检索结果-南通市图书馆

烟粉虱med隐种抑制蛋白基因Btarrestin的克隆及特性分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

昆虫学报 2019年第10期62卷 1129-1139页

作者：梁金金何超刘少楠谢文张友军湖南农业大学植物保护学院长沙410128 中国农业科学院蔬菜花卉研究所北京100081

【目的】明确烟粉虱Bemisia tabaci med隐种抑制蛋白基因Btarrestin是否参与吡虫啉耐药性。【方法】根据已有烟粉虱转录组数据,利用RT-PCR克隆Btarrestin的全长序列,进行生物信息学分析。通过qPCR分析Btarrestin在烟粉虱med隐种各个龄期... 详细信息

【目的】明确烟粉虱Bemisia tabaci med隐种抑制蛋白基因Btarrestin是否参与吡虫啉耐药性。【方法】根据已有烟粉虱转录组数据,利用RT-PCR克隆Btarrestin的全长序列,进行生物信息学分析。通过qPCR分析Btarrestin在烟粉虱med隐种各个龄期(卵,1-2龄、3龄、4龄若虫,雌、雄成虫)以及吡虫啉处理(100 mg/L)后成虫中的表达量变化,明确其时空表达模式。利用RNAi技术沉默Btarrestin,观察沉默前后Btarrestin表达量和烟粉虱med隐种成虫死亡率变化。【结果】成功克隆烟粉虱med隐种Btarrestin的cDNA序列(GenBank登录号: MK204377),编码区全长1 227 bp,编码409个氨基酸,预测所编码的蛋白分子量约为45.33 kD,理论等电点(pI)为8.38。保守结构域分析表明,Btarrestin具有Arrestin_N和Arrestin_C两个超家族保守结构域,符合抑制蛋白家族特征。分子系统树分析表明,Btarrestin与褐飞虱Nilaparvata lugens的Arrestin亲缘关系最近。Btarrestin的表达量随烟粉虱med隐种的生长发育逐渐升高,成虫期表达量最高。100 mg/L吡虫啉处理成虫24 h后Btarrestin的表达量较对照增加了2.39倍。RNAi干扰Btarrestin后进行生物测定,烟粉虱med隐种成虫的死亡率上升了31.27%。【结论】Btarrestin可能与烟粉虱med隐种对吡虫啉的耐药性有关。

关键词：烟粉虱med隐种抑制蛋白耐药性吡虫啉 RNA干扰

烟粉虱med隐种保幼激素酯酶cDNA片段克隆、序列分析及在不同发育阶段的表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

昆虫学报 2013年第3期56卷 234-242页

作者：龙楚云郭建洋万方浩中国农业科学院植物保护研究所、植物病虫害生物学国家重点实验室北京100193

昆虫卵黄发生及其内分泌调控机理一直是昆虫生殖生理学的研究热点。由保幼激素代谢通路关键分子介导的调控系统是影响昆虫卵黄发生的关键途径。研究激素代谢通路关键调控因子的功能将为明确生殖调控机理提供理论依据。保幼激素酯酶(juve... 详细信息

昆虫卵黄发生及其内分泌调控机理一直是昆虫生殖生理学的研究热点。由保幼激素代谢通路关键分子介导的调控系统是影响昆虫卵黄发生的关键途径。研究激素代谢通路关键调控因子的功能将为明确生殖调控机理提供理论依据。保幼激素酯酶(juvenile hormone esterase,JHE)是降解昆虫体内保幼激素的关键酶之一,具有调控昆虫发育、变态和生殖等功能。本实验以烟粉虱Bemisia tabaci med隐种为研究对象,采用反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)和cDNA末端快速扩增PCR(rapid amplification of cDNA ends PCR,RACE-PCR)技术克隆获得编码552个氨基酸的烟粉虱med隐种保幼激素酯酶基因的部分cDNA序列,将其命名为Btjhe(GenBank登录号为KC422259)。同源序列比对发现,该基因与菜叶蜂Athalia rosae、西方蜜蜂Apis mellifera的保幼激素酯酶基因推导的氨基酸一致性较高,且具有昆虫保幼激素酯酶共有的5个氨基酸保守模块,其中包括对保幼激素酯酶活性起关键作用的长疏水结合域GxSxG。由此推测,Btjhe为烟粉虱med隐种的保幼激素酯酶基因,其编码蛋白参与烟粉虱体内保幼激素的特异性降解。实时荧光定量PCR检测结果表明,Btjhe在烟粉虱若虫、成虫阶段都有表达,在成虫阶段表达量较高,且在羽化后11d达到峰值,其表达模式与卵黄原蛋白基因(vg)类似。本研究结果为明确烟粉虱的生殖调控机理奠定基础。

