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降解温和气单胞菌AHLs乳酸菌的筛选及在三文鱼保鲜中的应用

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食品科学 2022年第14期43卷 136-142页

作者：高永悦吕欣然杜宏崔晓玲俞美辰白凤翎励建荣王明丽周小敏郭晓华渤海大学食品科学与工程学院生鲜农产品贮藏加工及安全控制技术国家地方联合工程研究中心辽宁省食品安全重点实验室辽宁锦州121013 大连工业大学海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心辽宁大连116034 蓬莱京鲁渔业有限公司山东烟台265600 浙江兴业集团有限公司浙江舟山316100 山东美佳集团有限公司山东日照276800

从传统发酵食品中筛选对温和气单胞菌(Aeromonas sobria)N-酰基高丝氨酸内酯(N-acyl-homoserine lactones,AHLs)信号分子具有降解活性的乳酸菌,对其进行菌种鉴定,探究乳酸菌产生的群体感应淬灭作用酶存在位置与类型。以三文鱼为载体,通... 详细信息

从传统发酵食品中筛选对温和气单胞菌(Aeromonas sobria)N-酰基高丝氨酸内酯(N-acyl-homoserine lactones,AHLs)信号分子具有降解活性的乳酸菌,对其进行菌种鉴定,探究乳酸菌产生的群体感应淬灭作用酶存在位置与类型。以三文鱼为载体,通过测定细菌菌落总数、持水力、硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)值以及挥发性盐基氮(total volatile basic nitrogen,TVB-N)值等指标评价乳酸菌抑制温和气单胞菌致腐能力的效果。结果表明:采用96孔板法结合牛津杯法筛选获得1株对温和气单胞菌AHLs降解活性接近100%的菌株YF-8,经鉴定为戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)。菌株YF-8淬灭酶存在于胞外上清液中,且在酸性、中性条件下均具有降解活性,初步判定为AHLs酰基转移酶。通过生长曲线确定YF-8淬灭酶粗提物在亚抑菌质量浓度2.0、4.0 mg/mL和6.0 mg/mL时不影响温和气单胞菌生长。此外,感染温和气单胞菌的三文鱼经YF-8淬灭酶粗提物处理过后,细菌菌落总数、持水力、TBA值和TVB-N值均得到良好抑制。研究为微生物源群体感应淬灭剂的筛选及水产品保鲜生物制剂提供理论基础。

关键词：戊糖片球菌温和气单胞菌群体淬灭腐败特性三文鱼

戊糖片球菌YF-8对温和气单胞菌毒力因子及生物膜的影响

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中国食品学报 2022年第8期22卷 22-31页

作者：吕欣然崔晓玲杜宏夏文敬白凤翎励建荣王明丽渤海大学食品科学与工程学院生鲜农产品贮藏加工及安全控制技术国家地方联合工程研究中心辽宁省高等学校生鲜食品产业技术研究院辽宁锦州121013 大连工业大学海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心辽宁大连116034 蓬莱京鲁渔业有限公司山东烟台265600

温和气单胞菌是水产品中常见的腐败菌,其致腐机制与群体感应密切相关,寻找淬灭群体感应的活性物质可以有效控制其致腐能力。本文选择对温和气单胞菌N-酰基高丝氨酸内酯类信号分子具有降解活性的戊糖片球菌YF-8,研究其对温和气单胞菌毒... 详细信息

