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四川农业大学学报 2005年第3期23卷 285-289页

作者：李壮李平郑爱萍王玲霞宋永燕丁建四川省农业生物技术工程研究中心四川农业大学水稻研究所四川温江611130

烬灰吸水链霉菌对稻瘟病菌、西瓜枯萎病菌等真菌病害均具有不同程度的抑制作用。用物理诱变、化学诱变、复合诱变3种方式对菌株孢子进行处理,最高变异率分别为25·2%,22·2%,24·1%。实验结果表明,物理诱变和复合诱变对菌株孢子有较好... 详细信息

烬灰吸水链霉菌对稻瘟病菌、西瓜枯萎病菌等真菌病害均具有不同程度的抑制作用。用物理诱变、化学诱变、复合诱变3种方式对菌株孢子进行处理,最高变异率分别为25·2%,22·2%,24·1%。实验结果表明,物理诱变和复合诱变对菌株孢子有较好的诱变作用,而化学诱变效果不明显。诱变处理时间分别为30s和2min,可诱变产生较多的变异菌株。分别以2%诱变剂诱变处理1·5h以及60s诱变处理筛选的变异菌株对稻瘟病和西瓜枯萎病都有很好的抑制作用。

关键词：烬灰吸水链霉菌稻瘟病西瓜枯萎病变异体

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抗稻瘟病的烬灰吸水链霉菌D-2变异菌株的产生及其应用研究

抗稻瘟病的烬灰吸水链霉菌D-2变异菌株的产生及其应用研究

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作者：李壮四川农业大学

学位级别：硕士

稻瘟病(Magnaporth grisea)、纹枯病(***)、白叶枯病(***)并称水稻三大病害。其中，稻瘟病位列三大病害之首。其生理小种多样化，遗传变异快，分类多样，有节瘟、穗颈瘟、叶瘟等类型。由于稻瘟病菌常在种子和稻杆上过冬，如前季水稻收... 详细信息

稻瘟病(Magnaporth grisea)、纹枯病(***)、白叶枯病(***)并称水稻三大病害。其中，稻瘟病位列三大病害之首。其生理小种多样化，遗传变异快，分类多样，有节瘟、穗颈瘟、叶瘟等类型。由于稻瘟病菌常在种子和稻杆上过冬，如前季水稻收割后，未能及时清除稻杆，就会给稻瘟病菌一个越冬场所，来年稻瘟病就有可能大面积爆发。稻瘟病菌的潜伏期在客观上也使得在症状能够在大田鉴别认识时，稻瘟病可能已经开始流行。这些都给防治工作带来了极大的困难。每年，稻瘟病都给世界水稻生产带来严重损失，甚至颗粒无收。而传统防治稻瘟病多采用化学农药，但近年来，随着对稻瘟病产生抗药性的研究以及人们对环境保护的重视，可持续发展已经成为一个人们不得不面对的严峻问题。而生物农药由于其具有低毒高效，选择性强，低残留甚至无残留的特点，受到人们的广泛重视。生物农药中很大一部分是农用抗生素，而链霉菌产生的次生代谢产物又在农用抗生素中占有重要地位，多种链霉菌次生代谢产物被研制成农用抗生素在生产上大力推广，如井冈霉素、春雷霉素、中生菌素等在植物病虫害防治方面取得的效果得到了大家的公认。本文针对稻瘟病这一严重危害水稻生产的世界性病害，从原有烬灰吸水链霉菌菌株的基础上，通过诱变育种的方法，筛选到了比原始菌株防效更好的突变菌株，并进行了田间试验，相关生物学活性，以及通过细胞学手段观察其对稻瘟病菌丝致畸作用等研究，结果如下： 1．采用物理诱变法，化学诱变法和复合诱变法对烬灰吸水链霉菌(Streptomyces cinereohygroscopicus)原始菌株D-2孢子悬液进行诱变，获得对稻瘟病(Magnaporth grisea)抑制作用优于原始菌株的两个突变菌株，分别是用紫外线照射处理60s和DES(硫酸二乙酯)2％的浓度处理1.5h得到的菌株。这两个突变菌株对西瓜枯萎病(Fusarium oxysporum *** niveum)的抑制作用也要优于原始菌株，其中DES(硫酸二乙酯)2％的浓度处理1.5h得到的菌株对两种病原菌的抑制作用都是最好的，抑菌带宽度分别达18mm和8mm。 2．选用不同的溶剂和乳化剂，在不同的稀释倍数下交叉配制成18种农药，同时设农药铁菌和清水对照，进行小区田间试验，结果表明：选用丙酮作溶剂，吐温80作乳化剂，在稀释倍数为50倍时配制的农药和选用异丙醇作溶剂，吐温80作乳化剂，在稀释倍数为250时配制的农药防效明显优于其它组合，其中，又以丙酮作溶剂，吐温80作乳化剂，在稀释倍数为50倍时配制的农药防效最好，防效达87.29％。在所有处理中，以丙酮为溶剂配制的农药的防效要明显优于分别以异丙醇和甲苯为溶剂配制的农药，且防效较稳定，平均防效＞80％。其中，以丙酮为溶剂，吐温80为乳化剂配制的农药，防效＞80％，且病情指数＜0.4，稳定性较好;以吐温80为乳化剂配制的

