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基于ITS条形码的滇鸡血藤及混伪品分子鉴定

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中国现代中药 2024年第1期26卷 10-17页

作者：刘心雨姜丹杨楚楚徐庆一徐裕彬陈绪军任广喜刘春生北京中医药大学中药学院北京102488 北京橘井健康科技集团有限公司北京100068 北京卫仁中药饮片厂有限公司北京101300

目的:基于内转录间隔区(ITS)序列,运用DNA条形码技术对滇鸡血藤药材及其混伪品进行序列比对分析,根据单核苷酸多态性位点构建滇鸡血藤单倍型数据库,建立快速、准确鉴定滇鸡血藤的分子鉴定方法。方法:以滇鸡血藤及其混伪品为材料,利用DN... 详细信息

目的:基于内转录间隔区(ITS)序列,运用DNA条形码技术对滇鸡血藤药材及其混伪品进行序列比对分析,根据单核苷酸多态性位点构建滇鸡血藤单倍型数据库,建立快速、准确鉴定滇鸡血藤的分子鉴定方法。方法:以滇鸡血藤及其混伪品为材料,利用DNA提取试剂盒,分别提取滇鸡血藤及其混伪品的总DNA,对ITS序列进行聚合酶链式反应扩增及测序分析,使用DNAMAN软件统计其片段长度及变异位点个数,使用MEGA软件对数据进行分析比对,计算Kimura2-parameter遗传距离,并利用邻接法建立系统发育树进行分析。结果:滇鸡血藤ITS序列片段长度为675 bp,共包括19种单倍型,与其主要混伪品的差异位点为212、223、224 bp,系统发育树显示,ITS序列能够区分滇鸡血藤及其混伪品。结论:ITS条形码可以作为区分鉴定滇鸡血藤及其混伪品的分子条形码,包含19个单倍型的单倍型数据库覆盖了滇鸡血藤全部的单倍型。

关键词：滇鸡血藤内转录间隔区序列 DNA条形码单核苷酸多态性单倍型数据库

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滇鸡血藤基原植物内南五味子及其近缘物种化学成分和活性的比较研究

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滇鸡血藤基原植物内南五味子及其近缘物种化学成分和活性的比较研...

作者：徐菁北京协和医学院

学位级别：硕士

滇鸡血藤(Kadsurae Caulis)是五味子科南五味子属植物内南五味子(Kadsura ***)的干燥藤茎,具有活血补血、调经止痛的功效,为云南省道地药材。五味子科系统发育研究显示内南五味子和异形南五味子、长梗南五味子、日本南五味子及冷饭藤等... 详细信息

