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牛结核分枝杆菌Mce4E蛋白对牛肺泡巨噬细胞iNOs、TNF-α、IL-6和IL-12表达的影响

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中国农业大学学报 2007年第1期12卷 1-6页

作者：徐广贤赵德明周向梅尹晓敏杨建民中国农业大学动物医学院/国家动物海绵状脑病实验室北京100094

探讨Mce4E蛋白在牛结核分枝杆菌致病机理中的作用。以Mce4E蛋白刺激肺泡巨噬细胞24和48h后,MTT检测分析表明,Mce4E蛋白对巨噬细胞的活性有显著的抑制作用(P0.05)。Mce4蛋白能够促使肺泡巨噬细胞分泌炎性细胞因子,并对肺泡巨噬细胞有抑... 详细信息

探讨Mce4E蛋白在牛结核分枝杆菌致病机理中的作用。以Mce4E蛋白刺激肺泡巨噬细胞24和48h后,MTT检测分析表明,Mce4E蛋白对巨噬细胞的活性有显著的抑制作用(P牛结核分枝杆菌纯化蛋白衍生物(Purified Protein Derivative of ***,MbPPD)、卡介苗(Bacille Calmette Guerin,BCG)和刀豆蛋白A(con-canavalin A,ConA)分别刺激肺泡巨噬细胞48h后,real-time PCR方法检测显示,Mce4E蛋白能够促使牛肺泡巨噬细胞TNF-α和IL-6 mRNA的表达上调(P肺泡巨噬细胞iNO的mRNA表达(P0.05)。Mce4蛋白能够促使肺泡巨噬细胞分泌炎性细胞因子,并对肺泡巨噬细胞有抑制作用,证实Mce4蛋白在分枝杆菌中具有重要的作用。

关键词：牛结核分枝杆菌 Mce4E蛋白牛肺泡巨噬细胞 real—time PCR

抗胰岛素蛋白(resistin)促进体外培养的牛肺泡巨噬细胞炎症因子的产生及其机制

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细胞与分子免疫学杂志 2018年第8期34卷 673-677页

作者：阳明贤左之才李碧梁爽苟丽萍任志华马晓平四川农业大学动物医学院环境公害与动物疾病四川省高校重点实验室动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川温江611130

目的探讨抗胰岛素蛋白(resistin)与过氧化物酶体激活物受体γ(PPARγ)的关系及其促炎效应。方法采用100 ng/m L牛resistin诱导牛肺泡巨噬细胞0、1. 5、3、6、12、24 h,采用实时荧光定量PCR检测牛肺泡巨噬细胞PPARγ、核因子κB(NF-κB)... 详细信息

目的探讨抗胰岛素蛋白(resistin)与过氧化物酶体激活物受体γ(PPARγ)的关系及其促炎效应。方法采用100 ng/m L牛resistin诱导牛肺泡巨噬细胞0、1. 5、3、6、12、24 h,采用实时荧光定量PCR检测牛肺泡巨噬细胞PPARγ、核因子κB(NF-κB)、resistin的mRNA水平,Western blot法检测PPARγ、NF-κB蛋白的表达变化,ELISA检测培养细胞上清液促炎细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平。结果 Resistin处理1. 5 h后,牛肺泡巨噬细胞PPARγmRNA水平显著降低,且存在时间依赖效应; NF-κB、resistin的mRNA水平在6 h后显著升高,12 h达到峰值; PPARγ蛋白水平在12 h显著降低,NF-κB蛋白在12 h显著升高; IL-1β、TNF-α于1. 5 h后呈时间依赖效应极显著升高。结论 Resistin能促进牛肺泡巨噬细胞产生IL-1β和TNF-α等炎症因子,这可能与抑制PPARγ和激活NF-κB途径有关。

关键词：牛抗胰岛素蛋白牛肺泡巨噬细胞过氧化物酶体激活物受体γ(PPARγ) 核因子κB(NF-κB) 促炎细胞因子

牛分支杆菌Mce4A蛋白对牛肺泡巨噬细胞iNOS、TNF-α、IL-6和IL-12表达的影响

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中国兽医学报 2008年第6期28卷 652-656页

作者：徐广贤杨建民周向梅尹晓敏赵德明中国农业大学动物医学院

牛分支杆菌侵入巨噬细胞的机制,主要是由哺乳动物细胞侵袭蛋白(Mammalian cell-entry proteins,Mce)介导的,在牛分支杆菌的致病机理中具有重要的作用。为了探讨Mce4A蛋白在牛分支杆菌致病机理中的作用,用不同浓度的重组Mce4A蛋白刺激肺... 详细信息

