检索结果-南通市图书馆

稳定表达淋巴细胞趋化因子的大鼠系膜细胞载体的构建

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

复旦学报（医学版） 2003年第6期30卷 565-568页

作者：朱春芳徐荣左欧周罗复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系上海200032

目的探讨以肾小球系膜细胞作为高表达大鼠淋巴细胞趋化因子(Ltn)的载体的可行性,从而为深入研究淋巴细胞趋化因子的作用和体内活性创造条件。方法采用RT-PCR法获得大鼠的Ltn的编码区全长的cDNA序列;应用基因重组技术和限制性内切酶酶... 详细信息

目的探讨以肾小球系膜细胞作为高表达大鼠淋巴细胞趋化因子(Ltn)的载体的可行性,从而为深入研究淋巴细胞趋化因子的作用和体内活性创造条件。方法采用RT-PCR法获得大鼠的Ltn的编码区全长的cDNA序列;应用基因重组技术和限制性内切酶酶切法构建并鉴定pcDNA 3.1/Ltn真核表达载体;用Lipofec-tAMINE PLUS脂质体转染法将构建的质粒及空质粒瞬时转染于SKOV3细胞;用RT-PCR和ELISA法检测LtnmRNA及蛋白质水平的表达,进而用pcDNA 3.1/Lac Z和pcDNA 3.1/Ltn稳定转染原代培养的WKY大鼠肾小球系膜细胞,用潮霉素B筛选获得稳定表达报告基因Lac Z和大鼠Ltn的细胞克隆。结果测序结果显示质粒载体中正确地插入了大鼠Ltn的编码基因;RT-PCR显示在瞬时转染的SKOV3细胞和稳定转染的4个系膜细胞克隆中Ltn mRNA表达增高;ELISA证实细胞培养上清中Ltn的蛋白质浓度较对照组明显升高。此外,X-gal染色显示获得了2个稳定表达β-半乳糖苷酶基因的系膜细胞克隆。结论本研究成功地构建了真核表达质粒载体pcDNA 3.1/hygro/Ltn,获得了稳定表达大鼠Ltn的肾小球系膜细胞克隆,并在mRNA及蛋白质水平上证实了Ltn的表达,为进一步研究Ltn的体内活性奠定了基础。

关键词：淋巴细胞趋化因子大鼠载体肾小球系膜细胞基因转染肾小球疾病

淋巴细胞趋化因子在COPD患者外周血中的表达及其对T细胞亚群的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

淋巴细胞趋化因子在COPD患者外周血中的表达及其对T细胞亚群的影响

作者：梁文美遵义医学院

学位级别：硕士

目的：研究淋巴细胞趋化因子(Lymphotactin,XCL1)在慢性阻塞性肺疾病患者外周血中的表达水平,并与COPD患者肺功能下降程度的相关性,及干预前后IL-2、T细胞及其表面Fas、FasL表达水平的变化,探讨XCL1对COPD患者慢性炎症的调控机制。方法... 详细信息

目的：研究淋巴细胞趋化因子(Lymphotactin,XCL1)在慢性阻塞性肺疾病患者外周血中的表达水平,并与COPD患者肺功能下降程度的相关性,及干预前后IL-2、T细胞及其表面Fas、FasL表达水平的变化,探讨XCL1对COPD患者慢性炎症的调控机制。方法：COPD急性加重期(AECOPD)患者13例,均来自龙岗中心医院2012年8月至2012年12月呼吸内科住院患者;稳定期患者13例,均为急性加重期患者经治疗后出院病情稳定至少2周者;健康对照组选用门诊体检性别、年龄与病例组相配的肺功能正常者。清晨空腹抽取外周静脉血用于分离血清及T淋巴细胞,经分离后的T淋巴细胞分为2组,接种于24孔细胞培养板,其中一板加入重组人淋巴细胞趋化因子(Recombinant Human Lymphotactin,RhXCL1)(干预组),另一板加入等量细胞培养液(未干预组),培养24小时,采用酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)分别检测血清及细胞培养上清液中的XCL1、白细胞介素2(Interleukin-2,IL-2);采用流式细胞仪检测细胞培养液中的T淋巴细胞亚群CD4+、 CD8+及其表面的Fas、 FasL的表达水平。结果： 1、外周血XCL1的表达及与FEVl%pred、IL-2的相关性： ①AECOPD及稳定期患者外周血中的XCL1的表达均高于健康对照组,差异有统计学意义(P淋巴细胞培养液中各指标比较及与XCL1的相关性： ①干预组COPD患者(包括急性期与稳定期)的T细胞培养液中XCL1、CD4+-Fas、 CD4+-FasL、CD8+-Fas. CD8+-FasL的表达均高于未干预组,而IL-2表达减少,结果有显著性差异(P细胞培养液中CD4+百分比降低、CD8+百分比升高,CD4+/CD8+降低,与未干预组相比,结果有显著性差异(P细胞培养液中,XCL1的表达与CD4+-Fas、CD4+-FasL、CD8+-Fas、CD8+-FasL的表达呈正相关,与IL-2的表达及CD4+/CD8+呈负相关。结论： 1、XCL1在AECOPD及稳定期患者外周血中的表达水平均较健康对照组明显升高,且急性加重期高于稳定期,并与肺功能指标FEV1%pred呈负相关,在干预组T细胞培养液中,CD4+-Fas、CD4+-FasL、CD8+-Fas、CD8+-FasL的表达均有不同程度增加,且与XCL1的表达呈正相关,提示XCL1参与了COPD的炎症过程,其参与炎症反应的机制可能是通过促进Fas、FasL的表达,导致CD4+T细胞的凋亡,进行性破坏CD4+、CD8+之间的平衡发挥效应。 2. COPD患者外周血T细胞经干预培养后,IL-2表达水平降低,与XCL1呈负相关,提示XCL1可能引起IL-2表达水平降低,间接导致自身反应性淋巴细胞增生或免疫功能紊乱或低下,可能是导致COPD气道炎症持续存在的原因之一。

