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清肠栓对大鼠溃疡性结肠炎caspase-3影响的研究

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中成药 2008年第3期30卷 340-343页

作者：谢建群张涛郑昱马贵同陆雄薛筠施斌徐海珍袁建业上海中医药大学附属龙华医院上海201203 浙江省中西医结合医院浙江杭州310003

目的:观察大鼠溃疡性结肠炎结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡及其凋亡调控关键酶caspase-3的表达以及清肠栓对相关表达的影响,探讨清肠栓(马齿苋、青黛、三七、五倍子)治疗溃疡病性结肠炎的作用机制。方法:64只SD大鼠随机分为4组,分别为正常... 详细信息

目的:观察大鼠溃疡性结肠炎结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡及其凋亡调控关键酶caspase-3的表达以及清肠栓对相关表达的影响,探讨清肠栓(马齿苋、青黛、三七、五倍子)治疗溃疡病性结肠炎的作用机制。方法:64只SD大鼠随机分为4组,分别为正常组、模型组、SASP组、清肠栓组,每组各16只。除正常组外,其余大鼠用5%2,4,6-三硝基苯磺酸100 mg/kg灌肠建立大鼠溃疡性结肠炎模型后,分别予0.9%生理盐水、SASP、清肠栓处理7 d后,处死大鼠。运用电镜,免疫组化染色、RT-PCR、Western-blot等技术,分别检测溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡及固有层淋巴细胞caspase-3的表达。结果:清肠栓组结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡呈上升趋势;其结肠黏膜固有层淋巴细胞上caspase-3的表达率上升,与模型蛆相比(P清肠栓可能增加结肠黏膜淋巴细胞凋亡效应酶caspase-3表达,诱导结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡,降低淋巴细胞毒作用,缓解大鼠溃疡性结肠炎效应。

关键词：清肠栓溃疡性结肠炎结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸酶一3

中药清肠栓对溃疡性结肠炎大鼠结肠通透性的影响

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中国中西医结合杂志 2010年第10期30卷 1087-1090页

作者：卢璐谢建群上海中医药大学附属龙华医院上海200032

目的探讨复方中药清肠栓对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠黏膜通透性的影响及其修复结肠溃疡的作用机制。方法采用异硫氰酸荧光素-右旋糖4000(FITC-dextran4000,FD-4)作为标记物,在体实验与离体实验相结合测定大鼠... 详细信息

目的探讨复方中药清肠栓对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠黏膜通透性的影响及其修复结肠溃疡的作用机制。方法采用异硫氰酸荧光素-右旋糖4000(FITC-dextran4000,FD-4)作为标记物,在体实验与离体实验相结合测定大鼠结肠通透性,观察中药清肠栓对UC大鼠结肠通透性的影响。结果 (1)在体动物实验:发现模型组大鼠结肠对FD-4的通透性较正常组显著增加,在30min内增加为对照组的6倍。清肠栓高剂量及中剂量组能不同程度的抑制UC大鼠结肠通透性的升高(P肠黏膜通透性120min内,模型组FD-4的Papp为(5.001±1.316)×10-8cm/s,Papp增加为正常组的2.5倍,清肠栓高剂量及中剂量组能有效降低升结肠黏膜对FD-4的Papp(P清肠栓能有效抑制UC大鼠结肠通透性的升高,改善肠黏膜屏障功能,促进溃疡愈合。

关键词：清肠栓溃疡性结肠炎肠道通透性

清肠栓对葡聚糖硫酸钠诱导溃疡性结肠炎大鼠Toll样受体表达的影响

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中国老年学杂志 2016年第5期36卷 1066-1067页

作者：高春利兰州市第一人民医院消化科甘肃兰州730050

目的探讨清肠栓对葡聚糖硫酸钠诱导溃疡性结肠炎大鼠Toll样受体(TLRs)表达的影响。方法选取大鼠60只,根据随机数字表法分为对照组、模型组、清肠栓组,每组20只,然后对大鼠进行模型建造,造模时对照组给予蒸馏水,其余组均给予5%的葡聚糖... 详细信息