牛分支杆菌侵入巨噬细胞的机制,主要是由哺乳动物细胞侵袭蛋白(Mammalian cell-entry proteins,Mce)介导的,在牛分支杆菌的致病机理中具有重要的作用。为了探讨Mce4A蛋白在牛分支杆菌致病机理中的作用,用不同浓度的重组Mce4A蛋白刺激肺泡巨噬细胞,结果显示,Mce4A蛋白抑制巨噬细胞的活性;用重组Mce4A蛋白、MtbPPD、MbPPD和BCG刺激肺泡巨噬细胞,结果表明,Mce4A蛋白促使肺泡巨噬细胞TNF-α、i NOS和IL-6的表达上调,而对IL-12的表达没有影响。MbPPD和BCG促使肺泡巨噬细胞TNF-α、i NOS、IL-6和IL-12的表达上调;MtbPPD促使肺泡巨噬细胞TNF-α、IL-6和IL-12的表达上调,但是对i NOS的表达却没有影响。由此可见,Mce4A蛋白能够促使巨噬细胞分泌炎性细胞因子,促使机体发生炎性反应,在宿主细胞免疫应答反应中具有重要的作用。

关键词：牛分支杆菌 Mce4A蛋白牛肺泡巨噬细胞 real-time PCR

牛抵抗素对牛肺泡巨噬细胞TLR4/MyD88非依赖信号通路基因表达的影响

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浙江农业学报 2019年第3期31卷 379-383页

作者：阳明贤左之才李碧王宇四川农业大学动物医学院环境公害与动物疾病四川省高校重点实验室动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川成都611130

旨在探究牛抵抗素通过TLR4/MyD88非依赖信号通路诱发牛肺泡巨噬细胞的相关炎症反应机理。使用100 ng·mL^(-1)终浓度牛抵抗素诱导牛肺泡巨噬细胞,分别在0、1.5、3.0、6.0、12.0、24.0 h时采用qRT-PCR检测TLR4/MyD88非依赖信号通路相关基... 详细信息

旨在探究牛抵抗素通过TLR4/MyD88非依赖信号通路诱发牛肺泡巨噬细胞的相关炎症反应机理。使用100 ng·mL^(-1)终浓度牛抵抗素诱导牛肺泡巨噬细胞,分别在0、1.5、3.0、6.0、12.0、24.0 h时采用qRT-PCR检测TLR4/MyD88非依赖信号通路相关基因(TLR4、TRAM、NF-κB)mRNA水平表达量,通过ELISA法检测下游IL-6、1L-1β、TNF-α等促炎细胞因子表达水平。结果显示,100 ng·mL^(-1)牛抵抗素处理牛肺泡巨噬细胞后,TLR4、TRAM、NF-κB基因表达量于6.0 h时极显著上调(P细胞因子于1.5 h表达量极显著上调(P牛肺泡巨噬细胞后,可激活TLR4/MyD88非依赖信号通路,通过信号传递,释放大量促炎细胞因子,引起肺部炎症。

关键词：牛抵抗素牛肺泡巨噬细胞 TLR4/MyD88非依赖信号通路促炎细胞因子

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牛肺泡巨噬细胞微小RNA的克隆与鉴定

牛肺泡巨噬细胞微小RNA的克隆与鉴定

牛分枝杆菌mce4E蛋白对牛肺泡巨噬细胞iNOS、TNF-α、IL-6和IL-12表达的影响

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会

作者：徐广贤张艳李娟贾浩王玉炯宁夏大学生命科学学院

MicroRNA(miRNA)是一类长约19-26个核苷酸的内源性非编码单链小分子RNA,miRNA表达具有严格的时间和组织特异性,其异常表达将会导致生理的异常和疾病的产生。为了研究miRNAs在牛肺泡巨噬细胞抗菌机制中的作用,我们构建了牛肺泡巨噬细胞mi... 详细信息

