检索结果-南通市图书馆

作者：朱嘉皓杭州师范大学

学位级别：硕士

第一部分TGF-β1对炎症下人牙周膜成纤维细胞生物学性能及细胞因子表达影响目的:探讨转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)对牙龈卟啉单胞菌来源脂多糖(Lipopolysaccharide from Porphyromonas gingivalis,Pg-LPS)刺激下人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblast,hPDLFs)的生物学性能影响以及炎症细胞因子表达。方法:获取hPDLFs并进行免疫组化鉴定,qRT-PCR与CCK-8法确定Pg-LPS炎症刺激浓度,实验分成空白对照组以及1、10、100ng/mL低中高三组浓度的TGF-β1对Pg-LPS刺激下hPDLFs进行细胞学实验,CCK-8检测72小时细胞增殖情况;划痕实验与Transwell小室实验检测24小时hPDLFs细胞迁移能力;流式细胞术检测72小时hPDLFs的细胞周期;qRT-PCR 检测 72 小时 hPDLFs 的转录因子叉头盒p3(Forkhead/winged helix transcriptional factor p3,Foxp3)、白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)及 EB 病毒诱导基因 3(Epstein-Barrvirus-induced gene 3,EBI3)mRNA 表达;western blot 检测 72 小时 hPDLFs 的 Foxp3、IL-6 及 EBI3蛋白表达。结果:免疫组化鉴定显示抗波形丝蛋白阳性及抗角蛋白阴性;Pg-LPS浓度为100μg/mL时,hPDLFs中IL-6mRNA表达相比对照组上升(P<0.05)且细胞增殖能力下降(P<0.05);10ng/mL和100ng/mL TGF-β1时能提高细胞在100μg/mL Pg-LPS刺激下的增殖(P<0.05);TGF-β1能促进hPDLFs在100μg/mL Pg-LPS 刺激下的迁移能力(P<0.05);1、10、100ng/mL 的 TGF-β1可加快hPDLFs在100μg/mL Pg-LPS刺激下的细胞周期(P<0.05);1、10、100ng/mL TGF-β1 可抑制 IL-6 基因和蛋白表达量(P<0.05);1、10ng/mL TGF-β1可提高EBI3基因及蛋白表达量(P<0.05);1、10ng/mL TGF-β1可提高Foxp3基因表达量,10ng/mL TGF-β 1可提高Foxβ3蛋白表达量(P<0.05)。结论:TGF-β1可以促进炎症下hPDLFs的增殖及迁移能力,上调EBI3抑制炎症,此过程可能与Foxp3表达有关,揭示新的炎症调控机制。第二部分病例展示:牙周序列治疗的数字化应用目的:观察数字化辅助应用对牙周序列治疗的治疗效果方法:选择5例就诊于我院牙周病诊疗中心被诊断为Ⅲ期/Ⅳ期牙周炎患者。根据患者不同的牙周病变情况,应用牙周内窥镜进行牙周基础治疗。依据后牙区根分叉病变情况采用相应的手术进行治疗;根据前牙区松动度情况,采取数字化口腔扫描设计及3D打印牙周夹板进行固定。在患者的牙周治疗过程中,定期随访复查,记录患者治疗前后的口内照片、全口牙周探诊记录表以及根尖片来评估牙周治疗效果。结果:5例患者经过牙周内窥镜下的基础治疗后,相比就诊前牙周炎症明显好转,对牙周探诊深度在6mm以上的位点具有良好的治疗效果,可一定程度上避免牙周手术治疗,但后牙区根分叉病变Ⅲ度位点仍需手术治疗。前牙松动度在Ⅰ度患牙经过3D打印牙周夹板可有效固定,无不适感;松动度Ⅱ度以上且伴随牙周牙髓联合病变患牙通过意向性再植同期3D打印牙周夹板固定可有效保留松动前牙。结论:各类数字化应用于牙周序列治疗,可有效提高牙周治疗的疗效且减轻患者不适感,为更加有效的保留天然牙提供新的治疗方案。

关键词：转化生长因子-β1 牙龈卟啉单胞菌来源脂多糖 IL-35亚基 Foxp3 IL-6 EBI3

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TGF⁃β1对炎症状态下人牙周膜成纤维细胞的调控作用

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口腔疾病防治 2023年第2期31卷 94-103页

作者：朱嘉皓芦婷钟良军杭州师范大学口腔医学院浙江杭州310000 杭州师范大学附属医院口腔医学中心浙江杭州310000

目的探讨转化生长因子⁃β1(transforming growth factor⁃β1,TGF⁃β1)对在牙龈卟啉单胞菌来源脂多糖(lipopolysaccharide from Porphyromonas gingivalis,Pg⁃LPS)刺激模拟炎症状态下的人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblasts,hPDLFs)的调控作用。方法获取hPDLFs并进行免疫组化鉴定,通过qRT⁃PCR与CCK⁃8确定Pg⁃LPS的刺激浓度。将hPDLFs分成4组:空白对照组,单纯100μg/mL Pg⁃LPS;低浓度组,1 ng/mL TGF⁃β1+100μg/mL Pg⁃LPS;中浓度组,10 ng/mL TGF⁃β1+100μg/mL Pg⁃LPS;高浓度组100 ng/mL TGF⁃β1+100μg/mL Pg⁃LPS。CCK⁃8检测细胞增殖情况;划痕实验与Transwell小室实验检测hPDLFs细胞迁移能力;流式细胞术检测hPDLFs的细胞周期;qRT⁃PCR检测hPDLFs的转录因子叉头盒p3(forkhead/winged helix transcription⁃al factor p3,Foxp3)、白细胞介素6(interleukin⁃6,IL⁃6)及EB病毒诱导基因3(Epstein⁃Barrvirus⁃induced gene 3,EBI3)mRNA表达;Western blot检测hPDLFs的Foxp3、IL⁃6及EBI3蛋白表达。结果免疫组化鉴定显示抗波形丝蛋白阳性及抗角蛋白阴性;Pg⁃LPS浓度为100μg/mL时,hPDLFs中IL⁃6 mRNA表达相比空白对照组显著上升(P<0.0001)且细胞增殖能力下降(P<0.0001),所以选择100μg/mL Pg⁃LPS用于模拟炎症状态。10、100 ng/mL TGF⁃β1能提高炎症状态下hPDLFs的增殖能力(P<0.0001);1、10、100 ng/mL TGF⁃β1能促进炎症状态下hPDLFs的迁移能力(P<0.0001);1、10、100 ng/mL TGF⁃β1可加快炎症状态下hPDLFs的细胞周期(P<0.0001);1、10、100 ng/mL TGF⁃β1可抑制炎症状态下hPDLFs的IL⁃6基因和蛋白表达量(P<0.0001),1、10 ng/mL TGF⁃β1可提高炎症状态下hPDLFs的EBI3基因及蛋白表达量(P<0.0001),1、10 ng/mL TGF⁃β1可提高炎症状态下hPDLFs的Foxp3基因表达量,10 ng/mL TGF⁃β1可提高Foxp3蛋白表达量(P<0.05)。结论TGF⁃β1可促进炎症状态下hPDLFs的增殖及迁移能力、上调EBI3表达,可能与转录因子Foxp3表达有关。

关键词：转化生长因子⁃β1 牙龈卟啉单胞菌来源脂多糖转录因子叉头盒p3 白细胞介素6 IL⁃35亚基 EB病毒诱导基因3 牙周炎人牙周膜成纤维细胞细胞周期免疫治疗

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