留,从而使得进入S期的细胞减少,其次,药物cyclopamine处理增加了细胞的死亡,我们知道细胞周期和死亡都受到相应的蛋白因子的直接调控,由此我们推测SHH通路可能是通过影响这些蛋白因子的表达水平从而间接的影响胃癌细胞周期和死亡;最后,我们建立了NOD/SCID小鼠胃癌的移植瘤模型来观察SHH通路对胃癌肿瘤生长的调控作用,实验发现,当通路被抑制之后胃癌肿瘤的生长也明显受到了抑制,这一结果对胃癌的临床治疗具有重要的指导意义,为以针对SHH通路的胃癌靶标治疗提供了进一步的理论依据。

关键词： Sonic hedgehog通路环靶胺胃癌细胞周期细胞存活

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