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五种牙科合金对小鼠成纤维细胞毒性及凋亡相关基因表达的影响

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中华口腔医学杂志 2009年第8期44卷 497-501页

作者：孟贺韩东战德松中国医科大学口腔医学院口腔材料教研室沈阳110002 中国医科大学口腔医学院修复科沈阳110002

目的研究5种牙科合金浸提液对小鼠成纤维细胞的细胞毒性及调亡相关基因表达的影响，探讨5种牙科合金引起细胞凋亡的可能通路。方法以金合金（A组）、银钯合金（B组）、钴铬合金（C组）、镍铬合金（D组）和铜合金（E组）的浸提液（每组... 详细信息

目的研究5种牙科合金浸提液对小鼠成纤维细胞的细胞毒性及调亡相关基因表达的影响，探讨5种牙科合金引起细胞凋亡的可能通路。方法以金合金（A组）、银钯合金（B组）、钴铬合金（C组）、镍铬合金（D组）和铜合金（E组）的浸提液（每组样本量均为8个）体外培养小鼠成纤维细胞（L929），以含10％胎牛血清的RPMI1640培养基作为阴性对照组（F组）。各组体外培养1929细胞48h，甲基噻唑基四唑（MW）法检测细胞毒性。反转录聚合酶链反应（RT—PCR）法检测各组对1,929细胞凋亡相关基因，即天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）、easpase-8和easpase-9mRNA表达的影响。结果除E组细胞毒性为4级外，其余各组细胞毒性均为0级。各组easpase-3mRNA表达水平由低到高依次为E组（0．474±0．001）、F组（0．527±0．003）、A组（0．528±0.013）、C组（0．615±0．007）、B组（0．673±0．009）、D组（0．803±0．037），除F组与A组差异无统计学意义外，其余各组间差异均有统计学意义（P〈0．05）。各组caspase-9mRNA表达水平由低到高依次为E组（0．532±0．041）、A组（0．574±0．013）、F组（0．578±0．010）、C组（0．617±0．009）、B组（0．703±0．018）、D组（0．811±0．037），除F组与A组差异无统计学意义外，其余各组间差异均有统计学意义（P〈0．05）。各组easpase-8mRNA表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论5种牙科合金中仅铜合金有明显细胞毒性；5种牙科合金浸提液诱导1929细胞凋亡相关基因的表达有差异，除金合金外，另4种牙科合金可能通过线粒体通路诱导细胞凋亡。

关键词：牙科合金细胞凋亡细胞毒性免疫

不同牙科合金材料对龈沟液中某些细胞因子含量的影响

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中国临床康复 2005年第14期9卷 48-49页

作者：何惠明武红艳张春宝贾卫王忠义解放军第四军医大学口腔医院修复科陕西省西安市710032 解放军第四军医大学免疫学教研室陕西省西安市710032

目的:探讨不同牙科合金对局部龈沟液中肿瘤坏死因子α以及白细胞介素6表达的影响。方法:实验于2003-01/08在第四军医大学动物中心实验室完成,在实验犬的口腔中制作全冠(钴铬合金、镍铬合金、金合金、纯钛),在修复后第1个月和第6个月,用W... 详细信息

目的:探讨不同牙科合金对局部龈沟液中肿瘤坏死因子α以及白细胞介素6表达的影响。方法:实验于2003-01/08在第四军医大学动物中心实验室完成,在实验犬的口腔中制作全冠(钴铬合金、镍铬合金、金合金、纯钛),在修复后第1个月和第6个月,用WhatmanI号滤纸采集龈沟液样本。用酶联免疫吸附法测定龈沟液中白细胞介素6和肿瘤坏死因子α的含量。结果:4种全冠对肿瘤坏死因子α的影响,在修复后第1,6个月时钴铬合金、镍铬合金、纯钛与对照组相比有显著增加(P合金和对照组相比差异无显著性意义(P>0.05);仅镍铬合金对肿瘤坏死因子α分泌量的影响在时间上差异有显著性意义(P合金、镍铬合金之间差异无显著性意义(P>0.05),与金合金比较显著增加(P0.05)。而4种全冠都没有引起白细胞介素6分泌量的显著增加(P>0.05)。结论:不同的牙科合金材料对龈沟液中某些细胞因子的含量有影响,从而影响患者的术后康复。

