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一株铜绿微囊藻溶藻真菌的分离鉴定及溶藻特性

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环境污染与防治 2023年第10期45卷 1364-1368页

作者：洪桂云朱钰妮黄浚峰朱曙光安徽建筑大学环境与能源工程学院安徽合肥230601 建筑能效控制与评估教育部工程研究中心安徽合肥230601

从富营养化水体和土壤中分离筛选出一株溶藻真菌菌株JHQ3,通过ITS序列分析对溶藻真菌JHQ3进行鉴定,并研究了该菌株对铜绿微囊藻的溶藻方式和溶藻特性。结果表明:菌株JHQ3的ITS序列与萨氏曲霉属(Aspergillus sydowii)同源性达100%,菌株J... 详细信息

从富营养化水体和土壤中分离筛选出一株溶藻真菌菌株JHQ3,通过ITS序列分析对溶藻真菌JHQ3进行鉴定,并研究了该菌株对铜绿微囊藻的溶藻方式和溶藻特性。结果表明:菌株JHQ3的ITS序列与萨氏曲霉属(Aspergillus sydowii)同源性达100%,菌株JHQ3属于萨氏曲霉属(GenBank登录号为OP363844);溶藻真菌JHQ3对铜绿微囊藻的作用方式以直接溶藻作用为主,间接溶藻作用为辅;在30℃时菌液溶藻效果最好,溶藻率高达94.06%;在pH为7时,溶藻率最高,为83.39%;菌液浓度大于10^(-3)(即稀释10~3倍)时,其溶藻效果随菌液浓度的增加而增强;光暗比为12 h∶12 h时,溶藻效果较好,具有较好的工程应用价值;添加表面活性剂乙二胺四乙酸和Tween-80会抑制溶藻效果。溶藻菌株JHQ3能有效抑制铜绿微囊藻繁殖,在富营养化治理方面具有较好的应用前景。

关键词：溶藻真菌分离鉴定铜绿微囊藻溶藻特性

一株水华鱼腥藻溶藻细菌的分离鉴定和溶藻特性

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安徽农业大学学报 2023年第5期50卷 881-886页

作者：洪桂云黄浚峰朱钰妮朱曙光安徽建筑大学环境与能源工程学院安徽省建筑能效控制与评估教育部工程研究中心合肥230601

从不同来源的水体和土样中,筛选出对水华鱼腥藻具有溶藻作用的溶藻菌株SLW6。对菌株SLW6进行形态特征分析和生理生化鉴定,及16S rDNA序列分析,并研究了溶藻菌在不同培养时期、不同pH条件下对菌株SLW6溶藻效果的影响,探究了该菌株对水华... 详细信息

从不同来源的水体和土样中,筛选出对水华鱼腥藻具有溶藻作用的溶藻菌株SLW6。对菌株SLW6进行形态特征分析和生理生化鉴定,及16S rDNA序列分析,并研究了溶藻菌在不同培养时期、不同pH条件下对菌株SLW6溶藻效果的影响,探究了该菌株对水华鱼腥藻的溶藻方式。结果表明:菌株SLW6呈革兰氏阴性,V-P试验、明胶液化试验、甲基红试验为阴性,过氧化氢试验、硝酸盐还原试验都为阳性,菌株SLW6与产碱杆菌属的Alcaligenes faecalis(NR113606.1)的同源性达到99.65%,结合形态学特征,生理生化鉴定和16S rDNA序列分析,初步判断溶藻菌株SLW6为产碱菌属(GenBank登录号为OP363821)。超声辅助热乙醇提取叶绿素a,分光光度法测定叶绿素a含量,用叶绿素a含量变化计算溶藻率,结果表明SLW6处于对数期时的溶藻效果最好,溶藻率达89.45%;在pH=7条件下,溶藻效果较好,溶藻率为47.03%;溶藻菌SLW6对水华鱼腥藻的作用方式是直接溶藻为主间接溶藻作用为辅。

