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创伤弧菌LAMP检测方法的建立6

创伤弧菌LAMP检测方法的建立6

LAMP和PCR法检测痢疾志贺菌的特异性和灵敏性比较

动物检疫学分会2010年学术年会

作者：孙敏雷质文贾俊涛刘云国高宏伟山东出入境检验检疫局

目的建立创伤弧菌的LAMP检测方法。方法通过核酸序列分析,针对创伤弧菌谷氨酰胺合成酶glnA基因的保守序列设计特异性引物,经条件优化,建立创伤弧菌的LAMP检测方法,并对方法的敏感性和特异性进行探讨。结果针对创伤弧菌谷氨酰胺合成酶gln... 详细信息

目的建立创伤弧菌的LAMP检测方法。方法通过核酸序列分析,针对创伤弧菌谷氨酰胺合成酶glnA基因的保守序列设计特异性引物,经条件优化,建立创伤弧菌的LAMP检测方法,并对方法的敏感性和特异性进行探讨。结果针对创伤弧菌谷氨酰胺合成酶glnA基因设计的引物,可特异性扩增创伤弧菌,对19种非创伤弧菌无扩增。该方法灵敏度与PCR方法相当,检测基因组DNA的最低限为71fg。对水产品中创伤弧菌的检测,检出率略高于细菌分离法。结论成功建立了创伤弧菌的LAMP检测方法,该方法灵敏、特异、快速、简便,在检验检疫行业和食品加工业具有广阔的应用前景,对于保障人们的食品安全,促进进出口贸易具有重要意义。

关键词：创伤弧菌谷氨酰胺合成酶基因（glnA）环介导等温扩增技术检测

来源： cnki会议评论

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热带医学杂志 2012年第5期12卷 547-549,592页

作者：曾桂芬龙北国姜容刘行超廖韫婕范宏英南方医科大学公共卫生与热带医学学院微生物学系广东广州510515 中国人民解放军第一八一医院检验科广西桂林541002

目的建立环介导等温扩增技术(LAMP)快速检测痢疾志贺菌,并对其特异性、灵敏度与传统PCR进行比较。方法以痢疾志贺菌侵袭性质粒抗原H基因(ipaH)为靶序列,设计6条特异性引物(内引物、外引物和环引物各2条),优化LAMP反应体系及反应条件,检... 详细信息

目的建立环介导等温扩增技术(LAMP)快速检测痢疾志贺菌,并对其特异性、灵敏度与传统PCR进行比较。方法以痢疾志贺菌侵袭性质粒抗原H基因(ipaH)为靶序列,设计6条特异性引物(内引物、外引物和环引物各2条),优化LAMP反应体系及反应条件,检测LAMP反应的灵敏度、特异性及模拟样品,同步与PCR进行比较。结果 LAMP法和PCR均能特异性地扩增出志贺菌靶DNA,而其他非志贺菌均未扩增出特有条带。检测细菌纯培养物和模拟食品的灵敏度LAMP法分别为5.3×101cfu/ml、6.8×101cfu/ml,PCR法分别为5.3×102cfu/ml和6.8×102cfu/ml。结论利用LAMP技术,可快速、灵敏、简便地检测痢疾志贺菌,与PCR方法比较,特异性强、操作简便、检测成本低、耗时短,有望发展成为快速检测痢疾志贺菌的有效手段。

关键词：环介导等温扩增技术 PCR 痢疾志贺菌 ipaH基因

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猪瘟病毒RT-LAMP快速检测方法的建立

猪瘟病毒RT-LAMP快速检测方法的建立

罗非鱼无乳链球菌病LAMP快速诊断方法的建立

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会...

