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牛膝总皂苷对大鼠椎间盘髓核细胞外基质合成的影响

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中成药 2020年第1期42卷 69-74页

作者：王新立刘汝银王西彬岳宗进河南省中医院脊柱外科

目的探讨牛膝总皂苷(ABS)对大鼠椎间盘髓核细胞外基质合成的影响。方法体外培养大鼠椎间盘髓核细胞,并建立氧糖剥夺(OGD)模型模拟退变微环境。采用不同浓度ABS单独或加入SIRT1抑制剂EX527、自噬抑制剂3-MA干预细胞。CCK-8法检测细胞存活... 详细信息

目的探讨牛膝总皂苷(ABS)对大鼠椎间盘髓核细胞外基质合成的影响。方法体外培养大鼠椎间盘髓核细胞,并建立氧糖剥夺(OGD)模型模拟退变微环境。采用不同浓度ABS单独或加入SIRT1抑制剂EX527、自噬抑制剂3-MA干预细胞。CCK-8法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡,caspase-3试剂盒检测caspase-3活性,实时定量PCR检测细胞外基质collagen II、Aggrecan mRNA表达, Western blot检测SIRT1、collagen II、Aggrecan及自噬相关蛋白ATG5、LC3II/LC3Ⅰ和p62的蛋白表达。结果 ABS(40μg/mL)可促进大鼠椎间盘髓核细胞存活(P<0.01);ABS干预可使OGD环境中的细胞存活率增加,细胞凋亡、caspase-3活性降低,collagen II、Aggrecan mRNA和蛋白表达均上调,SIRT1、ATG5和LC3II/LC3Ⅰ蛋白表达上调,p62蛋白表达下调(P<0.05);EX527、3-MA干预可抑制OGD环境中ABS介导的细胞增殖增加、凋亡减少,collagen II和Aggrecan的蛋白表达上调(P<0.05)。结论 ABS可通过SIRT1/自噬信号通路促进大鼠椎间盘髓核细胞存活和细胞外基质合成。

关键词：牛膝总皂苷椎间盘髓核细胞细胞外基质 SIRT1 自噬

牛膝总皂苷对骨关节炎模型兔软骨修复及低氧诱导因子1信号通路的影响

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中国组织工程研究 2019年第27期23卷 4332-4337页

作者：马笃军彭力平余阗曹亚飞高坤肖伟胡烈奎徐文铭深圳市中医院广东省深圳市518033 广州中医药大学第四临床医学院广东省深圳市518033

背景:以往研究证实,牛膝能促进实验兔骨关节炎模型关节软骨修复,牛膝总皂苷含药血清体外能促进软骨细胞增殖。目的:观察牛膝总皂苷对实验兔骨关节炎模型软骨修复及低氧诱导因子1信号通路的影响。方法:新西兰大白兔32只由广东省实验动物... 详细信息

背景:以往研究证实,牛膝能促进实验兔骨关节炎模型关节软骨修复,牛膝总皂苷含药血清体外能促进软骨细胞增殖。目的:观察牛膝总皂苷对实验兔骨关节炎模型软骨修复及低氧诱导因子1信号通路的影响。方法:新西兰大白兔32只由广东省实验动物中心提供,实验方案经广州中医药大学动物实验伦理委员会批准(批准号:2018023)。将32只实验兔进行骨关节炎模型造模,将造模成功的30只随机分为牛膝总皂苷组、硫酸氨基葡萄糖组、空白对照组,每组10只,分别予牛膝总皂苷、硫酸氨基葡萄糖、蒸馏水灌胃30 d,进行软骨组织苏木精-伊红染色观察、病理学改良Mankin’s评分及软骨细胞电镜观察,用qRT-PCR检测软骨组织低氧诱导因子1α、血管内皮生长因子、Ⅱ型胶原mRNA表达。结果与结论:①灌胃30 d后牛膝总皂苷组与硫酸氨基葡萄糖组、空白对照组比较,苏木精-伊红染色观察、病理学改良Mankin’s评分明显改善(P 牛膝总皂苷组与硫酸氨基葡萄糖组、空白对照组比较,qRT-PCR检测软骨组织低氧诱导因子1α、血管内皮生长因子mRNA表达下调及Ⅱ型胶原mRNA表达上调(P 牛膝总皂苷能有效提高细胞活力、促进软骨细胞增殖,下调低氧诱导因子1α、血管内皮生长因子mRNA表达及上调Ⅱ型胶原mRNA表达,说明低氧诱导因子1信号通路在牛膝总皂苷对实验兔骨关节炎模型软骨修复过程中发挥了较大作用。

