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心功能不同的风湿性心脏瓣膜病心房颤动患者超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4的表达水平研究

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中国全科医学 2015年第26期18卷 3170-3172页

作者：张健李发鹏甘天翊许国军何卫周贤惠汤宝鹏李耀东郭霞新疆医科大学第一附属医院心脏中心心脏重症监护病区CCU 新疆乌鲁木齐市830054 新疆维吾尔自治区人民医院新疆医科大学第一附属医院心脏中心起搏电生理科

目的：探讨超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4（HCN4）基因在风湿性心脏瓣膜病心房颤动伴心力衰竭患者与心功能正常的风湿性心脏瓣膜病心房颤动患者心房肌中的表达水平。方法选取2008—2011年新疆医科大学第一附属医院因心脏瓣膜病需... 详细信息

目的：探讨超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4（HCN4）基因在风湿性心脏瓣膜病心房颤动伴心力衰竭患者与心功能正常的风湿性心脏瓣膜病心房颤动患者心房肌中的表达水平。方法选取2008—2011年新疆医科大学第一附属医院因心脏瓣膜病需接受开胸换瓣手术患者45例，根据其心功能分级，将美国纽约心脏病协会（ NYHA）分级为Ⅱ~Ⅲ级者27例作为试验组，将心功能正常者18例作为对照组。采用实时荧光定量PCR（ Real-time PCR）和蛋白质免疫印迹法（ Western-blotting）分别测定两组患者HCN4 mRNA及蛋白表达水平。结果对照组HCN4 mRNA表达水平为（1.12±0.69），低于试验组的（4.91±1.51）（t =0.021，P 〈0.05）。对照组 HCN4蛋白表达水平为（1.02±0.15），低于试验组的（2.01±0.92）（t=0.031，P〈0.001）。结论 HCN4在心力衰竭与心功能正常的风湿性心脏瓣膜病心房颤动患者的心房肌中均有表达，且随着心功能不全的加重，HCN4表达水平上调。

关键词：风湿性心脏病心房颤动环核苷酸门控阳离子通道心力衰竭

超极化激活环核苷酸门控阳离子通道的研究进展

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宁夏医学杂志 2007年第5期29卷 472-473页

作者：刘丹妮姚成立宁夏银川市第一人民医院宁夏银川750001

1976年Noma首次报道在家兔心脏窦房结组织记录到一种超极化激活的内向电流,称为拼。随后在感光细胞和海马CA1区的锥体细胞也记录到这种超极化激活的内向电流,称为Iq。在神经系统,这种超极化激活电流称为Ih。1997年发现介导Ih的离子通道H... 详细信息

1976年Noma首次报道在家兔心脏窦房结组织记录到一种超极化激活的内向电流,称为拼。随后在感光细胞和海马CA1区的锥体细胞也记录到这种超极化激活的内向电流,称为Iq。在神经系统,这种超极化激活电流称为Ih。1997年发现介导Ih的离子通道HCN,此后2年间陆续克隆出多种编吗HCN通道的基因。If表示出与超级化激活的阳离子电流的分子组成关联,在包括心脏和大脑起搏活性的生理功能上起着至关重要的作用,它决定了静息膜电位、树突样整合和突触传导。[第一段]

关键词：心脏起搏电流环核苷酸门控阳离子通道超极化激活

人超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4基因重组腺病毒构建心脏生物起搏的实验研究

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中华生物医学工程杂志 2014年第1期20卷 34-38页

作者：赵菁俞晓军胡大一丁荣晶张萍郭继鸿苟建军何飞乔伟郑州大学第一附属医院心血管内科 450052 郑州大学第一附属医院医务处 450052 郑州大学第一附属医院财务处 450052 舟山医院心血管内科北京大学人民医院心脏中心

目的对心肌细胞标记分子和与起搏活动相关的人超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4（hHCN4）的表达进行检测,并进行细胞电生理学研究.方法将20只成年新西兰大白兔分为对照组（10只）和实验组（10只）,对照组经心外膜注射腺病毒至左心... 详细信息

