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一株松鼠葡萄球菌JS-1对鲫的致病性及其灭活疫苗保护作用

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水产学报 2022年第9期46卷 1669-1679页

作者：马爽蒋弥李艳红刘炀孙瑜唐晓琪吴正理西南大学水产学院西南大学渔业资源环境研究中心

为探究松鼠葡萄球菌JS-1对鲫的致病性及其灭活疫苗保护作用，本实验设计了注射感染实验、投喂感染实验和灭活疫苗保护实验，通过组织病理学观察、实时荧光定量PCR(qPCR)和酶活性检测等方法进行分析。结果显示，注射实验中鲫全身性出血... 详细信息

为探究松鼠葡萄球菌JS-1对鲫的致病性及其灭活疫苗保护作用，本实验设计了注射感染实验、投喂感染实验和灭活疫苗保护实验，通过组织病理学观察、实时荧光定量PCR(qPCR)和酶活性检测等方法进行分析。结果显示，注射实验中鲫全身性出血、肝脏充血肿大，96 h LD50为5×10~6 CFU/mL。投喂含不同浓度JS-1的饲料后，鲫肝脏、脾脏、肾脏出现病变，细胞坏死；血清中转氨酶呈先增加后减少的趋势，高浓度(HG)组降低趋势最明显，溶菌酶活性显著升高；鲫肝脏和脾脏中TNF-α和IFN-γ表达量均先增加后减少，且显著高于对照组。注射灭活疫苗后，血清中溶菌酶活性显著高于对照组，而碱性磷酸酶、转氨酶、超氧化物歧化酶活性显著低于对照组，过氧化氢酶活性显著升高；经灭活疫苗免疫后的血清中，特异性IgM和总IgM与对照组相比都显著增加，注射感染JS-1 10 d后鲫的存活率达83.3%。研究表明，松鼠葡萄球菌JS-1对鲫的致病性强，其灭活疫苗可为鲫提供有效的保护，为松鼠葡萄球菌疫苗的开发提供了理论基础。

关键词：鲫松鼠葡萄球菌致病性免疫基因表达非特异性免疫灭活疫苗

成人接种2剂新冠灭活疫苗12个月后T细胞免疫应答特点

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解放军医学杂志 2024年第2期49卷 165-170页

作者：王静李亚群汪海燕宋曜如李静王文鑫万林钰周春保范兴王福生中国科学技术大学附属第一医院安徽合肥230001 解放军总医院第五医学中心感染病医学部/国家感染性疾病临床医学研究中心北京100039 北京大学302临床医学院北京100039

目的评估成年人接种新型冠状病毒(SARS-CoV-2)灭活疫苗12个月后不同抗原特异性T细胞免疫应答的特点。方法解放军总医院第五医学中心2022年4-6月招募15名健康成年人,于接种2剂新冠灭活疫苗12个月后采集其静脉血标本,以基于多色流式细胞... 详细信息

目的评估成年人接种新型冠状病毒(SARS-CoV-2)灭活疫苗12个月后不同抗原特异性T细胞免疫应答的特点。方法解放军总医院第五医学中心2022年4-6月招募15名健康成年人,于接种2剂新冠灭活疫苗12个月后采集其静脉血标本,以基于多色流式细胞术的活化诱导标记法(AIM)检测SARS-CoV-2抗原特异性T淋巴细胞水平,并分析其记忆表型与亚群分化特点。结果成年人接种2剂灭活疫苗12个月后,90%以上个体可检测到Spike及Non-spike特异性CD4^(+)T细胞反应(S:14/15,P=0.0001;NS:15/15,P灭活疫苗接种后能诱导广泛且持久的抗原特异性CD4^(+)T细胞反应,可能是当前国内新型冠状病毒感染重症化比例较低的关键因素。

关键词：新型冠状病毒灭活疫苗 T细胞免疫应答

嗜水气单胞菌灭活疫苗免疫施氏鲟后的免疫应答反应与保护效果

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中国水产科学 2018年第1期25卷 195-203页

作者：周勇史玉恒赵建青代建丽范玉顶刘文枝江南曾令兵中国水产科学研究院长江水产研究所武昌理工学院生命科学学院

为了研究嗜水气单胞菌灭活疫苗免疫施氏鲟(Acipenser schrenckii Brandt,1869)后的免疫应答反应与保护效果,本研究采用福尔马林灭活法制备嗜水气单胞菌灭活疫苗。通过腹腔注射途径免疫健康施氏鲟,对施氏鲟外周血的红细胞和白细胞数量、... 详细信息