滇鸡血藤(Kadsurae Caulis)是五味子科南五味子属植物内南五味子(Kadsura ***)的干燥藤茎,具有活血补血、调经止痛的功效,为云南省道地药材。五味子科系统发育研究显示内南五味子和异形南五味子、长梗南五味子、日本南五味子及冷饭藤等物种亲缘关系最近,并且内南五味子及其四个近缘物种在民间均作药用,具有不同功效。在植物形态特征上,内南五味子及其近缘物种相似易导致混用,其中内南五味子与异形南五味子极为相似,林祁等植物分类学家根据形态特征将内南五味子归并为异形南五味子。为了阐明内南五味子及其近缘物种的差异,本研究首先利用植物代谢组学对内南五味子及其近缘物种的化学成分进行差异性分析,其次采用现代药效学研究对内南五味子及其近缘物种的补血、止痛药效进行比较,最后结合内南五味子的化学指纹图谱与药效指标进行谱效关系研究,挖掘了滇鸡血藤药材潜在的活血、止痛药效物质。具体结果如下:1.对内南五味子及其近缘物种进行了传统药物学调查。通过对本草典籍、地方中药志的检索查阅,整理了内南五味子及其近缘物种的传统应用。发现内南五味子及其近缘物种的传统功效不同,可以为后续的药效研究提供参考依据。在野外调查过程中发现内南五味子及其近缘物种均为野生,野生资源蕴含量较小,急需开展人工栽培研究保护内南五味子及其近缘物种的野生资源。2.对内南五味子及其近缘物种进行了基于UPLC-Q/TOF-MS技术的植物代谢组学研究。根据课题组前期从内南五味子、异形南五味子中分离得到的化合物、购得的对照品、自建化合物库以及公共化合物库对内南五味子及其近缘物种中的化学成分进行了全面的鉴定和推断,其中,根据对照品比对到20个化合物,根据化合物库推断得到106化合物。并且对基于UPLC-Q/TOF-MS技术得到内南五味子及其近缘物种样品(69批)代谢组学数据进行了多元统计分析:首先通过主成分分析得到种间分组,进一步对内南五味子及其近缘物种两两进行正交偏最小二乘判别分析,结合比对得到的化合物筛选出5个可以作为内南五味子的差异化合物(Heteroclitin E、Heteroclitin G、Angeloylgomisin R、Interiorin D、Heteroclitin D),可以作为内南五味子区分于其近缘物种的化学标志物。3.内南五味子及其近缘物种的补血活性研究结果表明:内南五味子、异形南五味子及冷饭藤醇提物均可以显著升高血虚小鼠外周血中HCT、RBC、HGB的含量,内南五味子醇提物200 mg/kg以及400 mg/kg两种剂量可以显著改善造血生长因子含量(IL-3,GM-CSF,M-CSF)(p滇鸡血藤药材质量评价以及单体化合物药效研究奠定了研究基础。

关键词：滇鸡血藤内南五味子近缘物种化学成分药效活性谱效关系

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滇鸡血藤药材基原植物的探讨

中药材 2015年第12期38卷 2644-2650页

作者：高石曼郭豪杰齐耀东李西文张本刚刘海涛肖培根中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100193 中国中医科学院中药研究所北京100700

滇鸡血藤是2010年版中国药典新增的药材品种,为五味子科植物内南五味子的干燥藤茎。但有些报道认为滇鸡血藤药材的基原植物为五味子科南五味子属植物内南五味子和异型南五味子的藤茎,同时《Flora of China》中明确将内南五味子归并为异... 详细信息

滇鸡血藤是2010年版中国药典新增的药材品种,为五味子科植物内南五味子的干燥藤茎。但有些报道认为滇鸡血藤药材的基原植物为五味子科南五味子属植物内南五味子和异型南五味子的藤茎,同时《Flora of China》中明确将内南五味子归并为异型南五味子,因此,关于滇鸡血藤药材的基原植物需要进一步明确。该文从用药历史、分布范围、功能主治、形态结构、性状与显微鉴别、化学成分以及药理作用等方面对内南五味子和异型南五味子进行全面的整理和总结,为确定内南五味子和异型南五味子的亲缘关系,辨析滇鸡血藤药材的基原植物,合理开发和利用该药材资源提供数据参考。

关键词：滇鸡血藤基原植物

基于生物活性和分子对接的滇鸡血藤水煎液质量控制研究

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中国药事 2023年第11期37卷 1319-1325页

作者：朱泓宇乔子璇徐裕彬任广喜李萌姜丹刘春生北京中医药大学中药学院北京102488 河北橘井药业有限公司安国071200

目的:初步探究滇鸡血藤水煎液活血功效的生物评价方法并挖掘参与凝血酶抑制的核心成分。方法:采用体外凝血酶活性抑制试验,评价滇鸡血藤水煎液体外凝血酶抑制活性。然后利用超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS)挖掘滇鸡血藤水煎液中的化学成分... 详细信息

