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牙鲆甲状腺激素受体TRαA介导甲状腺激素调控的靶基因鉴定

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水生生物学报 2020年第2期44卷 275-282页

作者：谢燕付元帅施志仪季文瑶陶家康上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室上海201306

为了鉴定牙鲆甲状腺激素受体TRs介导甲状腺激素调控的靶基因,研究采用RT-PCR克隆了TRαA基因的CDS区,并构建了p3×Flag-TRαA重组真核表达载体;该重组质粒转染HEK293T细胞后,RT-PCR、实时定量PCR与Western blot检测均表明牙鲆TRαA在哺... 详细信息

为了鉴定牙鲆甲状腺激素受体TRs介导甲状腺激素调控的靶基因,研究采用RT-PCR克隆了TRαA基因的CDS区,并构建了p3×Flag-TRαA重组真核表达载体;该重组质粒转染HEK293T细胞后,RT-PCR、实时定量PCR与Western blot检测均表明牙鲆TRαA在哺乳动物蛋白表达系统中成功转录并翻译;且重组质粒转染的细胞裂解液通过G1亲和层析柱纯化、过滤除菌可得到纯的融合蛋白3×Flag-TRαA,然后双荧光素酶报告实验通过在HEK293T细胞中共转染p3×Flag-TRαA和含候选靶启动子的报告基因表达载体pGL3-Pro-atoh8-1517/1333/708,表明TRαA受体结合在atoh8基因启动子区–1497—–688特异的2个TRE识别序列来调控该基因的转录,即atoh8是TRαA介导甲状腺激素直接调控的靶基因。研究为深入探究甲状腺激素受体TRαA介导甲状腺激素调控的信号通路提供了基础依据。

关键词：牙鲆甲状腺激素甲状腺激素受体TRαA 靶基因

海水中总有机碳(TOC)对牙鲆铜、铅、镉吸收的影响

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农业工程学报 2004年第3期20卷 234-238页

作者：赵元凤吕景才吴益春宋晓阳王凡刘长发邢殿楼刘靖农业部海洋水产增养殖学与生物技术重点开放实验室大连116023 大连水产学院生命科学与技术学院大连116023

该文研究了海水中Cu、Pb、Cd浓度分别为0.5mg/L时,总有机碳(TOC)浓度、种类对牙鲆(Paralichthysolivaceus)内脏、肌肉、鳃组织Cu、Pb、Cd蓄积的影响。结果表明:当海水TOC种类相同时,随TOC浓度升高,牙鲆内脏、肌肉、鳃组织Cu、Pb、Cd蓄... 详细信息

该文研究了海水中Cu、Pb、Cd浓度分别为0.5mg/L时,总有机碳(TOC)浓度、种类对牙鲆(Paralichthysolivaceus)内脏、肌肉、鳃组织Cu、Pb、Cd蓄积的影响。结果表明:当海水TOC种类相同时,随TOC浓度升高,牙鲆内脏、肌肉、鳃组织Cu、Pb、Cd蓄积量均明显下降;当海水TOC浓度相同时,孔石莼分泌物比牙鲆分泌物更能降低牙鲆各组织Cu、Pb、Cd蓄积量。研究表明:孔石莼、牙鲆分泌物均能降低Cu、Pb、Cd的生物有效性;TOC浓度、种类变化对牙鲆各组织Cu、Pb、Cd蓄积分配均无影响,重金属含量大小顺序均为:内脏>鳃>肌肉。内脏团、肌肉中3种重金属蓄积量大小顺序为Cu>Pb>Cd;鳃中3种重金属蓄积量顺序为Pb>Cu>Cd。

关键词：总有机碳(TOC) 牙鲆重金属蓄积量

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牙鲆抗淋巴囊肿病毒免疫球蛋白的纯化

高技术通讯 2000年第9期10卷 14-18页

作者：曲凌云孙修勤战文斌张进兴国家海洋局第一海洋研究所青岛266061

采用饱和硫酸铵沉淀、DEAE 52纤维素离子交换柱层析和Sepharose 6B凝胶过滤的方法 ,首次得到了纯化的牙鲆抗淋巴囊肿病毒IgM。该IgM的重链与轻链分子量分别为 74KD和 2 2KD。

关键词：牙鲆淋巴囊肿病毒疫苗

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牙鲆淋巴囊肿病毒的病原性与免疫原性

高技术通讯 2000年第9期10卷 19-21页

作者：孙修勤曲凌云张进兴国家海洋局第一海洋研究所青岛266061

用病牙鲆体表肿瘤纯化的病毒 ,对健康牙鲆进行人工感染实验。感染 6 0天后 ,供试牙鲆再现了自然发病鱼的症状。该结果证明 ,从病鱼囊肿物中纯化的病毒 ,确系引发淋巴囊肿病的病原。免疫学实验显示 ,淋巴囊肿病毒使被感染鱼产生了抗体Ig... 详细信息