关键词：烟粉虱med隐种保幼激素酯酶 cDNA克隆序列分析实时荧光定量PCR

烟粉虱med隐种BtβNAC基因克隆及表达分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

河南农业大学学报 2020年第5期54卷 815-822页

作者：杜红旭王放放刘旭白润娥河南农业大学农学院河南郑州450002 河南农业大学植物保护学院河南郑州450002

根据佛罗里达弓背蚁Camponotus floridanus来源NAC蛋白β亚基氨基酸序列,搜索EST数据库拼接了一个烟粉虱BtβNAC基因cDNA。该基因全长856 bp,5’非翻译区134 bp,3’非翻译区272 bp,开放阅读框编码149个氨基酸,相对分子质量约为16.2 kD;... 详细信息

根据佛罗里达弓背蚁Camponotus floridanus来源NAC蛋白β亚基氨基酸序列,搜索EST数据库拼接了一个烟粉虱BtβNAC基因cDNA。该基因全长856 bp,5’非翻译区134 bp,3’非翻译区272 bp,开放阅读框编码149个氨基酸,相对分子质量约为16.2 kD;基因组序列长度为4430 bp,包含2外显子和1内显子。氨基酸分析显示,烟粉虱BtβNAC与已知NAC蛋白β家族成员高度同源,相似性介于78.3%~96.7%之间。定量RT-PCR分析显示,BtβNAC在卵、各龄若虫和成虫均有表达,以1龄若虫表达量最高,成虫次之;吡虫啉胁迫处理可以显著抑制BtβNAC在烟粉虱成虫体内的表达。该基因在烟粉虱不同发育阶段存在差异表达,并受吡虫啉的抑制,推测其对烟粉虱的生长发育具有重要的调控作用。

关键词：烟粉虱med隐种 BtβNAC 基因克隆表达分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

烟粉虱med隐种生殖的内分泌调控因子

烟粉虱MED隐种生殖的内分泌调控因子

作者：龙楚云中国农业科学院

学位级别：硕士

烟粉虱med隐种(Bemisiatabacimediterranean,med)(以往称为Q型烟粉虱，以下简称为med)自2003年入侵我国云南昆明后，凭借极限温度适应性、较强农药抗性等特性，在我国境内迅速扩散，暴发成灾，于2007年后在一些地区逐渐取代烟粉虱MEAM1... 详细信息

