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牦牛腹泻相关病毒的鉴定和牦牛星状病毒的分子特征及流行病学研究

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牦牛腹泻相关病毒的鉴定和牦牛星状病毒的分子特征及流行病学研究

作者：陈曦西南民族大学

学位级别：硕士

牦牛是青藏高原农牧民不可或缺的生产生活资料,犊牛腹泻一直是困扰牦牛养殖业的主要疾病。然而,由于青藏高原地理环境恶劣,交通不便等因素影响,有关牦牛腹泻的病原生物学和流行病学的资料很少,极大制约了该类疾病的科学防控。本实验的... 详细信息

牦牛是青藏高原农牧民不可或缺的生产生活资料,犊牛腹泻一直是困扰牦牛养殖业的主要疾病。然而,由于青藏高原地理环境恶劣,交通不便等因素影响,有关牦牛腹泻的病原生物学和流行病学的资料很少,极大制约了该类疾病的科学防控。本实验的目的是对牦牛腹泻粪便样本中的病毒种类进行鉴定,确定病毒与腹泻的联系,并对牦牛星状病毒（astrovirus,AstV）的分子特征、检测方法和流行病学进行研究。取得以下结果:1.牦牛腹泻粪便样本中病毒的鉴定及其与腹泻的联系为了鉴定腹泻牦牛粪便中的病毒种类,于2013年5月月份从川西北草原的四个牧场采集了20份30～60日龄的腹泻牦牛粪便样本。该20份样本中每5份组成一个pool样,提取样本中的总RNA,反转录成cDNA,然后将4组cDNA混合,建库后TruSeq Illumina测序,进行数据分析。结果显示从牦牛腹泻粪便样本中共鉴定出9种病毒:轮状病毒（Bovine rotavirus,BRV）、牛病毒性腹泻-粘膜病病毒（Bovine viral diarrhea virus,BVDV）、甲型流感病毒（influenza A virus）、AstV、肠道病毒（Bovine enterovirus,BEV）、戊肝病毒（hepatitis E virus,HEV）、嵴病毒（kobuvirus,kobuV）、有蹄兽细小病毒I型（hokovirus,hokoV）以及土拨鼠肝炎病毒（woodchuck hepatitis virus,WHV）,BRV和BVDV是已知的致腹泻病毒,其余7种病毒为牦牛中首次发现,5种病毒也是首次在国内的牛体中发现。利用PCR技术分别对9种病毒在20份腹泻牦牛粪便样本中的分布情况进行验证,发现仅HEV和WHV未能检出,这可能与PCR方法的灵敏度有关。为了进一步确定9种病毒与牦牛腹泻的联系,对2014年6月采自阿坝藏羌自治州的63份牦牛腹泻粪便样本和75份健康粪便样本进行了PCR检测,结果发现各病毒在腹泻和健康粪便样本中的检出率分别为:AstV（60.3%和2.7%）、BVDV（3.2%和1.3%）、甲型流感病毒（3.2%和0）、BEV（79.4%和68%）、kobuV（43.9%和34.7%）、BRV（28.6%和21.3%）、hokoV（4.7%和1.3%）。本实验结果表明,AstV、BEV、kobuV和BRV在牦牛群中普遍存在;AstV在腹泻粪便样本中的检出率显著高于健康粪便样本（p牦牛腹泻有联系。2.牦牛AstV的基因组扩增为了进一步了解牦牛astv的基因组特征,我们根据宏病毒组获得的基因片段和genbank中boastv的基因组序列,设计了12对引物,分段扩增获得了一株近似全长的牦牛astv基因组序列。序列分析发现,该基因组全长为6243bp（除5'utr外）,gc含量为51.8%,具有astvs的典型特征,与已知的boastv的核苷酸序列的同源性仅为41.2%6.6%。牦牛astv的基因组含有三个开放阅读框（orfs）的长度分别为orf1a:2454bp,orf1b:1509bp和orf2:2310bp。与同聚为boastv第一大支上毒株相应的orfs核苷酸序列同源性分别为72.9%4.3%、75.7%7.5%和50.7%5.1%;而氨基酸序列的同源性分别为75.4%2.5%、87.1%6.8%和54.0%9.2%。序列比对发现,牦牛astv的orf1a和orf1b发生的变异主要是由于碱基的插入与缺失及点突变造成;而该毒株的orf2基因序列变异很大,主要与基因发生了重组现象有关,推导的重组位点位于氨基酸序列的268aa处,序列分析显示1～268aa片段与boastv的同源性最高,而268aa以后的片段与鹿astvccastv株的同源关系最近,是一种新型astv。本实验结果为深入了解牦boastv的遗传变异和分子检测提供了参考。3.检测牦牛astv的rt-pcr方法的建立与应用本研究利用已有的2种检测boastv的pcr方法对已经测序验证的牦牛astv阳性样本不能检出。因此,有必要建立检测这种新型astv的方法。鉴于astvorf2基因序列前段在种内高度保守,本研究首先扩增获得的13株牦牛astv1～630bp的orf2基因片段,毒株间的核苷酸同源性为99.3%00%,而与牛肠源astvorf2基因的同源性仅为59.5%0.8%。在此基础上选择牦牛astv1-630bp的orf2基因片段为靶点,重新设计检测引物,成功建立了检测牦牛astv的rt-pcr方法,该方法只扩增牦牛astv的特异片段,对boastv和其他无关病原无扩增;对病毒核酸的最低检测限为57.3fg/μl;比较实验表明,本方法对牦牛astv的检出率明显优于现有检测boastv的rt-pcr方法;因