目的探讨清肠栓对葡聚糖硫酸钠诱导溃疡性结肠炎大鼠Toll样受体(TLRs)表达的影响。方法选取大鼠60只,根据随机数字表法分为对照组、模型组、清肠栓组,每组20只,然后对大鼠进行模型建造,造模时对照组给予蒸馏水,其余组均给予5%的葡聚糖硫酸钠。模型建立后清肠栓组给予清肠栓灌肠,比较大鼠疾病活动指数(DAI)、结肠指数以及TLR1、TLR2、TLR3以及TLR4表达。结果模型组DAI评分显著高于对照组,清肠栓组显著低于模型组(P清肠栓组结肠指数显著低于模型组(P0.05);模型组TLR2和TLR4表达显著高于对照组,清肠栓组TLR2和TLR4表达显著低于模型组(P0.05)。结论清肠栓对葡聚糖硫酸钠诱导溃疡性结肠炎疗效显著,能显著降低大鼠TLR2和TLR4表达水平。

关键词：清肠栓溃疡性结肠炎 Toll样受体

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清肠栓治疗溃疡性结肠炎的临床及实验研究

上海中医药杂志 1991年第9期25卷 1-5页

作者：马贵同赵鸿程焕章李千红徐珊珊谢建群瞿文龙詹剑烈罗靖章崇仪上海中医学院附属龙华医院内科 200032 上海中医学院附属龙华医院内窥镜室 200032 上海中医学院附属龙华医院制剂室 200032

本文以中药清肠栓塞肛治疗溃疡性结肠炎40例,有效率达90%。同时根据免疫学说成功地建立了该病的动物模型,并在模型建立同时及模型建立后分别予清肠栓治疗,结果证实该药确有阻抑溃疡形成及促进溃疡愈合及炎症吸收作用。

关键词：结肠炎溃疡性清肠栓

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清肠栓质量标准研究

中成药 2016年第8期38卷 1749-1753页

作者：韩柱崔波陆菁安叡许丽雯王新宏上海中医药大学上海201203 上海中医药大学附属龙华医院上海200032

目的建立清肠栓（三七、青黛、五倍子等）的质量标准。方法 TLC法对三七、青黛、五倍子和马齿苋进行定性鉴别,HPLC法定量测定三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1含有量。结果 TLC斑点清晰,分离度好。三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂... 详细信息

目的建立清肠栓（三七、青黛、五倍子等）的质量标准。方法 TLC法对三七、青黛、五倍子和马齿苋进行定性鉴别,HPLC法定量测定三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1含有量。结果 TLC斑点清晰,分离度好。三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1分别在1.007 5~8.06μg（r=0.999 9）、0.99~7.92μg（r=0.999 1）、1.012 5~8.1μg（r=0.999 1）范围内线性关系良好,平均回收率均大于95%。结论该方法可靠准确,专属性好,可用于清肠栓的质量控制。

关键词：清肠栓三七青黛五倍子马齿苋三七皂苷R1 人参皂苷Rg1 人参皂苷Rb1

中药清肠栓对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜紧密连接蛋白ZO-1、occludin的影响

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世界华人消化杂志 2011年第22期19卷 2322-2327页

作者：卢璐谢建群郭春荣上海中医药大学附属龙华医院上海市200032 上海中医药大学上海市201203

目的:探讨复方中药清肠栓对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的UC大鼠结肠黏膜上皮紧密连接相关蛋白-1(ZO-1)、闭锁蛋白(occludin)的修复作用.方法:清洁级♂SD大鼠36只,随机分为正常组、模型组、SASP组、清肠栓高、中、低剂量组,每组6只.选用TNB... 详细信息

目的:探讨复方中药清肠栓对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的UC大鼠结肠黏膜上皮紧密连接相关蛋白-1(ZO-1)、闭锁蛋白(occludin)的修复作用.方法:清洁级♂SD大鼠36只,随机分为正常组、模型组、SASP组、清肠栓高、中、低剂量组,每组6只.选用TNBS诱导的UC大鼠模型.采用免疫荧光的方法观察各组大鼠结肠黏膜上皮ZO-1、occludin和F-actin的表达,并运用图像分析软件进行平均光密度测定,考察了中药清肠栓对UC大鼠结肠黏膜上皮屏障的修复作用.结果:UC发病会对结肠紧密连接和细胞骨架系统造成严重的损害,模型组大鼠结肠黏膜上皮ZO-1、occludin几乎完全被破坏,不规则的分散在细胞外围,荧光染色暗淡.图像分析测其平均光密度较正常组明显降低(1.802±1.304vs3.145±0.110;0.568±0.063vs1.538±0.220,均P清肠栓能不同程度减轻UC对紧密连接的破坏,使上述两种蛋白表达升高(P肠道屏障功能,抑制结肠通透性的增加.结论:清肠栓能有效地调节肠黏膜屏障功能,有效抑制UC大鼠结肠通透性的升高,改善肠黏膜屏障功能,促进溃疡愈合.