作者：刘中勇曾小娜朱道中房红莹蒋启荣吴志强罗满林广东出入境检验检疫局华南农业大学兽医学院广东省动物防疫监督总所

本研究设计了4条针对猪瘟病毒6个位点的特异性引物,建立了一种灵敏、特异、快速的猪瘟病毒体外等温扩增(RT-LAMP)检测方法,所建立的方法能够特异地检测出CSFV的存在,检测PRV、PRRS、PCV等病毒均为阴性;灵敏度高,所建立的CSFV-RT-LAMP方... 详细信息

本研究设计了4条针对猪瘟病毒6个位点的特异性引物,建立了一种灵敏、特异、快速的猪瘟病毒体外等温扩增(RT-LAMP)检测方法,所建立的方法能够特异地检测出CSFV的存在,检测PRV、PRRS、PCV等病毒均为阴性;灵敏度高,所建立的CSFV-RT-LAMP方法灵敏度为10,总RNA的检测阈值约为1pg;反应快速,整个扩增反应可在1h内完成;操作简单,不需要PCR仪等复杂的仪器,结果可经肉眼观察及电泳检测。为猪瘟的现场快速检测提供更加简便快速的方法,可以满足基层检疫的需要.

关键词：猪瘟病毒环介导等温扩增技术

来源： cnki会议评论

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罗非鱼无乳链球菌病LAMP快速诊断方法的建立

3种分子生物学方法检测金黄色葡萄球菌的比较研究

中国水产学会鱼病专业委员会2013年学术研讨会

作者：郑磊樊海平吴斌曾占壮钟全福张新艳福建省淡水水产研究所

采取环介导等温扩增技术(Loop-Mediated Isothermal amplification,LAMP),针对无乳链球菌高度保守的表面免疫相关蛋白(Surface immunogeenic protein,Sip)基因,设计4条特异性引物,优化反应体系,建立罗非鱼无乳链球菌病快速诊断方法。研... 详细信息

采取环介导等温扩增技术(Loop-Mediated Isothermal amplification,LAMP),针对无乳链球菌高度保守的表面免疫相关蛋白(Surface immunogeenic protein,Sip)基因,设计4条特异性引物,优化反应体系,建立罗非鱼无乳链球菌病快速诊断方法。研究结果表明,LAMP方法检测灵敏度达到30cfu/ml,且对2株罗非鱼源无乳链球菌均能扩增出特异性片段,而对18株非无乳链球菌均未扩增出相应片段。本工作建立的LAMP检测方法具有高度的特异性和灵敏性,反应在1h内完成,为罗非鱼无乳链球菌病的快速诊断提供了一种重要的技术手段。

关键词：环介导等温扩增技术无乳链球菌 sip 检测

来源： cnki会议评论

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食品安全质量检测学报 2016年第6期7卷 2247-2251页

作者：唐梦君周倩张小燕张静唐修君蒲俊华陆俊贤顾荣陈大伟高玉时农业部禽类产品质量安全风险评估实验室扬州225125 中国农业科学院家禽研究所扬州225125

目的比较常规聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)、实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)和环介导等温扩增反应(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)对金黄色葡萄球菌的检测效果。方法以金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)标准菌株(ATCC6538)DNA为模板,以耐热核酸酶(Nuc)基因为靶标,采用常规PCR、qPCR和LAMP对其进行扩增并比较其检测灵敏度,同时对鸡蛋中金黄色葡萄球菌的检出率进行比较。结果常规PCR对S.aureus的检测灵敏度为400个基因拷贝数,低于实时荧光定量PCR和LAMP的40个基因拷贝数的检出限。在实际样品检测中常规PCR对50份鸡蛋外壳样品中S.aureus的检出率为6%,qPCR和LAMP的检出率分别为10%,而在鸡蛋内容物中均未检测到。结论 3种检测方法检测S.aureus均具有较高的灵敏度,但常规PCR的灵敏度低于qPCR和LAMP检测方法,qPCR需要昂贵的仪器,不适合基层现场应用,而LAMP方法简单、快捷,具有良好的应用前景。

关键词：金黄色葡萄球菌常规PCR 实时荧光定量PCR 环介导等温扩增技术

将LAMP方法应用于《动物疫病防控》课程的教学改革探索

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中国动物保健 2021年第8期23卷 128-129页

作者：刘向楠刘助红刘贤旭田存锋康艳梅刘国乾李桂珍广东科贸职业学院广州510430

《动物疫病防控》系动物医学和畜牧兽医专业的核心课程,该课程理论性较强,同时又有较高的实践能力要求;该课程的内容对于提高学生的专业水平大有裨益,对学生在以后的工作岗位实践中将发挥重要指导作用。多年来,为了保持课程内容的与时俱... 详细信息