关键词：溶藻菌水华鱼腥藻分离鉴定溶藻特性溶藻方式

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溶藻菌LG3的筛选、溶藻特性及机理研究

溶藻菌LG3的筛选、溶藻特性及机理研究

作者：罗刚安徽建筑大学

学位级别：硕士

由于人类活动对水体造成的影响,使得氮、磷等营养物质不断地进入水体环境,加速了水体富营养化的进程。藻类在富含营养物质的水体中疯长,有机物质的生成远快于其分解,水中溶解氧含量减少,透明度显著降低,最终导致水体生态环境的破坏。治... 详细信息

由于人类活动对水体造成的影响,使得氮、磷等营养物质不断地进入水体环境,加速了水体富营养化的进程。藻类在富含营养物质的水体中疯长,有机物质的生成远快于其分解,水中溶解氧含量减少,透明度显著降低,最终导致水体生态环境的破坏。治理蓝藻水华通常采用物理和化学方法,但是两者均有各自的缺点,所以生物方法成为治理水体富营养化的主要方法,而生物方法所使用的生物,大部分是具有溶藻作用的溶藻细菌。本研究以铜绿微囊藻为供试藻种,从巢湖富营养化爆发区域中筛选得到一株溶藻菌LG3,以菌株LG3为试验菌种,对菌株进行了形态观察、革兰氏染色、生理生化鉴定和16S r RNA序列分析。研究了菌株LG3在不同的生长时期、浓度、培养温度、p H和初始藻液浓度等条件下对铜绿微囊藻溶藻效率的影响。考察菌株LG3的溶藻方式及其胞外分泌液中溶藻活性物质的特性,并对不同菌液浓度下的溶藻产物进行光谱分析。最后系统研究了菌株LG3的生长动力学、溶藻动力学及氮、磷营养动力学。主要研究结果如下:(1)菌株LG3为革兰氏阴性菌,菌落为白色圆形,体积小,不透明,其边缘规则,表面干燥。菌株的甲基红和明胶液化试验为阳性;VP试验和过氧化氢试验为阴性;糖酵解试验为氧化型;可还原硝酸盐。将得到的16S r RNA序列(Gen Bank登录号为ON680760)与已知序列进行比对,菌株LG3与产碱菌属的Alcaligenes aquatilis(MG515168.1)同源性达到99.86%,结合系统发育分析结果,初步判定菌株LG3属于产碱菌属。(2)菌株LG3处于对数期时的菌液溶藻率最高,溶藻率为86.1%±1.39%;菌液浓度越高,溶藻率越高,原菌液溶藻率为90.84%±1.28%;在30℃时溶藻效果较好,溶藻率为95.07%±0.85%;p H为8时,溶藻效果较好,溶藻率为89.62%±4.17%;菌株LG3对不同初始浓度藻液均有很好的溶藻效果,高浓度组和低浓度组的溶藻率分别为83.91%±0.63%和91.99%±1.90%。根据菌株LG3的紫外光谱、红外光谱和三维荧光光谱分析结果可知,溶藻产物中含有N-H、C-H、CH2、NH、C-N、C-O等化学键,初步推断溶藻产物为类色氨酸物质。(3)菌株LG3以分泌溶藻活性物质的间接溶藻方式为主。菌株LG3起溶藻效果的溶藻活性物质主要分子量溶藻率大于上清组,为81.83%±2.43%;胞外分泌液在25℃、p H8时,溶藻活性较强,在不同p H条件下均有较高的溶藻效果,溶藻活性物质在一定范围内具有p H稳定性,在温度较高时,溶藻效果不明显,溶藻活性物质的热稳定性较差;菌株LG3的溶藻活性物质具有较高的抗氧化性;菌株LG3的溶藻活性物质可在短时间内提高SOD活性。(4)菌株LG3以铜绿微囊藻藻液为营养源的生长动力学符合Polynomial模型,菌株LG3的比生长速率动力学符合一元一次线性模型;菌株LG3在溶藻进程中的溶藻动力学符合Exponential和一级反应方程模型,两者均可预测和模拟在菌株LG3的作用下藻细胞的死亡过程;在菌株LG3的影响下,溶藻进程藻细胞中TP、TN浓度的变化量与溶藻时间满足一元一次线性模型。图[42]表[17]参[73]

