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牛视网膜微血管内皮细胞的培养及鉴定

世界临床药物 2009年第7期30卷 411-413页

作者：陈晨山东省临沂市人民医院博爱眼科临沂276003

目的探讨牛视网膜微血管内皮细胞(BREC)的体外选择性培养和鉴定方法。方法采用含0.075%胶原酶和0.03%牛血清白蛋白(BSA)的磷酸缓冲液(PBS)培养基选择性培养BREC。细胞鉴定采用经Ⅷ因子相关抗原免疫组化染色细胞鉴定内皮细胞。结果通过... 详细信息

目的探讨牛视网膜微血管内皮细胞(BREC)的体外选择性培养和鉴定方法。方法采用含0.075%胶原酶和0.03%牛血清白蛋白(BSA)的磷酸缓冲液(PBS)培养基选择性培养BREC。细胞鉴定采用经Ⅷ因子相关抗原免疫组化染色细胞鉴定内皮细胞。结果通过选择性培养获得的BREC纯度达98%以上,并能连续稳定传代。BREC早期聚集在微血管碎片周围,呈片状鹅卵石样单层生长,存在接触性抑制。经Ⅷ因子相关抗原免疫组化染色可见胞质内棕色的免疫沉积物反应呈阳性。结论本研究所采用的细胞培养方法可获得稳定生长与传代的较高纯度的视网膜微血管内皮细胞,简单、经济易操作。可为糖尿病视网膜病变等微血管病变研究提供可靠的(体外)试验方法。

关键词：牛视网膜微血管内皮细胞培养鉴定

非吞噬细胞氧化酶1介导糖基化终末产物对牛视网膜周细胞凋亡的影响

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微循环学杂志 2013年第4期23卷 4-7,F0002,I0001页

作者：高凌李竞武汉大学人民医院内分泌科武汉430060

目的:探讨非吞噬细胞氧化酶1(NOX1)激活是否介导糖基化终末产物(AGE)对牛视网膜毛细血管周细胞(BRP)的凋亡。方法:将原代培养BRP分为3组:对照组、AGE组(200mg/L AGE)、干预组(200mg/L AGE+NOX1RNAi)。用锥蓝排斥法观察各组BRP的增殖,使... 详细信息

目的:探讨非吞噬细胞氧化酶1(NOX1)激活是否介导糖基化终末产物(AGE)对牛视网膜毛细血管周细胞(BRP)的凋亡。方法:将原代培养BRP分为3组:对照组、AGE组(200mg/L AGE)、干预组(200mg/L AGE+NOX1RNAi)。用锥蓝排斥法观察各组BRP的增殖,使用流式细胞术检测BRP凋亡水平,采用免疫杂交法检测活性Caspase-3的表达。结果:AGE组BRP增殖率较对照组明显降低;干预组则较AGE组明显升高(P均<0.01)。活性Caspase-3在AGE组表达上调,而在干预组表达降低(P均<0.01)。结论:AGE对BRP增殖的抑制或者促凋亡作用可能是通过激活Caspase-3实现,而信号通路NOX1的激活可能介导了AGE对Caspase-3的活化。

关键词：晚期糖基化终末产物周细胞凋亡非吞噬细胞牛视网膜氧化酶1 糖尿病视网膜病变视网膜毛细血管慢性并发症

单核细胞源性趋化因子对培养的牛视网膜Mller细胞的趋化作用

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咸宁医学院学报 2002年第3期16卷 162-165页

作者：周元清曾水清魏厚仁广东省清远市人民医院眼科广东清远511500 华中科技大学同济医学院附属医协和医院

目的研究单核细胞源性趋化因子对培养的牛视网膜M櫣ｌｌｅｒ细胞的趋化作用?椒ㄒ缘抖沟鞍譇激活小牛的单核细胞 ,以此单核细胞条件培养基作为趋化因子的来源 ,用改良的Boyden小室微孔滤膜法检测其对培养的牛视网膜M櫣ｌｌｅｒ细胞的趋... 详细信息

