检索结果-南通市图书馆

湖北地黄CRISPR/Cas9基因编辑体系的建立

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

植物学报 2023年第6期58卷 905-916页

作者：苗春妍李铭铭左鑫丁宁杜家方李娟张重义王丰青河南农业大学农学院郑州450046 福建农林大学农学院福州350002

湖北地黄(Rehmannia henryi)是一种具有重要价值的药用植物,其基因编辑研究还未见报道。为建立湖北地黄基因编辑体系,克隆了类胡萝卜素合成途径中八氢番茄红素脱氢酶(PDS)的编码基因,并构建RhPDS1基因的CRISPR/Cas9载体,以根癌农杆菌介... 详细信息

湖北地黄(Rehmannia henryi)是一种具有重要价值的药用植物,其基因编辑研究还未见报道。为建立湖北地黄基因编辑体系,克隆了类胡萝卜素合成途径中八氢番茄红素脱氢酶(PDS)的编码基因,并构建RhPDS1基因的CRISPR/Cas9载体,以根癌农杆菌介导法转化湖北地黄基因组。结果表明,RhPDS1转录本含1764 bp的开放阅读框(ORF),其推测的氨基酸序列具有八氢番茄红素脱氢酶的典型结构域。RhPDS1基因在蕾、花和嫩叶中的相对表达量较高。利用基因编辑获得3个具有白化表型的再生株系,白化苗分化率为3.7%。测序结果表明,3个突变体属于2个基因编辑事件,靶点序列分别为1 bp或/和5 bp碱基缺失,造成移码突变。白化苗突变体的叶绿素和类胡萝卜素含量极显著低于野生型,RhPDS1基因的表达量也显著下降。综上,该研究克隆了RhPDS1基因,并利用CRISPR/Cas9技术实现了对RhPDS1基因的靶向敲除,为湖北地黄的功能基因组学研究和野生驯化奠定了技术基础。

关键词：湖北地黄 RhPDS1 CRISPR/Cas9 基因敲除

湖北地黄多糖超声波提取工艺条件及含量测定研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

时珍国医国药 2007年第1期18卷 37-39页

作者：田春莲廖博儒陈建华姚玉红曾凤吉首大学城乡资源与规划学院湖南张家界427000

目的建立超声波提取湖北地黄多糖的最佳工艺和测定湖北地黄各部分中多糖的含量。方法对超声波提取湖北地黄多糖的条件进行了研究并用蒽酮-硫酸法测定了湖北地黄各部分的多糖含量。结果由正交实验得出超声波提取的最佳条件为:湖北地黄与... 详细信息

目的建立超声波提取湖北地黄多糖的最佳工艺和测定湖北地黄各部分中多糖的含量。方法对超声波提取湖北地黄多糖的条件进行了研究并用蒽酮-硫酸法测定了湖北地黄各部分的多糖含量。结果由正交实验得出超声波提取的最佳条件为:湖北地黄与水的质量比为1∶40,提取温度为40℃,提取时间为30 m in。采用蒽酮-硫酸法于624 nm比色,得湖北地黄中各部分多糖含量为:根、茎、叶分别为15.74%,8.36%,4.21%。结论湖北地黄的多糖依据不同提取方法、不同部位含量有较大差异。

关键词：超声波提取多糖湖北地黄

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

湖北地黄梓醇超声波提取及含量测定

安徽农业科学 2009年第28期37卷 13788-13789,13792页

作者：田春莲丁文吉首大学生物资源与环境科学学院湖南吉首416000 吉首大学城乡资源与规划学院湖南张家界427000

[目的]采用超声波法对湖北地黄中梓醇的提取工艺进行研究。[方法]在单因素试验基础上，采用L9（3^4）正交试验考察乙醇浓度、提取时间、料液比时湖北地黄中梓醇提取效果的影响；运用薄层色谱分析（TLC）法分别对湖北地黄根、茎、叶和生... 详细信息