为了研究嗜水气单胞菌灭活疫苗免疫施氏鲟(Acipenser schrenckii Brandt,1869)后的免疫应答反应与保护效果,本研究采用福尔马林灭活法制备嗜水气单胞菌灭活疫苗。通过腹腔注射途径免疫健康施氏鲟,对施氏鲟外周血的红细胞和白细胞数量、白细胞组成、吞噬活性、吞噬指数、血清酸性磷酸酶活性、血清溶菌酶活性、血清中和抗体效价等免疫指标及疫苗保护效果进行测定。结果显示,免疫组红、白细胞数量迅速上升,于免疫后第4天达峰值,分别为(8.50±0.17)×108个/mL和(8.96±0.44)×106个/mL;单核细胞和嗜中性粒细胞分类百分比于第7天达峰值,分别为10.50%和15.53%,极显著高于对照组(P灭活疫苗免疫施氏鲟后,能够显著诱导施氏鲟体内的免疫应答反应,增强鱼体的免疫保护能力。本研究为养殖鲟因嗜水气单胞菌感染引起疾病的免疫预防技术研究奠定了前期基础。

关键词：嗜水气单胞菌施氏鲟灭活疫苗免疫指标相对免疫保护率

一种佐剂新材料在嗜水气单胞菌灭活疫苗浸泡免疫异育银鲫中的应用效果

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水产学报 2018年第1期42卷 112-119页

作者：任燕时云朵石存斌吴淑勤中国水产科学研究院珠江水产研究所广东省水产动物免疫技术重点实验室农业部渔用药物创制重点实验室四川省水产学校上海海洋大学水产与生命学院

为研究蓖麻油聚乙二醇单酯葡萄糖苷(CPMG)在细菌灭活疫苗浸泡免疫中的佐剂作用,将CPMG和嗜水气单胞菌灭活疫苗联合施用,二次浸泡免疫异育银鲫后饲养在室内玻璃缸中,用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测加强免疫后2、4、7、11、14和21 d脾脏中... 详细信息

为研究蓖麻油聚乙二醇单酯葡萄糖苷(CPMG)在细菌灭活疫苗浸泡免疫中的佐剂作用,将CPMG和嗜水气单胞菌灭活疫苗联合施用,二次浸泡免疫异育银鲫后饲养在室内玻璃缸中,用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测加强免疫后2、4、7、11、14和21 d脾脏中Ig M、IL-1β、C3、C-凝集素和溶菌酶的m RNA表达量,首次免疫30 d后用同源菌株活菌攻击实验鱼;同时,用含CPMG、山莨菪碱复合佐剂的灭活疫苗浸泡免疫异育银鲫一次后饲养在池塘网箱中,定期抽取血液检测血清抗体效价并用同源菌株人工感染实验鱼。结果显示,CPMG佐剂组和无佐剂组的5个免疫相关基因的相对表达量显著高于对照组,CPMG组Ig M基因较无佐剂组更早表达,补体C3、C-凝集素以及溶菌酶的基因表达量更高或表达持续时间更长。血清抗体效价在免疫后2周达到160,6周达到峰值640,12周降低为40。室内玻璃缸中二次免疫30 d后,CPMG组的平均相对保护率达到70.6%,复合佐剂组达到88.2%,均显著高于无佐剂组的56.0%。池塘网箱中一次浸泡免疫30、60和120 d后,平均相对保护率分别为54.6%、44.0%和12.5%。研究表明,CPMG与嗜水气单胞菌灭活疫苗共同浸泡免疫异育银鲫,增强了脾脏中Ig M、IL-1β、C3、C-凝集素以及溶菌酶基因表达,提高了异育银鲫抗嗜水气单胞菌感染的能力。

关键词：异育银鲫蓖麻油聚乙二醇单酯葡萄糖苷山莨菪碱灭活疫苗浸泡免疫

异源无乳链球菌胞外产物灭活疫苗对罗非鱼的免疫效果

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中国水产科学 2022年第2期29卷 325-340页

作者：祝璟琳邹芝英李大宇肖炜喻杰陈炳霖马文静杨弘沈锦玉中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业农村部淡水渔业和种质资源利用重点实验室南京农业大学无锡渔业学院农业农村部淡水渔业健康养殖重点实验室浙江省鱼类健康与营养重点实验室浙江省淡水水产研究所

为了研究异源无乳链球菌胞外产物灭活疫苗免疫罗非鱼后的免疫效果,本研究采用10%甲醛溶液灭活法制备了无乳链球菌HN0901和GX1101胞外产物灭活疫苗,通过腹腔注射途径免疫健康奥尼罗非鱼(Oreochromis niloticus♀×O. aureus♂),在免疫后2... 详细信息