关键词：蓝藻水华溶藻菌溶藻特性溶藻机理溶藻动力学

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溶藻菌的分离鉴定及溶藻特性的研究

溶藻菌的分离鉴定及溶藻特性的研究

作者：朱原吉林农业大学

学位级别：硕士

水体富营养化引起的水华在世界各地频繁爆发,对生态环境以及人类的经济和生活带来了很大的影响。物理和化学方法治理水华易对环境造成二次污染,不利于生态和环境的可持续发展。溶藻菌在水生生态系统中起到调节水生生态平衡的重要作用,... 详细信息

水体富营养化引起的水华在世界各地频繁爆发,对生态环境以及人类的经济和生活带来了很大的影响。物理和化学方法治理水华易对环境造成二次污染,不利于生态和环境的可持续发展。溶藻菌在水生生态系统中起到调节水生生态平衡的重要作用,同时也是治理水华爆发,改善水质的一柄“利剑”,目前高效溶藻菌的分离应用已成为水华问题治理方面的研究热点。东北地区春季温度较低,铜绿微囊藻在稻田易大量繁殖,浮于水面遮挡阳光,且竞争营养,对水稻生长造成了不同程度的影响。本研究从北方稻田藻类生长旺盛的水体中分离筛选溶藻菌,对溶藻菌的溶藻特性、溶藻机理进行研究,并利用苗期试验探究了溶藻菌解除铜绿微囊藻对水稻毒害效应的可行性。这将为利用生物手段防治水华,缓解藻类对水稻苗期生长的影响提供一定的菌种资源与理论支持。具体研究结果如下:(1)本研究分离获得4株溶藻菌,分别命名为ZY-1、FY-1、BJ-12和ZY-2,其中菌株ZY-2菌落颜色为橙黄色,其他3株细菌菌落均为乳白色;ZY-1菌株无刺激性气味,其他3株细菌具有刺鼻性气味。16S r DNA分子鉴定4株细菌分别属于萨拉曼卡假单胞菌属(Pseudomonas helmanticensis)、高地芽孢杆菌属(Bacillus altitudinis)、嗜水气单胞菌属(Aeromonas hydrophila)和水域微小杆菌属(Exiguobacterium undae)。(2)ZY-1、FY-1、BJ-12和ZY-2这4株细菌具有不同的溶藻阈值。初始菌液添加量大于1×10～6 CFU/m L时,7 d后溶藻率达到最高,分别为84.03%、83.11%、61.88%和58.88%;ZY-1和FY-1在初始藻液浓度低于10～6 cells/m L时,7 d后最高分别能达到83.82%和84.82%的溶藻率,而BJ-12和ZY-2在各初始藻液浓度时,溶藻率均低于ZY-1和FY-1。(3)通过各菌株洗涤细胞与无细胞滤液对铜绿微囊藻溶藻率影响的试验,发现ZY-2是通过直接方式进行溶藻,其他3个菌株ZY-1、FY-1和BJ-12通过间接方式溶藻,扫描电镜(SEM)结果更加直观的证实了这一结果。FY-1与BJ-12的无细胞滤液在25-50℃、p H值为7-8内活性较高,蛋白酶K处理后失活,推测这两株溶藻菌的溶藻活性物质可能为蛋白质类。ZY-1的无细胞滤液具有良好的热稳定性和耐碱性,在25-100℃、p H值为6-9内均具有较好的溶藻活性,蛋白酶K处理不失活,说明ZY-1菌株的溶藻活性物质与FY-1与BJ-12明显不同,不属于蛋白质类。(4)菌株ZY-1和FY-1的无细胞滤液与铜绿微囊藻的添加比例为10%(v/v)时对藻细胞裂解效果最佳,7 d时叶绿素a可降低到0.13±0.02 mg/L和0.14±0.03 mg/L。ZY-1和FY-1稳定生长期和对数生长期无细胞滤液的溶藻率无明显差异。ZY-1分泌的溶藻物质在25-100℃温度下,p H值为4-9时溶藻能力强,FY-1分泌的溶藻物质在25-50℃,p H值为6-8是溶藻活性较高。在有光照的情况下,两株细菌的无细胞滤液对铜绿微囊藻的溶解能力强于全黑暗情况。(5)ZY-1和FY-1无细胞滤液对藻细胞的光合作用产生了影响,攻击了藻细胞的光系统Ⅱ,7 d时铜绿微囊藻Fv/Fm相较于对照组降低了97.22%;藻细胞的MDA含量分别升高到0.49±0.01 nmol/mg protein和0.48±0.02 nmol/mg protein,发生膜脂过氧化,激活了藻细胞抗氧化酶系统,SOD、POD、CAT、APX和T-AOC分泌增多。通过q PCR实验结果显示藻细胞光合系统和抗氧化酶系统相关基因psb A1、psb D1、rbc L的表达量下调,微囊藻毒素分泌基因mcy B的相对表达量降低为内参基因的0.01倍。(6)利用分离获得的溶藻菌ZY-1和FY-1进行水稻盆栽实验。结果表明,铜绿微囊藻的添加使水稻的根部受损,并使水稻产生了过氧化损伤,苗期水稻根尖数相较于对照组降低了43.23%,根长、根直径、根体积、根表面积、根投影面积也减少了,水稻的MDA含量增加到1.02μmol/g。ZY-1和FY-1的无细胞滤液的施用使MDA含量分别降低到0.90±0.09μmol/g和0.94±0.05μmol/g,SOD、POD、CAT抗氧化酶活性明显降低,缓解了铜绿微囊藻对水稻苗期的危害。

