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猪瘟兔化弱毒苗抗原量测定方法的探索及不同免疫程序的差异性比较研究

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猪瘟兔化弱毒苗抗原量测定方法的探索及不同免疫程序的差异性比较...

作者：唐红慧扬州大学

学位级别：硕士

猪瘟(Classical swine fever, CSF或hog cholera, HC),是由黄病毒科的猪瘟病毒引起的一种高度接触性传染病,该病可分为最急性型、急性型、慢性型、非典型型或迟发型。该病被国际兽疫局(OIE)列为必须上报的A类病,目前仍然遍布全世界。在... 详细信息

猪瘟(Classical swine fever, CSF或hog cholera, HC),是由黄病毒科的猪瘟病毒引起的一种高度接触性传染病,该病可分为最急性型、急性型、慢性型、非典型型或迟发型。该病被国际兽疫局(OIE)列为必须上报的A类病,目前仍然遍布全世界。在我国,尽管猪瘟兔化弱毒苗的大范围使用有效地控制了猪瘟的急性发生和大流行。近些年来,我国猪瘟的流行发生了较大变化,出现了慢性和迟发型猪瘟,为猪瘟的防控带来了新的难题。本研究主要对当前使用的猪瘟兔化弱毒苗中猪瘟病毒的含量测定和猪瘟免疫程序等进行了深入的研究,对当前猪瘟的防制提出新方法。本研究主要包括以下三部分:1简单、快速地测定猪瘟病毒的含量是猪瘟兔化弱毒苗(HCLV)生产工艺中难以解决的技术之一。本试验通过应用猪瘟抗原/血清ELISA试剂盒(IDEXX HerdCheck Co.),对已知滴度的24份HCLV半成品细胞苗和21份成品疫苗进行抗原含量测定,结果发现,对于24份HCLV半成品细胞苗,ELISA检测方法9与兔体定型热反应结果符合率达95.83%。其中,ELISA方法检测敏感性可达20头份/瓶(或109个病毒拷贝数/瓶),但该方法无法区分猪瘟病毒抗原与牛流行性腹泻病毒抗原。试验结果证明,IDEXX猪瘟抗原/血清ELISA试剂盒能够稳定、快速、简单地用于HCLV细胞苗的半成品与成品的病毒含量测定,为疫苗生产的质量控制提供了一种可靠和稳定的方法。2目前在对猪瘟的防治实践中,对猪瘟超前免疫后抗体水平的变化及保护效果存在争议。本试验通过对规模化猪场的应用观察,选择3窝仔猪采用超前免疫,仔猪出生后即免疫猪瘟脾淋苗0.5头份/只,隔1～1.5小时采食初乳;2窝仔猪采用猪场常规免疫程序,21日龄免疫猪瘟脾淋苗1头份/只。应用猪瘟病毒抗体ELISA试剂盒(IDEXX HerdCheck Co.)对所有仔猪0、20、40、60日龄血清抗体监测,结果表明:在母源抗体水平较低的情况下采用超前免疫程序能够取得良好的免疫效果。3为了研究猪瘟兔化弱毒苗在母猪妊娠期免疫对母猪及仔猪有无副作用、妊娠期接种猪瘟疫苗是否能够提高仔猪的母源抗体水平、根据仔猪的母源抗体水平确定仔猪的最佳免疫时间,从而确定仔猪的免疫程序。试验一:随机选择胎次相近、饲养、年龄等大体相同的妊娠母猪,在妊娠中期(分娩前50～59天、40～49天、30～39天)免疫猪瘟脾淋苗2头份,各组随机筛选部分所产仔猪(5头/窝),应用猪瘟病毒抗体ELISA试剂盒(IDEXX HerdCheck Co.)对其进行抗体监测,仔猪于60日龄免疫猪瘟脾淋苗1头份,观察免疫效果。对照组,妊娠母猪不免疫,仔猪按照常规免疫程序(25日龄首免、60日龄二免)。试验二:在试验一的基础上,选择分娩前40～49天的妊娠母猪3头免疫猪瘟脾淋苗2头份,随机筛选部分所产仔猪(5头/窝),应用猪瘟病毒抗体ELISA试剂盒(IDEXX HerdCheck Co.)对其进行抗体监测,采用60日龄首免、85日龄二免的免疫程序,观察其免疫效果。对照组,妊娠母猪不免疫,仔猪根据其抗体水平确定免疫程序。结果表明:猪瘟疫苗在母猪妊娠期免疫对母猪及小猪未发现明显副作用,试验组仔猪存活率为91.30%,对照组存活率为90.63%,结果无显著差异(P>0.05)。对其所产仔猪采用采用60日龄首免、85日龄二免的的免疫程序较仅60日龄免疫一次的免疫程序有更好的免疫效果。

