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油茶炭疽病复合病菌鉴定及室内药剂评价

林业科学 2023年第5期59卷 100-108页

作者：李玲玲朱原野张盛培李河南方人工林病虫害防控国家林草局重点实验室、森林有害生物防控湖南省重点实验室、森林生物资源与有害生物综合管理湖南省普通高等学校重点实验室、中南林业科技大学长沙410004

【目的】探讨油茶炭疽病复合病菌种类,筛选油茶炭疽病复合病菌的高效杀菌剂,为科学防治油茶炭疽病提供依据。【方法】从湖南、广西、广东、江苏,海南等地油茶成林采集炭疽病叶样本,采用组织分离法分离纯化致病菌,结合形态学和多基因联... 详细信息

【目的】探讨油茶炭疽病复合病菌种类,筛选油茶炭疽病复合病菌的高效杀菌剂,为科学防治油茶炭疽病提供依据。【方法】从湖南、广西、广东、江苏,海南等地油茶成林采集炭疽病叶样本,采用组织分离法分离纯化致病菌,结合形态学和多基因联合系统发育分析进行种类鉴定;通过复合侵染试验研究致病菌之间的关系;采用菌丝生长速率法测定杀菌剂咪鲜胺、苯醚甲环唑、嘧菌酯、啶氧菌酯,氟吡菌酰胺和啶酰菌胺对油茶致病菌的室内毒力。【结果】1)从106个油茶炭疽病病斑中分离获得186株致病菌,其中主要病原菌是炭疽属真菌130株,拟盘多毛孢属真菌18株,新拟盘多毛孢属真菌28株,假拟盘多毛孢属真菌4株,链格孢属真菌6株;分离出单一炭疽病菌的病斑55个,而能同时分离出炭疽病菌和其他致病菌的病斑有51个,其中同一个病斑能同时分离出同属不同种或不同属致病菌的病斑有51个,分离的不同病菌有7种组合方式:同属不同种炭疽菌、炭疽菌和拟盘多毛孢属真菌、炭疽菌和新拟盘多毛孢属真菌、炭疽菌和假拟盘多毛孢属真菌、炭疽菌和链格孢属真菌两两组合以及炭疽菌和拟盘多毛孢属和新拟盘多毛孢属、炭疽菌和拟盘多毛孢属和链格孢属真菌3种菌的组合。2)将炭疽菌属和拟盘多毛孢属,炭疽菌属和新拟盘多毛孢属,炭疽菌同属不同种这3种分离率最多的组合方式致病菌回接到油茶上,发现炭疽病菌和其他致病菌复合接种的病斑显著大于只接同种病菌的病斑,表明油茶炭疽病斑中存在炭疽病菌与其他病原菌复合侵染协同增效的现象。3)室内毒力测定结果显示,苯醚甲环唑和咪鲜胺对炭疽菌属,拟盘多毛孢和新拟盘多毛孢致病菌均具有较强的抑制作用,平均EC50在0.011~0.555μg·mL^(-1)之间;其次是嘧菌酯和啶氧菌酯,这2种药剂对拟盘多毛孢和新拟盘多毛孢的室内毒力最强,平均EC50在0.007~0.020μg·mL^(-1)之间,但对炭疽菌的抑制作用较差;而啶酰菌胺和氟吡菌酰胺对油茶炭疽菌和拟盘多毛孢属致病菌几乎没有抑制作用。【结论】油茶炭疽病斑中存在炭疽菌和其他病菌复合侵染现象,咪鲜胺和苯醚甲环唑可作为防治油茶炭疽病复合侵染的主选药剂。

关键词：油茶炭疽病致病菌复合侵染药剂筛选

基于近红外高光谱的梨叶片炭疽病与黑斑病识别

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农业机械学报 2022年第2期53卷 221-230页

作者：刘莉陶红燕方静郑文娟王良龙金秀安徽农业大学园艺学院合肥230036 安徽农业大学信息与计算机学院合肥230036

针对梨炭疽病和黑斑病发病症状很相似,难以区分,导致实际生产中不便对症施药的问题,以砀山酥梨叶片为研究对象,探究利用高光谱技术来识别梨叶片炭疽病与黑斑病的可行性。首先,运用高光谱成像系统采集砀山酥梨正常叶片、炭疽病叶片和黑... 详细信息