MicroRNA(miRNA)是一类长约19-26个核苷酸的内源性非编码单链小分子RNA,miRNA表达具有严格的时间和组织特异性,其异常表达将会导致生理的异常和疾病的产生。为了研究miRNAs在牛肺泡巨噬细胞抗菌机制中的作用,我们构建了牛肺泡巨噬细胞miRNA cDNA文库,共从438个克隆中,筛选出22个miRNAs,其中有19个miRNAs在牛的miRBase数据库中没有发现,但是有8个miRNAs与人和(或)鼠中的序列完全同源,因此,我们将它们命名为:Bta-miR-141,Bta-miR-187,Bta-miR-191,Bta-miR-448,Bta-miR-589,Bta-miR-873,Bta-miR-463和Bta-miR-562。另外有11个miRNAs在所有miRBase数据库中都没有发现,有待进一步研究。这些数据为研究miRNAs调控牛肺泡巨噬细胞抗菌机制奠定了基础。

关键词： MicroRNA 牛肺泡巨噬细胞克隆鉴定

来源： cnki会议评论

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牛分枝杆菌mce4E蛋白对牛肺泡巨噬细胞iNOS、TNF-α、IL-6和IL-12...

牛分枝杆菌Mce4A和Mce4E对牛肺泡巨噬细胞凋亡的作用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会

作者：徐广贤赵德明周向梅尹晓敏杨建民中国农业大学动物医学院国家动物传染性海绵状脑病实验室中国农业大学动物医学院国家动物传染性海绵状脑病实验室中国农业大学动物医学院国家动物传染性海绵状脑病实验室中国农业大学动物医学院国家动物传染性海绵状脑病实验室中国农业大学动物医学院国家动物传染性海绵状脑病实验室

越来越多的研究证实mce家族蛋白与结核杆菌的毒力有关,为了探讨mce4E蛋白在牛分支杆菌致病机理中的作用,我们用重组表达的mce4E蛋白、MtbPPD、MbPPD、BCG和 ConA刺激肺泡巨噬细胞48小时后,用real-time PCR检测牛肺泡巨噬细胞TNF-α、iNO... 详细信息

越来越多的研究证实mce家族蛋白与结核杆菌的毒力有关,为了探讨mce4E蛋白在牛分支杆菌致病机理中的作用,我们用重组表达的mce4E蛋白、MtbPPD、MbPPD、BCG和 ConA刺激肺泡巨噬细胞48小时后,用real-time PCR检测牛肺泡巨噬细胞TNF-α、iNO、 IL-6、IL-12细胞因子mRNA的表达量的变化,与空白对照组相比,mce4E、MtbPPD、MbPPD、 BCG、ConA均能够使巨噬细胞的TNF-α mRNA表达上调(P巨噬细胞 iNO的mRNA表达(P巨噬细胞iNO的mRNA表达没有影响,MbPPD 和BCG促使巨噬细胞iNO的mRNA表达上调(P巨噬细胞的IL-12表达没有影响,MtbPPD、MbPPD和BCG能够促使巨噬细胞IL-12 mRNA表达上调(P牛肺泡巨噬细胞48小时后,用MTT检测肺泡巨噬细胞的存活率,结果表明,与空白组比较各剂量的mce4E蛋白对巨噬细胞的活性都有显著的抑制作用(P巨噬细胞的活性有显著的抑制作用。

关键词：牛分枝杆菌 mce4E蛋白牛肺泡巨噬细胞 real-time PCR

来源： cnki会议评论

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牛分枝杆菌Mce4A和Mce4E对牛肺泡巨噬细胞凋亡的作用

BCG感染牛肺泡巨噬细胞的转录组测序和分析

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十五次、中国病理生理学会动物病生专业委员会第十四次学术讨论会

牛结核病(Bovine tuberculosis)是由牛结核分枝杆菌(Mycobacterium bovis)引起的一种慢性、消耗性人兽共患传染病。牛结核的致病机理主要与牛分枝杆菌在肺泡巨噬细胞中的存活/侵入能力有关, 牛结核分枝杆菌侵入巨噬细胞的机制,主要是由... 详细信息