关键词：牛膝总皂苷骨关节炎信号通路软骨细胞低氧诱导因子1α

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牛膝总皂苷治疗膝骨关节炎的药理研究进展

中药新药与临床药理 2021年第4期32卷 592-595页

作者：黄竞杰杨俊兴陈浩雄广州中医药大学深圳医院(福田) 广东深圳518000

膝骨关节炎是关节组织降解和修复失衡,最终导致软骨退化、软骨下骨硬化、滑膜炎症的过程。现代医学的常用药物如止痛药、非甾体抗炎药、硫酸氨基葡萄糖和糖皮质激素类等只能暂时缓解膝骨关节炎的疼痛,但无法阻止关节炎的进展。牛膝是中... 详细信息

膝骨关节炎是关节组织降解和修复失衡,最终导致软骨退化、软骨下骨硬化、滑膜炎症的过程。现代医学的常用药物如止痛药、非甾体抗炎药、硫酸氨基葡萄糖和糖皮质激素类等只能暂时缓解膝骨关节炎的疼痛,但无法阻止关节炎的进展。牛膝是中医治疗膝骨关节炎的常见药物,牛膝总皂苷是其主要活性成分。近年研究发现牛膝总皂苷具有抗炎,抑制软骨基质降解等作用。该文对牛膝总皂苷治疗膝骨关节炎的药理研究成果作一综述,为临床治疗膝骨关节炎提供参考。

关键词：膝骨关节炎牛膝总皂苷作用机制研究进展抗炎软骨退化

牛膝总皂苷干预兔膝骨关节炎滑膜液来源细胞因子的表达

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中国组织工程研究 2019年第33期23卷 5317-5321页

作者：高坤张勇陈大宇余伟吉孙淑芬吴益宏林展鹏曹亚飞深圳市中医院骨伤科广东省深圳市518033 广州中医药大学第四临床医学院广东省深圳市518033

背景:既往研究表明,滑膜液中细胞因子是引起膝关节疼痛的重要因素。牛膝能够促进膝关节软骨细胞修复, 降低膝关节炎症水平,减轻膝关节疼痛。牛膝能否调控膝关节炎滑膜液内细胞因子水平,目前尚不清楚。目的:探讨牛膝总皂苷对实验兔膝骨... 详细信息

背景:既往研究表明,滑膜液中细胞因子是引起膝关节疼痛的重要因素。牛膝能够促进膝关节软骨细胞修复, 降低膝关节炎症水平,减轻膝关节疼痛。牛膝能否调控膝关节炎滑膜液内细胞因子水平,目前尚不清楚。目的:探讨牛膝总皂苷对实验兔膝骨关节炎滑膜液来源细胞因子谱的影响。方法:8 只新西兰兔随机分为实验组和对照组,每组4 只,均采用石膏外固定的方法构建右膝关节炎模型, 造模后第2 天开始给予牛膝总皂苷及蒸馏水灌服,灌服2 周后测定关节活动度,抽取膝关节滑膜液,采用 Luminex 法测定炎性细胞因子和趋化因子水平,采用ELISA 法检测基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶3 水平。实验经广州中医药大学实验动物伦理委员会批准(批准号:2018-31)。结果与结论:①治疗后,实验组膝关节活动度明显大于对照组(P 牛膝总皂苷能够缓解骨关节炎兔膝关节活动障碍,降低膝关节滑膜液中细胞因子水平,从而起到减轻炎症和保护软骨的作用。

关键词：骨性关节炎牛膝牛膝总皂苷滑膜液基质金属蛋白酶细胞因子趋化因子

牛膝总皂苷对IL-1β诱导髓核细胞的凋亡及炎性损伤的影响

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湖南中医药大学学报 2023年第9期43卷 1591-1597页

作者：李硕夫刘宏哲张嘉麟杨雷陈龙郭彦涛刘笑蓉湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 湖南省人民医院湖南长沙410002 中南大学湖南长沙410083 湖南中医药大学湖南长沙410208

目的通过观察髓核细胞(nucleus pulposus cell,NPC)的凋亡、炎症及细胞外基质(extracellular matrix,ECM)代谢研究不同浓度牛膝总皂苷(achyranthes bidentata saponin,ABS)对白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)诱导人源NPC损伤的保护作用。方法通过IL-1β诱导建立NPC退变模型,随机将细胞分为正常组、模型组(10 ng/mL IL-1β)、ABS低剂量组(10 ng/mL IL-1β+3μg/mL ABS)、ABS中剂量组(10 ng/mL IL-1β+10μg/mL ABS)及ABS高剂量组(10 ng/mL IL-1β+30μg/mL ABS),干预24 h。CCK-8法检测细胞活力,采用Tunel法和流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(B-cell lymphoma-2-associated X protein,Bax)、天冬氨酸蛋白水解酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)、B细胞淋巴瘤-xl(B-cell lymphoma-xl,Bcl-xl)、环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinase-3,MMP-3)和血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-5(recombinant a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin-5,ADAMTS-5)蛋白表达情况。结果与正常组比较,模型组NPC活力显著下降(P<0.01),凋亡率增加(P<0.01),Bax、Caspase-3、COX-2、MMP-3和ADAMTS-5蛋白表达升高(P<0.05),Bcl-xl蛋白表达降低(P<0.05);与模型组比较,不同浓度的ABS处理后,NPC活力显著上升(P<0.05),凋亡率减少(P<0.05),Bax、Caspase-3、COX-2、MMP-3和ADAMTS-5蛋白表达降低(P<0.05),Bcl-xl蛋白表达升高(P<0.05)。结论ABS可以通过抑制由IL-1β诱导引起的NPC凋亡、炎症反应、ECM降解,促进细胞增殖和活性,对NPC产生保护作用,其机制可能与抑制Bax、Caspase-3、ADAMTS-5、MMP-3及COX-2表达,促进Bcl-xl表达相关。

