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人巨细胞病毒特异性t淋巴细胞检测的研究进展

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中华检验医学杂志 2003年第4期26卷 251-253页

作者：季育华赵缜上海第二医科大学附属瑞金医院检验科 200025

人巨细胞病毒（HCMV）是疱疹病毒的一种，在不同人群中的感染率为50%～90%。初次感染后，在宿主免疫的控制下潜伏于骨髓等细胞中。当免疫功能受损时（移植、获得性免疫缺陷综合征、肿瘤等），潜伏的病毒易被激活、严重者可引起致死性肺... 详细信息

人巨细胞病毒（HCMV）是疱疹病毒的一种，在不同人群中的感染率为50%～90%。初次感染后，在宿主免疫的控制下潜伏于骨髓等细胞中。当免疫功能受损时（移植、获得性免疫缺陷综合征、肿瘤等），潜伏的病毒易被激活、严重者可引起致死性肺炎、肝炎。大量研究表明，特异性细胞免疫对HCMV感染的控制和疾病的恢复起重要作用，尤其是CD8~+t对控制HCMV感染更为重要。Cwynarski等研究发现，HCMV潜伏感染期，如特异性CD8~+t在免疫正常者中为0.4~0.8×10~7/L；而肾移植受者为≥1×10~7/L时，均可阻止病毒的激活。新近，关于特异性细胞毒性t细胞（CtL）治疗HCMV病亦屡见报道。另外，大量的研究表明，CD44t对于维持CtL的功能和长期控制病毒血病也起关键作用。因此体外检测特异性t细胞（包括记忆和效应t细胞的数量、功能及活性状态）有助于HCMV感染的诊断、防治和预后监测。

关键词：人巨细胞病毒特异性t淋巴细胞检测研究进展免疫功能

中国人类免疫缺陷病毒-1B亚型Gag蛋白特异性t淋巴细胞的免疫应答

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中华传染病杂志 2011年第9期39卷 558-561页

作者：李伟华闫惠平杨虹冰张海萍周冬燕孔祥莎张欣首都医科大学附属北京佑安医院感染与免疫研究中心 100069 英国牛津大学分子医学研究所人类免疫研究中心

大量研究证明，细胞免疫特别是HIV特异性CtL在控制HIV感染中发挥关键作用。HIV-1特异性CtL应答不仅由HIV-1特异性抗原蛋白结构决定，同时也受到特异性人类白细胞抗原（HLA）I类抗原的限制。不同人群HLA—I类基因型分布频率不同，决定了... 详细信息

大量研究证明，细胞免疫特别是HIV特异性CtL在控制HIV感染中发挥关键作用。HIV-1特异性CtL应答不仅由HIV-1特异性抗原蛋白结构决定，同时也受到特异性人类白细胞抗原（HLA）I类抗原的限制。不同人群HLA—I类基因型分布频率不同，决定了不同人群HIV-1特异性CtL应答模式的不同。

关键词：特异性t淋巴细胞人类免疫缺陷病毒-1 Gag蛋白免疫应答 B亚型特异性CtL HIV-1 人类白细胞抗原

人工抗原呈递细胞复合物体外诱导特异性t淋巴细胞活化的研究

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中国实验血液学杂志 2008年第3期16卷 655-658页

作者：毛汉文刘文励周剑锋耿哲黄伟华中科技大学同济医学院附属同济医院血液科湖北武汉430030

本研究旨在以人工抗原呈递细胞(artificial antigen-presenting cells,aAPCs)体外模拟树突状细胞生物学功能,探讨诱导特异性t淋巴细胞活化、增殖的作用。以磁性微珠为载体,选取慢性髓系白血病特异性抗原CML28作为目标抗原肽,通过抗原表... 详细信息