牛结核病(Bovine tuberculosis)是由牛结核分枝杆菌(Mycobacterium bovis)引起的一种慢性、消耗性人兽共患传染病。牛结核的致病机理主要与牛分枝杆菌在肺泡巨噬细胞中的存活/侵入能力有关, 牛结核分枝杆菌侵入巨噬细胞的机制,主要是由哺乳动物细胞侵袭蛋白(Mammalian cell-entry proteins, Mce)介导的,越来越多的研究证实 Mce 家族蛋白与分枝杆菌的毒力有关。巨噬细胞发生凋亡后可杀

关键词：牛结核分枝杆菌 Mce4A蛋白 Mce4E蛋白牛肺泡巨噬细胞细胞凋亡

来源： cnki会议评论

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吉林大学学报（医学版） 2019年第1期45卷 12-16,217页

作者：徐金瑞吕翠萍杨易周彦兵骆佳王玉炯宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室宁夏银川750021

目的:通过卡介苗(BCG)感染牛肺泡巨噬细胞(BAM)的转录组测序及生物信息学分析,揭示差异表达的基因和长链非编码RNA (lncRNA),为巨噬细胞抗结核分枝杆菌感染的免疫调控机制研究提供理论依据。方法:采用肺脏灌洗离心法收集并培养BAM,分为... 详细信息

目的:通过卡介苗(BCG)感染牛肺泡巨噬细胞(BAM)的转录组测序及生物信息学分析,揭示差异表达的基因和长链非编码RNA (lncRNA),为巨噬细胞抗结核分枝杆菌感染的免疫调控机制研究提供理论依据。方法:采用肺脏灌洗离心法收集并培养BAM,分为感染组和未感染组,感染组经BCG感染后12h,利用转录组测序技术(RNA-Seq)检测感染组和未感染组BAM mRNA表达谱及lncRNA表达谱,并进行生物信息学相关分析。结果:与未感染组比较,感染组BAM差异表达的lncRNAs共有119个(P细胞介素6(IL-6)、白细胞介素17 (IL-17)和白细胞介素23A (IL-23A)等促炎因子表达上调。lncRNA靶基因预测,差异表达的lncRNA参与转化生长因子β(TGF-β)信号通路及ABC转运体信号通路的调控(P细胞产生强烈的免疫反应,引起lncRNA和mRNA表达谱的改变。

关键词：卡介苗牛肺泡巨噬细胞转录组测序长链非编码RNA

β-羟丁酸对牛肺泡巨噬细胞促炎细胞因子释放的影响研究

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浙江农业学报 2022年第2期34卷 293-299页

作者：夏青才冬杰方静王之盛邓俊良易军左之才四川农业大学动物医学院四川成都611130 四川农业大学动物营养研究所四川成都611130 四川省畜牧科学研究院四川成都610066

β-羟丁酸(β-hydroxybutyrate,BHBA)除了能作为一种能源物质外,还可作为信号分子诱导肝细胞、子宫内膜细胞发生炎症反应,但其是否也能促使牛肺泡巨噬细胞(bovine alveolar macrophages,BAMs)发生炎症反应尚不清楚。利用不同浓度BHBA分... 详细信息

β-羟丁酸(β-hydroxybutyrate,BHBA)除了能作为一种能源物质外,还可作为信号分子诱导肝细胞、子宫内膜细胞发生炎症反应,但其是否也能促使牛肺泡巨噬细胞(bovine alveolar macrophages,BAMs)发生炎症反应尚不清楚。利用不同浓度BHBA分别与BAMs作用12、24 h,CCK-8法检测BAMs的存活率;用终浓度为4 mmol·L^(-1) BHBA与BAMs作用0、3、6、12、24 h,以及用0、1、2、4 mmol·L^(-1) BHBA分别与BAMs作用12 h,qRT-PCR检测GPR109A、p38MAPK、NF-κB、PPARγmRNA表达量,ELISA检测细胞上清中1L^(-1)β、IL-6、TNF-α等的浓度。结果表明,1、2、4 mmol·L^(-1) BHBA作用对BAMs的存活率没有不良影响;在一定时间浓度范围内,GPR109A、p38MAPK和NF-κB mRNA表达量,1L^(-1)β、IL-6、TNF-α等浓度随时间-剂量依赖变化(P细胞因子的分泌和释放,导致其发生炎症反应。

关键词： β-羟丁酸牛肺泡巨噬细胞促炎细胞因子

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