关键词：炎性损伤牛膝总皂苷髓核细胞细胞凋亡椎间盘退行性变性

牛膝总皂苷对兔膝骨关节炎软骨组织形态变化及关节液中IL-1β、TGF-β1含量的影响

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中药新药与临床药理 2016年第3期27卷 321-326页

作者：孙雪莲刘渊周红海广西中医药大学基础医学院广西南宁530001 广西中医药大学骨伤学院广西南宁530001

目的观察牛膝总皂苷(TSA)对兔膝骨关节炎(KOA)软骨组织形态变化及关节液中细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)和转化生长因子β1(TGF-β1)含量的影响。方法将36只新西兰兔,随机分为空白对照组,模型组,阳性对照组(硫酸氨基葡萄糖,60 mg·kg^(... 详细信息

目的观察牛膝总皂苷(TSA)对兔膝骨关节炎(KOA)软骨组织形态变化及关节液中细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)和转化生长因子β1(TGF-β1)含量的影响。方法将36只新西兰兔,随机分为空白对照组,模型组,阳性对照组(硫酸氨基葡萄糖,60 mg·kg^(-1)),牛膝总皂苷高、中、低(200,100,50 mg·kg^(-1))剂量组。采用改良Hulth法复制兔膝骨关节炎模型。药物干预2个月后,采用ELISA法检测各组兔膝关节液中IL-1β、TGF-β1的水平,分别于光镜及透射电镜下观察各组兔关节软骨的组织形态学变化。结果与空白对照组比较,模型组兔膝关节液中IL-1β的含量明显增高(P<0.01),TGF-β1的含量明显降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组IL-1β的含量明显降低(P<0.01),TGF-β1的含量显著增高(P<0.01)。光镜下观察关节软骨组织形态变化,结果表明TSA呈剂量依赖的抑制了软骨组织的退变。各组兔KOA软骨组织结构Mankin评分结果表明,与空白对照组比较,模型组评分明显增加(P<0.01);与模型组比较,各给药组评分明显减少(P<0.05,P<0.01)。透射电镜下观察关节软骨细胞形态学变化,结果表明TSA具有呈剂量依赖的保护软骨细胞的作用。结论 TSA能抑制细胞因子IL-1β的表达,提高转化生长因子TGF-β1的表达,具有保护软骨组织缓解软骨退变的作用。

关键词：牛膝总皂苷膝骨关节炎软骨组织形态白细胞介素1β 转化生长因子β1

牛膝总皂苷在腰椎间盘突出症治疗中的研究进展

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中华骨与关节外科杂志 2022年第2期15卷 150-154页

作者：张嘉麟梁锦前刘宏哲刘向阳张明彦袁龙辉湖南师范大学附属第一医院湖南省人民医院骨科长沙410005 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院骨科北京100730

近年来,由腰椎间盘突出症引起腰痛的人群呈年轻化趋势,药物保守治疗是腰椎间盘突出症的首选治疗方式。对牛膝主要成分牛膝总皂苷(ABS)的相关研究表明,ABS具有抗炎、抗细胞凋亡、保护软骨细胞等作用。同时,ABS在治疗腰椎间盘突出症所引... 详细信息

近年来,由腰椎间盘突出症引起腰痛的人群呈年轻化趋势,药物保守治疗是腰椎间盘突出症的首选治疗方式。对牛膝主要成分牛膝总皂苷(ABS)的相关研究表明,ABS具有抗炎、抗细胞凋亡、保护软骨细胞等作用。同时,ABS在治疗腰椎间盘突出症所引起疼痛方面有着不可忽略的临床疗效。本文综述ABS的作用及其治疗腰椎间盘突出症的相关机制,以期为更好地利用ABS治疗腰椎间盘突出症提供有价值的参考。