针对梨炭疽病和黑斑病发病症状很相似,难以区分,导致实际生产中不便对症施药的问题,以砀山酥梨叶片为研究对象,探究利用高光谱技术来识别梨叶片炭疽病与黑斑病的可行性。首先,运用高光谱成像系统采集砀山酥梨正常叶片、炭疽病叶片和黑斑病叶片的高光谱图像,提取图像的平均光谱反射率。采用多元散射校正法(Multiplicative scatter correction,MSC)、SavitzkyGolay卷积平滑法和标准正态变换法(Standard normal variate,SNV)分别对原始光谱数据进行预处理。然后,采用主成分分析算法(Principal component analysis,PCA)、连续投影算法(Successive projections algorithm,SPA)、无信息变量消除法(Uniformative variable elimination,UVE)、竞争性自适应重加权算法(Competitive adaptive reweighted sampling,CARS)、随机蛙跳算法(Shuffled frog leaping algorithm,SFLA)提取特征波长,分别获取了27、12、15、26、20条特征波长,并将其作为后期建模的输入变量。经对比发现,在各基于特征波长建立的支持向量机(SVM)分类识别模型以及BP神经网络分类识别模型中,SPASVM识别模型效果最佳,测试集准确率为93.25%,建模集准确率为94.80%。试验结果证明,利用高光谱技术能够有效识别砀山酥梨叶片的黑斑病与炭疽病。

关键词：砀山酥梨炭疽病黑斑病高光谱特征波长识别模型

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广东香葱炭疽病病原菌鉴定

园艺学报 2022年第1期49卷 129-140页

作者：于琳佘小漫汤亚飞蓝国兵李正刚何自福广东省农业科学院植物保护研究所广州510640 广东省植物保护新技术重点实验室广州510640

为明确广东香葱炭疽病的病原菌种类,在广东省香葱主要产区惠州市和韶关市采集香葱炭疽病疑似病株,分离、纯化病原菌;通过病原菌分生孢子悬液接种活体香葱植株和离体植株叶片,柯赫氏法则验证,明确病原菌的致病性;通过观察病原菌的形态特... 详细信息

为明确广东香葱炭疽病的病原菌种类,在广东省香葱主要产区惠州市和韶关市采集香葱炭疽病疑似病株,分离、纯化病原菌;通过病原菌分生孢子悬液接种活体香葱植株和离体植株叶片,柯赫氏法则验证,明确病原菌的致病性;通过观察病原菌的形态特征,结合其核糖体内转录间隔区(ITS)、肌动蛋白(ACT)、几丁质合成酶1 (CHS1)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)和β微管蛋白(TUB2)基因部分序列的多基因分子系统学分析等方法,确定病原菌的分类地位。从病样中分离获得23个形态特征相似的单分生孢子分离物。致病性人工接种结果表明,供试菌株分生孢子在20和25℃下均可侵染香葱产生与田间相似的炭疽病症状,老叶较嫩叶更易感病。20℃在PDA培养基上,供试菌株菌落呈灰色,菌丝生长速度较快;25和28℃菌丝生长较慢,菌落呈花瓣状;后期在菌落表面形成橘红色分生孢子堆。分生孢子梗透明,顶端簇生分生孢子;分生孢子透明,单细胞,微弯,大小13.1~19.6μm×3.2~3.9μm。附着胞深棕色,形状不规则,大小11.7~25.5μm×5.0~14.3μm;刚毛深棕色至浅棕色,基部膨大,顶端尖或圆滑,长为44.5μm×106.4μm。这些形态特征与白蜡树刺盘孢(Colletotrichum spaethianum)基本一致。供试菌株的ITS、ACT、CHS1、GAPDH和TUB2基因序列与白蜡树刺盘孢模式菌株CBS167.49对应基因序列的一致性为99.46%~100%。系统发育树显示,该菌株与白蜡树刺盘孢的3个菌株单独聚成一支。明确了广东香葱炭疽病的病原菌为白蜡树刺盘孢,这是白蜡树刺盘孢侵染香葱引起香葱炭疽病的首次报道。

关键词：香葱炭疽病白蜡树刺盘孢病原鉴定

拮抗炭疽病的茶树内生菌筛选、鉴定及培养条件优化

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茶叶科学 2023年第2期43卷 205-215页

作者：郑世仲周子维陈晓慧蔡烈伟江胜滔刘盛荣宁德师范学院生命科学学院福建宁德352100

为筛选高效拮抗茶树炭疽病的内生细菌,以茶树健康叶片为材料,采用平板对峙拮抗法进行筛选,并对筛选到的菌株进行鉴定、抑菌效果评价及培养条件优化。从分离的162株内生细菌中筛选到1株对茶树胶孢炭疽菌有较好抑制效果的拮抗细菌X13。形... 详细信息

