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血浆置换淋巴细胞分离用于肾移植(附4例报告)

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西南国防医药 2001年第4期11卷 253-255页

作者：邓超雄陈昭颉王庆堂成都军区总医院泌尿外科成都610083

随着环孢A的应用,肾移植术后肾/人的成活率有了明显提高,但仍有部分高敏患者因超急性排斥反应或耐激素的排斥反应导致移植失败.我院采用血液成分分离技术行血浆置换和淋巴细胞分离(去淋巴细胞)作为高敏患者的术前准备和耐激素排斥反应... 详细信息

随着环孢A的应用,肾移植术后肾/人的成活率有了明显提高,但仍有部分高敏患者因超急性排斥反应或耐激素的排斥反应导致移植失败.我院采用血液成分分离技术行血浆置换和淋巴细胞分离(去淋巴细胞)作为高敏患者的术前准备和耐激素排斥反应时的治疗手段.现将初步结果报告如下:

关键词：肾移置血浆置换淋巴细胞分离

人胚脾脏T、B淋巴细胞分离、冻存的初步探讨

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中华器官移植杂志 1985年第1期6卷 38-40页

作者：查国章汪秀明罗亚敏张建中王福熙张淑安湖南医学院微生物学教研组湖南医学院电镜室

筛选HLA抗血清用细胞,一般用外周血T、B淋巴细胞或成人脾B细胞,但需较大量的外周血及尸脾来源。据美国加利福尼亚州立大学组织配型实验室实验操作手册记载,一个成人尸体脾脏可收获B细胞达2×10~9个并冷冻保存。在胚胎早期脾脏巳有T细胞... 详细信息

筛选HLA抗血清用细胞,一般用外周血T、B淋巴细胞或成人脾B细胞,但需较大量的外周血及尸脾来源。据美国加利福尼亚州立大学组织配型实验室实验操作手册记载,一个成人尸体脾脏可收获B细胞达2×10~9个并冷冻保存。在胚胎早期脾脏巳有T细胞、B细胞分化。为此,我们探讨了由人胚脾脏进行T、B淋巴细胞分离并冷冻保存,以期为筛选HLA抗血清及其他研究等提供一个

关键词：人胚脾脏淋巴细胞分离冻存

恒河猴外周血调节性T淋巴细胞的分离纯化及鉴定

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中国修复重建外科杂志 2012年第10期26卷 1237-1241页

作者：张爽金熙程汉佳何斯荣陈又南龙丹单娟曾力王成世程惊秋陆燕蓉四川大学华西医院卫生部移植科学与移植免疫重点实验室成都610041 四川大学生命科学学院

目的建立恒河猴外周血CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(regulatory T cells,Tregs)快速有效的分离纯化方法。方法 4～5岁健康恒河猴10只,雌性4只,雄性6只,体重5～8 kg;于大隐静脉抽取外周血,每只抽取8 mL。密度梯度离心法分离外周血单个核细胞... 详细信息

目的建立恒河猴外周血CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(regulatory T cells,Tregs)快速有效的分离纯化方法。方法 4～5岁健康恒河猴10只,雌性4只,雄性6只,体重5～8 kg;于大隐静脉抽取外周血,每只抽取8 mL。密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),分别采用非人灵长类Tregs分离试剂盒的生物素标记的混合抗体和磁珠标记的抗生物素抗体阴性分选,以及大鼠抗人CD4-活化蛋白C(activatedprotein C,APC)和抗APC多选试剂盒中的磁珠标记的抗APC抗体阳性分选出CD4+T淋巴细胞,比较两种方法获得细胞的得率、活性及纯度;选择得率、活性和纯度较高的分选方法获得的CD4+T淋巴细胞,用磁珠标记的抗人CD25抗体进行阳性分选,获得CD4+CD25+Tregs,流式细胞仪检测纯度、活性及FoxP3表达水平,以及Tregs对刀豆蛋白(concanavalinA,ConA)刺激的自体CD4+CD25-效应性T淋巴细胞(effective T cells,Teffs)增殖的抑制功能。结果 CD4+T淋巴细胞阳性分选和阴性分选后,细胞活性均达95%左右,差异无统计学意义(P>0.05),但阳性分选后CD4+T淋巴细胞得率和纯度均显著高于阴性分选(P淋巴细胞。经双阳性分选收集的目的细胞中CD4+CD25+Tregs占76.2%±8.6%,活细胞比例为93.3%±4.7%,FoxP3阳性细胞比例为74.2%±6.9%。混合培养后Tregs均对ConA刺激的Teffs的增殖有抑制作用。结论免疫磁珠双阳性分选法能有效分选出恒河猴外周血中有功能的CD4+CD25+Tregs。

