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氯胺酮和氯诺昔康对慢性关节炎疼痛治疗的实验研究

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氯胺酮和氯诺昔康对慢性关节炎疼痛治疗的实验研究

作者：张浒昆明医学院

学位级别：硕士

目的：在大鼠慢性关节炎模型上，监测大鼠血浆谷氨酸的变化，研究关节腔内注射氯诺昔康、氯胺酮及两药联用对慢性关节炎疼痛的疗效。方法：70只SD大鼠，随机分为：对照组(n=20)和实验组(n=50)，对照组右踝关节腔注射生理盐水0.05ml... 详细信息

目的：在大鼠慢性关节炎模型上，监测大鼠血浆谷氨酸的变化，研究关节腔内注射氯诺昔康、氯胺酮及两药联用对慢性关节炎疼痛的疗效。方法：70只SD大鼠，随机分为：对照组(n=20)和实验组(n=50)，对照组右踝关节腔注射生理盐水0.05ml，实验组右踝关节腔内注射完全弗氏佐剂(CFA)0.05ml。从第四周开始，对照组和实验组随机取10只大鼠，右踝关节侧位X光照片，随后处死取右踝关节做病理切片；实验组剩余40大鼠随机平均分为4组：无治疗组(N组)；氯诺昔康组(L组)；氯胺酮组(K组)；联合治疗组(KL组)。N组大鼠不给任何药物治疗，其他三组每周右侧关节腔内给药三次，每次间隔2天，治疗两周，K组每次给氯胺酮10mg／kg，L组氯诺昔康4mg／kg，KL组氯胺酮5mg／kg+氯诺昔康2mg／kg。各组于治疗前、治疗一周、治疗两周进行大鼠右踝关节直径测定、屈关节疼痛试验评分、运动评分和血浆谷氨酸含量测定。最后，全部处死，取右踝关节做病理切片。结果： (1)治疗前右踝关节X线照片和病理切片结果均支持大鼠慢性关节炎疼痛模型建立。 (2)治疗前实验组动物右踝关节直径高于对照组(p＜0.01)；治疗两周氯诺昔康组和联合治疗组右踝关节直径低于无治疗组(p＜0.01)。 (3)治疗前实验组动物屈关节疼痛试验评分高于对照组(p＜0.01)、运动评分低于对照组(p＜0.01)；治疗两周三个治疗组屈关节疼痛试验评分低于无治疗组(p＜0.01)、运动评分高于无治疗组(p＜0.01)。 (4)治疗前各实验组血浆谷氨酸显著高于对照组(p＜0.01)；治疗两周后三昆明医学院硕士学位论文个治疗组与对照组相比无显著差异，显著低于无治疗组(P炎症均有不同程度的减轻，氯诺昔康组和联合治疗组有新生关节软骨的形成。结论: (l)关节腔内注射氧诺昔康或氯胺酮均可缓解慢性关节炎疼痛。 (2)关节腔内注射氛诺昔康抗炎作用明显，还可促进受损关节的修复。 (3)关节腔内联合注射氯胺酮和氯诺昔康，在达到镇痛、抗炎和促进关节修复的前提下，可大大减少氯胺酮和氯诺昔康的用量。

关键词：氯胺酮氯诺昔康关节腔注射炎症痛镇痛

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腺苷A1受体介导艾灸镇痛作用研究

腺苷A1受体介导艾灸镇痛作用研究

作者：胡丽萍成都中医药大学

学位级别：硕士

目的：明确腺苷A1受体是否参与艾灸的镇痛作用。方法：以C57BL/6J小鼠为研究对象,筛选基础热痛阈值在10 s-16 s的小鼠,随机分为空白组、造模组;造模组予小鼠右足底注射完全弗氏佐剂20μL建立炎症痛模型,造模后第4天,在小鼠右侧“足三里... 详细信息