目的:初步探究滇鸡血藤水煎液活血功效的生物评价方法并挖掘参与凝血酶抑制的核心成分。方法:采用体外凝血酶活性抑制试验,评价滇鸡血藤水煎液体外凝血酶抑制活性。然后利用超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS)挖掘滇鸡血藤水煎液中的化学成分,并通过分子对接技术对这些化学成分的生物活性进行评估,筛选核心抗凝成分。结果:凝血酶抑制试验表明滇鸡血藤的标准煎剂(0.2 g·m L^(-1))具有高达78.40%的凝血酶抑制率,并从滇鸡血藤水煎液中推测鉴定了14个化合物,将其与凝血酶进行分子对接评价:戈米辛C(-7.9 kcal·mol^(-1))、戈米辛G(-7.6 kcal·mol^(-1))、内南五味子素C(-8.1kcal·mol^(-1))、内南五味子素D(-9.4 kcal·mol^(-1))、阿里山五味子灵C(-9.4 kcal·mol^(-1))、五味子素C(-7.9 kcal·mol^(-1))、五味子素A(-7.3 kcal·mol^(-1))、异型南五味子素E(-8.2 kcal·mol^(-1))、五味子酯D(-8.6 kcal·mol^(-1))、红花五味子素(-7.4 kcal·mol^(-1))、内南五味子酯B(-7.6 kcal·mol^(-1))、内南五味子酯A(-8.1 kcal·mol^(-1))、乙酰基氧代南五味子烷(-8.5 kcal·mol^(-1))、内南五味子酯D(-9.2 kcal·mol^(-1))。其中内南五味子素D和阿里山五味子灵C与凝血酶蛋白具有紧密结合的空间构型以及理想的结合能。结论:滇鸡血藤水煎液具有较好的凝血酶抑制活性,筛选出的2个具有凝血酶抑制活性的核心成分,可作为其质量标志物候选成分,为滇鸡血藤水煎液生物活性评价方法的建立和质控研究提供了参考依据。

关键词：滇鸡血藤抗凝血酶活性分子对接质量评价

滇鸡血藤和复方鸡血藤膏的质量标准研究及荚果蕨贯众的化学成分研究

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滇鸡血藤和复方鸡血藤膏的质量标准研究及荚果蕨贯众的化学成分研...

作者：吴融复旦大学

学位级别：硕士

复方鸡血藤膏为传统中药,收载于《中国药典》(2005版一部),由滇鸡血藤膏粉、川牛膝、续断、红花、黑豆等加工而成,有补血、活血、调经等功效,用于血虚、手足麻木、关节酸痛和月经不调。该制剂疗效确切、历史悠久,但由于基础研究薄弱,缺... 详细信息

复方鸡血藤膏为传统中药,收载于《中国药典》(2005版一部),由滇鸡血藤膏粉、川牛膝、续断、红花、黑豆等加工而成,有补血、活血、调经等功效,用于血虚、手足麻木、关节酸痛和月经不调。该制剂疗效确切、历史悠久,但由于基础研究薄弱,缺乏特征性的定性定量指标。滇鸡血藤膏粉为滇鸡血藤的水提干浸膏粉,为复方鸡血藤膏方中的君药,功效明显、剂量大,是复方鸡血藤膏质量控制研究的重点。滇鸡血藤主要来源于木兰科内南五味子(Kadsura interior A. C. Smith),目前仅收载于《中国药典》(2005版一部)的附录中,缺少定性定量标准。本课题关键目的是研究制定复方鸡血藤膏及滇鸡血藤的质量标准,为《中国药典》(2010版一部)这两个项目的修订提供依据。本文建立了滇鸡血藤的质量标准,通过优化色谱条件,建立了滇鸡血藤药材的HPLC测定异型南五味子丁素的含量测定方法,并进行了方法学考察,方法可行,可以准确定量;建立了滇鸡血藤药材的TLC鉴别方法;确定了性状和粉末显微鉴别特征;进行了水分和总灰分的测定;起草了滇鸡血藤药材的质量标准草案。本文完善了复方鸡血藤膏的质量标准,建立了复方鸡血藤膏的HPLC含量测定方法并进行了方法学考察;建立了复方鸡血藤膏中滇鸡血藤膏粉、川牛膝和续断的TLC定性鉴别方法,特征明显;起草了复方鸡血藤膏的质量标准草案,弥补了复方鸡血藤膏难以准确鉴别、定量的不足。另外,建立了复方鸡血藤膏的君药成分滇鸡血藤膏粉的质量标准,包括制法、TLC鉴别、HPLC含量测定等项。荚果蕨贯众为球子蕨科Onocleaccae荚果蕨Matteuccia struthiopteris (L.) Todaro的干燥根茎及叶柄残基。课题组前期发现荚果蕨贯众具有明显的抗补体活性,并确定了其活性部位。本论文从荚果蕨贯众抗补体活性部位之一的乙酸乙酯部位中分离鉴定了6个化合物,包括3个间苯三酚类化合物：去甲绵马酚B(1)、绵马素BB(2)和methyl-desabbreviatin(3)以及正二十六醇(4)、十五烷酸甘油脂(5)和β-谷甾醇(6)。其中3为新化合物,化合物1-5均为首次从该科植物中分离得到。体外活性测定发现新化合物3对补体的经典激活途径有一定的抑制作用(CH50=1.17mg／ml)。