本研究旨在以人工抗原呈递细胞(artificial antigen-presenting cells,aAPCs)体外模拟树突状细胞生物学功能,探讨诱导特异性t淋巴细胞活化、增殖的作用。以磁性微珠为载体,选取慢性髓系白血病特异性抗原CML28作为目标抗原肽,通过抗原表位预测软件获取CML28表位序列(Vltfaedsv),并以该抗原表位与MHC分子(HLA-A2-Ig)偶联,作为第一信号分子,B7-1分子作为第二信号分子,将两种信号分子同时负载于磁珠表面,构建人工APC复合体;取HLA-A2+的健康骨髓捐赠者骨髓单个核细胞,以磁珠分选出CD8+t淋巴细胞并与人工APC复合体系统共培养。培养过程中加入羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(5,6-carboxylfluorescin diacetate succinimidylester,CFSE),并以此检测t细胞增殖,用流式细胞仪检测特异性t细胞增殖程度。结果发现:实验组中CML28-特异性t细胞增殖程度明显增高,实验组平均值为(17.34±0.35)%,对照组平均值为(2.25±0.43)%,两者比较差异显著(p细胞,刺激CD8+t特异性淋巴细胞活化、增殖。

关键词：人工抗原呈递细胞特异性t淋巴细胞树突状细胞慢性髓系白血病

犬瘟热病毒特异性t淋巴细胞过继免疫输入治疗犬瘟热试验

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黑龙江畜牧兽医 2018年第16期 131-133页

作者：李荣权胡服春刘思宇吉林农业科技学院动物科技学院

为了探讨犬瘟热病毒（CDV）特异性t淋巴细胞免疫输入疗法的抗病毒效果,试验采用体外增殖培养的特异性t淋巴细胞进行过继免疫输入疗法治疗犬瘟热30例,作为诊疗组;同时设未采用过继免疫输入疗法和干扰素、抗病毒药物等治疗的病犬20例,采... 详细信息

为了探讨犬瘟热病毒（CDV）特异性t淋巴细胞免疫输入疗法的抗病毒效果,试验采用体外增殖培养的特异性t淋巴细胞进行过继免疫输入疗法治疗犬瘟热30例,作为诊疗组;同时设未采用过继免疫输入疗法和干扰素、抗病毒药物等治疗的病犬20例,采用常规治疗及支持疗法,作为对照组。观察治疗后第2,4周免疫细胞机能、CDV-RNA阴转率等的变化,并追踪回访3周。结果表明：经该疗法治疗后病犬的临床症状明显改善,治疗组病犬t、B淋巴细胞的增殖均显著高于对照组（P〈0.05）;治疗4周后CDV-RNA阴转率达60%,且进一步研究发现治疗前病犬体内CDV-RNA的含量≤1×10~5copies/mL时病毒阴转率显著高于CDV-RNA的含量为〉1×10~5copies/mL时的病毒阴转率。说明CDV特异性t淋巴细胞免疫输注治疗犬瘟热是安全有效的。

关键词：犬瘟热特异性t淋巴细胞免疫犬瘟热病毒

人类白细胞介素-2与白细胞介素-7对体外诱导抗原肽SLYNtVAt特异性t淋巴细胞的影响

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生物技术世界 2016年第2期13卷 324-324页

作者：朱建蒙广西医科大学广西南宁530000

目的:优化人类白细胞介素-2(rh IL-2)与白细胞介素-7(rh IL-7)在体外诱导培养SLYNtVAt(SL9)抗原特异性t细胞时的用量。方法:分离健康人外周血PBMC作为效应细胞,培养t2(tAP缺陷t淋巴细胞)细胞并加载HIV来源抗原肽作为刺激细胞。SL9抗原... 详细信息

目的:优化人类白细胞介素-2(rh IL-2)与白细胞介素-7(rh IL-7)在体外诱导培养SLYNtVAt(SL9)抗原特异性t细胞时的用量。方法:分离健康人外周血PBMC作为效应细胞,培养t2(tAP缺陷t淋巴细胞)细胞并加载HIV来源抗原肽作为刺激细胞。SL9抗原肽四聚体检测不同细胞因子用量下特异性t细胞诱导频率大小。结论:rh IL-7在诱导SL9抗原特异性t细胞中起到关键促进作用,SL9特异性t淋巴细胞能够自身分泌大量rh IL-2,减少rh IL-2用量可为体外诱导培养SL9特异性t淋巴细胞提高效率。

关键词： SLYNtVAt 特异性t淋巴细胞白细胞介素

Epstein-Barr病毒特异性细胞毒性t淋巴细胞在异基因造血干细胞移植中的作用

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Epstein-Barr病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞在异基因造血干细胞移...