目的：明确腺苷A1受体是否参与艾灸的镇痛作用。方法：以C57BL/6J小鼠为研究对象,筛选基础热痛阈值在10 s-16 s的小鼠,随机分为空白组、造模组;造模组予小鼠右足底注射完全弗氏佐剂20μL建立炎症痛模型,造模后第4天,在小鼠右侧“足三里”处分别运用CCPA(A1受体激动剂)、CPT(A1受体拮抗剂)进行干预;模灸组小鼠于“足三里”穴位温和灸,施灸15 min;镇痛效应测定分别在造模前、造模后第4天(即艾灸治疗前)、艾灸后15min、45 min、75 min、105 min、135 min用PL-200热刺痛仪测定热痛阈;采用实时荧光定量PCR技术检测下丘脑AiR mRNA表达;统计分析采用SPSS23.0统计软件处理。结果：(1)炎症痛模型小鼠艾灸镇痛效应与空白组比较,模型组小鼠痛阈降低,差异有统计学意义(P痛阈显著提高,在15～75 min时差异有统计学意义(P痛作用的影响1)腺苷A1受体激动剂对艾灸镇痛作用的影响①单独注射三种不同浓度激动剂(CCPA) (0.05 mM、0.1mM、0.2 mM)对模型组进行干预后,痛阈均升高;CFA+CCPA 0.05 mM组在注射后45～135 min时,较注射前升高(P痛阈均升高;CFA+MOXI+CCPA 0.05 mM组在干预后,在15～135 min与模灸组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);CFA+MOXI+CCPA0.1 mM组和CFA+MOXI+CCPA 0.2 mM组在干预后15～135 min,均比模灸组痛阈有所提高(P痛阈值在15～75 min均有所提高(P痛阈均提高(P痛作用的影响①单独注射三种不同浓度拮抗剂(CPT)(75 nM、150 nM、300 nM)对模型组进行干预,CFA+CPT 75 nM组及CFA+CPT 150 nM组在注射后15～105 min,CFA+CPT 300 nM组在注射后15～135 min时痛阈下降,与注射前比较有差异(P痛阈均有所下降;与模灸组比较,CFA+MOXI+CPT 75 nM组、CFA+MOXI+CPT 150 nM组、CFA+MOXI+CPT 300 nM组在干预后15-105 min,痛阈均有所降低,差异有统计学意义(P痛阈均升高(P痛阈升高,差异有统计学意义(P炎症痛小鼠痛阂,镇痛效应在灸后约45 min达到高峰;2.局部腺苷A1受体参与艾灸镇痛;①激活穴位局部A1受体增强艾灸镇痛效应;②阻断穴位局部A1受体减弱艾灸镇痛效应;3.下丘脑腺苷A1受体可能参与艾灸镇痛。

关键词：艾灸镇痛炎症痛腺苷A1受体下丘脑

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枳实对大鼠疼痛敏感性的影响

中国老年学杂志 2023年第24期43卷 6067-6070页

作者：沈勇徐佳琦何帅帅付立波王紫怡王可吕航王雪纯长春师范大学生命科学学院吉林长春130032 深圳桃源居中澳实验学校

目的探讨枳实水煮液对大鼠疼痛敏感性的影响。方法分别对正常和炎症痛模型大鼠用15.5、31.0,62.0和118.0 mg/ml浓度的枳实水煮液灌胃,并进行热板与压板测试,分别观察与记录5、10、15、20、30、45、60 min 7个时间点大鼠后爪缩爪潜伏期(H... 详细信息

目的探讨枳实水煮液对大鼠疼痛敏感性的影响。方法分别对正常和炎症痛模型大鼠用15.5、31.0,62.0和118.0 mg/ml浓度的枳实水煮液灌胃,并进行热板与压板测试,分别观察与记录5、10、15、20、30、45、60 min 7个时间点大鼠后爪缩爪潜伏期(HWL),以大鼠HWL作为疼痛敏感性影响的指标,分别与灌胃生理盐水进行比较。结果正常及炎症痛模型大鼠灌胃62、1.0、118.0 mg/ml的枳实水煮液,左、右后爪热板和压板HWL明显长于灌胃生理盐水(均P炎症痛模型大鼠HWL,表明枳实参与了疼痛敏感性的变化,对正常与炎症痛模型大鼠均具有镇痛调节作用,且均存在剂量依赖性,在20 min时镇痛效果最佳。