关键词：复方鸡血藤膏滇鸡血藤滇鸡血藤膏粉质量标准异型南五味子丁素 HPLC TLC 荚果蕨贯众间苯三酚抗补体

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滇鸡血藤的化学成分与HPLC分析

滇鸡血藤的化学成分与HPLC分析

鸡血藤、滇鸡血藤、大血藤等血藤类药材的psbA-trnH条形码分子鉴定

第六届全国药用植物和植物药学术研讨会

作者：陈道峰卢燕颊征伟复旦大学药学院生药学教研室

复方鸡血藤膏为传统中药,收载于《中国药典》(2005版一部),由滇鸡血藤、川牛膝、续断、红花、黑豆等加工而成,功能补血、活血、调经,用于血虚、手足麻木、关节酸痛和月经不调。该制剂疗效确切、历史悠久,但由于基础研究薄弱,剂型落后,... 详细信息

复方鸡血藤膏为传统中药,收载于《中国药典》(2005版一部),由滇鸡血藤、川牛膝、续断、红花、黑豆等加工而成,功能补血、活血、调经,用于血虚、手足麻木、关节酸痛和月经不调。该制剂疗效确切、历史悠久,但由于基础研究薄弱,剂型落后,缺乏特征性的定性定量指标。君药滇鸡血藤主产于云南,主要来源于五味子科南五味子属植物内南五味子(Kadsura interior A．C． Smith)和异型南五味子(***(Roxb．)Craib．)的藤茎,以水提干浸膏粉入药,是复

关键词：滇鸡血藤内南五味子异型南五味子木脂素 HPLC

来源： cnki会议评论

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世界科学技术-中医药现代化 2016年第1期18卷 40-45页

作者：周红马双姣陈贝贝韩正洲姚辉中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100193 华润三九医药股份有限公司研发中心深圳518110

目的:中国药典收载的鸡血藤、大血藤、滇鸡血藤及相关物种均有"血藤"之称,其各自的来源不同,功效主治不同,不能混用。为确保其临床用药的安全、有效,本研究应用DNA条形码序列psbA-trnH对鸡血藤、大血藤、滇鸡血藤及其混伪品进行鉴定研... 详细信息

