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有机硅季铵盐浸泡热聚合丙烯酸树脂对白色念珠菌的抑制作用

有机硅季铵盐浸泡热聚合丙烯酸树脂对白色念珠菌的抑制作用

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作者：尹倩倩河北医科大学

学位级别：硕士

目的:研究热聚合丙烯酸树脂经一定浓度的有机硅季铵盐浸泡处理后,对白色念珠菌抑制作用的影响。通过冷热循环实验,检验抑制作用是否具有可持续性,为临床提供参考。方法:1.材料a.制作试件常规加热聚合法制备10mm*10mm*1.0mm大小的热聚合... 详细信息

目的:研究热聚合丙烯酸树脂经一定浓度的有机硅季铵盐浸泡处理后,对白色念珠菌抑制作用的影响。通过冷热循环实验,检验抑制作用是否具有可持续性,为临床提供参考。方法:1.材料a.制作试件常规加热聚合法制备10mm*10mm*1.0mm大小的热聚合丙烯酸树脂试件174片。使用水砂纸在流水下依次从200目、400目、600目逐级打磨试件六个面,沿同一方向,每个面打磨50次,超声振荡清洗20min,然后将试件置于37℃无菌蒸馏水中浸泡7天以去除残余单体的影响,每隔24 h换一次水,第7天使用灭菌蒸馏水超声清洗20min,洗3遍。再用无菌蒸馏水浸泡一天后,超声振荡清洗20min,洗3遍,自然晾干24h后备用。b.抗菌处理从备用试件中随机选择144片,按A-F分组用无菌镊分别夹取试件放入24孔细胞培养板中,每孔1片,A-E组对应有机硅季铵盐溶液的质量浓度分别为:1%、5%、10%、20%和40%;F组为灭菌蒸馏水,即对照组。将以上每组试件分成四个时间组,浸泡时间分别为:30min、60min、120min、240min。分别浸泡处理完成后,以无菌镊夹出试件,分别放入盛有2ml无菌蒸馏水的玻璃试管内轻轻荡洗3遍,以去除悬浮在试件表面的药液,自然晾干,将试件逐一放入新的24孔细胞培养板中备用。c.复苏白色念珠菌标准菌株ATCC90028首先解冻复苏白色念珠菌菌株ATCC90028,然后将其冻干粉和溶解液混合均匀,采用平板划线技术以无菌接种环挑取菌液涂布在沙保罗琼脂固体培养基上,将培养皿放入恒温培养箱中,在37℃下培养48小时后,再次用无菌接种环挑取培养皿上的单个菌落少许,方法同上接种在新的培养皿上,48小时后,以无菌拭子挑取平板上的单个菌落,将其贴壁涂布在盛有RPMI 1640液体培养基的比浊管上,吹打混匀后,在比浊仪上将菌悬液浓度调至0.5M备用(1M=3*10CFU/ml)。2.实验方法a.检验对白色念珠菌抑制作用的实验用移液器分别取1ml配好的0.5M的菌悬液,逐一滴入经抗菌处理后备用的24孔细胞培养板中,将培养板放入恒温培养箱中,在37℃下培育48h。然后,分别在盛有2ml灭菌蒸馏水的无菌试管中轻轻漂洗试件,再将试件分别转移到含有1ml无菌RPMI 1640液体培养基中并于快速混合器上振荡1min,最后将菌悬液分别转移到无菌比浊专用管中,用比浊仪比浊2次取平均值并记录数据,每次比浊前用空管调“0”。b.检验对白色念珠菌抑制作用持续时间的实验对白色念珠菌抑制作用实验得出的数据进行统计学分析,本实验得出最佳处理条件为:在20%的有机硅季铵盐溶液中浸泡试件60min,并以此作为冷热循环实验的抗菌处理条件。随机选取30片处理好的热聚合丙烯酸树脂试件并将其分为G、H、I、J、K五组,其中,G-J组进行抗菌处理,然后分别循环0次、2500次、5000次、10000次,K组即对照组用灭菌蒸馏水进行浸泡处理。冷热循环结束后,将试件分别放入无菌的24孔细胞培养板中,用移液器逐一向每孔加入1ml配好的0.5M的菌悬液,将培养板置入恒温培养箱中,在37℃下培养48h,然后,分别取出试件,用无菌蒸馏水轻轻漂洗,将试件分别转移到含有1ml的无菌RPMI 1640液体培养基中并于快速混合器上振荡1min,最后将菌悬液分别转移到无菌比浊专用管中,用比浊仪比浊2次取平均值并记录数据,每次比浊前用空管调“0”。结果:1.对白色念珠菌抑制作用实验的结果:通过对A-F组六组数据进行析因设计的方差分析可知,不同处理浓度对白色念珠菌生长的抑制作用有影响(F=79.779,P热聚合丙烯酸树脂试件浸泡在20%的有机硅季铵盐溶液中60分钟,对白色念珠菌的抑制作用效果最佳。2.对白色念珠菌抑制作用持续性实验对G-K组数据进行单因素方差分析,通过不同循环次数的LSD比较得出:除G组和对照组K组存在显著差异(P<0.05)外,其余任意一组和对照组间均不存在显著差异,说明试件经抗菌处理后对白色念珠菌有显著的抑制作用,并且冷热循环对白色念珠菌的抑制作用有影响;进行不同循环次数的S-N-K两两比较得出:除G组和各组间存在显著差异(P<0.05)外,其余任意两组间均不存在显著差异,说明冷热循环会减弱白色念珠

关键词：热聚合丙烯酸树脂有机硅季铵盐白色念珠菌抗菌处理冷热循环

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