检索结果-南通市图书馆

联合应用活体染料CFDA-SE和SNARF-1检测混合淋巴细胞反应

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细胞与分子免疫学杂志 2006年第3期22卷 382-384,387页

作者：肇静娴曾耀英刘毅何贤辉暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510630 中国医学科学院中国协和医科大学皮肤病研究所江苏南京210042

目的建立一种能够对单向混合淋巴细胞反应中应答细胞的应答强度进行更全面评价的增殖检测方法。方法BALB/cJ小鼠淋巴结细胞经CFDA-SE标记后作为应答细胞,BALB/cJ或C57BL/6小鼠脾细胞经丝裂霉素C处理后再用SNARF-1标记,作为刺激细胞,进... 详细信息

目的建立一种能够对单向混合淋巴细胞反应中应答细胞的应答强度进行更全面评价的增殖检测方法。方法BALB/cJ小鼠淋巴结细胞经CFDA-SE标记后作为应答细胞,BALB/cJ或C57BL/6小鼠脾细胞经丝裂霉素C处理后再用SNARF-1标记,作为刺激细胞,进行混合培养。混合培养96h后收获细胞,用流式细胞术进行检测,分析SNARF-1-CFSE+应答细胞的增殖情况,并用ModFitTM软件拟和以获得更多增殖相关指数。结果随着应答细胞分裂代数的增加,CFSE荧光强度逐渐减弱直至与刺激细胞无法分开,通过划除SNARF-1阳性细胞以确定应答细胞,解决了这一问题。应用ModFitTM软件,获得应答细胞的前体频率和增殖指数等多项重要的增殖相关指标。结论联合应用CFSE和SNARF-1染色,结合流式细胞术,可作为评价混合淋巴细胞反应中应答细胞的应答强度的有力工具。

关键词： CFDA-SE SNARF-1 混合淋巴细胞反应增殖

HCV C-Fc基因转染的小鼠树突状细胞促进混合淋巴细胞反应的作用

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细胞与分子免疫学杂志 2004年第3期20卷 301-303页

作者：王全楚冯志华周永兴聂青和白雪帆第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心陕西西安710038

目的 :观察HCVC Fc基因电穿孔法转染的小鼠树突状细胞(DC)功能的改变。方法 :分离小鼠骨髓单个核细胞与rmGM CSF和rmIL 4培养 1wk,对培养的细胞进行形态学观察 ,并用FACS检测细胞表面DEC2 0 5的表达。以通过质粒pcD NA3HCVC Fc电穿孔法... 详细信息

目的 :观察HCVC Fc基因电穿孔法转染的小鼠树突状细胞(DC)功能的改变。方法 :分离小鼠骨髓单个核细胞与rmGM CSF和rmIL 4培养 1wk,对培养的细胞进行形态学观察 ,并用FACS检测细胞表面DEC2 0 5的表达。以通过质粒pcD NA3HCVC Fc电穿孔法转染培养的DC ,用间接免疫荧光染色测定转染细胞中HCVC Fc的水平 ;用混合淋巴细胞反应检测电穿孔法转染细胞的功能。结果 :培养 1wk后 ,得到具有典型DC形态的细胞 ,以质粒pcDNA3HCVC Fc为载体电穿孔法转染DC后 ,转染细胞中可检测到较高水平的HCVC Fc。与对照组相比较以电穿孔法转染的细胞能明显刺激混合淋巴细胞反应。结论 :小鼠骨髓单个核细胞加GM CSF和IL 4培养 1wk ,可生成大量的DC。质粒pcDNA3HCVC Fc转染培养的DC对T细胞刺激作用显著增强。

关键词：小鼠树突状细胞电转染混合淋巴细胞反应 HCV C—Fc基因

尖锐湿疣病损组织粗提蛋白对混合淋巴细胞反应的影响

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中华传染病杂志 2005年第1期23卷 24-27页

作者：芦桂青程浩张行沈建根岑建萍叶俊浙江大学医学院附属邵逸夫医院皮肤科杭州310016 浙江大学医学院附属邵逸夫医院临床研究所杭州310016 浙江大学医学院免疫研究所