关键词：溶藻菌铜绿微囊藻溶藻特性抗氧化酶水稻

蜡状芽孢杆菌L7对拟柱孢藻的溶藻特性与机制研究

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蜡状芽孢杆菌L7对拟柱孢藻的溶藻特性与机制研究

作者：胡媛媛华南理工大学

学位级别：硕士

拟柱孢藻(Cylindrospermopsis raciborskii)是一种产毒丝状蓝藻,普遍存在于热带地区,近几年已扩张至温带地区,对饮用水水源地和人类健康造成了危害。因此,探索高效且环境友好的防治方法非常重要。目前,微生物控藻被认为是防治蓝藻水华... 详细信息

拟柱孢藻(Cylindrospermopsis raciborskii)是一种产毒丝状蓝藻,普遍存在于热带地区,近几年已扩张至温带地区,对饮用水水源地和人类健康造成了危害。因此,探索高效且环境友好的防治方法非常重要。目前,微生物控藻被认为是防治蓝藻水华最有前景的策略,溶藻细菌以其繁殖快速、高效的优势逐渐成为研究热点,但是关于溶藻细菌对拟柱孢藻的研究仍比较少。本课题组之前分离筛选出来的蜡状芽孢杆菌L7溶藻范围广,不仅对铜绿微囊藻、水华鱼腥藻、蛋白核小球藻和中肋骨条藻有高效的溶藻活性,也能对拟柱孢藻起溶藻作用。本研究以蜡状芽孢杆菌L7和拟柱孢藻FACHB-1503为研究对象,探究了溶藻细菌L7对拟柱孢藻FACHB-1503的溶藻特性和溶藻机制。主要研究结果如下:(1)延滞期、对数期和稳定期的L7菌液均对拟柱孢藻表现出高效抑藻活性,衰亡期抑藻效果不明显。延滞期时L7有最佳抑藻效率(I=99.62%),但对数期的L7菌液在第1～4 d比延滞期更快的杀死拟柱孢藻。5%接种量(细胞密度为7.56×10～8)的L7菌液表现出明显的溶藻效果(I=78.69%),10%和15%接种量的L7菌液能在6 d内裂解90%的拟柱孢藻。因此只有L7达到5%接种量时的细胞密度才能显著抑制拟柱孢藻的生长。(2)光照对溶藻效果的影响取决于光照对藻类生长的影响,光暗循环(12 h光照:12 h黑暗)时溶藻效果最好(I=83.69%)。温度为15～30℃时,抑藻率与温度呈正相关,且30℃有最佳抑藻效率(I=87.63%)。pH为6～8时,L7快速繁殖生长,溶藻活性也随之增强。R2A培养基重悬菌液能够快速高效杀死拟柱孢藻,抑藻率甚至高于L7菌液,但L7的无菌滤液没有明显溶藻效果,表明L7的作用方式为直接接触。(3)在L7的直接作用下,拟柱孢藻的多细胞丝状体断裂成单个细胞,随后质壁分离,膜结构受损,且拟核区域遭到破坏,细胞内容物流出,随着培养时间增加,处理组中只能看到大量的细菌包裹着藻细胞裂解后的残骸,藻细胞结构完全丧失,细胞密度下降,最终完全死亡。(4)在L7的直接作用下,不同投加量的L7菌液处理后MDA含量的不断增加表示拟柱孢藻细胞的细胞膜受到了不同程度的氧化损伤。此外,叶绿素荧光参数随处理时间的增加逐渐下降至0,表明L7对拟柱孢藻细胞造成了环境胁迫,导致其光合系统受损,PSⅡ系统的活性及光合效率显著降低。(5)在L7的直接作用下,通过非靶向代谢组学途径在溶藻前后注释到1354个差异代谢物,其中上调的代谢物有754个,下调的代谢物有600个。差异代谢物的成分分析表示,接触L7后藻细胞中与脂质代谢相关的代谢物上调,膜流动性增加,过量的ROS导致细胞膜氧化受损,同时抑制了光合色素的产生和藻细胞的增殖能力。(6)在L7的直接作用下,拟柱孢藻细胞密度下降,ABC转运蛋白、不饱和脂肪酸的生物合成、氨基糖和核苷酸糖代谢以及嘌呤代谢等代谢通路的代谢过程受到干扰,其中与脂质代谢相关的代谢物变化表明藻细胞受到氧化损伤,代谢加快,启动ROS清除机制。同时还有与细胞壁合成、细胞增殖、能量代谢、信号传导、蛋白质合成、光合作用、DNA合成等相关的代谢物变化,表明藻细胞的生长过程受到抑制。

