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生物化学与生物物理进展 2024年

作者：杨琪彭加金王乐卢颀梅宏成戈文东张涛季安全叶健康克莱中国人民公安大学公安部鉴定中心法医遗传学公安部重点实验室昆明医科大学法医学院福建省公安厅刑事技术总队新疆生产建设兵团公安局

目的灰尘作为法庭科学极具特色和应用价值的物证，其中包含丰富的环境dna信息，逐渐成为领域内的前沿研究热点。然而，作为办案应用中的关键基础环节，从法庭科学领域实际应用出发的物体表面灰尘的采集及dna提取研究，仍亟待开展。方法... 详细信息

目的灰尘作为法庭科学极具特色和应用价值的物证，其中包含丰富的环境dna信息，逐渐成为领域内的前沿研究热点。然而，作为办案应用中的关键基础环节，从法庭科学领域实际应用出发的物体表面灰尘的采集及dna提取研究，仍亟待开展。方法使用Copan Liquid Amies Elution Swab拭子擦拭物体表面采集灰尘，将采集样品管内拭子头、沉淀、上清液分别提取dna，评估dna含量从而选定应处理和裂解的样品管内成分。按照5种不同采样面积(25～400 cm2)采集灰尘样本并检测dna浓度，确定合适的采样面积。比较3种商业化dna提取试剂盒对灰尘样本的提取效果，并检测评估提取的灰尘dna片段大小、提取的灰尘dna是否含人源dna，同时通过16S rdna扩增子测序分析物体表面灰尘dna中的细菌信息，从而建立灰尘dna提取产物的质量控制方法。针对dna提取中的细胞裂解关键步骤，比较评估在不同的细胞裂解方式以及震荡裂解次数下提取dna的量，从而建立适合灰尘dna提取的细胞裂解方法。结果灰尘采样管内沉淀与拭子头为dna的主要来源部位，后续提取时均应纳入处理。灰尘的采样面积与灰尘dna浓度呈正相关，且灰尘采样面积宜大于5 cm×5 cm。使用DNeasy PowerSoil Pro试剂盒可以获得较高的dna产量，同时3种dna提取试剂盒提取的dna片段大小均无显著差异，从上述灰尘样本提取的dna中未检出人源dna，而物体表面灰尘dna中含有细菌dna，并且不同采样点之间的微生物物种组成存在差异。此外，使用生物样品均质器进行研磨裂解4 min（2 min×2次）时，得到的灰尘dna浓度最高。结论灰尘dna的提取与采样面积、提取试剂盒、裂解方式均有关，建立完整且适合的灰尘dna提取方案至关重要。这不仅为研究挖掘灰尘中的环境dna数据打下基础，还为环境样本的实际办案应用提供了方法参考。

关键词：灰尘dna 灰尘采集 dna提取微生物组

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