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昆虫天敌 1997年第2期19卷 88-92页

作者：王方海龚和中山大学昆虫学研究所中国科学院动物研究所

本文以家蚕为模式昆虫，从来源、理化特性、代谢作用。

关键词：滞育激素昆虫家蚕

家蚕胚胎和幼虫时期滞育激素的组织学定位、表达和分泌路径

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科学通报 2004年第12期49卷 1151-1156页

作者：孙久松陈复生徐卫华中国科学技术大学生命科学学院合肥230027 安徽省农业科学院蚕业研究所合肥230061

利用原位杂交和免疫组化方法对家蚕滞育激素(DH)基因在胚胎时期神经系统中的分布、转录水平和翻译水平的表达进行了研究.免疫组化结果表明,胚胎的整个中枢神经系统中,包括脑、咽下神经节和胸神经节(TG),都有明显的阳性细胞;心侧体和末... 详细信息

利用原位杂交和免疫组化方法对家蚕滞育激素(DH)基因在胚胎时期神经系统中的分布、转录水平和翻译水平的表达进行了研究.免疫组化结果表明,胚胎的整个中枢神经系统中,包括脑、咽下神经节和胸神经节(TG),都有明显的阳性细胞;心侧体和末端腹神经节(TAG)很可能是DH的释放位点;以地高辛标记的DHcRNA为探针的原位杂交结果表明,DHmRNA在胚胎咽下神经节的上颚、下颚和上唇3簇细胞中表达.此外,发现胚胎的咽下神经节的一对侧边细胞和TG的一对腹中线细胞也表达DHmRNA.原位杂交和RT-PCR的结果表明5龄幼虫期的DHmRNA的表达定位与胚胎期基本一致.

关键词：滞育激素原位杂交免疫组化胚胎幼虫家蚕组织学定位组织学表达

家蚕中调控胚胎滞育的滞育激素及其受体研究概况

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昆虫学报 2018年第11期61卷 1340-1349页

作者：沈张飞解鸿青时连根浙江大学动物科学学院杭州310058

滞育是昆虫为躲避不良生存环境而进化出的一种个体发育停滞的生存策略和状态,家蚕Bombyx mori滞育发生于胚胎发育早期,为卵滞育型。家蚕胚胎滞育是由咽下神经节分泌的滞育激素作用于卵巢,通过卵巢细胞膜上的滞育激素受体介导,引发卵内... 详细信息

滞育是昆虫为躲避不良生存环境而进化出的一种个体发育停滞的生存策略和状态,家蚕Bombyx mori滞育发生于胚胎发育早期,为卵滞育型。家蚕胚胎滞育是由咽下神经节分泌的滞育激素作用于卵巢,通过卵巢细胞膜上的滞育激素受体介导,引发卵内一系列物质代谢变化而引发的发育事件。本文综述了家蚕滞育激素的发现及其结构与功能,以及滞育激素受体的基因克隆与表达、信号转导与机理等研究概况,并展望了其研究前景,以期推进家蚕胚胎滞育诱导、阻止和解除全过程的分子机理研究,并为进一步利用家蚕胚胎滞育进行传统养蚕业的技术提升等提供理论依据。

关键词：家蚕滞育激素滞育激素受体 G蛋白偶联受体胚胎滞育

诱导滞育的温度和光照节律对家蚕滞育激素基因Dh表达的影响

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蚕业科学 2010年第6期36卷 930-936页

作者：韩慧慧徐丽陶卉司马杨虎徐世清苏州大学医学部应用生物学系江苏苏州215123 现代丝绸国家工程实验室江苏苏州215123

滞育激素(DH)是导致家蚕滞育生理现象出现的关键因素。研究卵期不同温度和光照节律引起家蚕滞育激素基因Dh表达的变化,探讨温度和光照对家蚕滞育调控的机制。催青期25℃持续光照(25LL)条件下,蚕卵中Dh基因mRNA高水平稳定转录;而在15℃... 详细信息

