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microRNA125a-3p对滋养层细胞功能的调控作用及机制

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生殖医学杂志 2023年第2期32卷 260-268页

作者：刘倩张琦谢青贞武汉大学人民医院生殖医学中心武汉430060

目的观察microRNA125a-3p(miR-125a-3p)在滋养层细胞中的表达,探讨其对滋养层细胞增殖、侵袭和凋亡的调控及机制。方法荧光实时定量PCR检测人滋养层细胞系HTR-8/SVneo、绒癌细胞系JAR和JEG-3中miR-125a-3p的表达情况。以HTR-8/SVneo和JE... 详细信息

目的观察microRNA125a-3p(miR-125a-3p)在滋养层细胞中的表达,探讨其对滋养层细胞增殖、侵袭和凋亡的调控及机制。方法荧光实时定量PCR检测人滋养层细胞系HTR-8/SVneo、绒癌细胞系JAR和JEG-3中miR-125a-3p的表达情况。以HTR-8/SVneo和JEG-3细胞为实验对象,分为3组:空白对照组(CK组),未做任何处理;阴性对照组(NC组),转染NC-inhibitor;实验组(inhibitor组),转染miR-125a-3p inhibitor。以Transwell、流式细胞仪、CCK8法分别检测细胞的侵袭、凋亡及增殖能力。Western blot检测Fyn蛋白表达情况及ERK1/2、STAT3磷酸化水平。荧光实时定量PCR检测Fyn mRNA水平,免疫共沉淀法检测Fyn活性水平。结果miR-125a-3p mRNA表达水平在HTR-8/SVneo、JAR和JEG-3细胞中依次降低,两两比较均有统计学差异(P细胞的凋亡水平明显降低,侵袭和增殖能力均明显升高(P滋养层细胞中检测到miR-125a-3p的表达。miR-125a-3p通过作用于Fyn和ERK1/2-STAT3信号通路可抑制滋养层细胞的增殖、侵袭,促进其凋亡。

关键词： miR-125a-3p 滋养层细胞酪氨酸激酶细胞外信号调节激酶(ERK1/2) 信号传导和转录激活因子3(STAT3)

敲减circSERPINE2通过靶向调控miR-34a-5p表达抑制滋养层细胞增殖、迁移和侵袭

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中华细胞与干细胞杂志（电子版） 2023年第4期13卷 193-201页

作者：韦先梅韩毓蒋英彩海南省海口市第四人民医院妇产科海口571100

目的探讨circSERPINE2对滋养层细胞HTR8/SVneo增殖、迁移和侵袭的影响和可能机制。方法收集37例子痫前期患者胎盘组织和37例正常妊娠孕妇胎盘组织。体外培养滋养层细胞HTR8/Svneo,转染circSERPINE2小干扰RNA(si-circSERPINE2)或miR-34a... 详细信息

目的探讨circSERPINE2对滋养层细胞HTR8/SVneo增殖、迁移和侵袭的影响和可能机制。方法收集37例子痫前期患者胎盘组织和37例正常妊娠孕妇胎盘组织。体外培养滋养层细胞HTR8/Svneo,转染circSERPINE2小干扰RNA(si-circSERPINE2)或miR-34a-5p模拟物、或共转染circSERPINE2小干扰RNA与miR-34a-5p抑制剂至HTR8/Svneo细胞。qRT-PCR法检测circSERPINE2和miR-34a-5p表达;CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖;划痕实验、Transwell和Western blot法分别检测细胞迁移、侵袭及细胞中E-cadherin和N-cadherin表达。双荧光素酶报告基因实验证实circSERPINE2和miR-34a-5p的靶向关系。两组间比较采用配对样本t检验或独立样本t检验;多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。结果与正常胎盘组织比较,子痫前期患者胎盘组织中circSERPINE2的表达(0.37±0.04比1.00±0.11)降低,miR-34a-5p的表达(3.50±0.28比1.00±0.08)升高,差异有统计学意义(P均细胞中circSERPINE2表达水平(0.31±0.03比1.01±0.06)、细胞活力、克隆形成数、侵袭数、划痕愈合率及N-cadherin表达下降,E-cadherin表达增高(P均细胞活力、克隆形成数、侵袭数、划痕愈合率及N-cadherin表达下降,miR-34a-5p(3.48±0.32比1.00±0.00)、E-cadherin表达增高(P均细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论circSERPINE2在子痫前期患者胎盘组织中表达下调,敲减circSERPINE2可能通过靶向负调控miR-34a-5p表达抑制滋养层细胞增殖、迁移和侵袭。