关键词：牛膝总皂苷腰椎间盘突出

UHPLC-MS/MS联用微透析法研究牛膝引栀子苷关节靶向在佐剂性关节炎大鼠体内药动学的影响

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中国中药杂志 2019年第2期44卷 364-371页

作者：占翔王文宇傅俊邓然李锋戴学静王言吴虹安徽中医药大学安徽合肥230012 新安医学教育部重点实验室安徽合肥230038 中药复方安徽省重点实验室安徽合肥230012

建立了UHPLC-MS/MS测定栀子苷(GE)和3种牛膝皂苷成分(姜状三七皂苷R1、人参皂苷Ro、竹节参皂苷Ⅳa)在大鼠关节、血液透析液中药物浓度的分析方法,并应用该法研究牛膝总皂苷-栀子苷(ABS-GE)配伍前后在佐剂性关节炎(AA)大鼠体内的药动学过... 详细信息

建立了UHPLC-MS/MS测定栀子苷(GE)和3种牛膝皂苷成分(姜状三七皂苷R1、人参皂苷Ro、竹节参皂苷Ⅳa)在大鼠关节、血液透析液中药物浓度的分析方法,并应用该法研究牛膝总皂苷-栀子苷(ABS-GE)配伍前后在佐剂性关节炎(AA)大鼠体内的药动学过程,以探讨ABS"引药下行"作用的活性部位。AA大鼠模型单用或联用ABS,GE后,微透析探针植入大鼠关节腔及颈静脉血管中收集样品,采用Waters Acquity HSS C_(18)色谱柱分离,以乙腈-0. 1%甲酸水为流动相梯度洗脱,采用电喷雾离子源(ESI),负离子模式扫描,多反应监测模式(MRM)检测上述4种成分。结果显示,大鼠关节及血液透析液中GE、姜状三七皂苷R1、人参皂苷Ro及竹节参皂苷Ⅳa,分别在2～4 000,16～4 096,14～3 584,23～5 888μg·L-1线性良好;上述4种成分精密度、准确度、稳定性及基质效应结果均符合生物样品定量分析要求。ABS与GE联用(60 mg·kg^(-1)+60 mg·kg^(-1))后,使GE的AUCjoint/AUCplasm达到GE单用(60 mg·kg^(-1))的2倍,表明ABS可以提高GE向关节腔靶向分布的程度。同时3种牛膝皂苷成分在关节腔的药动学变化趋势与配伍后GE的变化趋势无显著差别。此外,ABS与GE联用后对AA大鼠足爪肿胀、关节炎指数及关节滑膜病理组织的改善作用均强于GE单用。表明ABS对GE具有靶向引导作用,增加GE在关节腔浓度,并在药效上协同增强。

关键词：牛膝总皂苷栀子苷 UHPLC-MS/MS 微透析药动学

牛膝总皂苷对大鼠急性痛风性关节炎的防治作用及机制研究

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中国临床药理学与治疗学 2017年第9期22卷 966-971页

作者：那莎段陈方圆王璐吕磊陈光亮安徽中医药大学中西医结合学院澳门科技大学中医药学院

目的:研究牛膝总皂苷(total saponin Achyranthes,TSA)对大鼠急性痛风性关节炎(acute gouty arthritis,AGA)的防治作用及其机制。方法:雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,TSA高、中、低剂量组(200、60、20 mg·kg-1·d-1)以及吲哚美辛组(... 详细信息

目的:研究牛膝总皂苷(total saponin Achyranthes,TSA)对大鼠急性痛风性关节炎(acute gouty arthritis,AGA)的防治作用及其机制。方法:雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,TSA高、中、低剂量组(200、60、20 mg·kg-1·d-1)以及吲哚美辛组(5 mg·kg-1·d-1),灌胃给药,每天2次,连续5 d,第3天除正常组外,大鼠踝关节腔内注射尿酸钠溶液,测定大鼠关节肿胀度,48 h后处死大鼠,检测大鼠肿胀关节浸出液IL-1β、IL-18、IL-6水平,以及踝关节病理组织学,免疫组化法检测大鼠踝关节IL-1β的表达,Western blot法检测滑膜组织中NALP3(NACHT,LRR and PYD domains-containing protein 3)炎性体相关蛋白变化。结果:模型组大鼠关节显著肿胀,活动减少,关节浸出液IL-1β、IL-6和IL-18水平显著增高,关节滑膜组织增生,炎性细胞浸润明显,IL-1β蛋白表达增加,滑膜组织NALP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、caspase-1前体和活性形式蛋白表达增高。TSA高、中剂量及吲哚美辛组大鼠上述指标均不同程度改善。结论:TSA对AGA有防治作用,其机制可能是抑制NALP3炎性体装配和激活以及抑制炎性细胞因子的表达。

关键词：牛膝总皂苷急性痛风性关节炎防治作用机制