目的对心肌细胞标记分子和与起搏活动相关的人超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4（hHCN4）的表达进行检测,并进行细胞电生理学研究.方法将20只成年新西兰大白兔分为对照组（10只）和实验组（10只）,对照组经心外膜注射腺病毒至左心室心尖部,实验组则注射hHCN4重组腺病毒.术后3d内每天描记两组大白兔体表心电图,术后第7天分离颈部双侧迷走神经干并进行双侧或单侧电刺激,以标测电极在心尖部进行起搏（刺激脉宽2～4 ms,刺激电压5～8V,刺激频率20 ～ 30次/s）,并记录同步肢体6导联心电图.免疫荧光检测两组大白兔心脏组织和实验组大白兔肝、肾、肺组织的hHCN4表达.膜片钳记录实验组大白兔基因转染后心尖部心肌单细胞动作电位起搏相关离子流If和LCa.结果术后3d内心电图都没有记录到两组大白兔的室性心律失常事件.在术后第7天进行颈部迷走神经干电刺激时,实验组大白兔室性逸搏节律的频率明显快于对照组[（60±8）次/min比（42±6）次/min,P＜0.05],其室性逸搏节律起源于注射部位附近.实验组大白兔注射局部的心脏组织较对照组hHCN4蛋白表达明显增强,其肝、肾、肺组织未检测到该蛋白的表达.膜片钳记录到实验组大白兔基因转染后心尖部心肌单细胞存在起搏电流If和LCa.结论 hHCN4导入心肌可以使通道蛋白在局部过度表达,提高室性异位起搏点的频率.

关键词：环核苷酸门控阳离子通道 DNA,重组腺病毒科心脏起搏器,生物心动过缓

超极化激活环核苷酸门控阳离子通道（HCN）对大鼠海马突触传递功能的调控作用研究

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中国药理通讯 2006年第4期23卷 9-11页

作者：郭莲军郑敏喻欣宗贤刚华中科技大学同济医学院药理学系

二十世纪80年代初Di Franeesco和Irisawa等学者在研究窦房结起搏活动时发现一种离子流（funny current，If，或queer current，Iq），即超极化激活-环核苷酸门控的阳离子通道（hyperpolarization—activated cyclic nucleotide—gated cation channel，HCN），HCN通道为一多基因家族，至少含有HCNl-4四个成员，最近HCN家族亚单位已被克隆，每一亚单位形成的离子通道均具有内在If电流的主要特征。编码If通道的几种cDNA均已被克隆。在脊椎动物如大鼠、小鼠、兔和人的中枢以及外周组织，HCNl-4皆有高度表达。HCN1，HCN2，HCN4在心脏表达丰富。HCN1在大鼠，小鼠的新皮层、海马、丘脑、小脑等表达丰富；HCN2在嗅球、皮层、海马、丘脑、脑干和小脑亦表达丰富；HCN3在中枢表达水平相对较低；HCN4在嗅球、丘脑及松果体有较高的表达。HCN通道由4个亚单位组成，每个亚单位含有6个跨膜螺旋片断（S1-6），起电压传感器作用的S4片断和介于S5与S6之间的离子孔道即P区，HCN通道C端含有环核苷酸结合区（cyclic nucleotide-binding domain，CNBD）该区与其他几种环核苷酸结合包括cAMP和cGMP激活的蛋白激酶。HCN家族成员之间跨越S1片断到C末端CNBD区氧基酸序列高度保守．N末端与C末端则相反．在长度上变异较大只具有较低的同源性。

关键词：超极化激活环核苷酸门控阳离子通道大鼠海马突触传递功能调控作用

伊伐布雷定对快速心房起搏老年犬模型心脏电生理及超级化激活环核苷酸门控阳离子通道影响

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临床军医杂志 2024年第12期52卷 1302-1304页

作者：冯敏吴闯举张格格李耀东新疆医科大学第一附属医院心脏起搏电生理科新疆乌鲁木齐830000 四川省成都市邛崃市医疗中心心内科四川成都610000

目的探讨伊伐布雷定对快速心房起搏老年犬模型心脏电生理及超级化激活环核苷酸门控阳离子通道(HCN通道)的影响。方法选取12只健康老年比格犬,将犬随机分入对照组和伊伐布雷定组,每组各6只。对照组植入起搏器并进行8周的快速心房起搏;伊... 详细信息

目的探讨伊伐布雷定对快速心房起搏老年犬模型心脏电生理及超级化激活环核苷酸门控阳离子通道(HCN通道)的影响。方法选取12只健康老年比格犬,将犬随机分入对照组和伊伐布雷定组,每组各6只。对照组植入起搏器并进行8周的快速心房起搏;伊伐布雷定组在对照组基础上给予伊伐布雷定,剂量为2 mg/(kg·d)。每只犬在起搏前后通过S1S2递减刺激测量心房和肺静脉的有效不应期(ERP),通过Burst刺激测量心房颤动诱发率和心房颤动持续时间。给药结束后,取心房肌和肺静脉组织进行逆转录聚合酶链反应,分析两组HCN通道mRNA表达水平。结果所有犬8周后心房颤动模型制作成功。伊伐布雷定组快速心房起搏8周后的心房颤动诱发率低于对照组,心房颤动持续时间短于对照组,差异有统计学意义(P通道、HCN4通道mRNA表达水平降低,差异有统计学意义(P通道和HCN4通道的mRNA表达水平,其对增龄性心房颤动具有潜在的保护作用。