关键词：慢性阻塞性肺疾病淋巴细胞趋化因子淋巴细胞凋亡白细胞介素2

淋巴细胞趋化因子(XCL1)在COPD小鼠模型肺组织中的表达及其与CD4+、CD8+T淋巴细胞、IL-2的相关性分析

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

淋巴细胞趋化因子(XCL1)在COPD小鼠模型肺组织中的表达及其与CD4+...

作者：郑燚遵义医学院

学位级别：硕士

目的：研究淋巴细胞趋化因子（Lymphotactin,XCL1）在慢性阻塞性肺疾病（COPD）小鼠模型肺组织中的表达水平及XCL1与其肺组织中CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群白细胞介素2（Interleukin-2,IL-2)表达水平的相关性，进一步探讨XCL1在COPD中与T... 详细信息

目的：研究淋巴细胞趋化因子（Lymphotactin,XCL1）在慢性阻塞性肺疾病（COPD）小鼠模型肺组织中的表达水平及XCL1与其肺组织中CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群白细胞介素2（Interleukin-2,IL-2)表达水平的相关性，进一步探讨XCL1在COPD中与T淋巴细胞亚群、IL-2的相关性。方法：6周龄雄性小鼠55只，适应性饲养2周后，随机分为A组（健康对照组）、B组（COPD组）、C组（COPD+XCL1）干预组、D组(COPD+PBS)干预组，对B、C、D组小鼠采用烟雾暴露法制作COPD小鼠模型。采用HE染色法行病理组织切片观察评价模型成功。C、D组小鼠气管分别滴入XCL1和PBS，收集4组小鼠肺脏，用流式细胞学方法检测T淋巴细胞亚群，用免疫组化检测A、B组小鼠肺组织XCL1表达，并对各组小鼠右肺下叶XCL1、IL-2的表达行ELISA检测。结果： 1、小鼠COPD模型评价：HE染色病理观察示A组小鼠肺组织结构正常，无明显结构破坏及炎症细胞浸润，B组小鼠肺实质肺泡扩张，小气道炎症细胞浸润，粘液分泌增多。B组小鼠肺组织平均内衬间隔（MLI）和肺泡破坏指数（DI）与A组小鼠组织相比有统计学意义（P淋巴细胞亚群、肺组织上清液IL-2表达变化的影响及其相关性分析： ①C组、B组、D组与A组比较，CD4+降低，CD8+升高，CD4+/CD8+比值下降（P细胞降低、CD8+T细胞升高、CD4+/CD8+比值减低有关;C组与B、D组相比，CD4+T淋巴细胞下降，CD8+T淋巴细胞增高，CD4+/CD8+比值减低及IL-2分泌减少更明显。

关键词：慢性阻塞性肺疾病小鼠模型淋巴细胞趋化因子 T淋巴细胞亚群白细胞介素2

单核细胞源性树突状细胞表达淋巴细胞趋化因子mRNA的初步研究

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

细胞与分子免疫学杂志 2006年第6期22卷 723-725页

作者：鲁雄兵谢辉莉黄红卫史子敏熊建华潘正跃南昌大学第二附属医院泌尿外科江西南昌330006

目的:体外诱导、培养单核细胞源性树突状细胞(DC),研究其淋巴细胞趋化因子(lymphotactin,Lptn)mRNA表达的动态变化。方法:采用密度梯度离心的方法分离人外周血中的单个核细胞(PBMC),用重组人粒细胞-巨噬细胞集落群体刺激因子(rhGM-CSF)... 详细信息