关键词：溶藻细菌拟柱孢藻溶藻特性溶藻机制代谢物分析

溶藻菌的分离及其对铜绿微囊藻溶藻特性的研究

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溶藻菌的分离及其对铜绿微囊藻溶藻特性的研究

作者：吕萍兰州理工大学

学位级别：硕士

随着环境污染日益严重,水体养分增多,导致水体富营养化现象频发。浙江省义乌市岩口水库水体属于中度富营养化水体,易在夏季暴发水华,其上游集水区的若干个坑塘富营养化严重,严重威胁到饮用水水库的水质安全。溶藻菌(Algicidal bacteria... 详细信息

随着环境污染日益严重,水体养分增多,导致水体富营养化现象频发。浙江省义乌市岩口水库水体属于中度富营养化水体,易在夏季暴发水华,其上游集水区的若干个坑塘富营养化严重,严重威胁到饮用水水库的水质安全。溶藻菌(Algicidal bacteria)是指能够杀死藻细胞或抑制藻类生长的一类细菌,也可在水生态系统中有效调节种群结构,维持菌藻平衡。土著溶藻菌与外源溶藻菌相比无生物入侵风险和无菌种退化之虞,且对当地环境适应力强。因此,从水华暴发的水域分离筛选土著溶藻菌已成为生物控藻领域的研究热点。鉴于此,本文以淡水系统优势藻种铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)为研究对象,从水华频发的坑塘中筛选土著溶藻菌来探究其溶藻性能和溶藻机理,并分析营养物质对藻华暴发过程中藻际细菌群落的影响,主要研究结果如下。(1)从义乌市蓝藻水华暴发的坑塘(119°54′40.28″E,29°18′52.40″N)中分离纯化出对铜绿微囊藻(PCC7820)具有显著抑制作用的溶藻菌,命名为KT48。菌株KT48为革兰氏阴性菌,单菌落呈乳黄色,点状凸起,边缘整齐,具有较强的生存能力,可分别在5%Na Cl、4～45 C、p H 5～10的LB(Luria-Bertani)培养基中生长。生理生化鉴定结果显示:淀粉水解、吲哚试验、乙酰甲基醇(V-P)、甲基红(M.R.)、荧光色素和产硫化氢均呈阴性,氧化酶和亚硝酸盐还原呈阳性,葡萄糖发酵为发酵型。16S r DNA基因测序表明菌株KT48为寡氧单胞菌属(Stenotrophomonas sp.)。Stenotrophomonas sp.KT48保藏编号为CGMCC NO.22722,Genbank中登录号为OM678442。(2)将处于对数期的铜绿微囊藻与菌株KT48的原菌液、菌悬液、上清液共培养,探究菌株KT48的溶藻方式。结果表明:菌株KT48对铜绿微囊藻的作用方式是直接裂解。菌株KT48的原菌液、菌悬液、上清液与铜绿微囊藻共培养10天,其抑藻率分别为89.04%、97.26%、-16.44%,表明溶藻菌液中Stenotrophomonas sp.KT48主要通过菌体与藻细胞直接作用实现控藻,而非细胞代谢产物。