烟粉虱med隐种(Bemisiatabacimediterranean,med)(以往称为Q型烟粉虱，以下简称为med)自2003年入侵我国云南昆明后，凭借极限温度适应性、较强农药抗性等特性，在我国境内迅速扩散，暴发成灾，于2007年后在一些地区逐渐取代烟粉虱MEAM1隐种(BemisiatabaciMiddleEast-AsiaMinor1,MEAM1)(以往称为B型烟粉虱，以下简称为MEAM1)，成为危害我国农作物生产的主要烟粉虱入侵隐种类型，表现出比MEAM1更强的入侵性和危害性。研究表明，MEAM1能利用与植物双生病毒的互惠共生关系抑制寄主植物的防御反应、间接促进自身卵巢发育、提高生殖力，从而以大量的后代数量取代本地种ZHJ1型烟粉虱(BemisiatabaciAsiaII3,ZHJ1)。因此，生殖调控能力的差异可能是烟粉虱隐种间竞争取代的关键，而探明烟粉虱生殖调控的分子机理将有利于揭示烟粉虱隐种快速建立种群、扩散和暴发成灾的内在生殖机理，以及为揭示烟粉虱与双生病毒的互惠共生机制提供理论依据。卵黄发生(vitellogenesis)是昆虫重要的生殖发育过程，卵黄发生动态及其内分泌调控机制是昆虫生殖生理学的研究热点。为了揭示med卵黄发生过程中的内分泌调控模式，选取了保幼激素和蜕皮激素代谢通路上的几个重要基因，采用RACE技术克隆获得了全长，并利用分子和生理生化技术研究了外源激素处理、不同营养饲喂条件下烟粉虱雌虫相关基因的转录动态和卵巢发育动态，并探讨了沉默调控激素代谢基因对烟粉虱卵黄发生的影响，主要研究结果如下： 1．烟粉虱med隐种生殖内分泌调控因子基因的克隆、序列分析以及不同发育时期的表达通过克隆med卵黄发生过程中的重要基因卵黄蛋白受体基因(vgr)以及4个内分泌调控因子基因：保幼激素酯酶基因(Btjhe)、保幼激素结合蛋白基因(jhbp)、蜕皮激素受体基因(EcR)，蜕皮激素诱导蛋白75基因(e75)的cDNA序列，将获得的序列进行比对分析，运用荧光定量PCR检测各个基因在烟粉虱雌虫不同发育时期的转录表达。结果表明：本实验所克隆的vgr、Btjhe、jhbp、EcR、e75等基因的cDNA序列准确无误，保守结构域与其他昆虫同源蛋白一致;5个基因中vgr、Btjhe、jhbp的正常转录表达模式与vg的一致，相对表达水平均先升高后降低，且在羽化后11天达到最高。说明，保幼激素代谢通路的关键调控因子基因与编码卵黄蛋白及其受体基因的转录表达存在相关性，参与调控med的卵黄发生与卵子发生，而蜕皮激素通路的相关基因可能不参与调控med的卵黄发生或作用不明显。 2．保幼激素酯酶基因沉默对烟粉虱med隐种卵黄发生的影响将人工合成的medBtjhe-dsRNA片段掺入饲养液中饲喂初羽化med雌虫，检测dsRNA终浓度为1μg/μL和2μg/μL，不同取食时间后med的Btjhe转录水平，结果表明med取食含1μg/μL和2μg/μL双链的饲养液72h时后均能获得理想的基因沉默效果。通过分析Btjhe基因沉默后med卵巢发育的变化情况以及相关基因转录水平变化，探讨了JH与烟粉虱卵黄发生之间的关系。结果表明：med取食含2μg/μLdsRNA的饲养液72h后，靶标基因Btjhe沉默了60%～87%，而与烟粉虱卵黄发生相关基因的表达则显著下调，其中vg、vgr、jhbp基因表达分别下调了74%，73%和86%。说明Btjhe基因沉默显著抑制了med雌虫vg和vgr基因的表达，由此推断，Btjhe编码的蛋白调控med卵黄蛋白及其受体基因的表达，而Btjhe的高表达可能促进med的卵黄发生。 3．外源保幼激素处理对烟粉虱med隐种生殖发育的影响选取带有红眼期伪蛹的叶片，涂抹外源激素JHⅢ，收集初羽化med雌虫，检测vg、vgr、Btjhe、jhbp基因的相对表达水平和卵巢发育动态。结果表明：施用外源JHⅢ的不同日龄成虫体内Btjhe、vg、vgr和jhbp基因的相对表达水平与对照相比分别上调了1.24～5.48倍、1.16～1.60倍、1.13～1.90倍和1.11～1.19倍;JHⅢ处理后，med的Ⅳ级卵子量和卵巢管数目在羽化后1天达到最高值，比对照提前2天。由此推断：外源激素激发Btjhe基因转录水平增强，反过来促进med成虫血淋巴中JH分子的特异性降解，诱导vg基因的大量表达;并且外源保幼激素加快了med卵巢发育的速度，诱导烟粉虱成熟卵子的提前形成。这些结果说明JH及其代谢通路分子是调控烟粉虱Vg合成的重要因子，med的卵黄发生主要受JH调控。 4．不同营养成分对烟粉虱med隐种生殖发育的影响用分别含有蔗糖、果糖、葡萄糖的人工饲养液饲喂初羽化med成虫，检测不同日龄雌虫vg、vgr、Btjhe基因的相对表达水平和卵巢发育动