关键词：猪瘟兔化弱毒苗超前免疫妊娠母猪母源抗体免疫程序

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猪瘟兔化弱毒苗在猪体内动态分布的研究

猪瘟兔化弱毒苗在猪体内动态分布的研究

建立快速定量检测猪瘟兔化弱毒苗的荧光定量PCR技术

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第二十次学术研讨会

作者：马春霞李军潘艳彭昊禤雄标胡帅谢永平谢宇舟何彩美陈泽祥杨威广西兽医研究所广西畜禽疫苗新技术重点实验室来宾市动物疫病预防控制中心

研究目的:研究猪瘟兔化弱毒苗在免疫猪体内的动态分布。方法:在注射猪瘟兔化弱毒苗后第1、7、14、21、28、35、63天采集免疫猪的脾、肾、肺、腹股沟淋巴结、扁桃体及血清,应用免疫组化、RT-PCR、猪瘟抗原、抗体检测试剂盒等方法,检测分... 详细信息

研究目的:研究猪瘟兔化弱毒苗在免疫猪体内的动态分布。方法:在注射猪瘟兔化弱毒苗后第1、7、14、21、28、35、63天采集免疫猪的脾、肾、肺、腹股沟淋巴结、扁桃体及血清,应用免疫组化、RT-PCR、猪瘟抗原、抗体检测试剂盒等方法,检测分析猪瘟病毒在猪体内的动态分布、存留时间及抗体水平。结果:应用免疫组化方法于免疫后第7-14天在脾脏、第7-21天在腹股沟淋巴结、第14-28天在肾脏组织分别检测到猪瘟病毒。在免疫后第7天检测到猪瘟病毒抗体,随后抗体水平持续上升至免疫后第63天;病毒抗原的分布与RT-PCR检测结果吻合。结论:猪瘟兔化弱毒苗在猪体内主要分布器官为脾、肾和腹股沟淋巴结,免疫后第7天脾和腹股沟淋巴结最早检测到猪瘟病毒,猪瘟病毒在肾停留时间可至免疫后第28天。整个实验过程中未在扁桃体、肺、外周血检测到猪瘟病毒。

关键词：猪瘟兔化弱毒苗免疫组化动态分布

来源： cnki会议评论

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中国病毒学 2003年第2期18卷 124-128页

作者：陈玉栋张楚瑜邹俊煊潘兹书陈立新李田郭长林武汉大学生命科学学院湖北武汉430072 武汉中博生化有限公司湖北武汉430072

在猪瘟病毒兔化弱毒疫苗株的5挿潜嗦肭杓埔欢砸锖鸵惶跤馓秸?利用荧光定量PCR原理,结合LightCycler检测系统,首次建立了定量检测猪瘟兔化弱毒苗方法。结果表明,该方法的灵敏度为102拷贝数,线性范围为107-102,达6个数量级;标准样... 详细信息

在猪瘟病毒兔化弱毒疫苗株的5挿潜嗦肭杓埔欢砸锖鸵惶跤馓秸?利用荧光定量PCR原理,结合LightCycler检测系统,首次建立了定量检测猪瘟兔化弱毒苗方法。结果表明,该方法的灵敏度为102拷贝数,线性范围为107-102,达6个数量级;标准样品的变异系数为2.3%-5.1%(n=10),疫苗样品组内实验变异系数为0.85%-2.8%(n=5)、组间实验为2.5%-7.3%(n=5),对同一样品分5次RNA提取和逆转录,其变异系数为5.0%;对9份疫苗样品进行了检测,与兔体定型热反应方法相比较,有很好的相关性;整个检测过程仅需4h。该法可望取代传统的兔体定型热反应用于疫苗生产过程中的效价测定及指导疫苗的配制,也为猪瘟病毒分子生物学研究提供了一种新的、简捷有效的工具。

关键词：猪瘟兔化弱毒苗快速定量检测荧光定量PCR技术猪瘟

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后海穴注射猪瘟兔化弱毒苗的试验研究

中国畜牧兽医 2005年第4期32卷 39-41页

作者：张志成方光远王兵金陵科技学院动物科学系南京210038 徐州生物工程高等职业学校徐州221006

利用不同剂量的猪瘟兔化弱毒苗后海穴免疫生长肥育猪6 0 0头,用正向间接血凝试验(IHA)检测出抗猪瘟病毒抗体的水平,并与传统方法耳根部注射免疫进行比较。结果显示,后海穴注射2头份猪瘟兔化弱毒苗产生的抗体水平最高,维持时间最长。1头... 详细信息

利用不同剂量的猪瘟兔化弱毒苗后海穴免疫生长肥育猪6 0 0头,用正向间接血凝试验(IHA)检测出抗猪瘟病毒抗体的水平,并与传统方法耳根部注射免疫进行比较。结果显示,后海穴注射2头份猪瘟兔化弱毒苗产生的抗体水平最高,维持时间最长。1头份疫苗后海穴注射效果也比2头份的肌肉注射效果明显。表明后海穴注射疫苗能提前坚强免疫产生的时间,提高疫苗的免疫效应,是提高疫苗保护率的有效免疫途径之一。

关键词：猪瘟兔化弱毒苗后海穴抗体检测

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猪瘟兔化弱毒苗生产

山东畜牧兽医 2008年第8期29卷 52-52页

作者：刘艳山东省农业科学院济南250100

犊牛睾丸细胞培养冻干苗对猪瘟的预防起到了极其重要的作用，我国目前普遍使用这种疫苗，但许多地区发生不同程度的猪瘟疫苗免疫失败。提高猪瘟疫苗质量是避免免疫失败的有效方法之一。

