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多重PCR技术检测食品中鼠伤寒沙门氏菌3%种毒力基因

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食品研究与开发 2021年第12期42卷 171-176页

作者：谭燕肖紫鸣李小林张洁宋文军魏纪平乔长晟天津商业大学生物技术与食品科学学院天津300134

该研究建立多重酶链式反应法快速检测鼠伤寒沙门氏菌3种毒力基因的检测方法。以鼠伤寒沙门氏菌毒力基因mgtC、inva、mogA、sseL、araB设计合成特异性引物,提取鼠伤寒沙门氏菌的DNA为扩增模板,通过单重聚合酶链式反应技术(polymerase cha... 详细信息

该研究建立多重酶链式反应法快速检测鼠伤寒沙门氏菌3种毒力基因的检测方法。以鼠伤寒沙门氏菌毒力基因mgtC、inva、mogA、sseL、araB设计合成特异性引物,提取鼠伤寒沙门氏菌的DNA为扩增模板,通过单重聚合酶链式反应技术(polymerase chain reaction,PCR)验证引物特异性,利用引物特异性、Tm值等综合因素通过多重聚合酶链式反应技术(multiple polymerase chain reaction,MPCR)检测方法实现沙门氏菌多种毒力基因的检测,并优化MPCR试验参数,提高检测灵敏性。结果表明,在多对特异性引物中进行MPCR反应,筛选出mgtC、mogA、araB 3种毒力基因进行MPCR反应的特异性强、无交叉污染,且该方法能检测的最低灵敏度为0.0165 ng/μL。成功建立快速检测食品中沙门氏菌3种毒力基因的方法,该方法检测特异性强、灵敏度高,检测限低。

关键词：沙门氏菌毒力基因多重聚合酶链式反应技术快速检测特异性强

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RT-PCR技术诊断猪繁殖与呼吸综合征

畜牧与兽医 2010年第10期42卷 74-76页

作者：魏明奎薛邦玉郭小参陶长城信阳农业高等专科学校河南信阳464000 信阳市动物疫病预防与控制中心河南信阳464000

参照GenBank已发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型代表株VR-2332的ORF6(M蛋白)基因序列,设计1对引物,扩增大约420 bp的基因片段,建立检测PRRSV的RT-PCR方法,同时应用该方法对PRRSV美洲毒株、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)... 详细信息

参照GenBank已发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型代表株VR-2332的ORF6(M蛋白)基因序列,设计1对引物,扩增大约420 bp的基因片段,建立检测PRRSV的RT-PCR方法,同时应用该方法对PRRSV美洲毒株、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒(PCV)及空白对照进行检测。结果显示,除PRRSV外,CSFV、PRV、PCV及空白对照的检测结果均为阴性。将250μL细胞培养的PRRSV提取RNA后,依次稀释成10-1～10-8,均能扩增出明显的目的条带;且多次重复均能得到一致的结果。表明本研究建立的RT-PCR方法具有特异性强、敏感性高、重现性好的优点。用此方法对信阳市10县区疑似PRRS病例进行临床检测,检测病料478份,检出阳性病料265份,阳性率为55.4%。

关键词： RT-PCR技术诊断猪繁殖 PRRSV 临床检测 RT-PCR方法空白对照猪伪狂犬病毒检测结果猪圆环病毒猪瘟病毒细胞培养特异性强美洲扩增基因序列基因片段呼吸综合 CSFV GenBank

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检测犬恶丝虫病免疫层析试纸条的研制

畜牧与兽医 2010年第6期42卷 89-91页

作者：何光志田维毅王平王文佳韩洁简昌友安永如贵阳中医学院贵州贵阳550002 凤冈县人民医院贵州凤冈564200 安顺市职业技术学院贵州安顺561000

以胶体金标SPA和犬恶丝虫抗原蛋白制备免疫层析试纸条,对300份犬血清进行检测,阳性检出率高达5.0%,同时用虫检法检测犬恶丝虫感染率,阳性检出率为4.0%。结果提示免疫层析试纸条具有操作简便、灵敏度高、特异性强的优点,可用于犬恶丝虫... 详细信息

以胶体金标SPA和犬恶丝虫抗原蛋白制备免疫层析试纸条,对300份犬血清进行检测,阳性检出率高达5.0%,同时用虫检法检测犬恶丝虫感染率,阳性检出率为4.0%。结果提示免疫层析试纸条具有操作简便、灵敏度高、特异性强的优点,可用于犬恶丝虫病的快速检测。