关键词：清肠栓溃疡性结肠炎紧密连接相关蛋白-1 闭锁蛋白

清肠栓对UC模型大鼠结肠黏膜固有层淋巴细胞Fas、FasL蛋白表达的影响

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江苏中医药 2007年第8期39卷 74-76页

作者：张涛谢建群（指导）上海中医药大学上海201203 不详

目的:观察溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡及其凋亡调控蛋白Fas、FasL的表达以及清肠栓对相关表达的影响,探讨清肠栓治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法:用5%2,4,6-三硝基苯磺酸100mg/kg灌肠建立大鼠UC模型,运用电... 详细信息

目的:观察溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡及其凋亡调控蛋白Fas、FasL的表达以及清肠栓对相关表达的影响,探讨清肠栓治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法:用5%2,4,6-三硝基苯磺酸100mg/kg灌肠建立大鼠UC模型,运用电镜、原位末端标记细胞凋亡检测法(TUNEL法)和Fas、FasL蛋白免疫组化染色法,分别检测正常大鼠、UC模型大鼠以及经柳氮磺胺吡啶或清肠栓治疗后的大鼠结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡及固有层淋巴细胞Fas、FasL蛋白的表达情况。结果:与正常组相比,模型组大鼠结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡减慢,结肠黏膜固有层淋巴细胞上FasL的表达率增加,Fas的表达率下降。经清肠栓治疗后UC模型大鼠淋巴细胞凋亡增加,结肠黏膜固有层淋巴细胞上FasL的表达率下降,Fas的表达率增加。结论:溃疡性结肠炎的发病可能是由于结肠黏膜固有层FasL高表达与Fas表达不同步,降低了Fas/FasL介导的淋巴细胞凋亡率,导致淋巴细胞凋亡减慢。清肠栓可能因为诱导结肠黏膜固有层FasL与Fas同步表达,诱导结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡,从而达到缓解溃疡性结肠炎的目的。

关键词：清肠栓溃疡性结肠炎结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡 Fas FasL SD大鼠

清肠栓通过调控VEGF165/VEGFR1/STAT3信号通路相关蛋白表达改善结肠炎的作用机制

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清肠栓通过调控VEGF165/VEGFR1/STAT3信号通路相关蛋白表达改善结...

作者：李巧东上海中医药大学

学位级别：硕士

目的:1.研究VEGF165/VEGF165R1/STAT3通路调控VEGF165和VEGF165b在UC发病中的作用;2.研究清肠栓调控VEGF165/VEGFR1/STAT3通路抑制病理性血管生成治疗UC的作用机制。方法:将20只SPF级的雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为4组:空白对照组,模型组,清肠栓组和美沙拉嗪组。空白对照组自由饮用蒸馏水,其余各组自由连续饮用5%(w/v)的DSS水溶液7天以制备UC模型,造模7天的同时,除空白组及模型组用生理盐水灌肠外,其余组用不同药物灌肠,给药剂量均为0.2ml/100g。实验期间观察并记录大鼠的一般情况,包括粪便、体重、便血情况、进食和饮水、毛发光泽等的变化,评估疾病活动指数(disease activity index,DAI)等。用免疫组化、免疫荧光检测血小板-内皮细胞粘附分子(Platelet endothelial cell adhesion molecule-1,PECAM-1/CD31)在结肠组织的表达。用RT-PCR和Western-Blot检测相关基因和蛋白的表达水平。检测重组人VEGF165蛋白干预HUVEC细胞的成管和流式实验,检测LPS干预后细胞中血管内皮生长因子相关基因和蛋白的表达情况。结果:***成功诱导大鼠UC模型,UC大鼠在饮用DSS第2天开始出现大便稀软,进食减少,并在第3天逐渐出现脓血便。2.清肠栓干预可以有效改善UC大鼠结肠组织水肿,血管充血等病理变化,抑制炎性细胞浸润;模型组大鼠结肠黏膜有大量炎性细胞浸润,腺体消失,隐窝破坏,黏膜下充血水肿,溃疡形成。与正常组相比,P肠组织中VEGF165、VEGFR1、STAT3的含量明显升高,与正常组相比,P清肠栓组及美沙拉嗪组结肠组织中的VEGF165、VEGFR1、STAT3的含量明显降低,与模型组相比,P清肠栓可以有效抑制UC大鼠结肠组织中的血管生成,免疫组化和免疫荧光标记可见模型组有大量棕色颗粒和绿色荧光点堆积,用药治疗后,清肠栓组和美沙拉嗪结肠组织的血管标记明显减少。与正常组相比,P清肠栓干预可以有效减少病理性血管。倒置显微镜可见模型组HUVEC细胞成管数量明显增多,细胞流式实验检测到模型组CD31高表达。与模型组相比,清肠栓低、中、高剂量组及美沙拉嗪组对HUVEC细胞成管均有抑制作用,但清肠栓中、高剂量组HUVEC细胞的CD31表达量明显低于低剂量组和美沙拉嗪组。PCR和WB实验证明清肠栓可以降低模型细胞中VEGF165、VEGFR1、STAT3的含量,证明清肠栓具有良好的调节血管生成相关蛋白的作用。结论:***165和VEGF165b表达的失衡是UC病理性血管增加的主要原因。2.清肠栓可以有效改善UC大鼠结肠病理性血管生成,通过调控VEGF165和VEGF165b表达来抑制VEGF165/VEGFR1/STAT3通路相关蛋白,减少病理性血管生成,进而促进UC黏膜愈合。