温和气单胞菌是水产品中常见的腐败菌,其致腐机制与群体感应密切相关,寻找淬灭群体感应的活性物质可以有效控制其致腐能力。本文选择对温和气单胞菌N-酰基高丝氨酸内酯类信号分子具有降解活性的戊糖片球菌YF-8,研究其对温和气单胞菌毒力因子、生物膜及群体感应调控基因的影响。结果表明:亚最小抑菌浓度的YF-8乙酸乙酯粗提物(2.0,4.0 mg/mL和6.0 mg/mL)对温和气单胞菌蛋白酶、胞外多糖、嗜铁素、溶血性、泳动能力的抑制率分别为9.6%~32.72%,17.91%~58.09%,19.04%~44.35%,19.21%~51.49%,51.61%~93.55%,且呈质量浓度依赖性。此外,3个亚最小抑菌浓度的YF-8粗提物对温和气单胞菌生物膜形成抑制率和清除率分别为31.28%~66.64%和6.7%~29.88%,结构上可使其厚度变薄,菌体稀疏、松散。6.0 mg/mL的YF-8粗提物可使温和气单胞菌群体感应调控基因LuxI和LuxR的相对表达量分别下调69.48%和80.76%。本研究为控制由温和气单胞菌导致的水产品腐败及病害提供了新的思路。

关键词：温和气单胞菌戊糖片球菌群体感应淬灭毒力因子生物膜

40种中草药对美洲鲥源温和气单胞菌的体外抑菌作用研究

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饲料工业 2023年第12期44卷 67-73页

作者：高晓华高玮张明辉上海市水产研究所上海市水产技术推广站上海200433

为筛选出对美洲鲥(Alosa sapidissima)源温和气单胞菌(Aeromonas sobria)体外抑菌效果较好的中草药,采用牛津杯打孔法测定了温和气单胞菌对乌梅(Fructus mume)、苏木(Caesalpinia sap⁃pan)、五倍子(Rhus chinensis)等40种中草药的敏感性... 详细信息

为筛选出对美洲鲥(Alosa sapidissima)源温和气单胞菌(Aeromonas sobria)体外抑菌效果较好的中草药,采用牛津杯打孔法测定了温和气单胞菌对乌梅(Fructus mume)、苏木(Caesalpinia sap⁃pan)、五倍子(Rhus chinensis)等40种中草药的敏感性,并进一步通过微量二倍稀释法以及涂布平板法测定了具有抑菌作用的中草药对温和气单胞菌的最小抑菌质量浓度(Minimum Inhibitory Concen⁃tration,MIC)和最小杀菌质量浓度(Minimum Bactericidal Concentration,MBC)。结果表明:温和气单胞菌对苏木、乌梅、黄连、石榴皮(Punica granatum)、五倍子和地榆(Sanguisorba officinalis)6种中草药为高度敏感,其抑菌圈直径为20.00~28.00 mm,其中苏木的抑菌作用最强,抑菌圈直径为(27.12±0.78)mm,对赤芍(Radix paeoniae rubra)、连翘(Forsythia suspensa)、白头翁(Pulsatilla chinensis)等23种中草药为敏感,其抑菌圈直径为10.00~18.00 mm;对其余11种中草药不敏感。苏木对温和气单胞菌的体外抑菌、杀菌作用最强,其MIC和MBC分别为7.81、15.63 mg/mL;其次为乌梅、黄连、石榴皮和五倍子,其MIC为15.63~31.25 mg/mL,MBC为31.25~62.5 mg/mL;其余中草药对温和气单胞菌的抑杀效果较弱,其MIC和MBC均分别高于31.25 mg/mL和62.5 mg/mL。综上可知,苏木对美洲鲥源温和气单胞菌具有较强的抑菌、杀菌效果。

关键词：中草药温和气单胞菌美洲鲥最小抑菌质量浓度最小杀菌质量浓度抑菌效果

群体感应AHLs对大菱鲆体内温和气单胞菌致腐能力的影响

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中国食品学报 2019年第1期19卷 125-131页

作者：李婷婷马艳崔方超励建荣大连民族大学生命科学学院辽宁大连116600 渤海大学食品科学与工程学院生鲜农产品贮藏加工及安全控制技术国家地方联合工程研究中心辽宁锦州121013

将温和气单胞菌(AS7)及添加不同种类的AHLs信号分子标准品(C4-HSL、C6-HSL和C8-HSL)的菌液接种于大菱鲆无菌鱼块中,通过测定其在4℃冷藏过程中新鲜度指标(感官评定、菌落总数、pH、K值、持水性)的变化,研究群体感应对温和气单胞菌体内... 详细信息