关键词：枳实后爪缩爪反应潜伏期炎症痛疼痛敏感性变化

外周组织损伤对脑内AMPA受体突触表达的调控机制

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外周组织损伤对脑内AMPA受体突触表达的调控机制

作者：刘涛燕中央民族大学

学位级别：硕士

使君子酸(AMPA)受体是离子型谷氨酸受体,由GluA1-4四个亚基组成的异四聚体或同四聚体,广泛分布于中枢神经系统(CNS)里,并在CNS中介导绝大多数快速反应兴奋性突触传递。AMPA受体在突触可塑性、学习与记忆和痛觉调节等过程中发挥极其重要... 详细信息

使君子酸(AMPA)受体是离子型谷氨酸受体,由GluA1-4四个亚基组成的异四聚体或同四聚体,广泛分布于中枢神经系统(CNS)里,并在CNS中介导绝大多数快速反应兴奋性突触传递。AMPA受体在突触可塑性、学习与记忆和痛觉调节等过程中发挥极其重要的作用。目前大量研究集中于阐明外周组织损伤引起的病理性疼痛在脊髓水平突触后AMPA受体表达的变化所引起功能的改变,但在脊髓水平以上的相关研究较少。中脑导水管周围灰质(PAG)是一个结构与功能均非常复杂的痛觉信息整合区域,广泛参与痛觉以及与疼痛引发的情绪反应的调控;伏核(NAc)是边缘系统中对痛觉的调节有重要作用的核团。本实验使用神经药理行为学的方法从整体水平探讨外周组织损伤对AMAP受体亚基在脑内神经元转运的影响,并探讨其分子机制。本课题的研究方法主要是:第一部分①正常组大鼠PAG内注射 0.15pmol、7.5pmol 或 15pmol AMPA 受体内化抑制剂GluA2-3y 后10、15、20、30、45、60min用热板仪和压板仪测量大鼠对伤害性机械刺激和伤害性热刺激的缩爪反应潜伏期;②建立坐骨神经结扎引起的神经损伤模型,建立后第10天大鼠PAG内注射0.15pmol、1.5pmol或15pmol GluA2-3y 10、15、20、30、45、60min后用热板仪和压板仪测量大鼠对伤害性机械刺激和伤害性热刺激的缩爪反应潜伏期;③建立角叉菜胶(Carrageenan)导致炎症痛模型3个小时后大鼠 PAG 内注射 0.15pmol、1.5pmol 或 15pmolGluA2-3y10、15、20、30、45、60min后用热板仪和压板仪测量大鼠对伤害性机械刺激和伤害性热刺激的缩爪反应潜伏期;④正常组大鼠、神经痛组大鼠及炎症痛组大鼠PAG内分别注射10mg/ml(35nmol)的吗啡30min后测量大鼠对伤害性机械刺激和伤害性热刺激的缩爪反应潜伏期,并与高剂量GluA2-3y的缩爪反应潜伏期相比较;第二部分雄性SD大鼠10只,随机分为两组假手术组(sham组)和坐骨神经结扎组(CCI组),CCI模型采用坐骨神经结扎的方法建立,假手术组仅显露坐骨神经,并不进行结扎。用热板仪和压板仪测量两组大鼠伤害性热刺激和伤害性机械刺激痛阈后处死大鼠,取大鼠伏核和PAG标本,采用免疫蛋白印迹(Weston blot)技术,从蛋白质水平研究神经痛中不同核团AMPA受体亚基表达的变化。实验结果总结如下①正常组、神经痛组及炎症痛组大鼠PAG内注射含GluA2亚基的AMPA受体内化抑制剂GluA2-3y引起明确的镇痛作用,提示含GluA2亚基的AMPA受体在PAG内参与了痛觉的调节;②在神经痛组大鼠和炎症痛组大鼠PAG内注射GluA2-3y后有很强的镇痛效果,有趣的是,我们发现高剂量的GluA2-3y与吗啡有相似的镇痛效果,而在正常组中GluA2-3y的镇痛效果要弱于吗啡的镇痛效果,这表明GluA2-3y的镇痛机制与吗啡的机制不同;③Western Blot实验结果显示神经痛组PAG内GluA2的表达量均无明显变化,神经痛大鼠的伏核内GluA2亚单位的表达量升高,GluA1亚基的表达无明显变化。以上实验结果发现,外周组织损伤促进了大脑PAG内含GluA2亚基的AMPA受体的内化,抑制含GluA2亚基的内化能缓解外周损伤导致的痛敏,这可以作为一种新的靶点来治疗外周组织损伤引起的疼痛;另外伏核中AMPA受体可能也参与了神经痛的调节或传递,这为痛觉调节机制提供了新的思路。