关键词：烟粉虱med隐种生殖调控保幼激素蜕皮激素卵黄发生基因表达营养

杀虫剂和种植模式对烟粉虱med隐种和温室白粉虱种间竞争的影响

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

杀虫剂和种植模式对烟粉虱MED隐种和温室白粉虱种间竞争的影响

作者：尚昊培云南农业大学

学位级别：硕士

烟粉虱med隐种Bemisia tabaci med和温室白粉虱Trialeurodes vaporariorum是云南省番茄作物上的重要优势种粉虱,且两者具有一定的生态位重叠。化学防治是防治粉虱类害虫的重要手段,近年来多数地区发现烟粉虱与温室白粉虱存在竞争关系,... 详细信息

烟粉虱med隐种Bemisia tabaci med和温室白粉虱Trialeurodes vaporariorum是云南省番茄作物上的重要优势种粉虱,且两者具有一定的生态位重叠。化学防治是防治粉虱类害虫的重要手段,近年来多数地区发现烟粉虱与温室白粉虱存在竞争关系,杀虫剂的作用会对昆虫之间的竞争产生影响。为了探明杀虫剂对两种粉虱竞争造成的影响,本研究使用四分位法划分不同种植模式和生育期内两种粉虱的发生时期,比较三个时期两种粉虱种群数量、发生高峰、性比的差异,结合两种粉虱在不同种植模式内生态位指数对两种粉虱的竞争关系进行分析;于室内测定了5种常用杀虫剂对两种粉虱雌、雄成虫的毒力;探究在杀虫剂作用下,不同的数量比和雌雄比的处理下,两种粉虱F代的存活率及生命表相关参数,测定两种粉虱F代不同龄期若虫的发育历期、羽化数量和雌雄性比;测定在杀虫剂作用下两种粉虱体内生理酶活性在1、3、7d的变化。主要研究结果如下:1.不同种植模式内烟粉虱med隐种和温室白粉虱日活动规律不同生育期和种植模式内温室白粉虱发生时段早于烟粉虱,烟粉虱发生高峰集中在12:00-14:00,温室白粉虱则集中在10:45-12:30;坐果初期,辣椒田和番茄单作田内的烟粉虱种群数量较多,为31.07头·板和26.62头·板,辣椒田和黄瓜田内的温室白粉虱种群数量较多,为25.87头·板和23.67头·板;苗期,番茄单作田中的烟粉虱性比最高为5.35,黄瓜田和番茄单作田中的温室白粉虱性比较高,分别为7.82和6.79;两种粉虱在不同生育期和种植模式内的时间生态位指数相近,且二者生态位存在一定的重叠。种植黄瓜和辣椒邻作在番茄田旁可降低番茄田间两种粉虱的发生数量,开花期前两种粉虱种群数量较低时可进行相应的防治。2.5种杀虫剂对烟粉虱med隐种和温室白粉虱毒力测定烟粉虱雌、雄成虫对5种杀虫剂的敏感性依次阿维菌素>氟啶虫胺腈>螺虫乙酯>吡虫啉>联苯菊酯,其中烟粉虱雌、雄成虫对阿维菌素敏感性最高,LC值分别为2.76 mg/L和1.88 mg/L,对联苯菊酯敏感性最低,LC值分别为81.93mg/L和62.43 mg/L;温室白粉虱雌、雄成虫对5种杀虫剂的敏感性依次阿维菌素>氟啶虫胺腈>螺虫乙酯>吡虫啉>联苯菊酯,其中温室白粉虱雌、雄成虫对阿维菌素敏感性最高,LC值分别为0.67 mg/L和0.43 mg/L,对联苯菊酯敏感性最低,LC值分别为74.11 mg/L和45.99 mg/L。研究表明两种粉虱的雌、雄成虫均对阿维菌素和氟啶虫胺腈较为敏感,对联苯菊酯敏感性较差,两种粉虱的雌成虫LC值均高于其雄成虫LC值,烟粉虱med隐种成虫的LC值高于温室白粉虱LC值。3.杀虫剂对烟粉虱med隐种和温室白粉虱种间竞争的影响阿维菌素作用下,烟粉虱:温室白粉虱=3:1中温室白粉虱存活时长最短,仅为6天,而对照烟粉虱:温室白粉虱=1:3中温室白粉虱种群存活时间最长,为20天;两种粉虱的未成熟虫期各虫态发育历期经阿维菌素的作用下均变长,两种粉虱中烟粉虱未成熟虫期各虫态发育历期短于温室白粉虱;经阿维菌素的作用下,烟粉虱med隐种竞争能力优于温室白粉虱,两种粉虱的种群参数均显著低于对照,烟粉虱med隐种F代的种群参数显著高于温室白粉虱,F代的不同虫态的发育历期显著短于温室白粉虱。当环境中的烟粉虱med隐种种群数量占优势尤以烟粉虱med隐种:温室白粉虱=2:1,其竞争能力显著提升。4.杀虫剂作用后烟粉虱med隐种和温室白粉虱生理酶活性的测定采用阿维菌素对两种粉虱雄成虫的LC浓度,在此浓度作用下测定两种粉虱体内乙酰胆碱酶、谷胱甘肽-S-转移酶和羧酸酯酶活性。结果表明:对照中两种粉虱体内三种解毒酶活性在1、3、7d内无明显变化,而在阿维菌素的作用下,两种粉虱体内的三种解毒酶活性在1、3、7d与对照相比均显著提升;烟粉虱med隐种的三种解毒酶活性在1、3、7d均显著高于温室白粉虱体内三种解毒酶活性。研究发现烟粉虱med隐种可凭借其体内较强的解毒酶活性与较快的酶活性反应时间可使得烟粉虱med隐种在与温室白粉虱的竞争中取得优势地位。