将温和气单胞菌(AS7)及添加不同种类的AHLs信号分子标准品(C4-HSL、C6-HSL和C8-HSL)的菌液接种于大菱鲆无菌鱼块中,通过测定其在4℃冷藏过程中新鲜度指标(感官评定、菌落总数、pH、K值、持水性)的变化,研究群体感应对温和气单胞菌体内致腐能力的调控作用。结果表明,在贮藏期间添加C4-HSL和C8-HSL信号分子标准品,能够明显促进温和气单胞菌的生长,且对鱼块pH、K值、持水性及其品质变化影响较明显;而添加C6-HSL对其新鲜度指标均没有显著影响,说明群体感应可以通过AHLs来调控温和气单胞菌致腐能力。

关键词：大菱鲆温和气单胞菌 AHLs 致腐能力

急性白血病患者合并温和气单胞菌感染的临床特征及预后

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中国医学科学院学报 2015年第6期37卷 711-714页

作者：张路李剑周道斌朱铁楠中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院血液科北京100730

目的描述和分析急性白血病患者合并温和气单胞菌感染的临床特点及转归。方法报道北京协和医院1994至2014年收治的2例急性白血病合并温和气单胞菌感染的患者,并通过Pub Med、Medline及中国医院知识仓库检索同期的英文和中文文献,筛选资... 详细信息

目的描述和分析急性白血病患者合并温和气单胞菌感染的临床特点及转归。方法报道北京协和医院1994至2014年收治的2例急性白血病合并温和气单胞菌感染的患者,并通过Pub Med、Medline及中国医院知识仓库检索同期的英文和中文文献,筛选资料相对完整的病例进行汇总分析。结果共纳入15例急性白血病患者（急性髓系白血病10例、急性淋巴细胞白血病5例）,男∶女=12∶3,中位年龄49.5岁（27~80岁）。温和气单胞菌感染多发生于粒细胞缺乏期,以下肢感染为最常见表现（66.7%）。即使早期给予经验性抗生素治疗,仍具有较高的死亡率（80%）。经卡方检验分析,死亡的患者有更高的下肢感染率（P〈0.01）和更高的感染性休克率（P=0.02）。结论急性白血病患者合并温和气单胞菌感染虽然罕见但致死率高,应给予充分的临床重视。

关键词：温和气单胞菌急性白血病下肢感染感染性休克

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温和气单胞菌毒素的生物学活性研究

微生物学通报 1996年第1期23卷 22-26页

作者：胡圣尧马子行倪语星上海职工医学院上海第二医科大学瑞金医院

从腹泻病人粪便中分离到的４号温和气单胞菌（Ａｓ－４）产生溶血素（Ｈ）、肠毒素（Ｅ）和细胞毒素（Ｃ，简称ＨＥＣ毒素。粗制的ＨＥＣ毒素在家兔肠拌试验和乳鼠灌胃试验中使家兔和乳鼠小肠积液，引起Ｖｅｒｏ细胞和中国仓鼠（ＣＨＯ... 详细信息

从腹泻病人粪便中分离到的４号温和气单胞菌（Ａｓ－４）产生溶血素（Ｈ）、肠毒素（Ｅ）和细胞毒素（Ｃ，简称ＨＥＣ毒素。粗制的ＨＥＣ毒素在家兔肠拌试验和乳鼠灌胃试验中使家兔和乳鼠小肠积液，引起Ｖｅｒｏ细胞和中国仓鼠（ＣＨＯ）细胞的细胞毒反应，可使不同动物种类的红细胞溶血，尾静脉和腹腔注射导致小白鼠死亡。上述生物学活性均可被抗－ＨＥＣ毒素血清中和而失效。纯化毒素经５６℃１０ｍｉｎ处理，其肠毒性、细胞毒性及溶血毒性也将失去。