关键词： AMPA受体 GluA2-3y 神经痛炎症痛中脑导水管周围灰质伏核

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催产素作用于中央杏仁核对大鼠痛觉的影响

催产素作用于中央杏仁核对大鼠痛觉的影响

作者：韩毅云南大学

学位级别：硕士

目的：研究催产素及中央杏仁核对炎症性疼痛及神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用,为寻找有效的镇痛药物或镇痛手段提供理论依据。方法：在雄性SD大鼠后爪皮下注射carrageena或采用结扎坐骨神经分别制作炎症大鼠和神经病理性疼痛大鼠模型。... 详细信息

目的：研究催产素及中央杏仁核对炎症性疼痛及神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用,为寻找有效的镇痛药物或镇痛手段提供理论依据。方法：在雄性SD大鼠后爪皮下注射carrageena或采用结扎坐骨神经分别制作炎症大鼠和神经病理性疼痛大鼠模型。中央杏仁核中注射催产素,观察其对炎症性疼痛及神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用。用催产素受体阻断剂atosiban和阿片肽受体阻断剂naloxon预先阻断相应受体,再进一步观察催产素对大鼠痛阈的变化,探讨催产素受体和阿片类受体在中央杏仁核中的痛觉调节作用及其相关性。结果：在炎症痛大鼠模型中,中央杏仁核注射0.5和1 nmol催产素时,能够明显延长大鼠的热痛阈和压力痛阈,且呈现明显的剂量依赖性。催产素的镇痛作用可被其受体特异性拮抗剂atosiban阻断。在神经痛大鼠模型中,中央杏仁核注射0.25和0.5 nmol催产素后,能够明显延长大鼠的热痛阈和压力痛阈,且呈现明显的剂量依赖性。催产素的镇痛作用可被其受体特异性拮抗剂atosiban阻断。但是,阿片受体阻断剂naloxone对催产素在上述两种疼痛模型大鼠的镇痛作用均没有影响。结论：在炎症性疼痛及神经病理性疼痛大鼠中,催产素均可通过其受体在中央杏仁核减轻疼痛。催产素的镇痛作用与阿片类受体无关。

关键词：催产素中央杏仁核炎症痛神经痛痛觉过敏

辣椒素受体SUMO化修饰在炎性疼痛中的作用

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辣椒素受体SUMO化修饰在炎性疼痛中的作用

作者：王扬博上海交通大学

学位级别：硕士

SUMO化修饰（SUMOylation）是一种广泛存在于细胞内的类泛素化蛋白质翻译后修饰,能够调控底物蛋白的折叠、定位、稳定性及功能活性等。近年来的研究发现,SUMO化修饰在中枢神经系统神经元的兴奋性、突触传递及可塑性方面具有重要的调节作... 详细信息

SUMO化修饰（SUMOylation）是一种广泛存在于细胞内的类泛素化蛋白质翻译后修饰,能够调控底物蛋白的折叠、定位、稳定性及功能活性等。近年来的研究发现,SUMO化修饰在中枢神经系统神经元的兴奋性、突触传递及可塑性方面具有重要的调节作用,并且能够作用于神经系统疾病相关蛋白来影响疾病的发生发展过程。然而SUMO化修饰在外周初级感觉神经元中的作用还未有报道。本课题的研究发现SUMO1以及SENP1蛋白（SUMO特异性蛋白酶1）广泛表达于小鼠背根神经节的初级感觉神经元中。通过构建SENP1在背根神经节条件性敲除的小鼠,使其初级感觉神经元内蛋白处于过度SUMO化的状态,我们发现SENP1基因敲除小鼠的炎性热痛觉敏感度显著上升。进一步采用生化及电生理实验发现,介导炎性痛觉过敏的辣椒素受体（TRPV1）能够被SUMO1修饰,且修饰位点存在于其蛋白C末端的第822位赖氨酸。重要的是当修饰位点突变时TRPV1通道对于capsaicin的敏感性明显降低。此外,在炎症反应的条件下,神经元内信号通路通过激活蛋白激酶磷酸化TRPV1,使其通道发生敏化。生化实验结果表明,PMA诱导的TRPV1（K822）第800位丝氨酸的磷酸化修饰程度也显著降低。最后,通过足底注射干扰肽特异性抑制小鼠外周感觉神经元内TRPV1的SUMO化修饰,我们发现活性干扰肽能够通过抑制TRPV1的SUMO化修饰来缓解小鼠的炎性热痛敏化。综上结果表明,在炎症状态下,初级感觉神经元内的SUMO化修饰能够调控TRPV1通道的功能活性,即促进通道的激活以及炎症通路激活依赖的磷酸化修饰,提高机体的痛觉敏感性。本课题的研究为深入理解SUMO化修饰在外周神经系统中的作用以及进一步探究炎症疼痛的机制打下了良好的基础。