关键词：子痫前期滋养层细胞 circSERPINE2 miR-34a-5p

ω-3脂肪酸对人滋养层细胞侵袭和血管生成的影响

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现代生物医学进展 2023年第6期23卷 1010-1016,1032页

作者：贺艳丽王运萍綦春蕾赵淑华李玲霞周福兴张潍第四军医大学西京医院妇产科陕西西安710032

目的:探讨ω-3脂肪酸对人滋养层细胞(HTR-8/SVneo)侵袭和血管生成的影响。方法:本实验设置了不同浓度二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)处理组,依次为0、1、50和100μmol/L EPA组;0、1、50和100μmol/L DHA组。各组HTR-8/SVneo细... 详细信息

目的:探讨ω-3脂肪酸对人滋养层细胞(HTR-8/SVneo)侵袭和血管生成的影响。方法:本实验设置了不同浓度二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)处理组,依次为0、1、50和100μmol/L EPA组;0、1、50和100μmol/L DHA组。各组HTR-8/SVneo细胞分别用相应浓度的EPA和DHA培养48 h。然后通过CCK-8法检测细胞增殖,Matrigel Transwell实验检测细胞侵袭。使用EPA和DHA处理的HTR-8/SVneo细胞的上清液培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)6 h,然后检测HUVEC的小管形成能力。通过qRT-PCR和Western blot检测HTR-8/SVneo细胞中三结构域蛋白22 (TRIM22)、信号转导和转录激活因子1(STAT1)、p-STAT1(Tyr701)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9和VEGF的表达。结果:与0μmol/L EPA组或0μmol/L DHA组相比,50μmol/L EPA组、100μmol/L EPA组、50μmol/L DHA组和100μmol/L DHA组的OD450nm、侵袭细胞数量、MMP2和MMP9的蛋白相对表达量均升高(P滋养层细胞的侵袭性和血管生成,其机制可能与TRIM22的上调和STAT1活性的抑制有关。

关键词： 3脂肪酸滋养层细胞侵袭血管生成三结构域蛋白22 信号转导和转录激活因子1

妊娠糖尿病患者胎盘组织中γ-氨基丁酸A受体π亚基(GABRP)的表达及其对IR条件下滋养层细胞胰岛素敏感性的影响

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中国优生与遗传杂志 2022年第4期30卷 557-563页

作者：陈鲜李罗翔庄琳吴程成都中医药大学附属医院病理科四川成都610072 成都中医药大学附属医院产科四川成都610072

目的研究妊娠糖尿病(GDM)中γ-氨基丁酸A受体π亚基(GABRP)的表达及其对胰岛素抵抗(IR)条件下的滋养层细胞对胰岛素敏感性的影响与相关分子机制。方法选取自2018年1月至2020年1月至成都中医药大学附属医院妇产科就诊的35例GDM(GDM组)... 详细信息

目的研究妊娠糖尿病(GDM)中γ-氨基丁酸A受体π亚基(GABRP)的表达及其对胰岛素抵抗(IR)条件下的滋养层细胞对胰岛素敏感性的影响与相关分子机制。方法选取自2018年1月至2020年1月至成都中医药大学附属医院妇产科就诊的35例GDM(GDM组)与正常妊娠对照组(Normal组)的胎盘组织为研究对象。使用H-E染色及免疫组织化学染色观察两组胎盘组织的病理学改变及GABRP的表达;体外培养人绒毛膜滋养层细胞系HTR-8/Svneo(HTR-8),使用不同的胰岛素浓度探究胰岛素抵抗(IR)的最佳条件,Western blot法检测GABRP在IR模型中滋养层细胞内的表达;脂质体转染法过表达HTR-8细胞中GABRP,并将细胞分为4组:HTR-8组、IR组、IR+GABPR组及IR+vector组;葡萄糖消耗试验检测各组细胞对葡萄糖的摄取能力;Westernblot检测各组细胞中胰岛素敏感性相关蛋白:INSRα、INSRβ、IRS-1、IRS-2、p-PI3K/PI3K、GLUT4、p-AMPK/AMPK水平。结果与对照组相比,GDM组胎盘组织中GABRP的蛋白及mRNA表达水平均显著降低(P细胞36 h能成功构建滋养层细胞IR模型,同时该条件下GABPR蛋白表达水平显著降低(P细胞中INSRα、INSRβ、IRS-1、IRS-2、GLUT4的蛋白表达p-PI3K/PI3K与p-AMPK/AMPK值均显著降低(P0.05)。结论外源性上调伴有IR的GDM患者的胎盘滋养层细胞中异常降低的GABRP可能通过AMPK途径改善细胞对胰岛素的敏感性,从而在GDM中发挥一定的保护作用。