关键词：猪瘟兔化弱毒苗生产免疫失败猪瘟疫苗细胞培养犊牛睾丸疫苗质量冻干苗

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仔猪注射猪瘟兔化弱毒苗过敏的诊治

畜牧兽医杂志 2002年第5期21卷 34-34页

作者：赵云建湖县畜牧兽医站江苏建湖224700

仔猪注射猪瘟疫苗过敏常有发生.笔者对江苏建湖县猪场断奶仔猪注射猪瘟兔化弱毒苗,引起全窝仔猪发生急性过敏反应,幸得及时抢救,没有造成大的损失,报告如下:

关键词：注射过敏仔猪猪瘟兔化弱毒苗诊治

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猪瘟免疫接种抗体效价检测试验

中国动物检疫 2006年第7期23卷 35-36页

作者：周相华韩喜连青岛市畜牧兽医工作站 266071

1前言猪瘟只有一个血清型,免疫注射是防止猪瘟的重要手段.我国猪瘟兔化弱毒苗自1956年研制成功以来,在全国各地广泛应用,证明安全有效.免疫疫苗24小时后,即可抵抗自然感染,第3天产生可靠的免疫力;在疫区对体温及体况正常的猪用此苗紧急... 详细信息

1前言猪瘟只有一个血清型,免疫注射是防止猪瘟的重要手段.我国猪瘟兔化弱毒苗自1956年研制成功以来,在全国各地广泛应用,证明安全有效.免疫疫苗24小时后,即可抵抗自然感染,第3天产生可靠的免疫力;在疫区对体温及体况正常的猪用此苗紧急接种,能迅速终止疫情发展.断奶仔猪接种疫苗后产生的免疫期至少1年.

关键词：猪瘟兔化弱毒苗免疫接种效果检测试验抗体效价母源抗体水平断奶仔猪接种疫苗免疫力免疫期免疫注射

仔猪猪瘟首免日龄与疫苗剂量测定的小样本试验

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猪业科学 2009年第8期26卷 77-79页

作者：孔德江易栋柴保平何晓玲峰峰矿区动物卫生监督所河北邯郸056200 峰峰矿区动物疫病预防控制中心河北邯郸056200 峰峰矿区动物防疫监督站河北邯郸056200

猪瘟是危害我国养猪业的重要传染病，目前多表现为非典型猪瘟。长期以来，接种猪瘟疫苗是综合控制猪瘟的主要措施，但由于各猪场的母猪群、仔猪间母源抗体的分布参差不齐，免疫程序和免疫剂量更是千差万别，导致许多猪场出现“经过猪瘟... 详细信息

猪瘟是危害我国养猪业的重要传染病，目前多表现为非典型猪瘟。长期以来，接种猪瘟疫苗是综合控制猪瘟的主要措施，但由于各猪场的母猪群、仔猪间母源抗体的分布参差不齐，免疫程序和免疫剂量更是千差万别，导致许多猪场出现“经过猪瘟免疫但还是发生猪瘟”的现象，尤其是各猪场仔猪群免疫时，由于母源抗体滴度对猪瘟兔化弱毒苗的免疫保护效力有影响，导致疫苗接种达不到预期效果。为了确定某场仔猪猪瘟首免日龄与疫苗剂量，特进行了仔猪群猪瘟母源抗体滴度测定和母源抗体水平较低状态时不同剂量疫苗免疫效力的小样本试验。

关键词：仔猪猪瘟疫苗剂量首免日龄小样本试验测定母源抗体水平猪瘟兔化弱毒苗

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猪瘟免疫失败的原因和对策

山东畜牧兽医 2009年第2期30卷 29-30页

作者：左秀丽左秀峰山东省莒南县畜牧局 276600

1954年我国研制成功的猪瘟兔化弱毒苗控制猪瘟方面起到关键性作用，使该病得到根本性控制。但近年来，一些地方猪瘟发病率有上升趋势，其流行和发病率发生了很大的变化。其流行形式转为地方散发性，瘟疫性减少，病程由急性转为慢性，临... 详细信息

1954年我国研制成功的猪瘟兔化弱毒苗控制猪瘟方面起到关键性作用，使该病得到根本性控制。但近年来，一些地方猪瘟发病率有上升趋势，其流行和发病率发生了很大的变化。其流行形式转为地方散发性，瘟疫性减少，病程由急性转为慢性，临床由典型向非典型转变，症状显著减轻，死亡率降低，多表现为仔猪死亡率较高，成年猪较轻或耐过，病理变化无明显特征。呈现持续感染、胎盘垂直感染、妊娠母猪带毒综合症及新生仔猪的免疫耐受等。由于多种原因造成的免役失败严重威胁着养猪业的健康发展。特别是活猪及其产品自由贸易频繁，种猪管理不严，

关键词：猪瘟兔化弱毒苗免疫失败原因新生仔猪上升趋势流行形式病理变化持续感染