关键词：伊伐布雷定心房颤动心房起搏心脏电生理环核苷酸门控阳离子通道

犬窦房结细胞起搏电流与乳鼠心肌细胞野生型超极化激活环化核苷酸门控通道电流的比较

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中华老年医学杂志 2014年第11期33卷 1212-1215页

作者：赵欣李红霞杨向军汪小华程绪杰许海峰苏州大学附属第一医院心内科 215006

目的研究犬窦房结细胞起搏电流动力学特点,并与乳鼠心肌细胞表达野生型超极化激活环化核苷酸门控（mHCN2）通道比较. 方法用含胶原酶、弹性蛋白酶的无钙溶液酶解犬窦房结细胞,分离并记录窦房结细胞起搏电流,并在相同实验条件下与乳鼠... 详细信息

目的研究犬窦房结细胞起搏电流动力学特点,并与乳鼠心肌细胞表达野生型超极化激活环化核苷酸门控（mHCN2）通道比较. 方法用含胶原酶、弹性蛋白酶的无钙溶液酶解犬窦房结细胞,分离并记录窦房结细胞起搏电流,并在相同实验条件下与乳鼠心肌细胞表达野生型mHCN2通道电流的激活动力学比较. 结果犬窦房结细胞的形态为长梭形或多边形,边缘清楚,有自发性搏动,犬窦房结细胞的起搏电流是内向电流,并随着超极化电位的增加,电流增加幅度明显加快,在V=-75 mV,窦房结起搏电流为（-2.1±0.3）pA/pF,犬窦房结细胞起搏电流激活较mHCN2通道电流激活接近,通道激活时间常数分别为（728±137） ms、（530±65） ms,（P＞0.05）. 结论生理范围内犬窦房结细胞起搏电流和乳鼠心肌细胞过表达野生型mHCN2通道电流有类似激活动力学.

关键词：窦房结环核苷酸门控阳离子通道电生理学技术,心脏

脊髓HCN通道在右美托咪定抗伤害效应中的作用：在体和离体实验

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中华麻醉学杂志 2015年第9期35卷 1096-1100页

作者：杨颖聪陈向东夏中元武汉大学人民医院麻醉科 430060

目的探讨脊髓HCN通道在右美托咪定抗伤害效应中的作用.方法在体实验雄性C57BL/6J野生型和HCN1基因敲除（HCN1-/-）小鼠各30只,体重19～25 g,2～3月龄,采用随机数字表法,分为5组（n=6）：对照组（C组）、右美托咪定10μg/kg组（Dex10... 详细信息

目的探讨脊髓HCN通道在右美托咪定抗伤害效应中的作用.方法在体实验雄性C57BL/6J野生型和HCN1基因敲除（HCN1-/-）小鼠各30只,体重19～25 g,2～3月龄,采用随机数字表法,分为5组（n=6）：对照组（C组）、右美托咪定10μg/kg组（Dex10组）、右美托咪定20 μg/kg组（Dex20组）、右美托咪定30 μg/kg组（Dex30组）、右美托咪定40 μg/kg组（Dex40组）.不同剂量右美托咪定组按要求分别腹腔注射右美托咪定10、20、30和40 μg/kg,C组腹腔注射等容量的生理盐水.于右美托咪定给药前及给药后15、30、45、60、75、90、105和120 min时测定热辐射甩尾潜伏期,计算最大抗伤害效应百分比（MPE％）.离体实验将HCN1、HCN2质粒连同绿色荧光质粒通过脂质体2000转染至HEK293细胞,转染后24～ 48 h时采用全细胞膜片钳记录HCN1、HCN2通道电流.破膜后记录HCN通道电流作为基础值.用含0.1、1.0、10.0 μmol/L右美托咪定的细胞外液灌流,各浓度灌流5 min后记录HCN电流,洗脱后进行下一浓度测定.计算电流抑制率.记录HCN通道半激活电压（V1/2）和曲线斜率,计算给药前后半激活电压差（△V1/2）.结果与C组比较,野生型和HCN1-/-小鼠组Dex10组-Dex40组MPE％升高（P＜0.05）.与野生型小鼠Dex30组和Dex40组比较,HCN1-/-小鼠Dex30组和Dex40组MPE％降低（P＜0.05）.两种小鼠Dex10组与Dex20组MPE％差异无统计学意义（P＞0.05）.与基础值比较,右美托咪定0.1、1.0、10.0μmol/L灌流时HEK293细胞HCN1和HCN2通道电流和V1/2降低（P＜0.05）.与右美托咪定0.1 μmol/L比较,右美托咪定1.0、10.0μmol/L灌流时HEK293细胞HCN1和HCN2通道电流和V1/2降低,电流抑制率和△V1/2升高（P＜0.05）;与右美托咪定1.0 μmol/L比较,右美托咪定10.0μmol/L灌流时HEK293细胞HCN1和HCN2通道电流和V1/2降低,电流抑制率和△V1/2升高（P＜0.05）.右美托咪定0.1、1.0、10.0μmol/L灌流时HEK293细胞HCN1和HCN2通道的电流激活曲线斜率比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论右美托咪定的抗伤害效应可能与抑制脊髓HCN通道开放有关.