关键词：调节性T淋巴细胞效应性T淋巴细胞免疫磁珠分选淋巴细胞分离恒河猴

鲟鱼外周血淋巴细胞的分离及最佳体外增殖性反应条件

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生物技术通报 2018年第3期34卷 150-155页

作者：董颖胡红霞田照辉王巍东天北京市水产科学研究所暨国家淡水渔业工程技术研究中心渔业生物技术北京市重点实验室北京100068

以小体鲟(Acipenser ruthenus)为研究对象,应用不同浓度的淋巴细胞分离液对鲟鱼外周血淋巴细胞进行分离并探讨其增殖性反应的最佳条件。分别以植物血凝素(PHA)、刀豆蛋白A(Con A)和脂多糖(LPS)作为淋巴细胞增殖丝裂原,采用L25(56)五因... 详细信息

以小体鲟(Acipenser ruthenus)为研究对象,应用不同浓度的淋巴细胞分离液对鲟鱼外周血淋巴细胞进行分离并探讨其增殖性反应的最佳条件。分别以植物血凝素(PHA)、刀豆蛋白A(Con A)和脂多糖(LPS)作为淋巴细胞增殖丝裂原,采用L25(56)五因素五水平正交试验设计,用Enhanced Cell Counting Kit-8法(增强型CCK-8或WST-8)对培养时间、培养温度、细胞密度、胎牛血清浓度及丝裂原浓度等因素进行探索性研究。结果表明:70%的Percoll液(比重为1.092 g/m L)作为淋巴细胞分离液的分离效果最佳。鲟鱼最佳外周血淋巴细胞体外增殖反应条件为:3.625×10~6初始细胞量、20μg/m L的PHA或50μg/m L的Con A或10μg/m L的LPS作为丝裂原、10%-20%胎牛血清(FBS)、20-25℃培养2 d。

关键词：鲟鱼外周血淋巴细胞淋巴细胞分离增殖性反应植物血凝素刀豆蛋白A 脂多糖 CCK-8

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两种方法分离小鼠脾原始T淋巴细胞效果比较

中国热带医学 2013年第5期13卷 540-542,580页

作者：陈嵘祎阿彩岭周英樊翌明广东医学院附属医院皮肤科广东湛江524001

目的比较Ficoll-Paque梯度离心法与免疫磁珠法分离T淋巴细胞的效果差异,筛选有效的、优异的分选小鼠脾原始T淋巴细胞方法。方法分别采用Ficoll-Paque梯度离心法及Miltenyi Biotec免疫磁珠进行小鼠淋巴细胞分离。血小板计数器统计单核淋... 详细信息

目的比较Ficoll-Paque梯度离心法与免疫磁珠法分离T淋巴细胞的效果差异,筛选有效的、优异的分选小鼠脾原始T淋巴细胞方法。方法分别采用Ficoll-Paque梯度离心法及Miltenyi Biotec免疫磁珠进行小鼠淋巴细胞分离。血小板计数器统计单核淋巴细胞数,苔盼蓝染色判断细胞存活率,流式细胞术鉴定CD4+CD62+T淋巴细胞纯度,并进行统计学分析。结果免疫磁珠法CD4+CD62+T淋巴细胞纯度较高为(66.27±3.52)%,Ficoll-Paque梯度离心法细胞纯度为(15.27±4.16)%,两者比较差异有统计学意义(P淋巴细胞数(1.47±0.35)×108较免疫磁珠法的(0.67±0.26)×108多,两者比较差异有统计学意义(t=8.199,P细胞存活率(93.9±2.6)%较免疫磁珠法的(89.9±2.9)%高,两者比较差异亦有统计学意义(P分离小鼠脾原始T淋巴细胞并用于细胞纯度要求高的免疫学实验,但细胞得率需进一步优化。