为了研究异源无乳链球菌胞外产物灭活疫苗免疫罗非鱼后的免疫效果,本研究采用10%甲醛溶液灭活法制备了无乳链球菌HN0901和GX1101胞外产物灭活疫苗,通过腹腔注射途径免疫健康奥尼罗非鱼(Oreochromis niloticus♀×O. aureus♂),在免疫后28 d用同/异源无乳链球菌攻毒,测定了免疫后和攻毒后罗非鱼的免疫应答反应和血清抗体效价,并比较了罗非鱼在腹腔注射1×10~8 CFU/尾无乳链球菌后的相对免疫保护率和交叉免疫保护率。结果显示,免疫鱼谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)在免疫后28 d显著高于对照组,但在攻毒后显著低于对照组;与对照鱼相比,免疫鱼的超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)水平在免疫和攻毒后均有不同程度的提高,丙二醛(MDA)显著降低(P灭活疫苗免疫罗非鱼后,能够显著诱导罗非鱼体内的免疫应答,产生中等疫苗效力,对同/异源无乳链球菌都具有免疫保护能力。本研究结果为深入研究罗非鱼链球菌病的免疫预防技术和研制二价疫苗奠定了基础。

关键词：无乳链球菌胞外产物灭活疫苗免疫保护奥尼罗非鱼

鸭病毒性肝炎二价灭活疫苗(DHAV-SH和DHAV-FS株)的制备和评价

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生物工程学报 2015年第11期31卷 1579-1588页

作者：银凤桂李晶张爽余萌张万林范国兵董秀凯刘文军广西大学动物科学技术学院广西南宁530004 中国科学院微生物研究所病原微生物与免疫学重点实验室北京100101 北京信得威特科技有限公司北京102600 大连锦绣生物工程有限公司辽宁大连116450

我国鸭甲型肝炎病毒(DHAV)的快速变异及广泛流行给养鸭业造成了较大的经济损失,为研究鸭病毒性肝炎二价灭活疫苗(DHAV-SH和DHAV-FS株)的制备和评价方法,首先对我国多个鸭场进行血清型流行病学分析,从201株DHAV-1、38株DHAV-3中筛选出6... 详细信息

我国鸭甲型肝炎病毒(DHAV)的快速变异及广泛流行给养鸭业造成了较大的经济损失,为研究鸭病毒性肝炎二价灭活疫苗(DHAV-SH和DHAV-FS株)的制备和评价方法,首先对我国多个鸭场进行血清型流行病学分析,从201株DHAV-1、38株DHAV-3中筛选出6株毒力较强的DHAV,验证了DHAV-1和DHAV-3为我国流行优势株,并对6株DHAV进行ELD50和LD50测定,筛选疫苗候选株后经传代确定疫苗毒种,选取F5代鸭胚胚体研磨液作为疫苗毒种,经甲醛灭活后制成3批水包油包水(W/O/W)型乳剂二价灭活疫苗实验室制品。通过安全性试验、抗体中和试验、攻毒保护及免疫交叉保护试验发现:疫苗安全性良好,雏鸭免疫后第7天可以检测到DHAV中和抗体,第14-21天的攻毒保护率为90%-100%,免疫持续期可达5周以上,DHAV-SH和DHAV-FS之间的交叉保护为20%-30%。研究表明本试验研制的鸭病毒性肝炎二价灭活疫苗实验室制品安全且高效,为我国DHAV预防和控制提供了一种新方法和新产品。

关键词：鸭病毒性肝炎灭活疫苗免疫效果

一种新的人兽共患传染病——狐狸阴道加德纳氏菌病的研究 Ⅵ.阴道加德纳氏菌病灭活疫苗的研制

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微生物学报 1997年第3期37卷 217-227页

作者：严忠诚闫新华闫喜军栾凤英王长凤中国农业科学院特产研究所吉林132109

选用免疫原性优良的我国狐狸阴道加德纳氏菌主要流行型血清Ⅰ型GVF44号菌株,先后试验研制了氢氧化铝胶、蜂胶和油佐剂灭活苗。试验结果表明,铝胶苗的安全性优,免疫剂量为40亿菌/1ml,3倍免疫剂量的铝胶灭活苗接种狐狸后无任何不良反应,... 详细信息

选用免疫原性优良的我国狐狸阴道加德纳氏菌主要流行型血清Ⅰ型GVF44号菌株,先后试验研制了氢氧化铝胶、蜂胶和油佐剂灭活苗。试验结果表明,铝胶苗的安全性优,免疫剂量为40亿菌/1ml,3倍免疫剂量的铝胶灭活苗接种狐狸后无任何不良反应,免疫后21d经100个ID_(50)强毒的攻击,对Ⅰ型的保护率达92％。对Ⅱ、Ⅲ型的保护率达80％以上。免疫持续期为6个月,4～10℃条件下可保存10个月。通过田间试验应用证实该疫苗安全、有效。