关键词：右美托咪啶环核苷酸门控阳离子通道镇痛脊髓

特布他林对肺泡Ⅰ型和Ⅱ型细胞钠水转运机制的影响

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南方医科大学学报 2010年第5期30卷 966-968,972页

作者：徐建光李涛平王沛申海燕南方医科大学南方医院睡眠中心广东广州510515 解放军457医院呼吸内科湖北武汉430012

目的探讨特布他林对肺泡Ⅰ型细胞(ATⅠ)和Ⅱ型细胞(ATⅡ)上Na+转运机制的影响。方法分离ATⅡ,采用膜片钳全细胞记录模式,应用全细胞钠通道(ENaC)阻断剂amiloride和环核苷酸门控阳离子通道(CNG)阻断剂ZnCl2观察ATⅡENaC和CNG电流及特布... 详细信息

目的探讨特布他林对肺泡Ⅰ型细胞(ATⅠ)和Ⅱ型细胞(ATⅡ)上Na+转运机制的影响。方法分离ATⅡ,采用膜片钳全细胞记录模式,应用全细胞钠通道(ENaC)阻断剂amiloride和环核苷酸门控阳离子通道(CNG)阻断剂ZnCl2观察ATⅡENaC和CNG电流及特布他林对两者的影响。结果 ATⅡ全细胞电流主要为amiloride敏感电流和Zn2+敏感电流,两者比例无差别(P>0.05);特布他林可使amiloride敏感电流和Zn2+敏感电流明显增加(P通道的Na+转运实现。

关键词：肺泡Ⅰ型细胞肺泡Ⅱ型细胞上皮钠通道环核苷酸门控阳离子通道特布他林

伊伐布雷定对慢性心力衰竭伴室性心律失常兔模型HCN通道的影响

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中国心血管病研究 2018年第12期16卷 1138-1143页

作者：吴婷玉周景芬武汉市第一医院老年病科

目的观察伊伐布雷定对慢性心力衰竭伴室性心率失常兔模型超级化激活环核苷酸门控阳离子通道(HCN)的影响.方法纳入由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供的80只健康成年大白兔为研究对象,随机分为正常对照组(20只,予以0.9%生理盐水... 详细信息

目的观察伊伐布雷定对慢性心力衰竭伴室性心率失常兔模型超级化激活环核苷酸门控阳离子通道(HCN)的影响.方法纳入由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供的80只健康成年大白兔为研究对象,随机分为正常对照组(20只,予以0.9%生理盐水)和慢性心力衰竭组(60只,经耳缘静注异丙肾上腺素0.3 mg·kg-1·d-1).待慢性心衰组造模满意后将BW-200生理无线遥测心电系统芯片植入兔皮下,将其分为模型组(30只,0.9%生理盐水,洗胃,持续2周)和伊伐布雷定组(30只,伊伐布雷定7 mg·kg-1·d-1,持续2周).分别于起搏前(0周)、起搏4周、6周(药物干预2周后),观察四组心率(HR)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室射血分数(LVEF)、心室有效不应期(ERP)、ERP离散度(dERP)、室性心律失常(VA)诱发率、心室颤动阈值(VFT)变化,并分析HCN2、HCN4通道表达水平.结果起搏4、6周后,慢性心力衰竭组HR、LVEDD、LVESD、ERP、dERP、VA诱发率均显著高于起搏前及正常对照组(P0.05);起搏6周后,伊伐布雷定组HR、LVEDD、ERP、VA诱发率显著低于模型组(P0.05).慢性心力衰竭组HCN2通道和HCN4通道的mRNA、microRNA-1、microRNA-133及蛋白表达水平均显著高于正常对照组(P通道和HCN4通道表达水平,有助于指导慢性心力衰竭伴室性心率失常临床治疗.

关键词：伊伐布雷定慢性心力衰竭室性心率失常兔模型环核苷酸门控阳离子通道