关键词：鼠免疫磁珠淋巴细胞分离梯度离心

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微量全血和分离淋巴细胞染色分析大鼠外周血T细胞亚群的比较

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海军军医大学学报 1988年第3期 248-249页

作者：葛依工高瀚孔宪涛马健张浩长征医院临床实验科长征医院外科

外周血T细胞亚群的分布反映着机体的免疫状况。如何快速准确地测定外周血T细胞亚群是一个值得研究的课题。自Ficoll Hypaque问世以来使分离淋巴细胞方法更为简单,目前已广泛应用于临床和实验室研究。但是,由于各种功能的淋巴细胞之间存

关键词：淋巴细胞分离 T细亚群

小鼠T、B淋巴细胞酸性α-醋酸萘酯酯酶同工酶的分析

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上海免疫学杂志 1985年第2期 77-78页

作者：张霆胡勇孙国贤沈淑瑾首都儿科研究所生化室首都儿科研究所生化室研究生

自1975年 Mueller 等首次提出可用酸性α-醋酸萘酯酯酶(ANAE)的细胞或组织或组织化学染色阳性反应作为检测小鼠的T 细胞标志以来,已有不少学者将 ANAE 活性用作区分 T、B 细胞的指标,可近年来国内外陆续出现了不同的看法。为进一步探... 详细信息

自1975年 Mueller 等首次提出可用酸性α-醋酸萘酯酯酶(ANAE)的细胞或组织或组织化学染色阳性反应作为检测小鼠的T 细胞标志以来,已有不少学者将 ANAE 活性用作区分 T、B 细胞的指标,可近年来国内外陆续出现了不同的看法。为进一步探索 T、B 淋巴细胞中 ANAE 同工酶组分与活性的异同,本文对于小鼠 T、B 淋巴细胞的 ANAE 同工酶谱进行了分析与探讨。

关键词： ANAE 酯酶同工酶 B淋巴细胞细胞标志小鼠脾脏形态特征阳性反应性细胞温育淋巴细胞分离

芍药甘草汤对MRL/Lpr小鼠CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞的影响

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中医杂志 2009年第S1期50卷 247-249页

作者：王璞张雯周红娟朱社敏马纪林王丹谭富媛于健宁陶筱娟浙江省中西医结合医院风湿免疫肾病科 310003 浙江省食品药品检验所浙江中医药大学

系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythematosus,SLE)是临床常见的自身免疫性疾病,表现为T、B淋巴细胞异常活化产生各种针对自身的抗体,不仅临床诊治困难,并发症多而复杂,而且治疗手段有限。

关键词：芍药甘草汤系统性红斑狼疮调节性模型小鼠自身免疫性疾病淋巴细胞异常活化急性毒性实验淋巴细胞分离治疗手段病情活动

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影响外周血淋巴细胞亚群分析的因素

医学研究生学报 1992年第4期5卷 387-387页

作者：白晓洋张景红金陵医院全军肾脏病中心

外周血淋巴细胞亚群(PLS)的检测结果常常差别较大,其影响因素颇多。本文应用 PAP 四层法对23例患者进行 PLS 的检测,并就其影响检测的因素作一分析。(一)材料和方法①检测对象:23例胃癌、肠癌患者,男17例,女6例,平均年龄57.7岁(42～69)... 详细信息

外周血淋巴细胞亚群(PLS)的检测结果常常差别较大,其影响因素颇多。本文应用 PAP 四层法对23例患者进行 PLS 的检测,并就其影响检测的因素作一分析。(一)材料和方法①检测对象:23例胃癌、肠癌患者,男17例,女6例,平均年龄57.7岁(42～69)。②PLS 检测方法:分离淋巴细胞后滴片2张,吹干。

关键词：肠癌患者影响因素细胞亚群吹干苏木素羊抗兔淋巴细胞分离小牛血清分叶核细胞血片