关键词：牦牛腹泻宏病毒组技术病毒种类 AstV 基因组特征 RT-PCR 流行病学

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牦牛腹泻的发病原因及防治方法

畜牧兽医科技信息 2020年第8期36卷 106-107页

作者：桑杰吉青海省黄南州同仁县牙浪乡兽医工作站青海同仁811399

现如今,牦牛养殖已成为农户脱贫致富走向小康生活的重要途径,但牦牛养殖也是有一定风险的。在养殖过程中经常会发生疫病,严重时会导致牦牛死亡,给农户带来较大的经济损失。牦牛腹泻是常见的疾病之一,为减少该病的发生几率,必须及时查明... 详细信息

现如今,牦牛养殖已成为农户脱贫致富走向小康生活的重要途径,但牦牛养殖也是有一定风险的。在养殖过程中经常会发生疫病,严重时会导致牦牛死亡,给农户带来较大的经济损失。牦牛腹泻是常见的疾病之一,为减少该病的发生几率,必须及时查明病因并采取针对性治疗措施。本文介绍了牦牛腹泻的发病原因,提出有效的防治方法,旨在降低牦牛腹泻的发病几率,提高牦牛养殖经济效益。

关键词：牦牛腹泻发病原因防治方法

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一起犊牦牛腹泻病的病原学诊断

四川畜牧兽医 2017年第2期44卷 29-31页

作者：李凡阿继严州陈天祥张斌汤承西南民族大学生命科学与技术学院四川成都610041 四川省若尔盖县农业畜牧和水务局四川若尔盖624500

四川省若尔盖县某养殖户的犊牦牛出现以腹泻为主要特征的疾病,传播迅速,发病率为100%,为弄清病因,我们采集了6份腹泻样本,分别用Trizol法和酚氯仿法提取腹泻粪便的总RNA和DNA,再用牦牛轮状病毒(RV)、牛冠状病毒(Bco V)、牛病毒性腹泻病... 详细信息

四川省若尔盖县某养殖户的犊牦牛出现以腹泻为主要特征的疾病,传播迅速,发病率为100%,为弄清病因,我们采集了6份腹泻样本,分别用Trizol法和酚氯仿法提取腹泻粪便的总RNA和DNA,再用牦牛轮状病毒(RV)、牛冠状病毒(Bco V)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、沙门氏菌(Salmonella)、产肠毒素大肠杆菌(ETEC)特异的PCR方法进行病原检测,结果得出这5种病原的检出数分别为6、0、6、0、5,可见该地区犊牦牛腹泻主要由RV、BVDV和ETEC混合感染引起。

关键词：牦牛腹泻病原牦牛轮状病毒牛病毒性腹泻病毒

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中医治疗牦牛腹泻病

中兽医学杂志 2023年第3期 64-66页

作者：陈毅邦殷满财青海省牦牛繁育推广服务中心<青海省大通种牛场> 青海西宁810102 国家肉牛秏牛产业技术体系大通综合试验站青海西宁810102

主要探讨中医治疗牦牛腹泻疾病的方法和预防措施,分析了牦牛腹泻病因,包括饲料、饲养和病原微生物等方面,为后续的治疗和预防提供了理论依据。介绍了中医治疗牦牛腹泻的方法,包括三甲散、达原散、参苓白术散加益原散、参苓白术散加桂附... 详细信息