目的　通过观察尖锐湿疣病损组织粗提蛋白刺激后的树突状细胞(DC)对混合淋巴细胞反应的影响,探讨尖锐湿疣病损粗提蛋白对DC免疫功能的影响。方法　用聚合酶联反应(PCR)鉴定尖锐湿疣病损组织中人乳头瘤病毒(HPV)6 DNA和HPV11 DNA。人脐... 详细信息

目的　通过观察尖锐湿疣病损组织粗提蛋白刺激后的树突状细胞(DC)对混合淋巴细胞反应的影响,探讨尖锐湿疣病损粗提蛋白对DC免疫功能的影响。方法　用聚合酶联反应(PCR)鉴定尖锐湿疣病损组织中人乳头瘤病毒(HPV)6 DNA和HPV11 DNA。人脐带血和外周血分离培养10 d的DC分别用尖锐湿疣病损组织和健康儿童包皮组织粗提蛋白刺激2次。另设空白对照组磷酸盐缓冲液(PBS)刺激。用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测DC刺激同种异体和自体混合淋巴细胞反应的能力。同种异体淋巴细胞来源于脐带血和外周血,同种自体淋巴细胞来源于外周血。结果　PCR结果显示尖锐湿疣病损组织中HPV6b DNA阳性。尖锐湿疣病损粗提蛋白刺激后的DC刺激来源于脐血的T淋巴细胞,其增殖指数(5.514)高于包皮对照组(2.645)和空白对照组(1.698,DC∶T均为1∶11)。尖锐湿疣病损粗提蛋白刺激后的DC刺激来源于外周血的T淋巴细胞的增殖指数(2.352)高于包皮对照组(1.083)和空白对照组(0.644,DC∶T均为1∶3)。结论　尖锐湿疣病损粗提蛋白可能因存在的HPV病毒抗原对DC的刺激和功能活化,进一步促进了T淋巴细胞的增殖活化,并进而推测可以提高机体抗病毒特异性细胞免疫。

关键词：尖锐湿疣 DC 蛋白混合淋巴细胞反应刺激外周血 T淋巴细胞来源推测目的

室内常见气传真菌代谢提取物对异型小鼠混合淋巴细胞反应的影响

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环境与健康杂志 2001年第4期18卷 201-203页

作者：阚海东宋伟民蒋蓉芳复旦大学医学院环境卫生教研室 200032

目的　探讨室内常见气传真菌代谢提取物的免疫抑制作用。方法　监测室内环境中的气传真菌 ,在此基础上 ,以改良的混合淋巴细胞反应实验研究其代谢产物的免疫抑制作用。结果　室内主要气传真菌属中的青霉属、曲霉属在无明显的细胞毒性浓... 详细信息

目的　探讨室内常见气传真菌代谢提取物的免疫抑制作用。方法　监测室内环境中的气传真菌 ,在此基础上 ,以改良的混合淋巴细胞反应实验研究其代谢产物的免疫抑制作用。结果　室内主要气传真菌属中的青霉属、曲霉属在无明显的细胞毒性浓度下 ,可抑制异型小鼠淋巴细胞混合刺激而产生的增生。

关键词：室内空气真菌混合淋巴细胞反应代谢提取物小鼠空气污染

PDL_1Ig基因修饰的恒河猴肝细胞在混合淋巴细胞反应中的效应研究

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免疫学杂志 2015年第1期31卷 32-35页

作者：李鹏张玉毅李恒平丁正华王毅赵云邓仲鸣湖北医药学院附属襄阳医院普外科B区襄阳441001 湖北医药学院附属襄阳医院妇科科襄阳441001

目的探讨恒河猴来源的PDL1Ig在体外混合淋巴细胞反应中的作用。方法在Gen Bank中检索到恒河猴目的基因PDL1和Ig G1Fc的序列,采用重叠延伸PCR法合成该目的基因,与p GEM-T连接转化感受态E.coli TOP10,经鉴定得到PDL1Ig基因,p Shuttle-CMV... 详细信息