关键词： SUMO1 SENP1 初级感觉神经元炎症痛辣椒素受体

鞘内注射8-OH-DPAT和尼莫地平对大鼠炎性痛敏的影响

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鞘内注射8-OH-DPAT和尼莫地平对大鼠炎性痛敏的影响

作者：马彩艳苏州大学

学位级别：硕士

目的:在脊髓水平研究5-HT1A激动剂8-OH-DPAT和L型钙通道阻滞剂尼莫地平对炎性痛敏的影响及其可能机制.方法:104只成年雄性SD大鼠脊髓蛛网膜下腔置管后随机分为13组(n=8)。用角叉菜胶于右侧足底致炎后,分别鞘内注射生理盐水或/和不同药物... 详细信息

目的:在脊髓水平研究5-HT1A激动剂8-OH-DPAT和L型钙通道阻滞剂尼莫地平对炎性痛敏的影响及其可能机制.方法:104只成年雄性SD大鼠脊髓蛛网膜下腔置管后随机分为13组(n=8)。用角叉菜胶于右侧足底致炎后,分别鞘内注射生理盐水或/和不同药物,以VonFrey Monofilaments测定的机械痛阈值和热辐射缩足潜伏期,观察大鼠给药后,在3小时及15小时时痛阈的变化。结果:大鼠足掌心以角叉菜胶致炎后,3小时及15小时两个时相的痛阈值都明显降低。致炎后鞘内给予5-HT1A激动剂8-OH-DPAT对于早期时相有镇痛作用,并且呈剂量依赖性,而对于晚期时相未观察到有明显镇痛作用。小剂量L型钙通道阻滞剂尼莫地平对于炎性痛两个时相痛阈值均无明显作用,但可增加8-OH-DPAT对于早期时相的镇痛作用。结论:(1)5-HT1A激动剂8-OH-DPAT对炎性痛的早期时相有镇痛作用。(2 )L型钙通道阻滞剂尼莫地平单独鞘内给药不能有效地缓解炎性痛,但可增加8-OH-DPAT的早期时相的镇痛作用。

关键词：炎症痛脊髓尼莫地平 8-OH-DPAT

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腺苷A2a受体介导艾灸镇痛作用研究

腺苷A2a受体介导艾灸镇痛作用研究

作者：岳运青成都中医药大学

学位级别：硕士

目的:明确腺苷A2a受体是否参与艾灸的镇痛作用。方法:选取成年雌雄各半C57BL/6J小鼠,筛选出痛阈稳定的小鼠,随机分为空白组、造模组。造模组小鼠给予完全弗氏佐剂(Complete Freund’s adjuvant,CFA)于右足底注射20μL诱导炎症痛模型。... 详细信息