[目的]采用超声波法对湖北地黄中梓醇的提取工艺进行研究。[方法]在单因素试验基础上，采用L9（3^4）正交试验考察乙醇浓度、提取时间、料液比时湖北地黄中梓醇提取效果的影响；运用薄层色谱分析（TLC）法分别对湖北地黄根、茎、叶和生地黄中梓醇含量进行测定。[结果]优化的工艺参数为：乙醇浓度70％，提取时间30min，料液比1：40。TLC分析结果表明，张家界产湖北地黄叶中梓醇含量最高，为1．84％，其次是茎，为1．35％，根为1．29％，生地黄中梓醇舍量最低，为0．44％。[结论]为深入研究和开发湖北地黄提供依据，

关键词：湖北地黄生地黄梓醇超声波提取薄层色谱扫描法

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

湖北地黄化学成分研究

湖北地黄化学成分研究

作者：周婕北京协和医学院

学位级别：硕士

湖北地黄Rehannia henryi系玄参科地黄属植物,本论文采用现代多种色谱分离技术和波谱鉴定分析技术,并结合化学方法,对湖北地黄的水提取物进行了系统的化学成分研究,并且对分离得到的部分单体成分进行药理活性筛选。从湖北地黄全株水提... 详细信息

湖北地黄Rehannia henryi系玄参科地黄属植物,本论文采用现代多种色谱分离技术和波谱鉴定分析技术,并结合化学方法,对湖北地黄的水提取物进行了系统的化学成分研究,并且对分离得到的部分单体成分进行药理活性筛选。从湖北地黄全株水提物中共分离鉴(测)定了 88个化合物,分别为湖北地黄素A-P(1*,2*,4,7-19*),湖北地黄苷A(3*),地黄呋喃缩醛A-B(5*-6*),湖北地黄萜A-B(20*-21*),4S-ethoxyrehmapicrogenin(22*),湖北地黄酰胺 A(23*),益母草苷 A(24),二氢梓醇(25),梓醇(26),6-O-E-caffeoylajugol(27),地黄新苷 F(28),aeginetoyl ajugol5"-O-β-D-quinovoside(29),rehmaglutin B(30),地黄素 D(31),地黄呋喃(32),地黄呋喃醛(33),焦地黄内酯(34),地黄素C(35),地黄素G(36),piscrosinE(37),二氢梓醇苷元(38),rehmapicrogenin(39),(4S)-rehmapicrogenin(40),rehmapicrogenin calcium salt(41),(4S)-rehmapicrogenin calcium salt(42),rehmapicrogenin sodium salt(43),frehmaglutoside A sodium salt(44),frehmaglutoside A calcium salt(45),(4S)-frehmaglutoside A calcium salt(46),rehmapicroside sodium salt(47),dihydroxy-β-ionone(48),野菰酸(49),aeginetic acid sodium salt(50),14-hydroxyaeginetic acid(51),rehmaionoside B(52),rehmaionoside A(53),(9R)-oxyrehmaionoside B(54),oxyrehmaionoside B(55),黑蒴苷(56),neo-rehmannioside(57),aeginetic acid 5-O-β-D-quinovoside(58),aeginetic acid 5-O-β-D-quinovomuside sodium salt(59),aeginetic acid 5-O-β-D-quinovoside calcium salt(60),jiocarotenoside A1(61),jiocarotenoside A1 sodium salt(62),jiocarotenoside A1 calcium salt(63),3-甲氧基-4-羟基苯乙醇(64),3-羟基-4-甲氧基苯乙醇(65),3,4-二羟基苯乙醇(66),对羟基苯乙醇(67),3,4-dihydroxyphenyl alcohol-β-D-glucopyranoside(68),2-(3,4-dihydroxyphenyl)-2(S)-hydroxyethyl-3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→3)-O-β-D-glucopyranoside(69),地黄苷(70),异地黄苷(71),3,4-dihydroxy-β-phenethyl-O-α-L-rhamnopyranosyl(1→3)-O-β-1-galacopyranosyl(l→6)-4-O-caffeoyl-β-D-glucopyranoside(72),jionoside A1(73),jionosid B1(74),香豆酸(75),3,4-二羟基苯丙酸(76),阿魏酸(77),香豆酸乙酯(78),丁香酸(79),3-羟基-4-甲氧基-苯甲酸(80),uracil(81),(+)-neo-olivil(82),水苏糖(83),葡萄糖(84),果糖(85),5-hydroxypyrrolidin-2-one(86),ethyl-α-L-rhamnopyranoside(87),ethyl-α-D-galctopyranoside(88)。分离得到的88个化合物中,包括34个环烯醚萜及苷类(1*-19*,24-38),28个单萜、倍半萜和降倍半萜(20*-22*,39-63),11个苯乙醇及其苷类(64-74),15个其他类型化合物(23*,75-88)。其中化合物1*-23*为新化合物。对湖北地黄中所分离得到的部分单体化合物(1-83)进行药理活性筛选,抗肿瘤活性筛选:采用MTT法测定了湖北地黄中部分化合物对五种人肿瘤细胞的抑制作用,结果显示均没有表现

