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焦曲霉产木聚糖酶的研究

生物工程学报 1999年第1期15卷 75-78页

作者：朱静王皓梁改芹严自正中国科学院微生物研究所

从１１４４株真菌中筛选到一株产木聚糖酶活力较高的焦曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｕｓｕｓｔｕｓ）。该菌株适宜的产酶条件为在４％麸皮液中添加０５％葡萄糖，０４％硝酸钠及０１％氯化钠，３０℃振荡培养６ｄ，木聚糖酶活力可达２... 详细信息

从１１４４株真菌中筛选到一株产木聚糖酶活力较高的焦曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｕｓｕｓｔｕｓ）。该菌株适宜的产酶条件为在４％麸皮液中添加０５％葡萄糖，０４％硝酸钠及０１％氯化钠，３０℃振荡培养６ｄ，木聚糖酶活力可达２１７６ｕ／ｍＬ。酶反应的最适温度为５５℃，最适ｐＨ为５５，在ｐＨ５～８酶活力稳定。４５℃保温１ｈ，酶活力剩余３５％。酶水解桦木木聚糖的Ｋｍ值为４３×１０－３ｇ／ｍＬ，Ｖｍａｘ值为４９ｍｇ／（ｍＬ·ｍｉｎ）。酶解产物以木三糖和木四糖为主，表明该酶是一种典型的内切糖苷酶。

关键词：焦曲霉木聚糖酶糖苷酶

海鞘内生真菌焦曲霉Aspergillus ustus TK-5的化学成分研究

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海洋科学 2018年第5期42卷 130-137页

作者：李莉李晓明李洪雷 Belma Konuklugil 李鑫王斌贵中国科学院海洋研究所实验海洋生物学重点实验室山东青岛266071 中国科学院大学北京100049 Department of Pharmacognosy Faculty of Pharmacy Ankara University

焦曲霉(Aspergillusustus)TK-5是分离自土耳其海域海鞘(Pyuramomus)新鲜组织中的一株内生真菌,利用正相与反相硅胶柱层析、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱层析以及高效液相制备等色谱方法从其发酵产物中分离得到17个化合物,通过一维、二维... 详细信息

焦曲霉(Aspergillusustus)TK-5是分离自土耳其海域海鞘(Pyuramomus)新鲜组织中的一株内生真菌,利用正相与反相硅胶柱层析、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱层析以及高效液相制备等色谱方法从其发酵产物中分离得到17个化合物,通过一维、二维核磁共振、质谱等技术鉴定了所有化合物的结构,分别为血苋烷型倍半萜类化合物strobilactone A(1), ustusolate E(2), ustusolate C(3), ustusolate D(4),11-hydroustusolate E(5), 11, 6’-hydroustusolate E(6),(2’E, 4’E, 6’E)-6-(1’-carboxyocta-2’, 4’, 6’-triene)-11,12-epoxy-9, 11-dihydroxydrim-7-ene(7), 12-hydroxy-6-epi-albrassitriol (8), ustusolate A (9), deoxyuvidin B(10)和二倍半萜类化合物6-epi-ophiobolinG(11),(6α)-21,21-O-dihydroophiobolinG(12),6-epi-ophiobolin K(13), ophiobolin P(14) ophiobolin H(15), ophiobolin Q(16)及ophiobolin R(17)。活性筛选表明化合物2、6、7、9、11和13对神经氨酸酶具有一定的抑制活性,其半数抑制浓度(IC50)分别为31.8、37.3、28.4、36.8、46.6和37.6μmol/L。

关键词：海鞘内生真菌焦曲霉萜类神经氨酸酶抑制活性

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两株焦曲霉次生代谢产物及其生物活性研究

两株焦曲霉次生代谢产物及其生物活性研究

作者：甘雨甜华中科技大学

学位级别：硕士

真菌次生代谢产物是药物先导化合物的重要来源。为了获得结构新颖、活性显著的天然产物,我们以两株焦曲霉作为研究对象,对它们的次生代谢产物进行化学成分和生物活性研究。论文共分为三章:前两章分别介绍了两株焦曲霉*** NRRL 5856和***... 详细信息