为筛选高效拮抗茶树炭疽病的内生细菌,以茶树健康叶片为材料,采用平板对峙拮抗法进行筛选,并对筛选到的菌株进行鉴定、抑菌效果评价及培养条件优化。从分离的162株内生细菌中筛选到1株对茶树胶孢炭疽菌有较好抑制效果的拮抗细菌X13。形态学、生理生化鉴定及16 S rDNA系统进化发育分析显示,分离的菌株X13为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。菌株X13对病原菌菌丝生长抑制率为61.6%。生长曲线表明,菌株X13对数生长期为接种后2~14 h。响应面优化的培养条件为4.0%(质量百分浓度)玉米粉,1.0%(质量百分浓度)的硝酸钠,接种量3.5%(体积分数)。本研究结果可为茶树炭疽病防治及生防菌剂的开发提供重要参考。

关键词：茶树炭疽病内生细菌枯草芽孢杆菌培养条件

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丁香精油对杧果采后炭疽病及品质的影响

食品与发酵工业 2022年第18期48卷 107-113页

作者：李俊国胡美姣弓德强母军霞王伟博高兆银李敏谷会陈千付雷新涛海南大学园艺学院海南海口570228 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所海南海口571101 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所海南海口571101 海南省热带园艺产品采后生理与保鲜重点实验室海南海口571101

为探究植物精油对杧果采后炭疽病菌的抑菌效果以及植物精油处理后对贵妃杧的采后品质的影响,分别用10种植物精油对杧果炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides)进行离体抑菌试验;以贵妃杧为试验材料,刺伤后分别用0.0、0.2、0.5、1.0、... 详细信息

为探究植物精油对杧果采后炭疽病菌的抑菌效果以及植物精油处理后对贵妃杧的采后品质的影响,分别用10种植物精油对杧果炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides)进行离体抑菌试验;以贵妃杧为试验材料,刺伤后分别用0.0、0.2、0.5、1.0、2.0和4.0μL/mL的丁香精油浸泡5.0 min后接种杧果炭疽病菌,统计炭疽病病斑直径和病情指数;以2.0μL/mL的丁香精油浸泡贵妃杧5.0 min后观察自然发病,统计病情指数和防治效果,同时研究了丁香精油对贵妃杧采后品质的影响。结果表明,离体抑菌试验中,10种供试植物精油对杧果炭疽病原菌的菌丝生体长均有明显的抑制效果,其中丁香精油的抑菌效果最好,EC_(50)值和EC_(90)值分别为0.19μL/mL和0.57μL/mL。在丁香精油对贵妃杧刺伤接种抑制效果试验中发现,贮藏12 d时,2.0μL/mL处理的病斑直径及病情指数均显著低于对照,病斑直径为10.45 mm,病情指数为46.25。同时2.0μL/mL处理能有效预防贵妃杧采后自然发病,且能显著抑制失重和果肉硬度下降,贮藏后期仍保持较高的可溶性固形物和维生素C含量(P0.05)。

关键词：植物精油丁香精油炭疽病杧果

刺葡萄VdMAPK7参与炭疽病胁迫响应的功能分析

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果树学报 2022年第11期39卷 2036-2045页

作者：雷龑陈婷刘鑫铭谢倩陈清西福建省农业科学院果树研究所福州350013 福建农林大学园艺学院福州350002

【目的】克隆刺葡萄VdMAPK7基因,并对其参与炭疽病胁迫响应的功能进行分析。【方法】结合前期转录组数据,以刺葡萄福安(Vitis davidii‘Fu’an’)为试材,通过实时荧光定量PCR(quantitative real time PCR,qRT-PCR)分析VdMAPK7基因在炭... 详细信息