关键词：湖北地黄化学成分环烯醚萜生物活性

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

重庆列当科两个新记录种

中国野生植物资源 2024年第7期43卷 107-110页

作者：张哲张欢冉佳鑫吕信运邓洪平西南大学生命科学学院重庆400715 重庆市涪陵区林业局重庆408000

对重庆市涪陵区和巫山县植物多样性考察时,发现列当科(Orobanchaceae Vent.)植物新记录2种,现予以报道。经过查阅资料和标本研究,确定为鹿茸草属(Monochasma Maxim.)植物沙氏鹿茸草(Monochasma savatieri *** Maxim.)和地黄属(Rehmannia... 详细信息

对重庆市涪陵区和巫山县植物多样性考察时,发现列当科(Orobanchaceae Vent.)植物新记录2种,现予以报道。经过查阅资料和标本研究,确定为鹿茸草属(Monochasma Maxim.)植物沙氏鹿茸草(Monochasma savatieri *** Maxim.)和地黄属(Rehmannia *** Fisch.&***.)植物湖北地黄(Rehmannia henryi ***.),为重庆市新记录种。其中,重庆新分布沙氏鹿茸草是该种在中国西南片区的首次发现,其分布海拔提升至1205 m。该记录种的发现丰富了重庆的植物区系,同时为地方植物志的编写提供新资料。凭证标本均存于西南大学自然博物馆植物标本室(SWNTU)。

关键词：列当科新记录沙氏鹿茸草湖北地黄重庆市

MYB转录因子调控3种地黄属植物花青素合成的分子机制研究

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

MYB转录因子调控3种地黄属植物花青素合成的分子机制研究

作者：左鑫河南农业大学

学位级别：硕士

植物花青素具有较好的抗氧化、抗肿瘤和视力保护活性,在维护人类身体健康中发挥重要作用。地黄是传统大宗药材,也是著名的“四大怀药”之一,其近缘种天目地黄、湖北地黄也有长期的民间用药历史。地黄属植物的花含有丰富的梓醇、毛蕊花... 详细信息