目的:体外诱导、培养单核细胞源性树突状细胞(DC),研究其淋巴细胞趋化因子(lymphotactin,Lptn)mRNA表达的动态变化。方法:采用密度梯度离心的方法分离人外周血中的单个核细胞(PBMC),用重组人粒细胞-巨噬细胞集落群体刺激因子(rhGM-CSF)、重组人白细胞介素-4(rhIL-4)刺激贴壁的单核细胞,诱导培养DC,第6天用重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)诱导DC成熟。用流式细胞术检测成熟和未成熟的DC表面分子CD1a和CD83;在电镜下观察成熟DC的形态;以RT-PCR法扩增其LptncDNA并克隆至pGM-TEasyT载体中,测序;以RT-PCR结合凝胶成像分析系统,半定量分析培养3、5及7dDC的LptnmRNA表达的强度。结果:电镜观察培养7d的细胞具有典型的DC形态,流式细胞术检测DC表面分子CD83呈高水平表达。用RT-PCR法克隆的cDNA序列与GenBank中U23772(登陆号)提供的序列一致。培养3d的DC不表达LptnmRNA,培养7d的DC较培养5d的DCLptnmRNA表达增强。结论:单核细胞源性DC能表达LptnmRNA,随着DC的成熟,LptnmRNA的表达增强。

关键词：树突状细胞淋巴细胞趋化因子单核细胞

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

肾结核病灶中淋巴细胞趋化因子的表达

细胞与分子免疫学杂志 2008年第1期24卷 62-63,66页

作者：鲁雄兵谢辉莉邹高德黄红卫熊建华史子敏潘正跃南昌大学第二附属医院泌尿外科江西南昌330006

目的:探讨淋巴细胞趋化因子在正常肾脏和肾结核中的表达以及淋巴细胞趋化因子和浸润CD4+、D8+T细胞在肾脏结核病灶中的分布特点。方法:6例正常肾脏和10例肾结核病变组织,经匀浆后,采用RT-PCR法扩增人淋巴细胞趋化因子(hLptn)的含编码区... 详细信息

目的:探讨淋巴细胞趋化因子在正常肾脏和肾结核中的表达以及淋巴细胞趋化因子和浸润CD4+、D8+T细胞在肾脏结核病灶中的分布特点。方法:6例正常肾脏和10例肾结核病变组织,经匀浆后,采用RT-PCR法扩增人淋巴细胞趋化因子(hLptn)的含编码区序列的cDNA;扩增cDNA的克隆至pGM-TEasy T载体,测序;应用免疫组织化学方法检测正常肾脏和肾结核中的hLptn的表达和结核病灶中的CD4、CD8分子的表达。结果:正常肾脏和肾结核组织均表达hLptnmRNA,应用RT-PCR法克隆的cDNA序列与GenBank中U23772的序列一致;hLptn在正常的肾小球、肾小管中和结核病变中残存的肾小球、肾小管中均有表达;结核病变中有散在的CD4和CD8分子阳性细胞,与hLptn的分布无重叠。结论:淋巴细胞趋化因子在肾脏的肾小球和肾小管中呈结构性表达,肾结核肉芽肿中淋巴细胞的募集可能非依赖于hLptn的作用。

关键词：淋巴细胞趋化因子细胞肾脏结核

急性排斥反应过程中淋巴细胞趋化因子基因表达的意义

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华器官移植杂志 2003年第3期24卷 160-162页

作者：顾晓唐孝达顾沈阳杨尚琪周佩军徐达王祥慧谭建明扬州大学临床医学院泌尿外科江苏省225001 上海市第一人民医院上海市器官移植临床中心上海第二医科大学附属瑞金医院泌尿外科

目的　探讨急性排斥反应过程中淋巴细胞趋化因子 (LTN)mRNA在移植心脏局部表达的意义及环孢素A(CsA)对其的影响。方法　以SD大鼠为受者 ,Wistar大鼠为供者 ,施行异位 (腹腔 )心脏移植术 ,分为术后使用CsA组 (15mg·kg-1·d-1)和不用组 ... 详细信息