真菌次生代谢产物是药物先导化合物的重要来源。为了获得结构新颖、活性显著的天然产物,我们以两株焦曲霉作为研究对象,对它们的次生代谢产物进行化学成分和生物活性研究。论文共分为三章:前两章分别介绍了两株焦曲霉*** NRRL 5856和*** 3.3904的次生代谢产物及其生物活性研究;第三章综述了激活沉默基因的方法及其在真菌次生代谢产物挖掘中的应用。论文的第一章对焦曲霉*** NRRL 5856的次生代谢产物及其生物活性进行了系统研究。从该菌株的大米发酵物中共分离得到化合物32个(1-32),包括austocystins类新化合物10个(1-10)、小分子聚酮类新化合物2个(24-25)。并以免疫抑制活性为切入点,对其中的austocystins类(1-19)和蒽醌类(20-23)化合物进行生物活性评价。其中,分子中C-5位被3′′-羟基异戊基取代的化合物3、5和7-14表现出最为显著的免疫抑制活性。另外,体外细胞毒活性实验结果显示,化合物7、8、12-14对MCF-7细胞选择性地表现出明显的细胞毒性,IC值为0.46-7.52μM;16和19对He La细胞选择性地表现出明显的细胞毒性,IC值分别为10.47和8.29μM。论文的第二章利用单菌株多化合物策略(one strain-many compounds,OSMAC),通过改变培养基的成分,从而挖掘焦曲霉*** 3.3904的代谢潜力。从该菌株的发酵物中共分离得到化合物39个(33-71),新化合物15个(33-36、46-54、69-70),包括一类C-8-C-14、C-13-C-17键断裂重排的甾体类新骨架化合物2个(49-50)。活性实验结果显示,化合物34、36、42和69具有不同程度的免疫抑制活性,IC值为4.10-16.37μM;化合物33-34、42-44、49-50、53和70选择性地显示不同程度的细胞毒活性,IC值为1.27-39.00μM。论文的第三章对目前可以用于激活真菌沉默基因簇的方法进行了详细的综述,旨在为真菌代谢潜能的挖掘和活性天然产物的深入开发提供科学依据。

关键词：焦曲霉 Austocystins类化合物聚酮甾体免疫抑制细胞毒单菌株多化合物策略

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急弯棘豆内生真菌的分离与鉴定

畜牧兽医学报 2010年第7期41卷 902-908页

作者：路浩马尧赵宝玉来航线李蓉卢围荣杰西北农林科技大学动物医学院杨凌712100 西北农林科技大学资源环境学院杨凌712100

为探明我国青海主要疯草类植物——急弯棘豆中是否含有内生真菌,本研究对采自青海的急弯棘豆样品采用组织分离法对内生真菌进行分离,运用形态学和分子生物学方法对筛选到的内生真菌菌株进行种属鉴定。结果表明,从采集的急弯棘豆样品中... 详细信息

为探明我国青海主要疯草类植物——急弯棘豆中是否含有内生真菌,本研究对采自青海的急弯棘豆样品采用组织分离法对内生真菌进行分离,运用形态学和分子生物学方法对筛选到的内生真菌菌株进行种属鉴定。结果表明,从采集的急弯棘豆样品中共分离获得3株内生真菌,分别命名为EFJ-3、EFJ-4和EFG-8,通过形态学和分子生物学方法确定这3株内生真菌分别为分层镰刀菌、褶皱裸孢壳菌和焦曲霉。结果提示,我国青海地区急弯棘豆植株中存在多种内生真菌。

关键词：急弯棘豆内生真菌分层镰刀菌褶皱裸孢壳菌焦曲霉

三株刺松藻内生真菌次生代谢产物及其生物活性研究

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三株刺松藻内生真菌次生代谢产物及其生物活性研究

作者：刘向红山东农业大学

学位级别：硕士

海洋微生物拥有丰富多样的次生代谢途径，其中海洋生物内生真菌次生代谢产物研究日益受到天然产物化学界的重视。本论文选择了三株刺松藻内生真菌分别为玉米赤霉菌（Gibberella zeae）、焦曲霉（Aspergillus ustus）和杂色曲霉（Aspergi... 详细信息