植物花青素具有较好的抗氧化、抗肿瘤和视力保护活性,在维护人类身体健康中发挥重要作用。地黄是传统大宗药材,也是著名的“四大怀药”之一,其近缘种天目地黄、湖北地黄也有长期的民间用药历史。地黄属植物的花含有丰富的梓醇、毛蕊花糖苷、多糖等药效成分,具有重要的开发利用价值。地黄、天目地黄和湖北地黄的花色具有显著的差异,推测花青素种类和含量差异是导致其花色差异的原因。研究地黄属植物花青素形成差异的物质基础,挖掘调控地黄属花青素合成的关键功能基因和分子调控机制,将为地黄属花资源的充分开发利用奠定基础,为地黄种质资源创新和分子育种提供宝贵的基因资源,同时也为研究花青素积累的分子调控提供理论基础。为了研究MYB转录因子在调控地黄、天目地黄和湖北地黄花青素生物合成中的作用,首先测定了3个地黄属植物不同发育阶段花冠中总花青素的含量,并利用花青素靶向代谢组学方法对其花冠中花青素成分进行了定性和定量分析,初步解析了3个物种花冠中花青素差异积累的物质基础。通过转录组测序分别从地黄、天目地黄和湖北地黄中挖掘了可能参与花青素生物合成的结构基因,并鉴定出可能调控花青素生物合成的MYB转录因子。对来自3个地黄属植物的6个MYB基因进行克隆和序列特征分析。构建过量表达载体和CRISPR/Cas9基因编辑载体,以农杆菌介导的遗传转化对MYB基因调控花青素生物合成的分子功能进行研究。进一步从烟草中克隆了Nt DFR和Nt ANS基因启动子,从地黄、天目地黄和湖北地黄中分别克隆了ANS基因的启动子,并构建了双荧光素酶报告载体,分析了6个MYB转录因子对催化酶基因启动子表达活性的影响。主要的研究内容和结果如下:1.由于天目地黄和湖北地黄实时荧光定量PCR分析的内参基因未见报道,本研究基于天目地黄和湖北地黄5个不同发育阶段的花冠及叶的转录组数据,在两个物种中分别筛选出6个表达量稳定的持家基因作为候选内参基因。通过q RT-PCR分析了候选基因在不同样本内的表达丰度,并利用Ge Norm、Norm Finder和Best Keeper 3种不同算法对候选内参基因的稳定性进行评估。结果显示,天目地黄中稳定性较高的候选内参基因分别是Rc TIP41和Rc18S,湖北地黄中稳定性较好的候选内参基因是Rh Actin和Rh18S。并且,分别从天目地黄和湖北地黄中筛选了4个功能基因,对内参基因进行了稳定性和准确性验证。通过对定量结果和转录组数据进行相关性分析,证实了Rc TIP41和Rc18S、Rh Actin和Rh18S分别是天目地黄和湖北地黄q RT-PCR分析的最适内参基因。2.对地黄、天目地黄和湖北地黄不同发育阶段花冠及叶中总花青素含量进行测定,发现其总花青素含量呈动态变化。同一发育阶段的总花青素含量存在明显的差异,其中地黄花冠中总花青素含量最高,天目地黄次之,而湖北地黄最少。利用花青素靶向代谢组学分别在地黄、天目地黄和湖北地黄花冠中检测到25、29和26种花青素成分,包括矢车菊素类、天竺葵素类、芍药素类、飞燕草素类和矮牵牛素类花青素。此外,3个物种花冠中含量最高的花青素成分均为矢车菊素-3-O-芸香糖苷,而其在天目地黄中的含量最高(958.14μg·g),其次为地黄(812.28μg·g),湖北地黄含量最低(431.06μg·g)。进一步分别对地黄、天目地黄和湖北地黄的5个时期花冠和叶进行了转录组测序(RNA-Seq)分析,并通过组装分别获得了100,891、91,010和80,035个Unigene。基于转录组数据分别在3个物种中筛选花冠与叶中的差异基因,并从地黄、天目地黄和湖北地黄花冠中鉴定出可能参与花青素生物合成的6种关键催化酶基因。此外,在地黄、天目地黄和湖北地黄转录组中分别鉴定出341、335和315个MYB转录因子基因。以拟南芥At PAP2基因序列作为参考序列,进一步结合不同发育阶段花冠中花青素的积累规律及花青素生物合成酶基因的表达模式,最终在地黄、天目地黄和湖北地黄中鉴定出可能调控花青素生物合成的6个候选MYB基因。3.采用聚合酶链式反应(PCR)分别克隆了地黄的Rg MYB41、Rg MYB42和Rg MYB43基因,天目地黄的Rc MYB1和Rc MYB3基因,及湖北地黄Rh MYB1基因,并利用q RT-PCR分析了6个MYB基因的表达模式。氨基酸序列分析发现,6个MYB转录因子均含有2个SANT超家族MYB结合结构域,属于R2R3-MYB亚家族。分别构建了6个MYB基因的过量表达载体,并利用农杆菌介导法对烟草及地黄属3个物种的叶片进行遗传转化。在烟草中,6个MYB基因的异源表达能够使愈伤组织、幼苗、叶片、花器官等不同器官的颜色明显变红,且花青素含量不同程度的显著提高,其中Rc MYB3基因功能最强。q RT-PCR分析发现,6个MYB基因在烟草中的异源

关键词：地黄天目地黄湖北地黄代谢组转录组花青素 MYB转录因子 CRISPR/Cas9