目的研究单核细胞源性趋化因子对培养的牛视网膜M櫣ｌｌｅｒ细胞的趋化作用?椒ㄒ缘抖沟鞍譇激活小牛的单核细胞 ,以此单核细胞条件培养基作为趋化因子的来源 ,用改良的Boyden小室微孔滤膜法检测其对培养的牛视网膜M櫣ｌｌｅｒ细胞的趋化活性 ,并检测经明胶结合处理掉纤维连接蛋白 (FN)后条件培养基的活性。结果该条件培养基对培养的M櫣ｌｌｅｒ细胞具有趋化活性 ,且该条件培养基在经明胶处理后其趋化活性降低 ,但仍然存在。结论该条件培养基对M櫣ｌｌｅｒ细胞趋化作用的物质成份不是单一的 ,是多种因素作用的结果。

关键词：单核细胞源性趋化因子牛视网膜 Mueller细胞趋化作用视网膜病

缺氧时视网膜血管内皮细胞缺氧诱导因子-1α及其mRNA的时序性表达(英文)

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国际眼科杂志 2005年第2期5卷 225-228页

作者：邓爱军姜德咏中南大学湘雅二医院眼科中国湖南省长沙市410011

目的:探讨在缺氧状态下视网膜血管内皮细胞缺氧诱导因子-1α(H IF-1α)及其m RNA 表达的时空规律。方法:对分离的牛视网膜血管内皮细胞分别进行常规和CoCl2模拟缺氧培养,采用免疫组化和逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测不同缺氧时间HIF-... 详细信息

目的:探讨在缺氧状态下视网膜血管内皮细胞缺氧诱导因子-1α(H IF-1α)及其m RNA 表达的时空规律。方法:对分离的牛视网膜血管内皮细胞分别进行常规和CoCl2模拟缺氧培养,采用免疫组化和逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测不同缺氧时间HIF-1α及其mRNA的表达。结果:正常对照组HIF-1α有极低表达,在缺氧1h时表达量显著上升,4h 达到高峰,16h后下降。与对照组比较,各缺氧组HIF-1α的表达均有显著性差异(P视网膜血管内皮细胞在缺氧早期HIF-1α表达有短暂、迅速的增加,但其mRNA的表达无明显变化,提示缺氧可以促进视网膜血管内皮细胞HIF-1α的表达,但不是在基因的转录水平。

关键词：缺氧诱导因子-1α 血管内皮细胞时序性表达 HIF-1α 逆转录多聚酶链反应 mRNA表达缺氧状态下 CoCl2 正常对照组显著性差异缺氧培养牛视网膜缺氧时间免疫组化转录水平低表达表达量

缺氧时视网膜血管内皮细胞HIF-1 α及其mRNA的表达

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眼科研究 2006年第4期24卷 356-358页

作者：邓爱军姜德咏中南大学湘雅二医院眼科

目的探讨在缺氧状态下视网膜血管内皮细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及其mRNA表达的时空规律。方法对分离的牛视网膜血管内皮细胞分别进行常规和CoCl2模拟缺氧培养,采用免疫组织化学和逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测不同缺氧时间HIF-1... 详细信息

目的探讨在缺氧状态下视网膜血管内皮细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及其mRNA表达的时空规律。方法对分离的牛视网膜血管内皮细胞分别进行常规和CoCl2模拟缺氧培养,采用免疫组织化学和逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测不同缺氧时间HIF-1α及其mRNA的表达。结果正常对照组HIF-1α有极低表达,缺氧1h表达量显著上升,4h达到高峰,16h后下降。与对照组比较,各缺氧组HIF-1α的表达均有显著统计学差异(P视网膜血管内皮细胞在缺氧早期HIF-1α表达有短暂、迅速的增加,但其mRNA的表达无明显变化,提示缺氧可以促进视网膜血管内皮细胞HIF-1α的表达,但不是在基因的转录水平。

关键词：缺氧诱导因子-1 HIF-1α 血管内皮细胞 mRNA表达牛视网膜逆转录多聚酶链反应正常对照组统计学差异免疫组织化学缺氧状态下

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热带医学杂志2012年第12卷总目次

热带医学杂志 2012年第12期12卷 1542-1550,F0003页

【硕博专栏论著】一种高选择性、高效的牛视网膜微血管内皮细胞培养方法，王征，齐炜炜，陈少波，等（1）：1基于WEB的寄生虫虫卵特征分类检索系统的建立，方子豪，刘燕，李正宇。

关键词：医学杂志总目次热带细胞培养方法微血管内皮寄生虫虫卵高选择性牛视网膜