海洋微生物拥有丰富多样的次生代谢途径，其中海洋生物内生真菌次生代谢产物研究日益受到天然产物化学界的重视。本论文选择了三株刺松藻内生真菌分别为玉米赤霉菌（Gibberella zeae）、焦曲霉（Aspergillus ustus）和杂色曲霉（Aspergillus versicolor）进行了规模发酵和次生代谢产物研究，并对分离得到的部分化合物进行了初步的生物活性评价。菌丝体和发酵液提取物采用常规的硅胶柱层析、凝胶Sephadex LH-20柱层析、制备薄层层析、制备高效液相色谱以及重结晶等分离手段，得到单体化合物。利用各种现代波谱技术（IR、UV、EI-MS、HR-EI-MS、H-NMR、3C-NMR、DEPT、1H-1HCOSY、HSQC、HMBC、NOESY等）从三种菌株发酵提取物中分离鉴定了35个化合物的结构。其中从菌株玉米赤霉菌中分离鉴定了9个化合物，发现1个新生物碱类化合物（GZ1），包括1个生物碱类化合物（GZ1）和8个甾体类化合物（GZ2-GZ9）;从菌株焦曲霉中分离鉴定了9个化合物，发现1个新甾体类化合物（AU1），包括9个甾体类化合物（AU1-AU9）;从菌株杂色曲霉中分离鉴定了17个化合物，发现1个新倍半萜类化合物（AV1），包括1个倍半萜类化合物（AV1）、5个生物碱类化合物（AV3-AV7）、1个蒽醌类化合物（AV2）、1个神经酰胺类化合物（AV8）和9个甾体类化合物（AV9-AV17）。对分离到的单体化合物进行了抗细菌活性试验结果表明，生物碱类化合物GZ1（AV3）、AV4、AV5和AV6、倍半萜类化合物AV1、甾体类化合物AU1、AU3、AU4（AV17）、AV9、AV10和AV16以及蒽醌类化合物AV2对金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）具有微弱的的抑制活性，其中化合物AU1、AU3、AU9、AV1、AV9、AV10和AV11对大肠埃希氏杆菌（Escherichia coli）显示出微弱的抑制活性。对单体化合物的卤虫毒性试验结果表明，甾体类化合物GZ2-GZ9,AU1-AU9，AV9-AV17对卤虫有弱的或中等强度的致死率，其中GZ7（AU5, AV14）显示出较强的致死率62.5%;化合物AV9、AV1、AV8和AV2对卤虫有较强的致死率，其半数致死浓度为分别为14.85μg/mL、34.99μg/mL、27.71μg/mL和0.29μg/mL。对部分单体化合物的乙酰胆碱酯酶抑制活性试验结果表明，所测试的化合物对乙酰胆碱酯酶有弱的或微弱的抑制活性，其中有些化合物还显示微弱的促进活性。对化合物GZ1的体外细胞毒（抗肿瘤）活性评价结果显示，GZ1对人白血病HL-60肿瘤细胞株无显著活性，对人肺癌A549和人肝癌BEL-7402细胞株显示细胞毒活性，在10μM浓度下抑制率分别为61.8%和17.6%。本论文对三株内生真菌的次生代谢产物进行了系统的研究，丰富了海洋天然产物的化合物结构，通过活性测试发现了部分具有活性的化合物，为海洋微生物资源的有效利用提供了一定的科学依据。

关键词：刺松藻内生真菌玉米赤霉菌焦曲霉杂色曲霉次生代谢产物生物活性

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海底热液口微生物次级代谢产物研究

海底热液口微生物次级代谢产物研究

作者：蒋伟浙江大学

学位级别：硕士

海底热液口蕴藏着异常丰富的微生物资源,它们能够产生结构独特、骨架新颖的次级代谢产物,是开发新型药物的重要来源。本文选取了三株来源于台湾龟山岛热液口的真菌作为研究对象,采用普通培养和胁迫培养两种方式考察了其发酵产物中乙酸... 详细信息

海底热液口蕴藏着异常丰富的微生物资源,它们能够产生结构独特、骨架新颖的次级代谢产物,是开发新型药物的重要来源。本文选取了三株来源于台湾龟山岛热液口的真菌作为研究对象,采用普通培养和胁迫培养两种方式考察了其发酵产物中乙酸乙酯层的次级代谢产物,并利用NMR、MS、UV、IR对单体化合物进行了结构鉴定。从焦曲霉Aspergillus ustus的浸膏中一共得到13个化合物,其中有4个为新化合物,命名为4-hydrocinereain(1),4-methoxycinereain(2),6α,14β-16,17-dihydro-21,21-O-dihydroophiobolin G (3), isoparaherquonin (4)。新化合物1和2为生物碱类,3和4为萜类衍生物。9个已知化合物,分别为cinereain (5), carnequinazoline B (6), (6α)-21,21-O-dihydroophiobolin G (7), (5α,6α)-isomer of ophiobolin H (8), berkeleytrione(9),22-epoxyberkeleydione(10), paraherquonin (11), miniolutelide B (12), (2’E,4’E,6’E)-6-(1’-Carboxyocta-2’,4’,6’-triene)-11,12-epoxy-9,11-dihydroxy-drim-7-ene(13)。从菌核曲霉Aspergillus sclerotiorum的浸膏中一共得到7个notamide族或者含有notomide骨架的化合物,其中有1个为新化合物,命名为notoamide X(14)。6个已知化合物,分别为notoamide F (15), notoamide I (16), stephacidin A (17), notoamide R(18), notoamide B (19), sclerotiamide(20)。从棒曲霉Aspergillus clavatus的浸膏中一共分离到7个化合物,两个新化合物为clavatustide A (21)和clavatustide B(22),这是首次从天然产物中发现具有邻氨基苯甲酸二聚体的环肽化合物。另外5个已知化合物为deoxytryptoquivaline (23), tryptoquivaline A (24), xanthocillin-X dimethyl ether (25), kotanin (26), 7-demethylsiderin (27)。热液口微生物能够对周围环境中重金属离子浓度的改变快速作出反应,本文对上述其中的两株真菌Aspergillus sclerotiorum和Aspergillus clavatus进行了胁迫培养。结果显示Cu2+能有效刺激Aspergillus sclerotiorum代谢产物中两个非主要物质含量的增加,胁迫Aspergillus clavatus产生了一个新的物质。利用NMR鉴定了其中两个物质的结构,分别为aspochracin (28)和clavatol (29)。两个胁迫产物的结构和正常代谢产物明显不同,证明胁迫培养方式对于寻找新的海洋来源微生物次级代谢产物有着重要的意义。