关键词：白细胞介素6 肿瘤坏死因子龈缝液牙科合金动物实验

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变形链球菌对牙科合金耐蚀性的影响

口腔医学研究 2011年第10期27卷 859-861页

作者：褚凤清王国平夏露王培志南京医科大学口腔医学研究所江苏南京210029 南京医科大学附属口腔医院种植中心南京医科大学附属口腔医院修复科

目的:探讨变形链球菌对镍铬合金、钴铬合金和金合金腐蚀性能的影响。方法:将3种牙科合金与变形链球菌在液体培养基中共同培养,以单纯培养基和空白组作为对照,8周后,进行电化学实验和扫描电镜观察。结果:电化学实验结果显示,镍铬、钴铬... 详细信息

目的:探讨变形链球菌对镍铬合金、钴铬合金和金合金腐蚀性能的影响。方法:将3种牙科合金与变形链球菌在液体培养基中共同培养,以单纯培养基和空白组作为对照,8周后,进行电化学实验和扫描电镜观察。结果:电化学实验结果显示,镍铬、钴铬合金的自腐蚀电位绝对值及自腐蚀电流密度值均为培养基对照组低于变形链球菌组及空白对照组,且在变形链球菌组的合金表面不规则破裂孔明显增多。金合金各组自腐蚀电位和电流密度无统计学差异,金合金表面形貌无明显变化。结论:变形链球菌能增加口腔镍铬、钴铬合金的腐蚀倾向与腐蚀速率,但对金合金的影响不明显。

关键词：变形链球菌腐蚀性能牙科合金

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两种牙科合金的微动磨损机理研究

两种牙科合金的微动磨损机理研究

作者：高姗姗四川大学

学位级别：硕士

随着医学技术及材料科学的发展，牙科合金在口腔中的应用日益广泛。口腔修复体中的精密附着体等主要由牙科合金构成，这些部件在口腔内行使功能的时候不可避免的会出现微动损伤。迄今为止，微动摩擦学的研究主要集中在工业研究中，口腔... 详细信息

随着医学技术及材料科学的发展，牙科合金在口腔中的应用日益广泛。口腔修复体中的精密附着体等主要由牙科合金构成，这些部件在口腔内行使功能的时候不可避免的会出现微动损伤。迄今为止，微动摩擦学的研究主要集中在工业研究中，口腔环境下的微动损伤研究文献和数据较少，更缺少对其损伤机理的系统研究。本文系统研究了最常用的两种牙科合金在大气和人工唾液两种介质下的微动损伤行为。实验目的：探索最常用的两种牙科合金的微动磨损机理，为改进牙科合金的抗微动损伤性能提供理论基础。实验方法：本研究采用高精度液压式微动磨损试验机，在人工唾液和干摩擦两种介质条件下，对两种典型牙科合金(System18牙科合金和VBV牙科合金)进行了系统的微动损伤实验。人工唾液介质下整个试样浸泡在恒温37℃循环流动的人工唾液中。微动磨损实验的参数为：法向载荷分别为F=50、100N，位移幅值为30、20、10、5、3μm，频率为2Hz，循环周次为1～10。实验过程中摩擦力和位移等参数随循环次数增加的瞬间变化情况由计算机进行实时监测和记录，实验结果后，采用光学显微镜(OM)、扫描电子显微镜(SEM)和电子能谱(EDX)等分析手段细致分析了微动磨损的磨斑。结论：1．微动摩擦特性图与材料本身的性能有很大相关性，System18牙科合金更容易出现部分滑移区;VBV牙科合金的全滑移区较宽;2．微动运行区域与人工唾液及施加的载荷均有一定的关系：人工唾液使部分滑移区的临界位移值向小位移方向移动;高载荷使部分滑移区的临界位移值向大位移方向移动。微动磨损也受人工唾液及载荷的影响：人工唾液下System18牙科合金的微动磨损较干摩擦情况下轻微，人工唾液对VBV牙科合金有一定的腐蚀作用，尤其在高载荷作用下，腐蚀作用更明显;高载荷下，其微动损伤较低载荷下损伤严重，微动损伤严重的区域均出现在接触区边缘，中心区域损伤较轻微;System18牙科合金的抗微动损伤性能优于VBV牙科合金;3．两种牙科合金的微动损伤机理相似，主要表现为磨粒磨损和剥层磨损共同作用的特征。