作者：顾斌苏州大学

学位级别：硕士

第一部分：EBV特异性细胞毒性t淋巴细胞体外诱导培养及杀伤效果鉴定目的研究EB病毒特异性细胞毒性t淋巴细胞(EBV-CtL)体外诱导和扩增培养的方法，并检测其杀伤的效果。方法采集EBV血清抗体阳性的6例正常供体的外周血单个核细胞(PBMNC)... 详细信息

第一部分：EBV特异性细胞毒性t淋巴细胞体外诱导培养及杀伤效果鉴定目的研究EB病毒特异性细胞毒性t淋巴细胞(EBV-CtL)体外诱导和扩增培养的方法，并检测其杀伤的效果。方法采集EBV血清抗体阳性的6例正常供体的外周血单个核细胞(PBMNC)，用EBV转化的B淋巴细胞系(BLCL)作为抗原递呈细胞及抗原刺激剂,经辐照灭活后不断刺激培养自体PBMNC，诱导产生EBV-CtL，并将其扩增培养;采用流式细胞仪鉴定其免疫表型;然后检测不同效靶细胞比例条件下EBV-CtL对自体BLCL、自体植物血凝素培养的B淋巴母细胞(PHA-Blast)、HLA不合供体的BLCL(alloBLCL)、K562细胞株的杀伤效果。结果6例EBV血清抗体阳性正常供体来源的PBMNC在体外成功筛选并扩增培养了EBV-CtL，扩增效率为PBMNC数的18.65.0倍。刺激10次培养后的EBV-CtL对自体BLCL在20:1，10:1，5:1三种效靶细胞比例条件下特异性杀伤效率的平均值分别为59.4%、43.2%、29.0%;对PHA-Blast、alloBLCL、K562的非特异性杀伤率在上述三种效靶细胞比例下平均值依次为7.1%、9.4%、10.3%(p﹤0.05)，6.6%、8.3%、8.1%(p﹤0.05)，5.4%、7.3%、6.3%(p﹤0.05)。结论EBV-CtL能有效在体外筛选培养并扩增，并能有效杀伤HLA相合的BLCL;可望成为EBV相关性移植后淋巴细胞增殖性疾病的过继免疫治疗的有效方法。第二部分：异基因造血干细胞移植后淋巴细胞增殖性疾病的临床分析目的提高对异基因造血干细胞移植后淋巴细胞增殖性疾病(PtLD)的认识，探讨其有效的治疗策略。方法回顾性分析2006年1月至2011年12月我院行异基因造血干细胞移植的524例病例，其中同胞全相合移植299例，无关供体相合移植149例，亲缘半相合移植51例，脐血移植25例。结果根据临床表现及病理结果共确诊7例PtLD;在上述四种移植类型中PtLD发病率依次为0.3%(1/299)，2.7%(4/149)，2.0%(1/51)，4.0%(1/25);后三者发病率均高于同胞全相合移植组(P=.044);在预处理应用抗胸腺细胞球蛋白(AtG)的患者中发病率为2.7%(6/225)，明显高于无AtG者(1/299, P=.046)。7例PtLD临床表现特征主要分为两类：6例发生在移植后2至8个月，播散性起病，正规经验性抗感染治疗无效的发热，淋巴结进行性肿大，血象三系进行性下降，EB病毒血症，病情迅速进展，短期内出现多脏器功能不全;1例发生在移植后18月，以颌下淋巴结进行性肿大局限性起病，EBV-DNA检测阴性，病程相对缓和。病理类型6例为弥漫大B细胞淋巴瘤，1例为小淋巴细胞性淋巴瘤。7例中4例给予含利妥昔单抗方案治疗，2例恢复，2例死于PtLD进展;1例给予供者淋巴细胞输注后恢复;其余2例对抗病毒对症支持治疗无效死亡。结论PtLD是一组异质性淋巴细胞增殖性疾病，尽早诊断，及时采用有效措施治疗有望改善其预后。