关键词：狐狸阴道加德纳氏菌阴道疾病灭活疫苗研制

甲型肝炎减毒活疫苗与灭活疫苗免疫效果的比较

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中华医学杂志 2000年第6期80卷 422-424页

作者：汪萱怡孟宗达李荣成马景臣罗东刘洪斌龚健徐志一张英林韩常全江世平黄全诚欧阳佩英上海医科大学流行病学教研室 200032 河北省卫生防疫站广西壮族自治区卫生防疫站河北省正定县卫生防疫站广西柳州市卫生防疫站

目的　观察甲型肝炎 (甲肝 )减毒活疫苗H2 株与LA 1株的不同剂量、不同免疫程序的免疫原性及抗体动态变化。方法　在河北、广西两地选择 318名经甲肝抗体检测为阴性的易感儿童 ,按不同剂量程序及不同甲肝疫苗 ,分为 6组 ,并在首剂接种... 详细信息

目的　观察甲型肝炎 (甲肝 )减毒活疫苗H2 株与LA 1株的不同剂量、不同免疫程序的免疫原性及抗体动态变化。方法　在河北、广西两地选择 318名经甲肝抗体检测为阴性的易感儿童 ,按不同剂量程序及不同甲肝疫苗 ,分为 6组 ,并在首剂接种后 1、6、7、12、13月份分别采集血清标本 ,检测甲肝总抗体。结果　各组抗体水平均于再免疫后 1个月达高峰 ,以后开始下降 ;再免半年后抗体水平仍明显高于初免抗体水平 ;灭活疫苗与不同剂量的减毒活疫苗再免后抗体阳转率均达 10 0 % ,并于再免半年后仍维持在 10 0 %。结论　甲肝减毒活疫苗加强免疫能诱导很好的免疫记忆反应 ,其免疫学效果与史克灭活疫苗相当 ;加强免疫的针次宜有一定时间间隔 ,在抗体水平较高时 ,加强免疫意义不大 ;

关键词：甲型肝炎减毒疫苗灭活疫苗免疫效果

传染性造血器官坏死病灭活疫苗的制备及免疫保护效果

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水产学报 2021年第11期45卷 1909-1920页

作者：陈桂花徐黎明赵景壮任广明邵轶智卢彤岩中国水产科学研究院黑龙江水产研究所黑龙江省水产动物疾病与免疫技术重点实验室上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心

为了研发用于预防传染性造血器官坏死病(infectious hematopoietic necrosis,IHN)灭活疫苗,实验以不同感染复数(multiplicity of infection,MOI)在胖头鱥上皮细胞(Epithelioma papulosum cyprinid,EPC)上对传染性造血器官坏死病毒(infectious hematopoietic necrosis virus,IHNV)进行连续传代培养,通过测定各代病毒滴度,结合病毒收获时间确定最佳增殖方案;采用不同浓度的β-丙内酯(β-propanolactone,BPL)在24℃下灭活,经安全性实验验证后确定最佳灭活条件。以不同剂量腹腔注射免疫虹鳟,以磷酸盐缓冲溶液(PBS)为阴性对照组,通过检测攻毒后相对免疫保护率(relative percent survival,RPS)、免疫相关因子表达量及血清中和抗体效价来分析该疫苗的保护效果。结果显示,最佳增殖方案为以MOI为0.000 1接种,15℃培养3 d;最佳灭活条件为以终浓度3.0 mmol/L的BPL将IHNV在24℃下灭活24 h;以最佳免疫剂量10μL/尾腹腔注射免疫虹鳟,免疫后7、21、45和60 d的相对免疫保护率分别为91.37%、84.28%、84.15%和47.5%,免疫后60 d时RPS显著低于其他时间点免疫组;免疫相关基因的实时荧光定量PCR(realtime quantitative PCR,RT-qPCR)结果显示,与阴性对照组相比,Mx-1和IFN-γ表达量在免疫后7、15和30 d脾脏和头肾中均显著上调,在第7天时达到最大值(5倍);CD4和IgM表达量在免疫后15 d脾脏和头肾中均显著上调;在免疫后第30、45和60天虹鳟血清IHNV中和抗体效价依次为67.25、43.40和29.78,呈下降趋势且各组间差异显著。研究表明,该灭活疫苗可诱导虹鳟产生特异性免疫和非特异性免疫反应,对虹鳟具有显著的免疫保护作用。本研究为IHNV灭活疫苗研发提供参考。

关键词：虹鳟传染性造血器官坏死病胖头鱥上皮细胞灭活疫苗 β-丙内酯(BPL)