关键词：微动损伤牙科合金损伤机理人工唾液

常用牙科合金对p62和Beclin1等自噬相关蛋白的影响

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常用牙科合金对p62和Beclin1等自噬相关蛋白的影响

作者：林云志福建医科大学

学位级别：硕士

目的:本课题旨在揭示在常用牙科合金的影响下,口腔黏膜组织、血清及肝、肾组织中不同时间点自噬信号分子的表达情况,进一步明确牙科合金对生物体的影响及其机制,为临床上选择不同生物相容性的牙科合金提供实验基础。方法:本课题根据ISO ... 详细信息

目的:本课题旨在揭示在常用牙科合金的影响下,口腔黏膜组织、血清及肝、肾组织中不同时间点自噬信号分子的表达情况,进一步明确牙科合金对生物体的影响及其机制,为临床上选择不同生物相容性的牙科合金提供实验基础。方法:本课题根据ISO 10993和YY/T 0127.13-2009标准构建金黄地鼠动物研究模型,分别采用镍铬(Nickel-chromium,Ni-Cr),钴铬(Cobalt-chromium,Co-Cr),钛金属(Commercially pure titanium,CP-Ti),钯基(Palladiumbased,Pd-based)和金铂(Gold-platinum,Au-Pt)合金等常用牙科合金持续刺激金黄地鼠口腔黏膜12周及24周,并用聚丙烯材料作为阴性对照,应用免疫组织化学法(IHC)检测与试件接触的口腔黏膜组织中自噬相关蛋白p62和Beclin1的表达情况;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中自噬相关蛋白p62和Beclin1的表达情况;采用免疫组织化学法和Western blot法检测肝、肾组织中自噬相关蛋白p62和Beclin1的表达情况。结果:1.口腔黏膜组织免疫组化结果表明,五种牙科合金组口腔黏膜组织12周和24周的p62表达强度均不同程度低于阴性组,而Beclin1表达强度则不同程度高于阴性组。其中,12周时五种牙科合金组口腔黏膜组织的p62表达强度与阴性组均无明显差异(P>0.05);同期镍铬合金和钴铬合金Beclin1表达强度显著高于阴性组(P合金Beclin1表达强度与阴性组无显著性差异(P>0.05);在24周时,镍铬和钴铬合金组口腔黏膜组织中p62表达强度较阴性组显著降低(P合金组未对口腔黏膜组织中的p62和Beclin1表达强度造成明显影响(P>0.05)。2.血清ELISA结果显示,五种牙科合金组血清中12周和24周的p62表达强度均不同程度低于阴性组,而Beclin1表达程度则不同程度高于阴性组。其中,12周时五种牙科合金组血清中的p62和Beclin1表达强度与阴性组均无显著性差异(P>0.05);在24周时,镍铬合金组血清中的p62表达强度较阴性组显著降低(P合金组和钯基合金组血清中的Beclin1表达强度较阴性组显著升高(P合金组血清中的p62表达强度及钛金属、钴铬和金铂合金组血清中的p62和Beclin1表达强度与阴性组无明显差异(P>0.05)。3.肝脏免疫组化和Western blot检测发现,除镍铬合金组外,其余4种牙科合金组肝组织12周和24周的p62表达强度均不同程度低于阴性组,而Beclin1表达程度则不同程度高于阴性组。其中,在12周时钴铬和钯基合金组肝组织中p62和Beclin1表达强度分别较阴性组显著降低和升高(P合金组肝组织中p62和Beclin1表达强度与阴性组无明显差异(P>0.05);而在24周时,除了钴铬合金组(P牙科合金组肝组织中p62和Beclin1表达强度与阴性组无明显差异(P>0.05)。4.肾脏免疫组化和Western blot检测显示,除了镍铬和金铂合金组外,其余3种牙科合金组12周和24周肾组织p62表达强度低于阴性组,而Beclin1表达水平则不同程度高于阴性组。其中,只有钴铬合金组在12周和24周时肾组织p62表达明显低于阴性组(P合金组两个时间点的肾组织中p62和Beclin1的表达水平与阴性组没有明显差异(P>0.05)5.在口腔黏膜组织、血清和肝肾组织中,p62和Beclin1表达水平均呈负相关(P0.05)。结论:五种常用牙科合金均会引起口腔黏膜组织、血清和肝肾不同程度的自噬水平改变。在口腔黏膜组织和血清中,镍铬和钴铬合金可显著上调其24周细胞自噬水平;此外,钴铬合金还可引起肝肾组织细胞自噬水平明显升高;而钛金属、钯基和金铂合金具有较好的生物相容性。