目的:中国药典收载的鸡血藤、大血藤、滇鸡血藤及相关物种均有"血藤"之称,其各自的来源不同,功效主治不同,不能混用。为确保其临床用药的安全、有效,本研究应用DNA条形码序列psbA-trnH对鸡血藤、大血藤、滇鸡血藤及其混伪品进行鉴定研究。方法:通过对样本进行基因组DNA提取,PCR扩增psbA-trnH序列。所得序列经拼接后,用MEGA5.0和DNAMAN进行种内种间序列分析,构建NJ树,对psbA-trnH序列在血藤类药材中的鉴定能力进行评估。结果:鸡血藤、大血藤和滇鸡血藤序列长度和GC含量各不相同,psbA-rrnH种内序列相似度高,均高于它们与混伪品间的序列相似性。鸡血藤、大血藤、滇鸡血藤与其他非药典收载的血藤类药材的种间最小K2P距离分别为0.137、0.426和0.003,均大于其种内最大遗传距离0.014、0.004和0。在NJ树中,鸡血藤、大血藤均单独聚为一支,能明显的与其他混伪品区分开,滇鸡血藤与异形南五味子聚为一支。结论:psbA-trnH序列能准确鉴定鸡血藤、滇鸡血藤、大血藤药材及其混伪品,该条形码分子鉴定方法可作为传统鉴定方法的有效补充。

关键词： psbA-trnH 鸡血藤大血藤滇鸡血藤 DNA条形码

对滇鸡血藤不同部位中异型南五味子丁素含量的分析

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当代医药论丛 2016年第20期14卷 90-91页

作者：李波郭菊玲玉溪市食品药品检验所云南玉溪653100

目的:分析滇鸡血藤不同部位中异型南五味子丁素的含量。方法:将滇鸡血藤做为供试品,将异型南五味子丁素作为对照品,采用薄层色谱法对供试品进行鉴别试验,并对供试品韧皮部、木质部及髓部中异型南五味子丁素的含量进行测定,然后对检测结... 详细信息

目的:分析滇鸡血藤不同部位中异型南五味子丁素的含量。方法:将滇鸡血藤做为供试品,将异型南五味子丁素作为对照品,采用薄层色谱法对供试品进行鉴别试验,并对供试品韧皮部、木质部及髓部中异型南五味子丁素的含量进行测定,然后对检测结果进行分析。结果:在与对照品色谱相应的位置上,供试品三个部位的色谱分别显示出相同颜色的斑点。在相同取样量与点样量的条件下,与对照品色谱相应的位置上出现的供试品韧皮部斑点颜色较深,而供试品木质部与髓部斑点的颜色逐渐变浅。滇鸡血藤的韧皮部中异型南五味子丁素的含量为0.162%、其木质部中异型南五味子丁素的含量为0.116%、其髓部中异型南五味子丁素的含量为0.083%。结论:在滇鸡血藤的不同部位(韧皮部、木质部、髓部)中,异型南五味子丁素的含量各不相同。在对滇鸡血藤进行异型南五味子丁素含量的检测时应保证其取样部位的均一性,避免因取样的部位不同而使检测结果出现误差。

关键词：滇鸡血藤不同部位含量测定

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滇鸡血藤水、醇浸出物中总木脂素含量比较

科技风 2015年第16期 94-94页

作者：黄福荣陈珍马春霓楚雄医药高等专科学校云南楚雄675005

目的:对滇鸡血藤的水、醇提取工艺进行研究,并比较两种方法对木脂素的提取率。方法:采用正交设计试验,以总木脂素提取率为指标,优化醇提取工艺。结果:以乙醇为溶剂,采用渗漉法提取,对木脂素提取率明显高于水提。渗漉法最优提取工艺为:80... 详细信息

目的:对滇鸡血藤的水、醇提取工艺进行研究,并比较两种方法对木脂素的提取率。方法:采用正交设计试验,以总木脂素提取率为指标,优化醇提取工艺。结果:以乙醇为溶剂,采用渗漉法提取,对木脂素提取率明显高于水提。渗漉法最优提取工艺为:80%乙醇、冷浸24小时,2倍体积/h渗漉速率、收集50倍体积。结论:采用优化的渗漉法提取工艺提取,浸出物中总木脂素含量高,杂质少,方法简单、经济,更适于制备滇鸡血藤浸膏。

关键词：滇鸡血藤总木脂素比色法异型南五味子丁素