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清心解瘀颗粒抗动脉粥样硬化的药效学及调控机制

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南方医科大学学报 2024年第8期44卷 1518-1528页

作者：张珊苑蔡巧燕祁江晗殷恺馨何晨晨高铸烨张铃褚剑锋福建中医药大学中西医结合学院//中西医结合研究院福建福州350122 福建中医药大学陈可冀学术思想传承工作室福建福州350122 福建中医药大学康复医学院福建福州350122 福建省中西医结合老年性疾病重点实验室福建福州350122 中国中医科学院西苑医院北京100091

目的基于网络药理学探讨清心解瘀颗粒(QXJYG)抗动脉粥样硬化(AS)的药效学及其调控机制。方法通过网络药理学挖掘QXJYG抗AS的关键靶点和信号通路。采用高脂喂养合并腹腔注射维生素D3的方式构建AS大鼠模型,将造模成功后的30只大鼠随机分... 详细信息

目的基于网络药理学探讨清心解瘀颗粒(QXJYG)抗动脉粥样硬化(AS)的药效学及其调控机制。方法通过网络药理学挖掘QXJYG抗AS的关键靶点和信号通路。采用高脂喂养合并腹腔注射维生素D3的方式构建AS大鼠模型,将造模成功后的30只大鼠随机分为模型组、阿托伐他汀组(13.15 mg·kg^(-1)·d^(-1))、低剂量组(0.99 g·kg^(-1)·d^(-1))、中剂量组(1.98 g·kg^(-1)·d^(-1))、高剂量组(3.96 g·kg^(-1)·d^(-1)),每组6只;另外将6只SD大鼠给予正常饮食作为对照组。实验动物干预8周后,通过小动物超声检测大鼠腹主动脉血管内径、血管壁厚度、脉冲波传播速度、搏动指数,通过HE染色检测大鼠腹主动脉病理形态,通过全自动生化仪检测每组大鼠的血脂水平,通过ELISA检测试剂盒测定血清中AngⅡ、ET-1、TXA2、PGI2、ox-LDL含量。采用免疫组化法检测大鼠腹主动脉中LOX-1、PPARγ、RXRα、p-P65、VCAM-1、ICAM-1蛋白的表达。结果与正常组相比,模型组的腹主动脉血管壁厚度、脉冲波传播速度、搏动指数升高(P<0.05),血管内径减小(P<0.05),且平滑肌细胞增生、排列紊乱,TC、LDL-C、AngⅡ、ET-1、TXA2含量显著升高(P<0.05),HDL-C、PGI2含量显著下降(P<0.05)。与模型组相比,QXJYG和阿托伐他汀干预后,显著降低腹主动脉血管壁厚度、脉冲波传播速度、搏动指数(P<0.05),增大血管内径(P<0.05),减轻平滑肌细胞排列紊乱情况,显著降低TC、LDL-C,AngⅡ、ET-1、TXA2(P<0.05),显著升高HDL-C、PGI2含量(P<0.05),通过网络药理学预测发现QXJYG可能通过调控脂质,PPAR和NF-κB等信号通路发挥抗AS的作用。与正常组相比,模型组的ox-LDL含量、LOX-1、p-P65、VCAM-1、ICAM-1蛋白表达水平显著升高(P<0.05),PPARγ、RXRα蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与模型组相比,QXJYG干预后,ox-LDL含量、LOX-1、p-P65、VCAM-1、ICAM-1蛋白表达水平显著降低(P<0.05),PPARγ、RXRα表达显著升高(P<0.05)。结论QXJYG显著改善AS大鼠脂代谢紊乱,扩大腹主动脉血管内径,减小腹主动脉血管壁厚度,抑制腹主动脉血管病理损伤,调节血管收缩和舒张功能。QXJYG发挥抗AS的作用机制可能是抑制血脂中ox-LDL水平,降低LOX-1的表达,激活PPARγ、RXRα蛋白,抑制P65的磷酸化,从而降低VCAM-1、ICAM-1蛋白表达。