关键词：烟粉虱med隐种温室白粉虱日活动规律毒力测定种间竞争酶活性的测定

烟粉虱med隐种铁蛋白基因克隆、不同发育阶段和吡虫啉胁迫下的表达及原核表达

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

昆虫学报 2013年第7期56卷 738-746页

作者：白润娥王雄雅李静静刘晓华熊大斌李冬兵曹玲珑闫凤鸣河南农业大学植物保护学院郑州450002 河南农业大学园艺学院郑州450002 国家小麦工程技术研究中心郑州450002

昆虫铁蛋白在铁转运和贮藏、抗氧化胁迫及病菌侵染等诱导的免疫反应等过程中发挥重要作用。为探索烟粉虱Bemisia tabaci铁蛋白功能,本研究以烟粉虱med隐种Bemisia tabaci med为研究对象,采用反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR... 详细信息

昆虫铁蛋白在铁转运和贮藏、抗氧化胁迫及病菌侵染等诱导的免疫反应等过程中发挥重要作用。为探索烟粉虱Bemisia tabaci铁蛋白功能,本研究以烟粉虱med隐种Bemisia tabaci med为研究对象,采用反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)克隆铁蛋白基因,采用荧光定量PCR检测了该基因在烟粉虱不同发育时期及在吡虫啉胁迫条件下成虫体内mRNA的表达量,并利用原核表达载体pMAL-BtFer1对该蛋白进行体外表达和纯化。克隆获得烟粉虱铁蛋白基因的cDNA序列,并命名为BtFer1(GenBank登录号:JX865415)。该基因cDNA长度为1 043 bp,编码224个氨基酸残基,序列中含有铁蛋白典型的铁结合功能域,以及由19个氨基酸残基构成的信号肽。荧光定量分析显示,BtFer1在不同发育时期均有表达,以成虫和3龄若虫期的表达量较高,并且该基因的表达受吡虫啉胁迫处理的强烈诱导。体外表达、纯化和电泳检测显示,在0.3 mmol/L浓度IPTG诱导下融合蛋白在上清和沉淀中均能表达,电泳检测到一条约68 kD的外源蛋白,与预测融合蛋白分子量大小相符。本研究明确了该铁蛋白基因在烟粉虱med隐种不同发育阶段及在低浓度吡虫啉胁迫下成虫体内的表达水平,为深入研究其功能提供理论依据。