滞育激素(DH)是导致家蚕滞育生理现象出现的关键因素。研究卵期不同温度和光照节律引起家蚕滞育激素基因Dh表达的变化,探讨温度和光照对家蚕滞育调控的机制。催青期25℃持续光照(25LL)条件下,蚕卵中Dh基因mRNA高水平稳定转录;而在15℃持续黑暗(15DD)条件下,蚕卵中只有痕迹量Dh基因mRNA存在;25LL或者20℃、光照与黑暗12h交替(20LD)条件下,胚胎发育至单眼着色后(有效积温2160℃.h以后)Dh基因mRNA转录水平显著上调,与此时期胚胎对诱导滞育的温度和光照节律更加敏感一致。从催青期开始整个世代的保护温度和光照节律,呈现高温25℃显著上调整个胚后时期Dh基因mRNA转录水平,光照上调蛹期与蛾期Dh基因mRNA转录水平,且高温的作用强于光照。5龄第3天幼虫的基因芯片表达谱显示,Dh基因mRNA转录水平存在显著的性别与组织差异,雌蚕多个组织中的Dh基因mRNA转录水平都显著低于雄蚕,卵巢中的Dh基因mRNA只有痕迹量。亲代卵的催青温度与光照节律决定子代卵的滞育性,也影响到Dh基因mRNA的转录水平;但子代卵内Dh基因mRNA转录水平高低不是蚕卵滞育与否的关键。推测家蚕Dh基因表达的性别差异及在早期蚕卵中表达特征与滞育性不一致的现象,可能与Dh基因的前体多肽翻译产物剪切有关。

关键词：温度光照家蚕滞育激素基因表达滞育发生

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烟夜蛾滞育激素基因在粟酒裂殖酵母中的表达

河南农业大学学报 2008年第4期42卷 423-426页

作者：赵特罗梅浩郭线茹原国辉河南农业大学植物保护学院河南郑州450002

利用设计的特异性引物通过RT-PCR的方法获得了烟夜蛾滞育激素(Diapause hormone,DH)基因,构建了真核表达载体pESP-2-DH,并在粟酒裂殖酵母SP-Q01中进行了诱导表达,对表达产物进行了SDS-PAGE电泳,获得了与谷胱甘肽S-转移酶(Glutathione S-... 详细信息

利用设计的特异性引物通过RT-PCR的方法获得了烟夜蛾滞育激素(Diapause hormone,DH)基因,构建了真核表达载体pESP-2-DH,并在粟酒裂殖酵母SP-Q01中进行了诱导表达,对表达产物进行了SDS-PAGE电泳,获得了与谷胱甘肽S-转移酶(Glutathione S-tranferases,GST)融合表达的蛋白,分子量约48 kDa,与预测的融合蛋白分子量大小相当。对表达的融合蛋白进行Western blotting检测,结果表明,与GST抗体产生了很强的交叉反应,表明融合蛋白得到了表达.

关键词：烟夜蛾滞育激素 RT-PCR 真核表达融合蛋白

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棉铃虫滞育激素cDNA的克隆和序列测定

科学通报 1999年第3期44卷 279-283页

作者：张刘宾徐卫华刘兢沈晋良中国科技大学生命科学学院合肥230027 南京农业大学植保系南京210095

滞育激素是诱导昆虫滞育的神经肽 .运用cDNA末端快速扩增法 ,对棉铃虫滞育激素的cDNA进行了克隆 ,序列分析表明它是由 2 5个氨基酸组成的一种新型的滞育激素分子 ,它和家蚕、玉米夜蛾的滞育激素在核苷酸和氨基酸水平上有高度的同源性。

关键词：滞育激素 cDNA 克隆棉铃虫

昆虫滞育的分子机理——Ⅰ.家蚕胚子发育期的温度条件与滞育激素基因表达

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中国科学（C辑） 1998年第2期28卷 154-159页

作者：徐卫华张元琪王盈丁俐丽刘兢中国科学技术大学生物系合肥230026

运用分子生物学方法 ,解决了环境条件通过什么途径决定昆虫滞育的关键一步 :即环境信号能诱导家蚕胚期滞育激素基因表达 .胚期滞育激素cDNA被克隆 ,测序结果表明胚期的滞育激素基因表达完全属实 .测定了不同胚期的滞育激素基因的发育表... 详细信息

运用分子生物学方法 ,解决了环境条件通过什么途径决定昆虫滞育的关键一步 :即环境信号能诱导家蚕胚期滞育激素基因表达 .胚期滞育激素cDNA被克隆 ,测序结果表明胚期的滞育激素基因表达完全属实 .测定了不同胚期的滞育激素基因的发育表达 ,推定滞育激素基因表达在头部的食道下神经节 .根据实验结果 ,提出环境条件诱导滞育的一种假说 .