目的探讨恒河猴来源的PDL1Ig在体外混合淋巴细胞反应中的作用。方法在Gen Bank中检索到恒河猴目的基因PDL1和Ig G1Fc的序列,采用重叠延伸PCR法合成该目的基因,与p GEM-T连接转化感受态E.coli TOP10,经鉴定得到PDL1Ig基因,p Shuttle-CMV线性化后连接目的基因转化感受态E.coli TOP10,克隆p Shuttle-CMV/PDL1Ig重组穿梭质粒。将p Ad Easy-1和线性p Shuttle-CMV/PDL1Ig共电转至BJ5183细胞中同源重组,构建重组腺病毒载体p Ad Easy-1/PDL1Ig骨架,以脂质体2000将p Ad Easy-1/PDL1Ig转染至293细胞中包装成有活性的重组腺病毒。感染恒河猴肝细胞,RT-PCR和Western blotting检测目的基因的表达。混合淋巴细胞反应(MLR)测定其生物学活性。结果成功构建了PDL1Ig重组腺病毒载体,能感染恒河猴肝细胞,RT-PCR和Western blotting检测有目的基因表达,在混合淋巴细胞反应中其能抑制T细胞增殖。结论成功构建了p Ad Easy-1/PDL1Ig重组腺病毒载体,其可在恒河猴肝细胞中高效表达,该重组蛋白可在体外通过PD-1/PDL1通路抑制T淋巴细胞增殖。

关键词：恒河猴PDL1Ig 腺病毒载体混合淋巴细胞反应

重组腺病毒介导CD40L和CTLA4Ig的共表达和对人混合淋巴细胞反应的抑制作用

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中华器官移植杂志 2005年第11期26卷 694-695页

作者：田普训吴军李钊伦薛武军丁小明贺伟峰易绍萱陈希伟西安交通大学第一医院肾移植科 710061 第三军医大学附属西南医院烧伤研究所

CD40/CD40L和B7/CD28是两条重要的共刺激通路,在T淋巴细胞活化过程中提供共刺激信号,在自身免疫性疾病和移植排斥反应的发生、发展过程中起重要作用,干预其相互作用,可有效地预防和治疗自身免疫性疾病和排斥反应[1,2].本研究基于我们构... 详细信息

CD40/CD40L和B7/CD28是两条重要的共刺激通路,在T淋巴细胞活化过程中提供共刺激信号,在自身免疫性疾病和移植排斥反应的发生、发展过程中起重要作用,干预其相互作用,可有效地预防和治疗自身免疫性疾病和排斥反应[1,2].本研究基于我们构建的重组腺病毒CD40L-IRES2-CTLA4Ig[3],观察其体外的共表达情况和对人外周血混合淋巴细胞反应(MLR)的作用。

关键词： CD40/CD40L 混合淋巴细胞反应重组腺病毒介导 CTLA4Ig 抑制作用自身免疫性疾病共表达移植排斥反应 B7/CD28 T淋巴细胞活化

mOX40-Fc的真核表达及其对混合淋巴细胞反应的影响

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现代免疫学 2008年第5期28卷 362-366页

作者：刘艳菲冯永堂鞠吉雨林志娟孙萍王丽娜潍坊医学院分子免疫学实验室潍坊261042

构建重组pcDNA3.1-mOX40-Fc真核表达载体,在CHO细胞中表达,并初步研究融合蛋白mOX40-Fc对MLR中细胞增殖的影响。克隆编码hIgG1Fc基因片段,与编码小鼠OX40胞外段的基因融合,构建mOX40-Fc融合基因及其分泌型真核表达载体pcDNA3.1-mOX40-Fc... 详细信息