关键词：焦曲霉菌核曲霉棒曲霉热液口微生物次级代谢产物环境胁迫

两株地中海海鞘和海绵来源的内生真菌次级代谢产物及其生物活性研究

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两株地中海海鞘和海绵来源的内生真菌次级代谢产物及其生物活性研...

作者：李莉中国科学院大学(中国科学院海洋研究所)

学位级别：硕士

地中海海域高盐、寡营养环境使其成为天然产物研究的主要热点区域之一,其中海洋动物来源微生物的次级代谢研究日益受到科学家们的重视。本文对2000年以来地中海海洋动物来源真菌的天然产物研究情况进行了系统的调研和分析。统计分析发现... 详细信息

地中海海域高盐、寡营养环境使其成为天然产物研究的主要热点区域之一,其中海洋动物来源微生物的次级代谢研究日益受到科学家们的重视。本文对2000年以来地中海海洋动物来源真菌的天然产物研究情况进行了系统的调研和分析。统计分析发现,地中海海洋动物来源真菌次级代谢产物的主要类型是聚酮类和萜类,分别占49%和25%,其他类型的化合物合计占26%左右。这些代谢产物普遍具有抗菌、抗肿瘤、酶抑制等生物活性,其中聚酮类化合物中具有生物活性的比例高达53%,进一步证明了地中海海域是活性天然产物的巨大宝库,具有极大的研究潜力。本论文对分离自地中海海鞘(Pyura momus)的一株焦曲霉(Aspergillus ustus)TK-5进行了规模发酵,从中分离鉴定了27个化合物,包括8个混源萜类化合物(AU 1–8)、10个倍半萜类衍生物(AU 9–18)、7个二倍半萜类化合物(AU 19–25)、1个三萜类化合物(AU 26)和1个二酮哌嗪类化合物(AU 27)。其中三个混源萜类化合物(AU 1–3)经核磁共振、单晶衍射实验确定为新化合物,并对其生源途径进行了推测。另外对地中海海绵(Ircina oros)来源的一株溜曲霉(Aspergillus tamarii)TK-18进行了研究,从其发酵产物中分离鉴定了6个化合物(AL 1–6),包括甾醇和二酮哌嗪类化合物。分别对上述萜类化合物进行了抗菌活性和神经氨酸酶抑制活性、乙酰胆碱酯酶抑制活性测试,结果表明混源萜类化合物对神经氨酸酶的抑制活性较强,其中化合物AU 1、AU 2、AU 4、AU 6和AU 7的IC值分别为5.28、8.95、5.71、1.37、8.95μM,化合物AU 4对小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)具有较强的抑制活性(MIC=8.0μg/mL)。本论文通过对两株土耳其海域海鞘和海绵来源的内生真菌次级代谢产物及其生物活性的研究,印证了地中海来源真菌代谢产物化学结构和生物活性的多样性,丰富了海洋天然产物的研究内容,为海洋生物资源的开发和利用提供了一定的理论和实验基础。

关键词：地中海海洋真菌焦曲霉溜曲霉神经氨酸酶活性

乳糖对焦曲酶合成α-半乳糖苷酶的间接诱导作用的初步研究

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微生物学报 1979年第2期 225-226页

作者：刘波彭万霖赵淑贞王春生高素洁田晓光黑龙江省应用微生物研究所

微生物合成的α-半乳糖苷酶（α-Galactosidose）为诱导酶。近年来由于它在工业上的应用,促进了对产该酶的微生物的筛选、特性及应用的研究。不同种类的微生物合成α-半乳糖苷酶,

关键词：焦曲霉酶合成胞内酶培养液间接诱导乳糖乳制品诱导合成半合成诱导酶豆饼诱导物花生饼油饼类饲料

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急弯棘豆内生真菌分离与鉴定

急弯棘豆内生真菌分离与鉴定