关键词： γ-氨基丁酸A受体π亚基(GABRP) 妊娠糖尿病胰岛素敏感性滋养层细胞

高糖环境对滋养层细胞腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1亚基表达及增殖的影响

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上海交通大学学报（医学版） 2018年第3期38卷 299-304页

作者：彭海燕李华萍上海交通大学附属第六人民医院妇产科上海200233

目的·研究妊娠糖尿病患者胎盘组织中的腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1亚基(protein kinase AMP-activated catalytic subunitα1,PRKAA1)的表达水平,及体外高糖环境对滋养层细胞PRKAA1表达水平和增殖活性的影响。方法·收集妊娠糖尿病患者... 详细信息

目的·研究妊娠糖尿病患者胎盘组织中的腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1亚基(protein kinase AMP-activated catalytic subunitα1,PRKAA1)的表达水平,及体外高糖环境对滋养层细胞PRKAA1表达水平和增殖活性的影响。方法·收集妊娠糖尿病患者(19例)及同期正常妊娠孕妇(20例)的胎盘组织,分别利用实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹试验测定PRKAA1 mRNA及蛋白水平的表达情况。体外高糖处理滋养层细胞后,测定PRKAA1的表达;高糖培养基及PRKAA1抑制剂dorsomorphin分别作用于滋养层细胞后,利用CCK8试剂盒测定细胞增殖活性。结果·相比正常妊娠孕妇,妊娠糖尿病患者胎盘组织中PRKAA1 m RNA及蛋白表达量显著降低(均P滋养层细胞可明显降低PRKAA1的表达水平(P滋养层细胞的增殖活性(均P滋养层细胞增殖活性的抑制作用可能是通过下调PRKAA1介导发生。

关键词：妊娠糖尿病滋养层细胞腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1亚基高糖细胞增殖

柔毛水杨梅甲醇提取物通过调控miR-758表达对滋养层细胞增殖、迁移和侵袭的影响

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中国优生与遗传杂志 2023年第6期31卷 1152-1157页

作者：崔静于婉莹曾彬唐山市妇幼保健院生殖遗传科河北唐山063000

目的探讨柔毛水杨梅甲醇提取物对滋养层细胞增殖、迁移侵袭的影响。方法不同浓度的柔毛水杨梅甲醇提取物处理人正常滋养细胞HTR8/SVneo后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭。实时荧光定量PCR(RT-qP... 详细信息

目的探讨柔毛水杨梅甲醇提取物对滋养层细胞增殖、迁移侵袭的影响。方法不同浓度的柔毛水杨梅甲醇提取物处理人正常滋养细胞HTR8/SVneo后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测HTR8/SVneo、正常胎盘滋养细胞、子痫前期胎盘滋养细胞中miR-758表达水平。将miR-758抑制物转染HTR8/SVneo,检测抑制miR-758表达对HTR8/SVneo细胞增殖、迁移和侵袭的影响。将miR-758模拟物转染HTR8/SVneo,检测过表达miR-758对柔毛水杨梅作用的HTR8/SVneo细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果柔毛水杨梅甲醇提取物处理后HTR8/SVneo细胞的增殖、迁移和侵袭能力显著升高,miR-758表达显著降低,并呈一定浓度依赖性(P滋养细胞中miR-758表达升高,抑制miR-758表达后HTR8/SVneo细胞的增殖、迁移和侵袭能力显著升高(P滋养层细胞增殖、迁移和侵袭,其机制与下调miR-758表达有关。