关键词：稻瘟病生物农药农用抗生素烬灰吸水链霉菌

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抗稻瘟病拮抗菌D-2的鉴定及其活性代谢物的研究

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植物病理学报 2005年第4期35卷 352-358页

作者：宋永燕李平郑爱萍王玲霞李姝晋李杰勤四川省农业生物技术工程研究中心四川农业大学水稻研究所温江611130

经土壤链霉菌的分离、筛选得到抗稻瘟病的强拮抗菌D-2。对峙培养表明,D-2菌株在PDA平板上对稻瘟病菌、油菜菌核病菌、小麦赤霉病菌和黄瓜枯萎病菌的抑菌率分别为92.2%、78.9%、53.3%和52.2%。根据形态特征、培养特征、细胞壁化学组分分... 详细信息

经土壤链霉菌的分离、筛选得到抗稻瘟病的强拮抗菌D-2。对峙培养表明,D-2菌株在PDA平板上对稻瘟病菌、油菜菌核病菌、小麦赤霉病菌和黄瓜枯萎病菌的抑菌率分别为92.2%、78.9%、53.3%和52.2%。根据形态特征、培养特征、细胞壁化学组分分析和生理生化分析,D-2菌株被定名为烬灰吸水链霉菌(Streptomyces cinereohyg roscopicus)。D-2菌株发酵液经乙酸乙酯萃取、浓缩得橙黄色活性粗提物,活性物质在酸性环境下稳定性较差,在中性或偏碱性环境下80℃处理1 h、可见光(4 000 lx)处理12 h、紫外线(2 400 lx)处理4 h活性均保持不变。通过硅胶柱层析和硅胶薄层层析得到了主要的纯活性组分。选择不同的溶剂和乳化剂交叉配制成9种生物农药进行田间小区试验,结果表明:以甲醇作溶剂,吐温80作乳化剂防效最好,达65.69%。

关键词：稻瘟病抗生素烬灰吸水链霉菌防效形态特征培养特征

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抗真菌农用抗生素的分离及应用研究

抗真菌农用抗生素的分离及应用研究

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作者：宋永燕四川农业大学

学位级别：硕士

据FAO统计,全世界农林业中每年因虫害、病害和杂草危害造成的损失占总产值的37%,损失额高达1260亿美元,相当于中国农业总产值的一半,英国的4倍多。化学农药在病虫草害的防治上一直居于主导地位,但高毒高残留化学农药的大量使用正在严重... 详细信息

据FAO统计,全世界农林业中每年因虫害、病害和杂草危害造成的损失占总产值的37%,损失额高达1260亿美元,相当于中国农业总产值的一半,英国的4倍多。化学农药在病虫草害的防治上一直居于主导地位,但高毒高残留化学农药的大量使用正在严重威胁着我们赖以生存的地球环境和人类健康。发展和应用生物农药已逐渐成为一种趋势,而且随着公众对绿色食品和无公害食品的要求越来越高,生物农药的市场前景也越来越广阔。农用抗生素作为生物农药的主体,因其具有低毒高效、选择性强、残留时间短、无三致(致癌、致畸、致突变)和无公害等优点,正日益受到世界各国的重视,如井冈霉素、阿维霉素、中生菌素和宁南霉素等在植物病虫害防治上已广泛被应用并做出了突出贡献。本文针对植物真菌病害进行农用抗生素的筛选、分离和田间小区试验等研究,结果如下: 1、在四川雅安和温江两地共采集到土样11份,采用稀释分离法从中分离到放线菌253株,细菌886株。采用平皿拮抗测定法进行抗植物病原真菌拮抗菌的筛选获得有拮抗活性的放线菌51株,细菌173株,分别占总数的20.16%和19.53%。通过代谢物抑菌活性强弱、物化性质及稳定性等确定了优势拮抗菌株D-2和LM-3。经形态特征、培养特征、细胞壁化学组分分析和生理生化分析,D-2菌株和LM-3菌株分别鉴定为烬灰吸水链霉菌和多粘类芽孢杆菌。 2、平皿拮抗测定显示D-2菌株在PDA平板上对稻瘟病菌、油菜菌核病菌、小麦赤霉病菌和黄瓜枯萎病菌的抑菌率分别为92.2%、78.9%、53.3%和52.2%。D-2菌株发酵液经乙酸乙酯萃取和浓缩得橙黄色抗生素粗提物,抗生素在酸性环境下稳定性较差,中性或偏碱性环境下80℃处理1 h、可见光(4 000 1x)处理12 h以及紫外线(2 400 1x)处理4 h活性均保持不变。通过硅胶柱层析和硅胶薄层层析得到了主要的纯活性组分。选择不同的溶剂和乳化剂交叉配制成9种生物农药进行田间小区试验,结果表明:以甲醇作溶剂,吐温80作乳化剂防效最好,达65.69%。 3、研究了LM-3菌悬液浸种、浸芽和浇苗3种处理对水稻的生长促进作用和对超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和过氧化物酶3种保护酶的诱导表达作用。结果表明:以2×10 cfu/ml的细胞浓度浇灌幼苗对水稻的生长促进作用最好,苗高等各项生理指标均显著高于对照及其它处理;对3种保护酶均有良好的诱导表达作用。采用盐析法提取获得了该菌株的抗菌多肽,抑菌活性测定表明抗菌多肽对辣椒炭疽病菌等多种植物病原真菌有强烈的生长抑制作用。抗菌多肽对链霉蛋白酶E和胰蛋白酶不敏感,对蛋白酶K部分敏感;高温(120℃)处理20min后抗菌多肽仍保留84.71%的活性;酸碱处理发现抗菌多肽在pH 8.5时最为稳定,而在pH 2.5时80℃处理1 h

关键词：农用抗生素烬灰吸水链霉菌多粘类芽孢杆菌稻瘟病

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