用病牙鲆体表肿瘤纯化的病毒 ,对健康牙鲆进行人工感染实验。感染 6 0天后 ,供试牙鲆再现了自然发病鱼的症状。该结果证明 ,从病鱼囊肿物中纯化的病毒 ,确系引发淋巴囊肿病的病原。免疫学实验显示 ,淋巴囊肿病毒使被感染鱼产生了抗体IgM。在实验期间内 ,IgM随着时间的延长而增加。

关键词：淋巴囊肿病毒感染病原性免疫原性牙鲆

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牙鲆“鲆优2号”试养效果评估

北方农业学报 2022年第3期50卷 104-110页

作者：宋立民刘肖莲贾磊蔡超姚学良薄其康郝俊丁子元天津市水产研究所天津300221

【目的】改良天津市养殖牙鲆种质,促进当地渔业经济效益和生态效益的提高。【方法】2018年9月—2019年5月对“鲆优2号”牙鲆进行试养,采用性状比较的方法,分析“鲆优2号”牙鲆的生长、体型、抗病和单位增重所产氮、磷量。【结果】“鲆优... 详细信息

【目的】改良天津市养殖牙鲆种质,促进当地渔业经济效益和生态效益的提高。【方法】2018年9月—2019年5月对“鲆优2号”牙鲆进行试养,采用性状比较的方法,分析“鲆优2号”牙鲆的生长、体型、抗病和单位增重所产氮、磷量。【结果】“鲆优2号”牙鲆绝对增重率高于普通牙鲆19.41%,绝对增长率高于普通牙鲆16.67%;“鲆优2号”牙鲆平均肥满度低于普通牙鲆22.87%,全长/体长值低于普通牙鲆0.89%,其他体型参数无差别;“鲆优2号”牙鲆体重、全长、体长、头长、体高测量数据的变异系数,分别低于普通牙鲆8.07%、16.03%、16.07%、30.31%、27.88%;“鲆优2号”牙鲆患腹水病的死亡率低于普通牙鲆73.95%,患淋巴囊肿病的死亡率低于普通牙鲆67.14%,试验期间“鲆优2号”牙鲆的终成活率高于普通牙鲆31.07%;试验鱼体重每增长1 kg,“鲆优2号”牙鲆尾水中新增铵态氮、总氮、可溶性磷酸盐、总磷的含量比普通牙鲆分别少48.56%、35.37%、29.68%、37.36%。【结论】“鲆优2号”牙鲆在生长、体型差异以及抗病和单位增重所产氮、磷量等性能方面较普通牙鲆优良,适合在天津市推广。

关键词：牙鲆生长参数体型参数抗病性尾水氮磷

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牙鲆肠道益生菌的分离筛选及益生效果评价

天津农业科学 2023年第8期29卷 36-43页

作者：王雪惠王祯辉董学旺郝俊耿绪云孙金生天津市水产研究所天津300221 天津市海发珍品实业发展有限公司天津300452 天津市动物疫病预防控制中心天津300402 天津师范大学生命科学学院天津市动植物抗性重点实验室天津300387

为获得安全有效的牙鲆益生菌,从牙鲆(Paralichthys olivaceus)肠道分离到94株菌,经溶血性、消化酶活力测试筛选出3株候选菌:Y1、Y5、I66,进行16S rDNA分子鉴定,分别为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloid... 详细信息

为获得安全有效的牙鲆益生菌,从牙鲆(Paralichthys olivaceus)肠道分离到94株菌,经溶血性、消化酶活力测试筛选出3株候选菌:Y1、Y5、I66,进行16S rDNA分子鉴定,分别为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloidophilus)和蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)。经安全性检验后,开展为期4周的投喂试验,分别将3株菌以1×10^(8) CFU·g^(-1)添加到饲料中投喂牙鲆,为3个试验组,同时设对照组(C),定期检测各组鱼血液先天免疫指标。结果发现,与对照组相比,试验组鱼淋巴细胞吞噬百分比显著升高(P牙鲆安全有效的益生菌,能促进先天免疫,提高抗病力,具有推广应用优势和潜力。

关键词：牙鲆益生菌酶活先天免疫抗病力

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牙鲆微卫星标记的筛选及群体遗传结构分析

遗传 2010年第10期32卷 1057-1064页

作者：王蕾张立冬万玉美谭照君孙效文大连海洋大学生命科学与技术学院大连116023 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所哈尔滨150070 中国水产科学研究院水产生物应用基因组研究中心北京100141

采用生物素-磁珠吸附微卫星与质粒二次检测相结合的方法克隆牙鲆微卫星,并利用所得到的引物分析野生群体遗传结构。共获得2805个阳性克隆,测序得到3120个含微卫星的序列。其中完美型、非完美型和混合型分别占57.97%、7.25%和34.78%。用P... 详细信息