【目的】克隆刺葡萄VdMAPK7基因,并对其参与炭疽病胁迫响应的功能进行分析。【方法】结合前期转录组数据,以刺葡萄福安(Vitis davidii‘Fu’an’)为试材,通过实时荧光定量PCR(quantitative real time PCR,qRT-PCR)分析VdMAPK7基因在炭疽菌侵染后不同时间点表达水平变化,通过聚类分析VdMAPK7蛋白与其他物种相关MAPK蛋白的系统发育关系。利用烟草叶片亚细胞定位技术分析VdMAPK7蛋白在细胞中的位置。在番茄中异源表达VdMAPK7基因后,番茄果实接种尖孢炭疽菌(Colletotrichum acutatum),验证其对炭疽病胁迫的响应。【结果】刺葡萄VdMAPK7基因响应炭疽菌诱导后表达量逐渐升高,在接种第7天达到高峰。VdMAPK7蛋白与欧洲葡萄、番茄、马铃薯、茶树、珙桐、烟草聚为一大类;亚细胞定位发现,VdMAPK7蛋白定位在细胞质和细胞核中;VdMAPK7转基因番茄植株矮于野生型植株,果实变小。转基因番茄果实接种尖孢炭疽菌后,相较于野生型番茄,VdMAPK7基因过表达番茄果实发病较轻;q RT-PCR结果显示,VdMAPK7基因过表达番茄植株中响应水杨酸信号通路的基因SlPR1和SlPR2上调表达。【结论】VdMAPK7基因在番茄中过量表达均可增强对尖孢炭疽菌的抗性,推测VdMAPK7基因参与了葡萄对炭疽菌的胁迫响应。

关键词：刺葡萄炭疽病 MAPK基因

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茶树炭疽病病原菌鉴定及其致病性分析

园艺学报 2022年第5期49卷 1092-1101页

作者：贡长怡刘姣姣邓强张立新安徽农业大学植物保护学院作物有害生物综合治理安徽省重点实验室合肥230036

从来自12个省份茶区的茶树炭疽病病叶分离病原菌,基于形态学和多基因聚类分析对其进行鉴定,并对不同茶区分离的纯培养物致病性进行测定。结果表明,分离到的57株菌株有明显的形态学差异,根据其在PDA上的菌落形态和分生孢子特征可划分为5... 详细信息

从来自12个省份茶区的茶树炭疽病病叶分离病原菌,基于形态学和多基因聚类分析对其进行鉴定,并对不同茶区分离的纯培养物致病性进行测定。结果表明,分离到的57株菌株有明显的形态学差异,根据其在PDA上的菌落形态和分生孢子特征可划分为5种类型。选取21个代表性菌株进行多位点(ITS、TUB2、ACT、CAL、CHS-1和GAPDH)的序列和聚类分析,发现测试菌株均属于胶孢炭疽复合种(Colletotrichum gloeosporioides complex),包括7株果生炭疽菌(C.fructicola)、8株山茶炭疽菌(C.camelliae)、3株暹罗炭疽菌(C.siamense)和3株隐秘炭疽菌(C.aenigma),其中山茶炭疽菌和果生炭疽菌在调查茶区的炭疽病叶中分离频率较高。采用刺伤接种法将测试菌株接种于‘舒茶早’离体枝条的叶片,结果显示21个代表性菌株中17株能够侵染‘舒茶早’叶片并使其发病,但不同菌种表现出致病性差异,其中山茶炭疽菌表现出强致病力,同时发现同种病原菌不同菌株间也存在致病力差异。此外,在河南茶区首次发现由果生炭疽菌引起茶树炭疽病。

关键词：茶树炭疽病病原菌鉴定聚类分析致病性

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高粱种质资源抗靶斑病和炭疽病鉴定与评价

植物遗传资源学报 2023年第3期24卷 896-902页

作者：徐婧胡兰姜钰程洪森徐秀德辽宁省农业科学院植物保护研究所沈阳110161 辽宁省农业科学院经济作物研究所辽阳111000

采用人工接种技术,2019-2020年对美国、印度、澳大利亚及中国的高粱雄性不育系(A)及相应的保持系(B)共166份材料进行高粱靶斑病(Bipolaris sorghicola)和高粱炭疽病(Colletotrichum sublineolum)抗性鉴定。结果表明,对高粱靶斑病表现高... 详细信息