关键词：牙科合金生物相容性自噬

基于3D OMM研究不同制作工艺的牙科合金对细胞凋亡、自噬的影响

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基于3D OMM研究不同制作工艺的牙科合金对细胞凋亡、自噬的影响

作者：刘苑福建医科大学

学位级别：硕士

目的:本研究拟在建立三维口腔黏膜模型(3-dimensional oral mucosa model,以下简称3D OMM)的基础上,研究人口腔黏膜在不同制作工艺的牙科合金的影响下细胞凋亡、自噬相关标志物的表达情况,为临床工作中选用不同制作工艺的牙科合金制作... 详细信息

目的:本研究拟在建立三维口腔黏膜模型(3-dimensional oral mucosa model,以下简称3D OMM)的基础上,研究人口腔黏膜在不同制作工艺的牙科合金的影响下细胞凋亡、自噬相关标志物的表达情况,为临床工作中选用不同制作工艺的牙科合金制作修复体提供实验依据及指导。方法:(1)本研究分别将铸造金铂合金、铸造钴铬合金、计算机辅助设计/计算机辅助制作(Computer Aided Design/Computer Aided Manufacturing,CAD/CAM)切削钴铬合金、选择性激光熔融(Selective laser melting,SLM)钴铬合金、铸造钛金属、CAD/CAM切削钛金属以及SLM钛金属等不同制作工艺的7种牙科合金浸于细胞培养液中72小时,制备浸提液,作为实验组,并以细胞培养液作为空白对照组;首先应用电感耦合等离子体质谱技术(Inductively coupled plasma mass spectrometry,ICP-MS)检测浸提液中金属离子的种类和浓度;(2)再使用浸提液持续刺激3D OMM(由人口腔角质细胞及人牙龈成纤维细胞混合于基质胶中进行3D分层共培养构建而成)72小时,随后将刺激后的组织进行固定、石蜡包埋,采用免疫荧光双重染色法(Immunofluorescence double staining)检测组织中的4种标志物:凋亡相关蛋白Caspase-3、TUNEL法(TdT-mediated dUTP nick-end labeling)以及自噬相关蛋白p62和LC3B,通过对比对照组及各实验组的标志物阳性细胞率,分析不同制作工艺(数字化制造及传统铸造)的牙科合金对口腔黏膜细胞凋亡、自噬水平的影响,并分析其与浸提液中金属离子浓度的相关性。结果:(1)ICP-MS检测发现:各组牙科合金试件在浸提液中均可检出金属离子的析出,除CAD/CAM Ti和SLM Ti外,其余各牙科合金浸提液中金属离子的总浓度均显著高于空白对照组;与传统失蜡铸造法相比,数字化制造工艺可以显著降低钴铬合金和钛金属在浸提液中析出的金属离子总浓度;(2)免疫荧光双重染色发现:三种制作工艺的钴铬合金均可引起口腔黏膜细胞的早期凋亡和细胞自噬水平的升高,其中CAST Co-Cr对早期凋亡、自噬的影响最为明显;三种制作工艺的钛金属均可引起口腔黏膜细胞自噬水平的升高;传统失蜡铸造的金铂合金也可引起口腔黏膜细胞自噬水平的升高,但其升高程度不如传统失蜡铸造的钴铬合金组显著;7种不同制作工艺的牙科合金均未对口腔黏膜细胞中的晚期凋亡产生明显影响;(3)相关性分析发现:金属离子的总浓度与组织中的早期凋亡程度呈高度正相关,与其细胞自噬水平呈低度或中度正相关。结论:(1)与钴铬合金相比,金铂合金和钛金属对口腔黏膜细胞产生的生物学影响较小,展现出了较好的生物相容性,这为临床工作中选用修复体材料提供了参考依据;(2)与传统的失蜡铸造法相比,使用新兴的数字化制造手段,如CAD/CAM或SLM,可以显著提高牙科合金的化学稳定性,减少金属离子的析出,从而减少牙科合金对口腔黏膜细胞产生的生物学影响,这也为数字化制造技术的普及奠定了理论基础。