目的:明确腺苷A2a受体是否参与艾灸的镇痛作用。方法:选取成年雌雄各半C57BL/6J小鼠,筛选出痛阈稳定的小鼠,随机分为空白组、造模组。造模组小鼠给予完全弗氏佐剂(Complete Freund’s adjuvant,CFA)于右足底注射20μL诱导炎症痛模型。造模后第4天,将造模组小鼠随机分为模型组、模型+CGS21680(腺苷A2a受体激动剂)组、模型+SCH58261(腺苷A2a受体拮抗剂)组、模灸组、模灸+CGS21680组、模灸+SCH58261组。我们于模型+CGS21680组、模型+SCH58261组小鼠的右侧“足三里”处分别注射CGS21680或SCH58261后,捆绑15 min;于模灸组小鼠“足三里”穴位处行温和灸15 min;于模灸+CGS21680组、模灸+SCH58261组小鼠“足三里”处局部采用激动剂或拮抗剂注射后立即进行温和灸干预,方法同前一致。痛阈测定分别在造模前、造模后第4天(艾灸干预前)、艾灸干预结束后0 min、30 min、60 min、90 min、120 min用PL-200热刺痛仪测定小鼠右后足底中部位置,记录热痛阈值;采用实时荧光定量PCR技术检测下丘脑A2aR mRNA表达;运用SPSS23.0、GraphPad Prism 6统计软件对实验数据进行统计分析处理。结果:1.艾灸“足三里”穴对炎症痛模型小鼠的镇痛效应与空白组比较,模型组小鼠痛阈值在各时间点均降低(P痛阈值升高。其中,灸后00 min内痛阈值升高显著(P痛效应的影响(1)激动与拮抗“足三里”处腺苷A2a受体对炎症痛小鼠痛阈值的影响:运用CGS21680激动模型鼠“足三里”处腺苷A2a受体后,与模型组比较,热痛阈值下降,在00 min显著降低(P痛阈升高但维持时间短暂,只在注射后的0 min显著升高(P痛效应:(1)与模灸组比较,模灸+CGS21680组在艾灸结束后020 min内痛阈值均显著下降(P痛阈较模型+CGS21680组有升高趋势,艾灸后0 min、60 min痛阈值显著升高(P痛效应:(1)与模灸组比较,模灸+SCH58261组痛阈值在艾灸结束后0 min时显著增高(P痛阈值逐渐降低,至灸后6020 min时降至模型组水平。(2)与模型+SCH58261组比较,模灸+SCH58261组痛阈升高,在灸后0 min时虽低于模型+SCH58261组,但差异无统计学意义(P>0.05),在30 min时高于模型+SCH58261组(P炎症痛模型小鼠有镇痛效应;2.局部腺苷A2a受体参与艾灸镇痛;1)激活穴位局部腺苷A2a受体可阻断艾灸镇痛效应;2)拮抗穴位局部腺苷A2a受体可增强艾灸镇痛效应。3.下丘脑腺苷A2a受体可能参与艾灸镇痛。

关键词：艾灸镇痛炎症痛腺苷A2a受体下丘脑

多次联合注射可乐定与氯胺酮对单发性佐剂性关节炎的治疗作用

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中国疼痛医学杂志 1999年第2期5卷 91-96页

作者：王韵黄诚曹羽韩济生北京医科大学神经科学研究所赣南医学院生理教研室

目的：观察多次联合注射氯胺酮（ｋｅｔａｍｉｎｅ）及可乐定（ｃｌｏｎｉｄｉｎｅ）对关节炎的治疗作用。方法：用半剂量法设计实验，观察皮下联合注射氯胺酮（剂量固定）及可乐定（剂量变动）对单发性佐剂性关节炎的治疗作用。给药方... 详细信息

目的：观察多次联合注射氯胺酮（ｋｅｔａｍｉｎｅ）及可乐定（ｃｌｏｎｉｄｉｎｅ）对关节炎的治疗作用。方法：用半剂量法设计实验，观察皮下联合注射氯胺酮（剂量固定）及可乐定（剂量变动）对单发性佐剂性关节炎的治疗作用。给药方式为每天皮下注射一次，每周５次，共治疗４周。疼痛评分采用背屈踝关节测痛试验，一周评分一次。动物的一般状况以体重增长速率为指标，炎症程度用踝周长表示。结果：（１）皮下联合注射氯胺酮（５ｍｇ／ｋｇ）及可乐定（２０μｇ／ｋｇ或者４０μｇ／ｋｇ）产生的镇痛效应显著大于单独注射氯胺酮（１０ｍｇ／ｋｇ）或可乐定（４０μｇ／ｋｇ或８０μｇ／ｋｇ）。（２）联合注射组动物的关节肿胀程度与单独注射可乐定或氯胺酮组无显著差异。（３）长期应用有协同镇痛作用的剂量组合对动物体重增长无明显影响。结论：氯胺酮与一定剂量的可乐定联合应用时具有显著的协同镇痛作用，但无协同消炎作用。有协同镇痛效应的剂量组合长期应用时对动物未产生明显的毒副作用。

关键词：氯胺酮可乐定炎症痛镇痛佐剂性关节炎