采用人工接种技术,2019-2020年对美国、印度、澳大利亚及中国的高粱雄性不育系(A)及相应的保持系(B)共166份材料进行高粱靶斑病(Bipolaris sorghicola)和高粱炭疽病(Colletotrichum sublineolum)抗性鉴定。结果表明,对高粱靶斑病表现高抗(HR)的资源26份,占总数的15.66%;抗病(R)资源34份,占总数20.48%;中抗(MR)资源42份,占总数的25.30%;感病(S)资源46份,占总数的27.71%;高感(HS)资源18份,占总数的10.84%。对高粱炭疽病表现高抗(HR)的资源8份,占总数的4.82%;抗病(R)资源84份,占总数的50.60%;中抗(MR)资源56份,占总数33.73%;感病(S)资源14份,占总数的8.43%;高感(HS)资源4份,占总数的2.41%。由结果可知,雄性不育系与其相应的保持系对高粱靶斑病的抗感特性不存在差异,但极少数品系(Tx2790、91NF18、KSP335)对高粱炭疽病的抗感特性存在差异。供试材料中美国的抗高粱靶斑病和炭疽病资源所占比例较大,因此应加强国外种质资源的引进和改良。本研究共鉴定出兼抗高粱靶斑病和炭疽病的材料38份,包括美国20份,中国16份,印度2份,丰富了我国高粱抗病基因资源,有助于加快高粱抗病资源创新和品种选育进程。

关键词：高粱靶斑病炭疽病抗性鉴定

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炭疽病胁迫下采后香蕉的膜脂代谢

南方农业学报 2021年第5期52卷 1325-1333页

作者：吴小建陈茜梁朋光赵承刚栾会燕谢祖强冯小青向昱杨兆杏何雪梅广西农业科学院微生物研究所南宁530007 广西农业科学院农产品加工研究所南宁530007 烟台黄金职业学院山东烟台264000 河池市农业技术推广站广西河池547000 南丹县农作物病虫预测预报站广西河池547200 南丹县种子管理站广西河池547200

【目的】从细胞膜降解角度研究芭蕉炭疽菌(Colletotrichum musae)采后侵染香蕉果实的机制,为进一步研究香蕉炭疽病及其防控措施提供理论依据。【方法】以桂蕉6号香蕉为试验材料,采用喷雾接种芭蕉炭疽菌侵染香蕉果实,以果实喷雾蒸馏水作... 详细信息

【目的】从细胞膜降解角度研究芭蕉炭疽菌(Colletotrichum musae)采后侵染香蕉果实的机制,为进一步研究香蕉炭疽病及其防控措施提供理论依据。【方法】以桂蕉6号香蕉为试验材料,采用喷雾接种芭蕉炭疽菌侵染香蕉果实,以果实喷雾蒸馏水作对照,每3 d取样1次,通过测定采后贮藏过程中香蕉果实的病情指数、果实硬度及果皮电导率、细胞膜降解关键酶活性、细胞膜磷脂和脂肪酸组分与含量的变化规律,明确炭疽菌侵染对香蕉果皮膜脂代谢的影响。【结果】接种芭蕉炭疽菌可促进香蕉果实炭疽病的发生,病情指数随贮藏时间的延长而增加,同时果实硬度下降、果皮电导率升高,贮藏至第15 d,炭疽菌侵染组与对照组相比,果实的病情指数显著增加61.31%(P炭疽菌侵染促进香蕉果皮膜脂代谢相关酶[磷脂酶C(PLC)、磷脂酶D(PLD)和脂氧合酶(LOX)]活性增强,贮藏至第15 d,炭疽菌侵染组的果皮PLC、PLD和LOX活性较对照组分别显著提高31.21%、63.72%和26.24%;同时炭疽菌侵染加速果皮细胞膜磷脂[磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰肌醇(PI)和磷脂酰乙醇胺(PE)]降解为磷脂酸(PA)、不饱和脂肪酸(油酸、亚油酸和亚麻酸等)氧化为饱和脂肪酸(棕榈酸和硬脂酸等),贮藏至第15 d,与对照组相比,炭疽菌侵染组的果皮不饱和脂肪酸总量降低12.97%,饱和脂肪酸总量则提高17.77%。炭疽菌侵染促进香蕉果皮氧化,贮藏至第15 d,炭疽菌侵染组的丙二醛(MDA)和过氧化氢(H2O2)含量较对照组分别提高17.23%和13.58%。【结论】炭疽病菌侵染与贮藏期间香蕉果皮细胞膜脂代谢有关,炭疽菌侵染加剧细胞膜水解,导致细胞膜结构破坏和功能丧失,从而促使炭疽病发生。

关键词：香蕉炭疽病果皮膜脂降解酶膜脂组分脂肪酸