关键词：牙科合金金属离子自噬凋亡

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牙科合金腐蚀行为的电化学研究及影响因素

口腔医学 2006年第5期26卷 388-390页

作者：陈志红刘丽毛英杰浙江大学附属口腔医院修复科杭州310006

牙科合金在口腔环境中发生的腐蚀主要是电化学腐蚀。电化学方法是研究合金腐蚀的主要手段。合金的电化学腐蚀与材料的成分和量以及组织结构密切相关。口腔电解质溶液环境和微生物对合金的腐蚀也有显著的影响。

关键词：牙科合金电化学腐蚀微生物

纳米等离子处理对提高牙科合金金瓷结合性的研究

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四川大学学报（工程科学版） 2004年第5期36卷 74-77页

作者：宋君祥冉均国苏葆辉苟立四川大学材料科学与工程学院四川成都610065

为提高烤瓷材料与牙科合金之间的结合强度,采用Ar+离子轰击溅射清洁表面处理和等离子体刻蚀活化处理,并在牙科合金表面沉积纳米Al2O3膜,进行纳米表面处理。结果表明,通过处理的牙科合金与烤瓷的结合强度有所提高,当Al2O3膜厚约为1000nm... 详细信息

为提高烤瓷材料与牙科合金之间的结合强度,采用Ar+离子轰击溅射清洁表面处理和等离子体刻蚀活化处理,并在牙科合金表面沉积纳米Al2O3膜,进行纳米表面处理。结果表明,通过处理的牙科合金与烤瓷的结合强度有所提高,当Al2O3膜厚约为1000nm时,抗折强度达到最大,为47.68MPa,与传统方法相比提高近70%,纳米膜的适宜厚度在700～1200nm之间。

关键词：牙科合金纳米技术结合强度

牙科合金表面涂镀TiN/TiAlN薄膜的研究进展

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现代口腔医学杂志 2016年第5期30卷 303-308页

作者：郑彤王霄北京大学第三医院口腔科 100191

合金材料因具有良好的机械性能、可铸造性能、价格适中等优点,在金属修复体及牙科切削工具中应用广泛。然而口腔复杂生理环境对合金材料的耐腐蚀性、机械性能和生物性能提出了更高的要求。硬质薄膜Ti N尤其是Ti Al N作为新兴的合金表面... 详细信息

合金材料因具有良好的机械性能、可铸造性能、价格适中等优点,在金属修复体及牙科切削工具中应用广泛。然而口腔复杂生理环境对合金材料的耐腐蚀性、机械性能和生物性能提出了更高的要求。硬质薄膜Ti N尤其是Ti Al N作为新兴的合金表面处理方法之一,在提高牙科合金机械和生物性能方面有积极作用。本文旨在对牙科合金细胞毒性、合金表面涂镀硬质薄膜的机械及生物性能做一综述。

关键词：牙科合金 TiN/TiAlN 硬质薄膜钴铬合金生物性能涂镀氮化钛薄膜薄膜硬度耐腐蚀性生理环境