关键词：温和气单胞菌病原菌毒素生物活性致病性

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温和气单胞菌单克隆抗体的制备及特性分析

河南农业科学 2006年第2期35卷 108-110页

作者：黄钧梁明龙朱芸广西大学动物科技学院广西南宁530004

利用细胞融合技术建立了5株分泌抗温和气单胞菌CR79-1-1株单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株,特异性鉴定获得2株与参考菌株中的温和气单胞菌发生反应,并且与嗜水气单胞菌以及鳗弧菌、爱德华氏菌、克鲁氏耶尔森菌、大肠杆菌、荧光假单胞菌... 详细信息

利用细胞融合技术建立了5株分泌抗温和气单胞菌CR79-1-1株单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株,特异性鉴定获得2株与参考菌株中的温和气单胞菌发生反应,并且与嗜水气单胞菌以及鳗弧菌、爱德华氏菌、克鲁氏耶尔森菌、大肠杆菌、荧光假单胞菌均不反应的杂交瘤细胞,命名为2G3、1A4;快速酶联免疫分析法测得2G3、1A4的亲和常数为5×108L/mol、1.725×108L/mol;应用方阵配对试验证实,2株单抗针对特异性抗原上不同表位。

关键词：温和气单胞菌单克隆抗体表位酶联免疫吸附分析

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温和气单胞菌CRISPR位点的检测与分析

中国兽医学报 2017年第5期37卷 839-843页

作者：焦雪张培军冷东泽王建超巴翠玉李月红吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130000 吉林省卫生监测检验中心吉林长春130000

为检测3株温和气单胞菌中是否存在CRISPR,采用PCR方法扩增3株菌的CRISPR序列,并利用生物信息学方法分析和预测了重复序列(direct repeat,DR)的同源性及二级结构。结果显示,3株温和气单胞菌中可信CRISPR个数为1,总长度为2 805bp,并含有4... 详细信息

为检测3株温和气单胞菌中是否存在CRISPR,采用PCR方法扩增3株菌的CRISPR序列,并利用生物信息学方法分析和预测了重复序列(direct repeat,DR)的同源性及二级结构。结果显示,3株温和气单胞菌中可信CRISPR个数为1,总长度为2 805bp,并含有42条间隔序列;可疑CRISPR个数为3,总长度为384bp。对可信CRISPR的DR二级结构预测发现,可形成发夹环,且头环由15个碱基构成,茎环含有5个碱基。在CRISPR BLAST中对测序结果进行同源性比对时发现,除多数同属或同种外,DR与嗜热螺旋体DSM 6192菌株、暗网菌属等远缘菌种均具有较高的同源性,且置信值为1;这说明温和气单胞菌株的CRISPR序列存在水平基因转移,并可能存在其他的进化进程。

关键词： CRISPR 温和气单胞菌二级结构预测水平基因转移

温和气单胞菌及益生菌对鲤鱼肠道菌群多样性影响的研究

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黑龙江畜牧兽医 2017年第11期 171-174页

作者：李晨阳王利王海娟西南民族大学青藏高原研究院成都610041 西南民族大学生命科学与技术学院成都610041

为了分析温和气单胞菌及益生菌对鲤鱼肠道菌群多样性的影响,试验将鲤鱼分为对照组(A组)、益生菌组(B组)、温和气单胞菌组(C组)、益生菌+温和气单胞菌组(D组),采用RAPD和ERIC方法对鲤鱼肠道菌群多样性进行了研究。结果表明:两种技术的DN... 详细信息

为了分析温和气单胞菌及益生菌对鲤鱼肠道菌群多样性的影响,试验将鲤鱼分为对照组(A组)、益生菌组(B组)、温和气单胞菌组(C组)、益生菌+温和气单胞菌组(D组),采用RAPD和ERIC方法对鲤鱼肠道菌群多样性进行了研究。结果表明:两种技术的DNA图谱中都出现了17种谱带,RAPD扩增的每组条带数量少于ERIC扩增得到的,且组间条带差异性明显;C组的肠道微生物多样性低于A组,D组的肠道微生物多样性高于C组,B组的肠道微生物多样性高于D组。

关键词：肠道菌群多样性温和气单胞菌益生菌鲤鱼 RAPD ERIC