(3)通过将铜绿微囊藻与菌株KT48共培养,探究其溶藻性能,结果表明:菌株KT48对处于对数期和稳定期的铜绿微囊藻均有显著的抑制效果;采用1/8 LB液体培养基重悬菌体的溶藻效果远大于无菌水重悬菌体的溶藻效果;且藻液中菌体密度越高,溶藻效果越好;在1/8 LB培养基中添加0.3%淀粉或葡萄糖以补充碳源,可促进菌株KT48溶藻效果,抑藻率可高达98%以上。(4)对菌株KT48溶藻过程中藻细胞形态和抗氧化酶系统的变化进行分析,结果表明:菌株KT48可破坏铜绿微囊藻的细胞结构,诱导藻细胞产生过量活性氧(ROS)、促使丙二醛(MDA)含量增多,加剧了膜脂过氧化程度。藻细胞受到氧化损伤后,藻细胞的抗氧化系统被激活,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性在溶藻中期显著升高。随着菌株KT48的继续作用,溶藻后期藻细胞的SOD、CAT和POD活性下降,表明藻细胞抗氧化酶防御系统不足以抵御细胞损伤,导致铜绿微囊藻逐渐凋亡。(5)在铜绿微囊藻中添加不同营养物质,探究藻际细菌群落结构变化情况和藻细胞生长状态之间的关系。结果表明:LB培养基和蛋白胨对铜绿微囊藻的抑制作用明显;原位营养刺激下铜绿微囊藻藻际环境中细菌群落结构变化明显,物种丰富度显著升高。且在营养刺激下的藻际细菌中分离出若干株溶藻菌,从而验证了藻际环境中存在溶藻菌。

关键词：蓝藻水华铜绿微囊藻溶藻菌溶藻特性溶藻机理

高效铜绿微囊藻溶藻菌WJ6的分离鉴定及溶藻特性

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中国环境科学 2018年第11期38卷 4269-4275页

作者：洪桂云马少雄王佳张瑾安徽建筑大学环境与能源工程学院安徽省水污染控制与废水资源化重点实验室安徽合肥230601

以铜绿微囊藻为研究对象,从富营养化水体分离了一株高效溶藻菌,通过分析形态学、生理生化特征及16SrDNA序列比对,鉴定了该溶藻菌株,分析了该菌株对铜绿微囊藻的溶藻方式、溶藻特性及其不同培养时期、不同浓度菌液及不同环境因子对溶藻... 详细信息

以铜绿微囊藻为研究对象,从富营养化水体分离了一株高效溶藻菌,通过分析形态学、生理生化特征及16SrDNA序列比对,鉴定了该溶藻菌株,分析了该菌株对铜绿微囊藻的溶藻方式、溶藻特性及其不同培养时期、不同浓度菌液及不同环境因子对溶藻效果的影响,并探讨了其可能的溶藻机制.研究表明:WJ6属于沙雷氏菌属(Serratia sp. GenBank登录号为KY462187);溶藻菌WJ6以胞外释放溶藻物质为主直接溶藻为辅的溶藻方式;溶藻菌WJ6处于对数期时的溶藻率最高达87.50%;菌液浓度达1.4×10~9CFU/mL以上,溶藻率最高为95.69%;在30℃、pH8条件下,溶藻率达90.00%;改良的基本培养基培养的溶藻菌溶藻率最高达98.50%;铵离子浓度大于2mol/L时,溶藻菌的溶藻率98.33%;当盐度为0.5%时,溶藻率较高为92.77%.溶藻菌株WJ6是1株高效溶铜绿微囊藻菌,在富营养化治理方面具有较好的应用前景.