关键词：清心解瘀颗粒动脉粥样硬化网络药理学 PPARγ/RXRα信号通路 NF-κB信号通路

清心解瘀颗粒对大鼠动-静脉旁路血栓形成及ADP诱导血小板聚集作用的影响

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西安交通大学学报(医学版) 2024年

作者：何晨晨祁江晗韦琛谊蔡巧燕高铸烨张铃褚剑锋福建中医药大学中西医结合学院中西医结合研究院福建省中西医结合老年性疾病重点实验室福建中医药大学陈可冀学术思想传承工作室中国中医科学院西苑医院

目的观察清心解瘀颗粒对大鼠动-静脉旁路血栓形成及ADP诱导血小板聚集作用的影响。方法取36只雄性SD大鼠，随机分为6组（n=6），按分组分别预防性灌胃给药，即正常对照组与模型组给予等体积蒸馏水，氯吡格雷阳性对照组[6.74 mg/（kg·... 详细信息

目的观察清心解瘀颗粒对大鼠动-静脉旁路血栓形成及ADP诱导血小板聚集作用的影响。方法取36只雄性SD大鼠，随机分为6组（n=6），按分组分别预防性灌胃给药，即正常对照组与模型组给予等体积蒸馏水，氯吡格雷阳性对照组[6.74 mg/（kg·d）]及清心解瘀颗粒低、中、高组[0.99、1.98、3.96 g/(kg·d)]，连续14 d，1次/d。除正常对照组外，其余大鼠均采用聚乙烯管作动-静脉搭桥建立大鼠动-静脉旁路血栓模型后，末次给药1 h后，麻醉大鼠，取出血栓，采用万分之一精密电子分析天平称量各组大鼠血栓湿重的质量；ELISA试剂盒检测各组血浆中血栓素B2（thromboxane B2，TXB2）和6-酮-前列腺素F1α（6-keto-prostaglandin F1α，6-keto-PGF1α）的含量；酶标仪比浊法测定各组二磷酸腺苷（adenosine diphosphate，ADP）诱导的血小板聚集率。结果与正常对照组比较，模型组的动-静脉旁路血栓质量显著升高，血浆中TXB2的含量显著升高，6-keto-PGF1α的含量则显著降低，ADP诱导后的血小板聚集率显著升高（P清心解瘀颗粒各剂量组的动-静脉旁路血栓质量均显著降低（P清心解瘀颗粒各剂量组间呈现剂量依赖性（P清心解瘀颗粒具有预防大鼠动-静脉旁路血栓形成及抑制ADP诱导血小板聚集的作用。

关键词：清心解瘀颗粒动-静脉旁路血栓 ADP 血小板聚集

清心解瘀颗粒调控线粒体自噬对C57B/L6小鼠心肌梗死后心室重构的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：陈一帆褚剑锋姜众会高铸烨中国中医科学院西苑医院福建中医药大学中西医结合研究院

目的：探讨清心解瘀颗粒对于心肌梗死后心室重构小鼠的影响及对线粒体自噬的调控作用。方法：60只雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、清心解瘀低剂量组(1.3 g·kg-1)、清心解瘀中剂量组(2.6 g·kg-1)、清心解瘀高剂量组(5.2 g·... 详细信息