目的　探讨急性排斥反应过程中淋巴细胞趋化因子 (LTN)mRNA在移植心脏局部表达的意义及环孢素A(CsA)对其的影响。方法　以SD大鼠为受者 ,Wistar大鼠为供者 ,施行异位 (腹腔 )心脏移植术 ,分为术后使用CsA组 (15mg·kg-1·d-1)和不用组 ,并设SD大鼠间的心脏移植组 (同系移植组 ) ,以正常SD大鼠为对照组。采用一步法逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测术后不同时间移植心脏局部LTNmRNA的表达。结果　正常对照组和同系移植组在各时间点均未见LTNmRNA表达 ;LTNmRNA在未用CsA组的表达变化与急性排斥反应的进程相关 ,排斥反应的早期出现LTNmRNA表达上调 ,术后 5d时达到峰值 ,而应用CsA组 ,LTNmRNA的表达峰值出现延缓 ,且明显低于未用CsA组 (P 淋巴细胞浸润密切相关 ,可能对急性排斥反应的早期诊断有帮助 ;CsA可抑制LTN基因的表达。

关键词：异位心脏移植术急性排斥反应淋巴细胞趋化因子基因表达环孢素A

淋巴细胞趋化因子增强柯萨奇病毒DNA疫苗黏膜免疫及预防小鼠心肌炎的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

微生物与感染 2010年第2期5卷 77-83页

作者：岳艳胡林昆徐薇熊思东复旦大学上海医学院免疫生物学研究所上海200032

本研究在已建立的柯萨奇病毒B3型(CVB3)黏膜疫苗chitosan-pVP1基础上,引入C家族趋化因子,即淋巴细胞趋化因子(LTN),以期诱导更强的黏膜免疫应答,获得更有效的免疫保护作用。将pLTN与pVP1各50μg混合后,与chitosan形成共聚复合物,隔周滴... 详细信息

本研究在已建立的柯萨奇病毒B3型(CVB3)黏膜疫苗chitosan-pVP1基础上,引入C家族趋化因子,即淋巴细胞趋化因子(LTN),以期诱导更强的黏膜免疫应答,获得更有效的免疫保护作用。将pLTN与pVP1各50μg混合后,与chitosan形成共聚复合物,隔周滴鼻免疫小鼠,共4次;末次免疫后2周,检测血清IgG、粪便IgA及肠系膜淋巴结细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性。同时,以3LD50/0.1mlCVB3腹腔感染小鼠,7d后检测血清肌酸激酶(CK)活性及心肌病理学改变。结果显示,与对照组相比,chi-(pVP1+pLTN)可显著提高CVB3特异性血清IgG水平、粪便IgA水平以及增强肠系膜淋巴结特异性CTL应答。病毒攻击后,chi-(pVP1+pLTN)组心肌炎发病率仅为16.7%,显著低于chi-(pVP1+pcDNA3.1)组的33.3%。心肌组织病理显示,chi-(pVP1+pLTN)组心外膜下仅有轻微炎症,而chi-(pVP1+pcDNA3.1)组除心外膜下有较多淋巴细胞聚集外,心肌内尚有少量炎症浸润和坏死灶。结果提示,LTN与VP1质粒经chitosan共包装后进行滴鼻免疫,可增强CVB3特异性黏膜免疫应答,更有效地预防病毒性心肌炎的发生。

关键词：柯萨奇病毒B3型黏膜疫苗淋巴细胞趋化因子滴鼻免疫病毒性心肌炎

淋巴细胞趋化因子对乳腺癌MCF-7细胞的表柔比星药物敏感性及侵袭转移能力的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华乳腺病杂志（电子版） 2017年第6期11卷 354-360页

作者：马哿王佳夏添松王水南京医科大学第一附属医院乳腺外科 210036

目的探讨淋巴细胞趋化因子(lymphotactin,XCL1)对人乳腺癌MCF-7细胞的表柔比星药物敏感性及侵袭转移能力的影响。方法根据是否进行表柔比星及XCL1干预,将MCF-7细胞分为4组:对照组(MCF-7 NC),表柔比星单药组(MCF-7 E),XCL1单药组(MCF-7 X... 详细信息