关键词：滞育滞育激素温度胚子发育家蚕昆虫

家蚕、野桑蚕海藻糖酶基因启动子的特性及其滞育激素的转录调节

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蚕业科学 2004年第2期30卷 147-150页

作者：沈兴家唐顺明易咏竹赵巧玲张志芳李奕仁何家禄农业部家蚕生物技术重点开放实验室中国农业科学院蚕业研究所镇江212018

以pGEM 3Z为载体 ,分别构建了家蚕 (Bombyxmori)和野桑蚕 (Bombyxmandarina)海藻糖酶基因启动子控制的荧光素酶基因报告质粒 ,利用昆虫细胞瞬时表达系统进行启动子特性分析 ,并就家蚕滞育激素对海藻糖酶基因启动子转录活性的调节作用进... 详细信息

以pGEM 3Z为载体 ,分别构建了家蚕 (Bombyxmori)和野桑蚕 (Bombyxmandarina)海藻糖酶基因启动子控制的荧光素酶基因报告质粒 ,利用昆虫细胞瞬时表达系统进行启动子特性分析 ,并就家蚕滞育激素对海藻糖酶基因启动子转录活性的调节作用进行了研究。结果表明 :家蚕和野桑蚕海藻糖酶基因启动子在家蚕Bm5细胞、Sf2 1细胞中都有转录活性 ,但是活性都很低 ;家蚕滞育激素在体外条件下对家蚕海藻糖酶基因启动子活性的调节有明显的剂量效应 ,13～ 33nmol/L时有明显的增强作用 ,由此推测来自家蚕卵巢的Bm5细胞可能存在与滞育激素作用的受体。

关键词：家蚕野桑蚕海藻糖酶基因启动子滞育激素

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中国野桑蚕滞育激素基因的克隆与序列分析

蚕业科学 2003年第3期29卷 236-240页

作者：徐春媛刘彦群鲁成西南农业大学蚕学与生物技术学院农业部蚕桑学重点开放室验室重庆400716

根据家蚕DH PBAN基因序列设计特异引物 ,以中国野桑蚕基因组DNA为模板进行PCR扩增 ,获得了1 5 85kb的目的片段 ,将其克隆进pMD18 T载体 ,测序和同源性比较结果表明 :该片段由 3个外显子、2个内含子组成 ,2个内含子均为典型的GT AG结构 ... 详细信息

根据家蚕DH PBAN基因序列设计特异引物 ,以中国野桑蚕基因组DNA为模板进行PCR扩增 ,获得了1 5 85kb的目的片段 ,将其克隆进pMD18 T载体 ,测序和同源性比较结果表明 :该片段由 3个外显子、2个内含子组成 ,2个内含子均为典型的GT AG结构 :该片段编码中国野桑蚕滞育激素 (DH)及DH引导肽 ;中国野桑蚕DH及引导肽与家蚕及日本野桑蚕的DH及引导肽氨基酸序列完全相同 ,其基因cDNA序列的同源性分别为 99 3%、97 2 %。研究结果进一步显示了中国野桑蚕与家蚕之间的近缘关系。

关键词：中国野桑蚕滞育激素基因克隆序列分析家蚕近缘关系同源性

烟夜蛾（Helicoverpa assulta Guenée）滞育激素cDNA的克隆和序列分析

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烟夜蛾（Helicoverpa assulta Guenée）滞育激素cDNA的克隆和序...

作者：汤清波河南农业大学

学位级别：硕士

以烟夜蛾(Helicoverpa assulta Guenée)滞育蛹和非滞育蛹脑-食道下神经节为材料，利用RT—PCR技术在滞育蛹中克隆到其滞育激素(diapause hormone，DH)cDNA，PCR产物经过纯化后和质粒连接并转化到大肠杆菌，经过筛选、酶切鉴定，表明克... 详细信息

以烟夜蛾(Helicoverpa assulta Guenée)滞育蛹和非滞育蛹脑-食道下神经节为材料，利用RT—PCR技术在滞育蛹中克隆到其滞育激素(diapause hormone，DH)cDNA，PCR产物经过纯化后和质粒连接并转化到大肠杆菌，经过筛选、酶切鉴定，表明克隆成功。在非滞育蛹内没有克隆到任何片段。克隆基因经过测定后分析表明，该基因序列全长627bp，共编码194个氨基酸，其中滞育肽为24个氨基酸，与家蚕(Bombyx mori Linnaeus)、棉铃虫(Helicoverpa armigera Hübner)滞育激素氨基酸序列的同源性分别为62％和99％。并且发现，该序列为一前体mRNA序列，它不仅编码滞育肽，而且还编码性信息素合成激活肽(pheromone biosynthesis activating neuropeptide，PBAN)和其它3个脑-食道下神经节肽，它们的肽链长度分别为24，33，7，18，8个氨基酸组成，都属于FXPRL神经肽家族。分析表明，该基因是烟夜蛾滞育激素基因，或者至少是滞育相关基因。该基因序列在GenBank上的登录号是AY052417。

关键词：烟夜蛾滞育激素 cDNA 克隆滞育