《动物疫病防控》系动物医学和畜牧兽医专业的核心课程,该课程理论性较强,同时又有较高的实践能力要求;该课程的内容对于提高学生的专业水平大有裨益,对学生在以后的工作岗位实践中将发挥重要指导作用。多年来,为了保持课程内容的与时俱进,实训内容经过多次更新;但近年来生物技术迅猛发展,部分内容已不能满足当前畜牧业发展的实际需要,例如在生产中使用的新技术、新方法未纳入到课程当中。为持续改善该课程的教学效果,促进教学与生产实际进一步紧密结合,本教学团队首次将环介导等温扩增技术方法引入《动物疫病防控》实验教学课堂,学生充分掌握该技术,取得了良好的教学效果。

关键词：动物疫病防控检测新技术环介导等温扩增技术

犬钩端螺旋体病LAMP临床快速检测方法的建立

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兽医导刊 2020年第24期 197-198页

作者：张君戴志亮刘贤旭张莹黄绮雯广东科贸职业学院广东广州510430

环介导恒温扩增技术(LAMP)是近年来发明的最新病原检测方法。本研究借助新兴的环介导等温扩增技术,设计了4条能识别六个特异性位点的引物,建立了一种灵敏、特异、快速的犬钩端螺旋体病分子生物学检测方法-体外等温扩增检测方法。本研究... 详细信息

环介导恒温扩增技术(LAMP)是近年来发明的最新病原检测方法。本研究借助新兴的环介导等温扩增技术,设计了4条能识别六个特异性位点的引物,建立了一种灵敏、特异、快速的犬钩端螺旋体病分子生物学检测方法-体外等温扩增检测方法。本研究建立的方法能够特异地检测出其的存在,最小检测阈值为1×10-5,灵敏度高,整个扩增反应可在1h内完成,结果可经肉眼显色荧光观察及电泳检测。该方法快速、敏感、实用,适合基层和现场检测。

关键词：犬钩端螺旋体病环介导等温扩增技术

环介导等温扩增法对虾酱中致病菌检测结果的分析

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吉林农业 2019年第7期 59-59页

作者：林青海南省食品检验检测中心

样品按照GB4789系列标准进行增菌后,提取致病菌核酸利用环介导等温扩增技术对检测虾酱中食源性致病菌进行快速检测。结果显示:5种致病菌沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌和大肠杆菌O157检测结果阴性,符合率100%,在副... 详细信息

样品按照GB4789系列标准进行增菌后,提取致病菌核酸利用环介导等温扩增技术对检测虾酱中食源性致病菌进行快速检测。结果显示:5种致病菌沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌和大肠杆菌O157检测结果阴性,符合率100%,在副溶血性弧菌中有假阳性出现。环介导等温法检测虾酱时应考虑有干扰导致假阳性出现的可能。

关键词：环介导等温扩增技术虾酱致病菌检测

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作者更正

临床检验杂志 2020年第4期38卷 272-272页

《临床检验杂志》2020年第1期《环介导等温扩增技术检测呼吸道样本中肺炎克雷伯菌》一文因作者疏漏,产生错误。现作如下更正:文中甜菜碱浓度优化试验的甜菜碱浓度单位应均为mol/L,非mmol/L。《临床检验杂志》2018年第10期《类风湿关节... 详细信息

《临床检验杂志》2020年第1期《环介导等温扩增技术检测呼吸道样本中肺炎克雷伯菌》一文因作者疏漏,产生错误。现作如下更正:文中甜菜碱浓度优化试验的甜菜碱浓度单位应均为mol/L,非mmol/L。《临床检验杂志》2018年第10期《类风湿关节炎患者血清长链非编码RNA HOTAIR、XIST和H19表达研究》一文作者张立平为该论文的共同第一作者和共同通信作者,特此更正。

关键词：环介导等温扩增技术肺炎克雷伯菌浓度单位 H19 甜菜碱张立平更正