关键词：快速检测恶丝虫病免疫层析试纸条犬恶丝虫阳性检出率特异性强灵敏度高蛋白制备犬血清胶体金感染率抗原结果操作 SPA

肉品中莱克多巴胺残留的酶联免疫快速检测方法的建立

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畜牧与兽医 2010年第6期42卷 71-75页

作者：孙海新凌红丽高亚东李志中王宏华王雷青岛康地恩药业有限公司山东青岛266111

用自主制备的莱克多巴胺特异性抗体建立了猪肉样品中莱克多巴胺药物残留的间接竞争酶联免疫检测方法,对该检测体系的灵敏度、准确度、精密度、特异性等性能进行了测定,并将该检测系统与高效液相色谱法(HPLC)进行了对比分析。结果显示:... 详细信息

用自主制备的莱克多巴胺特异性抗体建立了猪肉样品中莱克多巴胺药物残留的间接竞争酶联免疫检测方法,对该检测体系的灵敏度、准确度、精密度、特异性等性能进行了测定,并将该检测系统与高效液相色谱法(HPLC)进行了对比分析。结果显示:莱克多巴胺药物残留的酶联免疫检测体系的检测范围为1～100 ng,灵敏度为0.12 ng/mL,检测限为1 ng/mL,回收率为80%～100%,与同类药物如盐酸克仑特罗、硫酸特布他林及硫酸克仑特罗的交叉反应率均小于0.01%;采用HPLC方法进行莱克多巴胺药物残留的检测时,其检测范围为10～200μg/mL,检测限为1μg/mL,回收率为83%～100%。该方法与高效液相色谱法相比灵敏度较高,特异性强,检测结果准确度相近,但是在检测结果稳定性方面逊于HPLC方法。

关键词：肉品莱克多巴胺药物残留酶联免疫检测方法高效液相色谱法特异性抗体灵敏度盐酸克仑特罗检测体系检测结果检测范围 HPLC方法准确度硫酸特布他林检测限回收率交叉反应率特异性强检测系统间接竞争

基于核酸适配体Q5的石斑鱼虹彩病毒快速检测技术

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广西科学院学报 2019年第3期35卷 193-199,212页

作者：余庆刘明珠肖贺贺吴思婷黄艳徐凤巧覃仙玲王一兵陆子君聂振平许尤厚李鹏飞广西科学院广西近海海洋环境科学重点实验室广西南宁530007 广西壮族自治区海洋研究所广西海洋生物技术重点实验室广西北海536000 河南师范大学生命科学学院河南新乡453007 北部湾大学海洋学院广西北部湾海洋生物多样性养护重点实验室广西钦州535011 广西民族大学海洋与生物技术学院广西南宁530006 广西海洋天然产物与组合生物合成化学重点实验室广西南宁530007

石斑鱼虹彩病毒(Grouper iridovirus,SGIV)在不同鱼群之间迅速传播,其致死率极高,严重制约了我国海水石斑鱼(Epinephelus tauvina)养殖业健康可持续发展。为了及早发现和鉴定出病原,降低经济损失,促进渔业发展,开发方便快捷的石斑鱼虹... 详细信息

石斑鱼虹彩病毒(Grouper iridovirus,SGIV)在不同鱼群之间迅速传播,其致死率极高,严重制约了我国海水石斑鱼(Epinephelus tauvina)养殖业健康可持续发展。为了及早发现和鉴定出病原,降低经济损失,促进渔业发展,开发方便快捷的石斑鱼虹彩病毒检测技术已迫在眉睫。本研究基于核酸适配体Q5,研发出一种核酸适配体Q5荧光分子探针(Aptamer Q5 based fluorescent molecular probe,Q5-AFMP),并且对Q5-AFMP检测感染石斑鱼虹彩病毒的特异性,以及Q5-AFMP在细胞水平和组织水平检测石斑鱼虹彩病毒感染的灵敏度进行分析。研究结果表明:Q5-AFMP能够在细胞水平和组织水平高特异性检测出石斑鱼虹彩病毒的感染,而且具有较高的灵敏度。因此Q5-AFMP能够用于石斑鱼虹彩病毒的快速检测和诊断。