关键词：烟粉虱med隐种铁蛋白基因克隆表达分析原核表达吡虫啉

烟粉虱取食ToCV侵染番茄对其解毒酶和保护酶基因表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

华北农学报 2021年第4期36卷 172-183页

作者：代惠洁程琳曹慧竺晓平赵静潍坊科技学院山东省高校设施园艺重点实验室山东寿光262700 潍坊学院生物与农业工程学院山东省生物化学与分子生物学高校重点实验室山东潍坊261061 山东农业大学植物保护学院山东省蔬菜病虫生物学重点实验室山东泰安271018 山东寿光蔬菜种业集团有限公司山东省设施蔬菜分子育种省级重点实验室山东寿光262700

为明确烟粉虱取食ToCV侵染番茄后其生理防御反应相关基因的变化,通过转录组测序和实时荧光定量PCR技术研究烟粉虱med隐种取食ToCV侵染番茄和健康番茄6,12,24,48 h,其体内解毒酶、保护酶系统以及基因功能、代谢功能的变化。结果表明,烟粉... 详细信息

为明确烟粉虱取食ToCV侵染番茄后其生理防御反应相关基因的变化,通过转录组测序和实时荧光定量PCR技术研究烟粉虱med隐种取食ToCV侵染番茄和健康番茄6,12,24,48 h,其体内解毒酶、保护酶系统以及基因功能、代谢功能的变化。结果表明,烟粉虱med隐种取食ToCV侵染番茄不同时间,其体内解毒酶细胞色素P450酶(P450)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)、羧酸酯酶(CarE)和保护酶超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)转录水平均发生不同程度的变化;除CAT外,P450、GST、CarE、SOD和POD表达量总体趋于上调,其中发挥主要作用的是P450和SOD。通过对差异表达基因进行GO注释和KEGG功能分析,发现烟粉虱med隐种取食ToCV侵染番茄12 h,其差异基因的生物学功能和代谢途径与其他时间点不同,该时间点下烟粉虱主要通过溶酶体实现蛋白质分解,而其他时间点下烟粉虱则通过核糖体逐步实现氨基酸到蛋白质的生物合成。综上,烟粉虱取食ToCV侵染番茄可能引起了其解毒酶、保护酶基因表达的改变,并通过溶酶体途径调控自身免疫应对ToCV入侵;其中,12 h可能是烟粉虱与ToCV互作的关键时间点。研究结果有助于进一步阐明烟粉虱取食ToCV获毒后的防御机制,丰富烟粉虱-植物病毒-寄主植物间的互作理论,为田间ToCV的有效防控提供科学依据。

关键词：烟粉虱med隐种转录组番茄褪绿病毒解毒酶保护酶

烟粉虱CRISPR/Cas9系统的建立及其在BtTRP基因温度耐受性功能验证中的应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物防治学报 2018年第2期34卷 254-258页

作者：王原吕志创万方浩青岛农业大学农学与植物保护学院青岛266109 中国农业科学院植物保护研究所/植物病虫害生物学国家重点实验室北京100193 农业部外来入侵生物预防与控制研究中心北京100193

烟粉虱之所以能在全世界范围内迅速扩散并成为重要害虫,其关键因素之一就是对温度变化的抵抗力很强。随着环境的变化,动物体中的很多细胞表面受体和离子通道感受器都会做出相应的反应,影响动物的行为。其中,昆虫对外界环境温度的感知就... 详细信息