目的探讨淋巴细胞趋化因子(lymphotactin,XCL1)对人乳腺癌MCF-7细胞的表柔比星药物敏感性及侵袭转移能力的影响。方法根据是否进行表柔比星及XCL1干预,将MCF-7细胞分为4组:对照组(MCF-7 NC),表柔比星单药组(MCF-7 E),XCL1单药组(MCF-7 XCL1),联合干预组(MCF-7XCL1+E)。用细胞计数试剂盒8(CCK-8)及平板克隆实验观察XCL1干预后MCF-7细胞对表柔比星药物敏感性的影响。用Transwell法观察XCL1对MCF-7细胞侵袭转移能力的影响,并用免疫荧光法检测对照组和XCL1单药组埃兹蛋白(ezrin)及磷酸化埃兹蛋白(p-ezrin)的表达。用Western blot实验检测4组E钙黏蛋白(E-cadherin)、ezrin及p-ezrin的表达水平。细胞生长抑制率的比较采用析因设计的方差分析,2组均数比较采用t检验,多组均数比较采用单因素方差分析,两两比较用LSD法。结果经XCL1处理2周后,表柔比星对MCF-7细胞的抑制作用降低(组间比较F=23.780,P细胞后,各组(MCF-7 NC、MCF-7 XCL1、MCF-7 E和MCF-7 XCL1+E)细胞克隆形成率分别为(15.63±0.61)%、(19.47±1.94)%、(7.77±0.71)%和(12.37±1.55)%,差异有统计学意义(F=41.925,P细胞穿膜数高于MCF-7 NC组(180.00±20.42比88.00±7.00,t=-7.382,P=0.002),侵袭实验中MCF-7 XCL1组的细胞穿膜数也高于MCF-7 NC组(176.33±8.02比90.33±12.90,t=-9.808,P=0.001)。免疫荧光实验发现XCL1刺激后的MCF-7细胞中p-ezrin蛋白表达明显升高(MCF-7 XCL1:1.08±0.12,MCF-7 NC:0.65±0.11,t=-4.528,P=0.011)。Western blot检测发现,4组比较E-cadherin和p-ezrin表达的差异均有统计学意义(F=6.317、48.517,P均细胞的侵袭转移能力,同时降低其对表柔比星的药物敏感性。

关键词：乳腺肿瘤淋巴细胞趋化因子表柔比星抗耐药肿瘤埃兹蛋白

淋巴细胞趋化因子在慢性阻塞性肺疾病患者外周血中的表达及其对CD4^＋CD8^＋T细胞亚群的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

国际呼吸杂志 2015年第1期35卷 12-16页

作者：卓宋明李娜荀安营梁文美郑燚深圳市龙岗中心医院呼吸内科 518116 北京大学深圳医院消化内科深圳518036

目的探讨淋巴细胞趋化因子（lymphotactin,XCL1）对COPD患者外周血CD4^＋ T、CD8^＋T细胞亚群及有关炎症因子的影响及机制。方法随机选取13例COPD 患者（急性加重期和稳定期）和13名健康人,分离外周血T淋巴细胞进行培养,经淋巴细胞趋... 详细信息

目的探讨淋巴细胞趋化因子（lymphotactin,XCL1）对COPD患者外周血CD4^＋ T、CD8^＋T细胞亚群及有关炎症因子的影响及机制。方法随机选取13例COPD 患者（急性加重期和稳定期）和13名健康人,分离外周血T淋巴细胞进行培养,经淋巴细胞趋化因子干预后,用流式细胞仪分别检测外周血中CD4^＋T、CD8^＋ T 细胞亚群变化及其表面Fas、FasL 表达,并用酶联免疫吸附试验（enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA）分别检测血清及细胞培养上清液中的XCL1、IL-2表达水平。结果 AECOPD及稳定期患者外周血中的XCL1的表达均高于健康对照组（P 〈0.05）,AECOPD组又高于稳定期组患者（P 〈0.05）。COPD患者（包括急性发作期与稳定期）T细胞培养液中,XCL1干预组与未干预组相比,XCL1、CD4^＋-Fas、CD4^＋-FasL、CD8^＋-Fas、CD8^＋-FasL 表达增高（P 〈0.05）,CD4^＋/CD8^＋降低（P 〈0.05）,而IL-2 表达减少（P 〈0.05）。且XCL1 的表达与CD4^＋-Fas、CD4^＋-FasL、CD8^＋-Fas、CD8^＋-FasL的表达呈正相关,与IL-2的表达及CD4^＋/CD8^＋呈负相关。结论 XCL1参与了COPD的炎症过程,其参与炎症反应的机制可能是通过促进Fas、FasL的表达,导致CD4^＋T、CD8^＋ T细胞的凋亡增加,CD4^＋T/CD8^＋T比值下降,造成CD4^＋/CD8^＋比例失衡,XCL1还可引起IL-2水平降低,间接导致机体免疫功能紊乱或低下,可能是导致COPD炎症持续存在的重要机制。

关键词：慢性阻塞性肺疾病淋巴细胞趋化因子 T淋巴细胞亚群凋亡白介素2

同方期刊数据库