关键词：石斑鱼虹彩病毒核酸适配体荧光分子探针水产养殖特异性强灵敏度高快速检测

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晚期乳腺癌二线化疗药物--希罗达

中国药物应用与监测 2002年第6期17卷 -页

作者：郭秀娥张信红解放军总医院药库解放军总医院药库

希罗达的有效成分是卡培它滨,是一种对肿瘤细胞有选择性活性的口服细胞毒性制剂,它对肿瘤选择性高、特异性强,在临床应用过程中,希罗达表现出良好的抗肿瘤作用和极少的副作用,具有极大的潜力.目前,希罗达只用于治疗晚期、耐药的转移性... 详细信息

希罗达的有效成分是卡培它滨,是一种对肿瘤细胞有选择性活性的口服细胞毒性制剂,它对肿瘤选择性高、特异性强,在临床应用过程中,希罗达表现出良好的抗肿瘤作用和极少的副作用,具有极大的潜力.目前,希罗达只用于治疗晚期、耐药的转移性乳腺癌,对大肠癌等其他适应症的研究还在进行中.

关键词：晚期乳腺癌化疗药物希罗达转移性乳腺癌肿瘤选择性抗肿瘤作用肿瘤细胞有效成分应用过程细胞毒性特异性强适应症副作用大肠癌治疗制剂潜力耐药临床口服

多重PCR技术在快速检测食源性致病菌中的研究进展

维普期刊数据库评论

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食品安全导刊 2020年第15期 156-156,158页

作者：于世成安丘市疾病预防控制中心

食品性致病菌是影响食品安全的重要因素之一,传统微生物检验方法检验周期较长、培养鉴定繁琐复杂,已越来越难以满足现代社会食品安全快速检测的需要,因而更加快速简便高效的检测方法成为科研热点。近年来,随着现代分子生物技术的发展,PC... 详细信息

食品性致病菌是影响食品安全的重要因素之一,传统微生物检验方法检验周期较长、培养鉴定繁琐复杂,已越来越难以满足现代社会食品安全快速检测的需要,因而更加快速简便高效的检测方法成为科研热点。近年来,随着现代分子生物技术的发展,PCR技术由于具有特异性强、灵敏度高、操作简便、成本低等优点,越来越多的被应用于食源性致病菌的检测。

关键词：食品性致病菌多重PCR快速特异性强灵敏度高

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三种方法检测乙肝表面抗原的结果分析

临床军医杂志 2010年第5期38卷 832-833页

作者：王厚照马芳芳陈云谢则金解放军第174医院检验科福建厦门361003

目的探讨三种方法对乙肝表面抗原的定性和定量检测的结果并进行对比分析。方法采用临床上常用的胶体金方法、酶联免疫吸附实验法(ELISA法)、化学发光微粒子免疫分析法(CMIA法)对400例标本进行乙肝表面抗原检测,分别计算ELISA法、CMIA法... 详细信息

目的探讨三种方法对乙肝表面抗原的定性和定量检测的结果并进行对比分析。方法采用临床上常用的胶体金方法、酶联免疫吸附实验法(ELISA法)、化学发光微粒子免疫分析法(CMIA法)对400例标本进行乙肝表面抗原检测,分别计算ELISA法、CMIA法、胶体金法检测结果的阳性率、灵敏度和特异度。结果 CMIA方法检测乙肝表面抗原的阳性率、灵敏度和特异度高于ELISA法和胶体金法。结论 CMIA法检测乙肝病毒标志物特异性强、灵敏度高,具有很高的临床应用价值。

关键词：方法乙肝表面抗原检测结果分析 hepatitis B surface antigen detection methods three 酶联免疫吸附实验法灵敏度高胶体金法乙肝病毒标志物阳性率特异度临床应用价值免疫分析法特异性强检测结果化学发光对比分析定量检测 ELISA法

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实时荧光定量PCR定量方法研究进展

江西农业学报 2010年第10期22卷 128-129,132页

作者：廉红霞高腾云傅彤孙宇李改英河南农业大学牧医工程学院河南郑州450002

实时荧光定量PCR以其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点而成为了分子生物学研究中的重要工具,综述了实时荧光定量PCR技术及其定量方法的研究进展,并展望了其应用前景。

关键词：实时荧光定量 PCR技术定量方法研究进展 Polymerase Chain Reaction Quantitative Real-time Method of 分子生物学研究应用前景特异性强灵敏度高封闭反应重复性速度工具