烟粉虱之所以能在全世界范围内迅速扩散并成为重要害虫,其关键因素之一就是对温度变化的抵抗力很强。随着环境的变化,动物体中的很多细胞表面受体和离子通道感受器都会做出相应的反应,影响动物的行为。其中,昆虫对外界环境温度的感知就与瞬时感受器阳离子通道(transient receptor potential,TRP)有关。本研究探索了一种简单高效的试验方法,即通过CRISPR/cas9系统来诱导烟粉虱的基因突变,探究烟粉虱BtTRP基因在温度感受方面的功能。文中阐述了向烟粉虱med隐种红眼期伪蛹注射Bt TRP靶基因sgRNA和Cas9 mRNA,高效诱导靶标基因发生突变并进行高温和低温胁迫试验,进而检测其击倒和恢复时间。结果表明,注射后的烟粉虱对外界温度变化敏感度显著下降,从而不能进行温度适应性调节,导致对高低温环境的耐受性均有明显下降。

关键词：烟粉虱med隐种基因突变温度感受 TRP基因

入侵粉虱热激调控因子Hsf1对Hsp60表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

入侵粉虱热激调控因子Hsf1对Hsp60表达的影响

作者：郭莉莉河南科技学院

学位级别：硕士

烟粉虱Bemisia tabac（Gennadius）和温室白粉虱Trialeurodes vaporariorum（Westwood）属同翅目，粉虱科，均为世界性害虫。近年来随着该虫发生量及发生面积的持续增加，对农作物及周边环境的危害已造成严重影响。作为一种入侵生物，... 详细信息

烟粉虱Bemisia tabac（Gennadius）和温室白粉虱Trialeurodes vaporariorum（Westwood）属同翅目，粉虱科，均为世界性害虫。近年来随着该虫发生量及发生面积的持续增加，对农作物及周边环境的危害已造成严重影响。作为一种入侵生物，国内外的研究者一直热衷于烟粉虱的耐热性研究。鉴于此现状，本实验主要从烟粉虱的热激蛋白HSPs出发，研究其调控因子hsf1，同时运用荧光定量技术观察不同温度条件下该调控因子的表达量，最终来确定hsps和hsf1之间的表达关系，从而更进一步的阐明烟粉虱大发生的分子学机制。其主要结论如下：1.本研究通过PCR技术，扩增出了烟粉虱med隐种和温室白粉虱的部分hsf1基因序列（约900bp），经DNAMAN软件分析验证得出：所扩的基因序列符合hsf1的相关特性，与hsf1的保守基因序列相似度达92.30％，可以用于进行荧光定量验证试验。2.在实验室前期实验研究的基础上，运用电子克隆技术成功的扩增出了烟粉虱med隐种和温室白粉虱的Hsp60基因全长，通过NCBI在线ORF Finder功能并结合DNAstar软件分析，推测烟粉虱med隐种Hsp60基因全长cDNA有1761bp开放阅读框（open reading frame，ORF），可编码587个氨基酸，预测其等电点为9.18，蛋白分子量约49441Da。该基因5’UTR含143bp，3’UTR含446bp;温室白粉虱Hsp60基因全长cDNA及推测氨基酸序列，全长cDNA有1725bp开放阅读框（open reading frame，ORF），可编码575个氨基酸，预测其等电点为5.30，蛋白分子量约61133Da，该基因5’UTR含143bp，3’UTR含467bp。3.采用荧光定量PCR技术（RT-PCR）对两种粉虱在不同温度下Hsp60基因和Hsf1调控因子的表达量进行定量检测，结果发现：两种基因在低温下均有很明显的表达量，但在高温下没有显著表达量，同时可以看出Hsf1表达与Hsp60的表达是呈正相关的，它们同时在低温被诱导，这可以很清晰的说明Hsp60基因是通过Hsf1调控因子而起诱导保护作用的。

关键词：烟粉虱med隐种温室白粉虱热激蛋白温度荧光定量