关键词：清肠栓溃疡性结肠炎 HUVEC细胞病理性血管 VEGF165-VEGFR1-STAT3通路黏膜损伤清肠栓含药血清

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清肠栓的药学及抗炎机制研究

清肠栓的药学及抗炎机制研究

作者：周桂上海中医药大学

学位级别：硕士

目的:建立机器生产清肠栓工艺,对其质量进行研究,并对其治疗溃疡性结肠炎的疗效及机制进行研究。方法:对清肠栓机器生产工艺进行摸索,并进行中试工艺研究;使用TLC、HPLC和GC等方法,对清肠栓进行质量研究,对其微生物方法进行验证;体外实... 详细信息

目的:建立机器生产清肠栓工艺,对其质量进行研究,并对其治疗溃疡性结肠炎的疗效及机制进行研究。方法:对清肠栓机器生产工艺进行摸索,并进行中试工艺研究;使用TLC、HPLC和GC等方法,对清肠栓进行质量研究,对其微生物方法进行验证;体外实验方面,建立IL-17A和TNF-α诱导的HT-29炎症细胞模型,采用CCK8、ELISA及Western Blot等方法,评估清肠栓及其单体化合物的疗效;体内实验方面,建立DSS诱导的BALB/C小鼠溃疡结肠炎模型,从DAI、小鼠结肠和宏观评分、病理评分等方面,评估不同剂量的清肠栓的疗效,并使用q-PCR、Western Blot、IHC、ELISA等方法,探讨清肠栓及其单体成分的作用机制。结果:工艺研究结果表明:机器生产的工艺不同于手工生产,其工艺参数需要进行调整。所建立的机器生产工艺生产出来的产品符合要求,其没食子酸含量求也高于手工生产产品,大大提高了生产效率,解决了临床供应不足的问题。质量研究结果表明:清肠栓中主要成分是没食子酸、靛蓝、靛玉红、三七皂苷R1,人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1,机器生产的清肠栓质量可控。体外试验结果表明:对于IL-17A和TNF-α联合诱导的HT-29炎症细胞,清肠栓及其化合物可以抑制IL-17A通路下游多个信号通路,从而降低各炎性因子以及趋化因子的表达,并且效果优于5-氨基水杨酸。体内实验结果表明:清肠栓、木犀草素以及槲皮素经过7天给药后,可以显著缓解DSS诱导的小鼠结肠炎,显著降低DAI(P肠宏观评分(P肠病理评分(P清肠栓、木犀草素以及槲皮素可以显著下调血清与结肠组织中IL-17A、IFN-γ、TNF-α、以及IL-1β的表达(P肠组织中IL-17A、ACT1、以及HSP90 m RNA的表达(P肠组织中IL-17A的表达。结论:机器生产清肠栓的工艺稳定、质量可控;所获的成品及单体成分没食子酸、木犀草素、槲皮素可以改善溃疡性结肠炎症状,其可能的作用机制是通过IL-17A通路,调控炎性因子表达。

关键词：清肠栓溃疡性结肠炎机器生产工艺 IL-17A通路