关键词：柔毛水杨梅滋养层细胞 miR-758 增殖迁移侵袭

RAC3基因对早期滋养层细胞增殖、迁移和侵袭的影响

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第二军医大学学报 2018年第4期39卷 399-403页

作者：盛菲纪逸萱丁海遐章青李文海军军医大学(第二军医大学)长征医院生殖医学中心上海200003

目的探讨ras相关C3肉毒杆菌毒素底物3(RAC3)对早期滋养层细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法收集2015年5月至2016年5月在海军军医大学(第二军医大学)长征医院门诊或住院的不明原因自然流产和人工流产妊娠妇女的绒毛组织各20例,应用q PCR... 详细信息

目的探讨ras相关C3肉毒杆菌毒素底物3(RAC3)对早期滋养层细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法收集2015年5月至2016年5月在海军军医大学(第二军医大学)长征医院门诊或住院的不明原因自然流产和人工流产妊娠妇女的绒毛组织各20例,应用q PCR法检测绒毛组织中RAC3 m RNA的表达。取C57/B6小鼠孕6.5、14.5和19.5 d的胎盘组织进行m RNA芯片检测。在早期人滋养层细胞系HTR-8/SVneo中干扰和过表达RAC3后,应用CCK-8法和Transwell实验检测RAC3对HTR-8/SVneo细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果不明原因自然流产绒毛组织中RAC3 m RNA的表达低于人工流产绒毛组织(P细胞的增殖、迁移和侵袭能力均减弱(P均细胞的增殖、迁移和侵袭能力增强(P均滋养层细胞的增殖、迁移和侵袭能力具有重要调控作用。

关键词：自然流产人工流产 ras相关C3肉毒杆菌毒素底物3 胎盘滋养层细胞

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滋养层细胞凋亡与稽留流产的关系

中国妇幼保健 2008年第26期23卷 3712-3716页

作者：陈莉萍谭布珍冯琼李里香汪庆余雷英武汉科技大学附属汉阳医院妇产科湖北武汉430050 南昌大学第二附属医院妇产科南昌大学第二附属医院病理科

目的:探讨滋养层细胞凋亡与稽留流产的关系。方法:对30例正常早孕吸宫流产病例和35例稽留流产病例的绒毛滋养层细胞进行凋亡研究。常规光镜观察细胞形态学变化;免疫组织化学SP法检测增殖细胞核抗原PCNA、抑凋亡基因Survivin和促凋亡基因... 详细信息

目的:探讨滋养层细胞凋亡与稽留流产的关系。方法:对30例正常早孕吸宫流产病例和35例稽留流产病例的绒毛滋养层细胞进行凋亡研究。常规光镜观察细胞形态学变化;免疫组织化学SP法检测增殖细胞核抗原PCNA、抑凋亡基因Survivin和促凋亡基因P53在细胞中的表达。结果:稽留流产组绒毛形态学结构均出现不同程度的退行性改变,绒毛细胞滋养层细胞中PCNA表达较正常早孕组明显减少,差异具有非常显著性意义(P滋养层细胞PCNA少量表达;稽留流产组绒毛滋养层细胞Survivin低于正常早孕组,而P53则高于正常早孕组,差异均有非常显著性意义(P滋养层细胞凋亡的增加可能是稽留流产发生的一个重要病理过程,其机制可能与PCNA、Survivin和P53基因的表达异常有关。

关键词：滋养层细胞凋亡稽留流产 PCNA Survivin P53

miRNA对妊娠疾病胎盘滋养层细胞功能调控的研究进展

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中南医学科学杂志 2023年第2期51卷 295-298页

作者：梁伶俐杨春芬罗桂芳何璐王佐南华大学衡阳医学院心血管疾病研究所、动脉硬化学湖南省重点实验室、湖南省动脉硬化性疾病国际科技创新合作基地湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院附属第一医院湖南衡阳421001

胎盘是胎儿和母体之间进行物质交换的器官,胎盘发育不良可导致一系列妊娠疾病。胎盘正常生长发育与滋养层细胞的多种生物学过程密切相关。本文综述了微小RNA在妊娠疾病中对胎盘滋养层细胞功能的调控。

关键词：微小RNA 滋养层细胞胎盘妊娠疾病