目的：探讨清心解瘀颗粒对于心肌梗死后心室重构小鼠的影响及对线粒体自噬的调控作用。方法：60只雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、清心解瘀低剂量组(1.3 g·kg-1)、清心解瘀中剂量组(2.6 g·kg-1)、清心解瘀高剂量组(5.2 g·kg-1)、沙库巴曲缬沙坦钠组(0.03 g·kg-1)，每组10只，除假手术组外，其余各组均使用冠状动脉左前降支结扎方法建立心肌梗死模型。超声检测小鼠左室舒张末期和收缩末期内径（LVIDd， LVIDs）、左室舒张期和收缩期后壁厚度（LVPWd， LVPWs）、左室舒张末期和收缩末期容积（LV Vold， LV Vols）、左室射血分数（LVEF）、左室短轴缩短率（LVFS）；计算小鼠心脏质量指数、心胫比；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测小鼠血清脑纳肽（BNP）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、血管紧张素2（Ang Ⅱ）、乳酸脱氢酶（LDH）；苏木素-伊红（HE）、马松（Masson）染色观察小鼠心肌组织形态；免疫组化检测小鼠心肌组织血管生成蛋白碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、血管内皮生长因子（VEGF）表达；透射电镜观察小鼠心肌组织线粒体形态；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组小鼠心肌组织磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（p-AMPK）、磷酸化雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）蛋白表达。结果：与假手术组比较，模型组小鼠LV Vold、LV Vols、LVIDd、LVIDs、心脏质量指数、心胫比、BNP、LDH、p-mTOR蛋白表达增加（P＜0.05），LVPWd、LVPWs、LVEF、LVFS、p-AMPK蛋白表达减少（P＜0.05），小鼠心肌细胞有大量炎性细胞浸润并伴有大量胶原沉积，bFGF、VEGF蛋白表达减少，心肌组织线粒体肿胀，嵴碎裂；与模型组比较，沙库巴曲缬沙坦钠组及清心解瘀颗粒中剂量组的LVIDs、LV Vold、LV Vols、BNP、CK-MB、LDH、p-mTOR蛋白表达减少（P＜0.05），LVEF、LVFS、p-AMPK表达增加（P＜0.05），各给药组心肌组织炎性细胞浸润及胶原沉积均得到改善，bFGF、VEGF蛋白表达增多，各组心肌组织线粒体肿胀减轻，出现自噬小体和溶酶体。结论：清心解瘀颗粒通过上调心肌梗死后心室重构小鼠心肌组织p-AMPK表达，下调p-mTOR表达，来调节心肌组织线粒体自噬，抑制心室重构，改善心功能。

关键词：清心解瘀颗粒心肌梗死心室重构心力衰竭线粒体自噬

基于UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS和分子网络技术快速鉴定清心解瘀颗粒化学成分

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中华中医药杂志 2023年第12期38卷 5709-5722页

作者：权建野杨琳邓欣祺王春国孔艳陈鹏彭娟王雪杜天依陈畅王化龙高铸烨中国中医科学院医学实验中心北京100700 国家中医心血管病临床医学研究中心中国中医科学院西苑医院北京100091 中国中医科学院中药研究所北京100700 北京中医药大学北京100029 江阴天江药业有限公司江苏江阴214400

目的:建立高分辨质谱(HR-MS)和分子网络整合策略的中药复杂化学成分快速分析方法,对清心解瘀颗粒中化学成分进行系统分析。方法:采用超高效液相色谱-静电场轨道阱组合式高分辨质谱联用(UHPLC-QExactive Orbitrap MS)对清心解瘀颗粒及其... 详细信息

目的:建立高分辨质谱(HR-MS)和分子网络整合策略的中药复杂化学成分快速分析方法,对清心解瘀颗粒中化学成分进行系统分析。方法:采用超高效液相色谱-静电场轨道阱组合式高分辨质谱联用(UHPLC-QExactive Orbitrap MS)对清心解瘀颗粒及其中的11种对照品进行质谱数据采集和裂解行为研究,计算MS/MS碎片模式的相似性并创建全球天然产物社会分子网络(GNPS),根据对照品的质谱裂解规律,以及高分辨质谱一级和二级质谱数据对分子网络中结构相似的分子簇及清心解瘀颗粒中主要的化合物类别的结构进行确证。结果:在清心解瘀颗粒中共鉴定出155种化学成分,其中皂苷类化合物26种,二萜醌等丹参酮类化合物21种,丹酚酸类化合物32种,生物碱类化合物19种,黄酮类化合物44种,藁本内酯、川芎内酯等其他类化合物13种。结论:该研究可为清心解瘀颗粒进一步的质量控制、药效物质及药效机制研究等提供参考数据,所建立的HR-MS和分子网络整合策略可为中药复方成分的快速定性分析提供借鉴。

关键词：清心解瘀颗粒分子网络裂解规律结构鉴定 Orbitrap质谱

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