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“温经止痛颗粒”药学基础研究

“温经止痛颗粒”药学基础研究

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作者：朱宇超南京中医药大学

学位级别：硕士

由于生活节奏加快、饮食结构变化、职场压力增加等因素,女性痛经发病率在逐年上升,严重影响发病女性的正常生活。本课题研究对象温经止痛方为经典方甘草干姜汤加味肉桂、小茴香、大枣而来,可温经通脉,散寒止痛,为将其开发成可满足临床... 详细信息

由于生活节奏加快、饮食结构变化、职场压力增加等因素,女性痛经发病率在逐年上升,严重影响发病女性的正常生活。本课题研究对象温经止痛方为经典方甘草干姜汤加味肉桂、小茴香、大枣而来,可温经通脉,散寒止痛,为将其开发成可满足临床需求的中药复方制剂,主要从文献研究、提取工艺路线筛选、制剂工艺优化、质量控制及抗痛经药理作用几个方面对其进行研究,主要内容如下:一、文献研究:对现代医学及传统中医药学在痛经方面的认识和治疗进行了综述,同时基于文献对处方进行方解并综述了各味药化学成分及药理作用研究进展。二、提取工艺路线筛选:利用HPLC 比较不同提取路线所得提取液中化学成分含量,构建小鼠痛经模型,用以评价各提取液药效,最终确定合理有效的提取路线为肉桂、小茴香先合提挥发油,药渣再与其余药味先醇提后水提,为后续制剂工艺研究确定了方向。三、制剂工艺研究:为最大程度的提取并保留有效成分,去除杂质,制备利于贮藏、携带、服用的安全、有效、质量可控的中药复方制剂,对提取、纯化、浓缩与干燥、制剂成型工艺进行优化。(1)挥发油提取工艺中,以挥发油得率为指标对肉桂、小茴香提油工艺进行考察,并利用正交试验最终优化工艺条件为:肉桂粉碎成最粗粉,小茴香不粉碎,加7倍量水浸泡0.5h,提取3h。(2)挥发油固化工艺中,考察不同固化挥发油的稳定性,确定以β-环糊精包合挥发油,进一步以包合物得率、挥发油包合率、包合物含油率为指标对包合方式进行考察,确定以饱和水溶液法进行包合,并利用正交试验优化工艺条件为:主客比1:7,包合温度50℃,包合2h。(3)整方醇提工艺中,以6-姜辣素提取率、甘草酸提取率、浸膏得率为指标,利用正交试验优选醇提工艺为加60%乙醇提取两次,第一次加9倍,第二次加7倍,每次提取1h。(4)整方醇提后的水提工艺中,建立了以UV-VIS法测定水提液中总黄酮含量测定方法,并以总黄酮得率、甘草酸提取率、浸膏得率为指标,利用均匀设计实验优化最终水提工艺为:提取两次,第一次加11倍水,第二次加9倍水,每次提取1h。(5)精制工艺研究中,以6-姜辣素保留率、甘草酸保留率、除杂率为指标比较醇沉与絮凝两种纯化方法,确定以醇沉法为纯化工艺,并进一步采用正交试验优化醇沉工艺为:60℃减压浓缩至相当于1g饮片/mL,加乙醇至醇浓度为70%,边加边搅拌,4℃静置24h。(6)浓缩干燥工艺研究中,比较不同干燥方式对热不稳定成分6-姜辣素及干浸膏粉状态的影响,确定采用喷雾干燥,并以喷干粉的得率、吸湿性、流动性为指标,利用混料设计实验对喷雾干燥中所加辅料配比进行优化,确定配比为干膏:轻质氧化镁:麦芽糊精:二氧化硅=0.5:0.305:0.145:0.05;进一步以喷干粉得率、甘草酸保留率、6-姜辣素保留率、水分为指标考察喷雾干燥工艺参数,最终确定总溶质浓度25%(药液浓缩至相当于0.7g饮片/mL,按比例加入辅料搅匀),药液初始温度60℃,进风温度130℃,空气流速35 m3/h,雾化压力40 mm,进液速度4.5 mL/min。(7)制剂成型工艺研究中,对润湿剂及固体辅料进行了考察,并利用均匀设计实验优化固体辅料配比,最终确定制剂工艺为:辅料配比为辅料:喷干粉=0.3,辅料中麦芽糊精:CMC-Na=1.5,加90%乙醇湿法制粒,50℃干燥,整粒。四、质量标准研究:以对照品、对照药材、阴性制剂为对照,研究制剂中肉桂、干姜、炙甘草、大枣薄层鉴别方法,并对制剂的水分、粒度等一般检查项进行考察,同时利用HPLC测定制剂中6-姜辣素及甘草酸含量,并建立相应HPLC指纹图谱,对10批制剂图谱进行比对,确定共有峰,并进行相似度评价。结果建立的4味药的TLC鉴别方法专属性良好;颗粒剂一般检查项符合2015版《中国药典》Ⅳ部制剂通则项下要求;建立的HPLC测定6-姜辣素及甘草酸线性关系良好,方法学考察符合相应要求;建立的HPLC指纹图谱方法学考察符合要求,10批温经止痛颗粒图谱与对照指纹图谱相似度良好。最终建立了温经止痛颗粒质量控制方法并初步拟定了质量标准草案,可用于温经止痛颗粒的整体质量控制。五、抗痛经药理作用研究:为对制剂药效进行初步评价,构建了小鼠痛经模型,比较痛经宝颗粒及温经止痛颗粒低、中、高剂量对痛经模型小鼠扭体反应及血清中PGE2、PGF2α的影响,结果温经止痛颗粒有良好的抗痛经作用,且中、高剂量组效果优于痛经宝颗粒组,表现其较好的开发前景。

关键词：温经止痛颗粒提取路线筛选工艺优化质量标准抗痛经

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