构建重组pcDNA3.1-mOX40-Fc真核表达载体,在CHO细胞中表达,并初步研究融合蛋白mOX40-Fc对MLR中细胞增殖的影响。克隆编码hIgG1Fc基因片段,与编码小鼠OX40胞外段的基因融合,构建mOX40-Fc融合基因及其分泌型真核表达载体pcDNA3.1-mOX40-Fc;转染CHO细胞构建融合蛋白的稳定真核表达细胞株,用RT-PCR及夹心ELISA检测其表达,纯化后经SDS-PAGE及Western blot法对其进行鉴定,混合淋巴细胞反应(MLR)测定其生物学活性。结果:核苷酸序列测定显示构建的mOX40胞外段和hIgG1Fc段基因序列与GenBank序列一致、阅读框完整;RT-PCR、ELISA和Western blot检测表明转染细胞有分泌型重组蛋白的表达;功能实验提示mOX40-Fc能抑制MLR中的细胞增殖。成功构建mOX40-Fc真核表达载体并获得高效表达,该重组蛋白可在体外通过抑制OX40/OX40L共刺激通路抑制淋巴细胞增殖。

关键词： mOX40-Fc 融合蛋白真核表达混合淋巴细胞反应

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自身混合淋巴细胞反应和自身免疫病

现代免疫学 1990年第2期10卷 127-129页

作者：计焱焱姚光弼静安区中心医院临床免疫研究室

同种异体的淋巴细胞在体外共同培养时,由于HLA不同而发生增殖反应。以后,Opelz等1975年发现自身的T细胞和非T细胞共同培养时,也有淋巴细胞增殖现象,称为自身混合淋巴细胞反应(AMLR)。近年来许多学者发现AMLR具有调节免疫功能,是维持自... 详细信息

同种异体的淋巴细胞在体外共同培养时,由于HLA不同而发生增殖反应。以后,Opelz等1975年发现自身的T细胞和非T细胞共同培养时,也有淋巴细胞增殖现象,称为自身混合淋巴细胞反应(AMLR)。近年来许多学者发现AMLR具有调节免疫功能,是维持自身稳定的一个重要方面。另外也注意到AMLR在多种自身免疫病中出现异常。

关键词： AMLR 巨噬细胞 DR 细胞亚群混合淋巴细胞反应吞噬细胞抗原自身免疫性疾病免疫性疾病自身免疫病

混合淋巴细胞反应中白细胞介素-2和肿瘤坏死因子-α的表达对肝移植急性排斥反应的预测价值

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中华实验外科杂志 2008年第10期25卷 1343-1343页

作者：付必莽张捷胡安斌唐浩然田大广何晓顺中山大学附属第一医院器官移植中心广州510080 昆明医学院第二附属医院肝胆外科

白细胞介素（IL）-2和肿瘤坏死因子（TNF）-α的表达水平与器官移植供受体间主要组织相容复合体（MHC）的吻合度密切相关。动物实验叫和临床病例中，移植物受体术后血浆IL-2或TNF-α浓度升高提示急性排斥反应（AR）的发生。淋巴细胞激... 详细信息

白细胞介素（IL）-2和肿瘤坏死因子（TNF）-α的表达水平与器官移植供受体间主要组织相容复合体（MHC）的吻合度密切相关。动物实验叫和临床病例中，移植物受体术后血浆IL-2或TNF-α浓度升高提示急性排斥反应（AR）的发生。淋巴细胞激活是肝脏移植AR的首要因素，供受体淋巴细胞混合反应（MLR）是研究移植排斥反应机制的可靠模型。

关键词：肝移植急性排斥反应肿瘤坏死因子-α 混合淋巴细胞反应白细胞介素-2 预测价值主要组织相容复合体 (TNF)-α TNF-α浓度