采用生物素-磁珠吸附微卫星与质粒二次检测相结合的方法克隆牙鲆微卫星,并利用所得到的引物分析野生群体遗传结构。共获得2805个阳性克隆,测序得到3120个含微卫星的序列。其中完美型、非完美型和混合型分别占57.97%、7.25%和34.78%。用Primer3.0软件设计牙鲆微卫星引物,从中筛选出具稳定多态性的30对,分析中国黄海、渤海海域4个不同海区牙鲆野生群体(大连、北戴河、丹东、青岛)遗传结构。结果显示:有效等位基因数为3.93～9.94,平均为6.95;观测杂合度为0.532～0.895,平均为0.753;期望杂合度为0.635～0.902,平均为0.820;Hardy-Weinberg平衡指数(d)的变化范围为-0.247～0.512,其中7个位点表现为杂合子过剩(d>0),其余位点表现为杂合子缺失(d<0)。聚类分析显示:4个群体聚为两类,大连与丹东聚为一类,北戴河与青岛聚为一类。

关键词：牙鲆微卫星遗传结构

牙鲆在保藏过程中影响ATP关联化合物降解的因素

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水产学报 2016年第7期40卷 1114-1122页

作者：吴依蒙陈舜胜今野久仁彦上海海洋大学食品学院日本北海道大学水产学部

为了深入了解牙鲆体内ATP关联化合物的变化,尤其是肌苷酸(IMP)降解这一限速步骤,利用高效液相色谱法(high efficiency liquid chromatography,HPLC)测定不同保藏条件下牙鲆体内ATP关联化合物和K值变化,并探讨了影响其变化的因素。结果显... 详细信息

为了深入了解牙鲆体内ATP关联化合物的变化,尤其是肌苷酸(IMP)降解这一限速步骤,利用高效液相色谱法(high efficiency liquid chromatography,HPLC)测定不同保藏条件下牙鲆体内ATP关联化合物和K值变化,并探讨了影响其变化的因素。结果显示,0°C保藏条件下牙鲆体内ATP在1 d内迅速降解,产生IMP作为初期的主要积累物质,蓄积一段时间(10 d)后迅速降解为次黄嘌呤(Hx),IMP的降解过程呈现二相性;鱼肉制成鱼糜形态保藏,ATP 0 d时几乎降解完全,但IMP的降解过程仍旧呈现二相性;加入抗菌素的鱼肉中微生物的生长得到有效抑制,此时IMP降解缓慢并且呈线性下降,原本的蓄积过程消失,K值的增长速率也随之减慢;加入Tritonx-100破坏细胞膜结构发现,牙鲆体内IMP的降解速率加快,同时K值的增长速率也随之加快。结果表明,牙鲆的保藏形态影响ATP的降解速率,但几乎不影响其他关联产物的降解变化;保藏后期外源微生物产生的酶与内源酶的叠加作用是导致保藏后期IMP加速降解、从而呈现二相性的原因,微生物是影响ATP关联化合物降解的关键因素;表面活性剂通过改变细胞膜结构也能够影响IMP的降解过程。

关键词：牙鲆 ATP关联化合物外源IMP降解酶 K值

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牙鲆雌核发育研究进展

中国水产科学 2017年第4期24卷 902-912页

作者：刘海金侯吉伦刘奕中国水产科学研究院中国水产科学研究院北戴河中心实验站中国水产科学研究院珠江水产研究所

牙鲆(Paralichthys olivaceus)是一种重要的海水经济鱼类,其雌性生长速度显著快于雄性。因此,生产全雌牙鲆对提高养殖产量和经济效益具有重要意义。雌核发育是一种特殊的有性生殖方式,在这种生殖方式中,灭活的精子进入卵子,激活胚胎发育... 详细信息

牙鲆(Paralichthys olivaceus)是一种重要的海水经济鱼类,其雌性生长速度显著快于雄性。因此,生产全雌牙鲆对提高养殖产量和经济效益具有重要意义。雌核发育是一种特殊的有性生殖方式,在这种生殖方式中,灭活的精子进入卵子,激活胚胎发育,但精核不与卵核融合形成合子,所以雌核发育的个体只具有母本的遗传信息。目前,牙鲆已成为雌核发育技术应用于产业的代表性鱼类。本文对牙鲆人工诱导雌核发育的研究进展进行综述,介绍牙鲆减数分裂雌核发育和有丝分裂雌核发育的诱导方法,以及雌核发育技术在性别控制、克隆制备等育种研究中的应用。最后,作者提出"雌核发育育种体系"构想,并对其在鱼类育种和遗传研究中的应用前景进行展望。

关键词：牙鲆雌核发育双单倍体克隆单交种