关键词： EB病毒特异性t淋巴细胞异基因造血干细胞移植移植后淋巴细胞增殖性疾病

人类膀胱癌患者中肿瘤浸润性淋巴细胞的研究进展

同方学位论文库评论

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浙江实用医学 2008年第1期13卷 72-75页

作者：陈寅波李德川浙江省肿瘤医院浙江杭州310022

目前的临床研究已经证实肿瘤患者能够产生相应的细胞毒性t细胞.虽然存在多种免疫方法激活患者外周血中特异性t淋巴细胞产生抗肿瘤效应,但这些免疫效应与临床的治疗效果常不一致.因此,仅仅依靠激活t细胞抗肿瘤的免疫反应不足以使肿瘤缩小... 详细信息

目前的临床研究已经证实肿瘤患者能够产生相应的细胞毒性t细胞.虽然存在多种免疫方法激活患者外周血中特异性t淋巴细胞产生抗肿瘤效应,但这些免疫效应与临床的治疗效果常不一致.因此,仅仅依靠激活t细胞抗肿瘤的免疫反应不足以使肿瘤缩小,抗肿瘤免疫不应仅停留在激活t细胞阶段,还应探索新的抗肿瘤免疫方法,研究主要集中在肿瘤的微环境.

关键词：肿瘤浸润性淋巴细胞癌患者特异性t淋巴细胞细胞毒性t细胞抗肿瘤效应激活t细胞膀胱人类

病毒直接损伤作用在乙肝相关性肾炎发病机制中的地位

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中华肾脏病杂志 2010年第8期26卷 646-648页

作者：周益袁伟杰上海交通大学附属第一人民医院肾内科 200080

据统计，8％～20％乙肝患者有肾脏损害，但乙肝病毒相关性肾炎（HBV-GN）的发病机制至今尚未完全阐明。HBV抗原和抗体形成的免疫复合物沉积在肾组织是最早公认的学说。HBV诱发的特异性免疫作用，诸如特异性t淋巴细胞、抗原提呈细胞数目... 详细信息

据统计，8％～20％乙肝患者有肾脏损害，但乙肝病毒相关性肾炎（HBV-GN）的发病机制至今尚未完全阐明。HBV抗原和抗体形成的免疫复合物沉积在肾组织是最早公认的学说。HBV诱发的特异性免疫作用，诸如特异性t淋巴细胞、抗原提呈细胞数目和功能的改变等也是大家关注的焦点。但目前认为，HBV因其泛嗜性而直接感染肾组织细胞，产生病毒的杀细胞效应，

关键词：乙肝病毒相关性肾炎发病机制乙肝相关性肾炎损伤作用特异性t淋巴细胞 HBV抗原免疫复合物沉积肾组织细胞

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ELISpot技术的研究进展及临床应用

中华检验医学杂志 2010年第8期33卷 709-711页

作者：徐建青上海市公共卫生临床中心复旦大学生物医学研究院 201508

自ELISpot技术问世以来，由于其独特的优点，在基础与临床研究中的应用越来越广泛。目前，ELISpot技术为抗原表位筛查、抗原特异性t淋巴细胞定量、t淋巴细胞受体功能亲和力研究以及疫苗效果评价等提供了极其重要的技术平台；其在基础研... 详细信息

自ELISpot技术问世以来，由于其独特的优点，在基础与临床研究中的应用越来越广泛。目前，ELISpot技术为抗原表位筛查、抗原特异性t淋巴细胞定量、t淋巴细胞受体功能亲和力研究以及疫苗效果评价等提供了极其重要的技术平台；其在基础研究领域广泛应用的同时，ELISpot技术在临床中的应用也逐渐受到重视。现在，ELISpot技术正在疾病诊断与鉴别诊断、患者免疫状态和治疗效果评价以及疾病预后判断等方面发挥着重要作用。随着ELISpot技术的改进，相信ELISpot技术将为人类的健康事业做出更大的贡献。

关键词：酶联免疫斑点技术表位筛查特异性t淋巴细胞诊断鉴别诊断