主要探讨中医治疗牦牛腹泻疾病的方法和预防措施,分析了牦牛腹泻病因,包括饲料、饲养和病原微生物等方面,为后续的治疗和预防提供了理论依据。介绍了中医治疗牦牛腹泻的方法,包括三甲散、达原散、参苓白术散加益原散、参苓白术散加桂附理中散等。提出了预防牦牛腹泻的具体措施,包括加强接产管理、严格喂料管理、注意舍内卫生等。这些措施可以有效预防和控制牦牛腹泻的发生,保障养殖业的稳定发展。

关键词：中医治疗牦牛腹泻预防

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中医治疗甘南牦牛腹泻疾病分析

中兽医学杂志 2023年第10期 34-36页

作者：白建生卓尼县畜牧工作站甘肃卓尼747600

高原牧场的养殖户在畜牧生产中面临着疾病病害的问题,目前甘南地区的牦牛病毒性腹泻尤为严重。该地区环境、气候复杂,牦牛病毒性腹泻发生率高,加上该病具有很强的传染性,可能导致大规模的家畜发病。因此,养殖户应按照相关要求和规范,及... 详细信息

高原牧场的养殖户在畜牧生产中面临着疾病病害的问题,目前甘南地区的牦牛病毒性腹泻尤为严重。该地区环境、气候复杂,牦牛病毒性腹泻发生率高,加上该病具有很强的传染性,可能导致大规模的家畜发病。因此,养殖户应按照相关要求和规范,及时采取防护与治疗措施,降低牦牛病毒性腹泻发生率。主要分析了牦牛腹泻的发生机制级中医治疗牦牛病毒性腹泻,以期对养殖户提供一定的指导。

关键词：甘南地区牦牛腹泻脾胃功能中医治疗

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预防牦牛腹泻疾病的主要措施研究

农家参谋 2021年第10期 140-141页

作者：老松青海省玉树州称多县畜牧兽医工作站

牦牛是高寒地区特有的牲畜品种,同时也是当地农牧民群众养殖最多的一种家畜,是当地农牧民群众的主要经济来源。由于牦牛长时间生活在高海拔地区,气候寒冷,条件恶劣,如果没有做好妥善有效的养殖管理工作,很容易造成各种疾病的发生,影响... 详细信息

牦牛是高寒地区特有的牲畜品种,同时也是当地农牧民群众养殖最多的一种家畜,是当地农牧民群众的主要经济来源。由于牦牛长时间生活在高海拔地区,气候寒冷,条件恶劣,如果没有做好妥善有效的养殖管理工作,很容易造成各种疾病的发生,影响到牦牛的正常生产,甚至会危及到牦牛的生命健康。腹泻疾病是牦牛养殖管理过程中经常发生流行的一类传染性疾病,引起腹泻疾病的病原种类多种多样,包括了细菌、病毒和寄生虫,不同病原所表现出来的临床症状存在很大的差异性,但都会造成牦牛出现严重的腹泻,机体严重消瘦,生长发育不良,严重脱水。所以牦牛养殖管理期间,就需要加强对发病原因的有效调查和总结,并构建针对性的防控措施,切实防控腹泻疾病的发生流行,确保牦牛养殖安全。

关键词：预防牦牛腹泻发生原因防控措施

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预防牦牛腹泻疾病的措施

中国动物保健 2015年第8期17卷 63-64页

作者：引兄共和县黑马河乡畜牧兽医工作站青海共和813000

牦牛养殖是农户走向小康生活的重要方式,可为农户带来巨大的经济效益。但是在养殖过程中,可能出现疾病、死亡等一些问题,给农户带来巨大的经济损失。牦牛腹泻是养殖过程中极为常见的问题,为了减少牦牛腹泻的发病率,笔者对预防牦牛腹泻... 详细信息

牦牛养殖是农户走向小康生活的重要方式,可为农户带来巨大的经济效益。但是在养殖过程中,可能出现疾病、死亡等一些问题,给农户带来巨大的经济损失。牦牛腹泻是养殖过程中极为常见的问题,为了减少牦牛腹泻的发病率,笔者对预防牦牛腹泻疾病的发病原因进行分析,并阐述该病的发病症状,分析疾病的预防措施,以期减轻牦牛养殖户的经济损失。

关键词：牦牛腹泻预防措施