关键词：溶藻菌分离鉴定铜绿微囊藻溶藻特性

芽孢杆菌B1胞外活性物质对球形棕囊藻的溶藻特性研究

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环境科学 2012年第3期33卷 838-843页

作者：李蔷赵玲尹平河暨南大学生命科学技术学院化学系广州510632 暨南大学理工学院环境工程系广州510632

从珠海香洲码头赤潮海水中分离获得1株对球形棕囊藻有显著溶藻效果的芽孢杆菌B1,研究了B1对棕囊藻的溶藻作用方式,溶藻过程中藻细胞结构变化,并采用透析、乙醇沉淀、有机溶剂萃取、酸碱及热稳定性分析等方法探讨了溶藻活性物质的性质.... 详细信息

从珠海香洲码头赤潮海水中分离获得1株对球形棕囊藻有显著溶藻效果的芽孢杆菌B1,研究了B1对棕囊藻的溶藻作用方式,溶藻过程中藻细胞结构变化,并采用透析、乙醇沉淀、有机溶剂萃取、酸碱及热稳定性分析等方法探讨了溶藻活性物质的性质.结果表明,B1无菌滤液对棕囊藻有较强的溶藻效应,除藻率达94.9%,B1通过分泌活性物质间接对球形棕囊藻的生长产生抑制;藻培养液中加入B1无菌滤液16 h后,藻细胞发生团聚,细胞壁失去完整性,56 h后藻细胞破碎,胞内物质溶出;相对分子质量溶藻过程中起主要作用的活性物质,具有较强极性和热稳定性,在121℃加热20 min后,仍然有良好的溶藻能力,除藻率达92.6%,活性物质在pH 9.0左右溶藻能力较强,在乙醇中不发生沉淀反应,由此推测该活性物质为含有酸性或碱性基团的非生物活性分子,不属于蛋白质、核酸、多糖等物质.

关键词：芽孢杆菌溶藻细菌球形棕囊藻胞外活性物质溶藻特性

铜绿微囊藻溶藻菌EA-1的分离鉴定及溶藻特性

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中国环境科学 2021年第11期41卷 5372-5381页

作者：卢露马金玲牛晓君张冬青郑小贤林璋华南理工大学环境与能源学院广东广州510006 广东石油化工大学环境科学与工程学院广东省石油化工污染过程与控制重点实验室广东茂名525000

从广州流花湖分离获得一株溶藻菌株EA-1,16SrDNA分析表明菌株EA-1属于肠杆菌属(Enterobacter).研究了肠杆菌EA-1对铜绿微囊藻的溶藻效果和溶藻机制.结果表明,对数期EA-1具有最佳溶藻效果,投加比例为10%,初始叶绿素a含量为1.43mg/L时,EA-... 详细信息

从广州流花湖分离获得一株溶藻菌株EA-1,16SrDNA分析表明菌株EA-1属于肠杆菌属(Enterobacter).研究了肠杆菌EA-1对铜绿微囊藻的溶藻效果和溶藻机制.结果表明,对数期EA-1具有最佳溶藻效果,投加比例为10%,初始叶绿素a含量为1.43mg/L时,EA-1能实现3d内完全除藻,叶绿素a含量为2.39mg/L时,共培养6d后,抑制率为84.1%±1.3%.EA-1通过分泌胞外溶藻物质间接溶藻,生理生化响应表明,EA-1无菌滤液胁迫下,藻细胞膜脂过氧化损伤严重,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性先急剧上升后下降.三维荧光光谱(EEM)表明溶藻产物为类腐殖酸,类富里酸和类蛋白类物质.扫描电子显微镜(SEM)显示藻细胞出现褶皱,内陷和萎缩现象.透射电子显微镜(TEM)显示藻细胞破坏过程为:首先,胶质层与细胞壁分离,光合片层变得松散和不规则,内含物被部分降解.随后,光合片层被彻底破坏,DNA核物质和多聚磷酸盐等营养物质颗粒被降解,藻细胞内部结构被完全破坏,藻细胞死亡.

关键词：肠杆菌铜绿微囊藻溶藻特性生理响应细胞形态细胞超微结构