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解剖学报 2009年第1期40卷 103-107页

作者：徐存拴邢雪琨谢来峰张明方方崔胜男王磊张富春河南师范大学生命科学学院河南省-科技部共建细胞分化调控重点实验室河南新乡453007 新疆大学生命科学学院乌鲁木齐830046

目的探讨液压转基因技术（HDT）应用于大鼠肝脏转基因的条件、方法。方法以不同速度从大鼠尾静脉注射不同体积、浓度的含绿色荧光蛋白基因质粒pEGFP—C1，于注射后不同时间取大鼠（各4只）各肝叶制备玲冻切片，在波长488nm的荧光显微镜... 详细信息

目的探讨液压转基因技术（HDT）应用于大鼠肝脏转基因的条件、方法。方法以不同速度从大鼠尾静脉注射不同体积、浓度的含绿色荧光蛋白基因质粒pEGFP—C1，于注射后不同时间取大鼠（各4只）各肝叶制备玲冻切片，在波长488nm的荧光显微镜下观察、计数各肝叶的绿色荧光蛋白表达情况。结果在一次性注射浓度为30mg／L质粒、注射速度为2ml／s、注射体积为大鼠体重9％的条件下，注射pEGFP-C1质粒后6h，绿色荧光蛋白阳性细胞比例最高，占肝脏总细胞的20％以上，从24h起绿色荧光蛋白的表达量逐渐减少，至72h时各肝叶均基本难以检出绿色荧光蛋白阳性细胞。在上述最佳条件下，绿色荧光蛋白在各肝叶的表达情况是：蒂状叶的绿色荧光蛋白阳性细胞约为30％，左叶、中叶、右叶约为20％，尾状叶约为10％。结论液压转基因技术可应用于大鼠肝脏转基因，其适宜条件是：质粒溶液的浓度为30mg／L，注射量为大鼠体重的9％，注射速度为2ml／s，观察转染率的适宜时间是转基因后6～24h。

关键词：肝脏绿色荧光蛋白液压转基因技术大鼠

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液压转基因技术应用于大鼠再生肝转基因实验

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解剖学报 2009年第4期40卷 599-603页

作者：徐存拴邢雪琨杨献光朱秋实窦磊刘帅帅李幼张富春河南师范大学生命科学学院河南新乡453007 河南省一科技部共建细胞分化调控重点实验室新乡453007 新疆大学生命科学与技术学院乌鲁木齐830046

目的探讨液压转基因技术（HDT）应用于大鼠再生肝转基因的条件和方法。方法以2ml/s的速度将浓度为30mg/L的含目的基因的质粒注射入大鼠尾静脉,于注射前/后不同时间进行大鼠2/3肝切除（PH）,于PH后不同恢复时间称量大鼠体重（g）和再生... 详细信息

目的探讨液压转基因技术（HDT）应用于大鼠再生肝转基因的条件和方法。方法以2ml/s的速度将浓度为30mg/L的含目的基因的质粒注射入大鼠尾静脉,于注射前/后不同时间进行大鼠2/3肝切除（PH）,于PH后不同恢复时间称量大鼠体重（g）和再生肝重（g）,计算肝系数（Lc）,并从Lc±Lc＊0%、＊5%、＊10%、＊15%、＊20%、＊25%、＊30%、＊35%等15组中找出最佳组,作为计算不同恢复时间再生肝最适注射质粒溶液量的校正系数（Trc）;取大鼠肝右叶中部组织制备冷冻切片,在波长488nm的荧光显微镜下观察、计数1万个细胞中的绿色荧光蛋白阳性细胞百分率。结果PH后注射生理盐水和注射空质粒对肝再生的影响与对照（只进行PH）相比无显著差异。PH前液压转基因的合适时间是PH前≥12h;PH后所有时间均可进行液压转基因。PH后对肝再生大鼠进行液压转基因的转基因溶液体积为大鼠体重（g）×9%×1/3×相应的校正系数（Trc）。转入基因在体内的表达时间和丰度既受载体影响,又受插入的目的基因影响。结论液压转基因技术亦可有效地应用于大鼠再生肝转基因研究。

关键词：肝再生液压转基因技术基因表达大鼠

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液压转基因技术用于脂肪肝大鼠的肝脏转基因实验

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解剖学报 2010年第1期41卷 160-164页

作者：徐存拴朱秋实邢雪琨郭学强白银辉河南师范大学生命科学学院河南省-科技部共建细胞分化调控重点实验室河南新乡453007 新疆大学生命科学与技术学院乌鲁木齐830046

目的探讨液压转基因技术(HDT)应用于大鼠脂肪肝转基因的条件、方法。方法以不同速度将不同体积、浓度的绿色荧光蛋白基因质粒pEGFP-C1一次性注射到脂肪肝大鼠尾静脉,于注射后不同时间取大鼠(各4只)各肝叶制备冷冻切片,在波长488nm的荧... 详细信息

目的探讨液压转基因技术(HDT)应用于大鼠脂肪肝转基因的条件、方法。方法以不同速度将不同体积、浓度的绿色荧光蛋白基因质粒pEGFP-C1一次性注射到脂肪肝大鼠尾静脉,于注射后不同时间取大鼠(各4只)各肝叶制备冷冻切片,在波长488nm的荧光显微镜下观察、计数各肝叶绿色荧光蛋白阳性细胞。结果在pEGFP-C1浓度为33mg/L、注射速度为2ml/s、注射液体积为大鼠体重的8.5%条件下,注射质粒后6h,各肝叶绿色荧光蛋白阳性细胞比例最高,其中,蒂状叶的绿色荧光蛋白阳性细胞约占18%,左叶约占14%、中叶约占12.5%、右叶约占10%,尾状叶约占8%。转基因后24h绿色荧光蛋白的表达量逐渐减少,至72h时各肝叶均难以检出绿色荧光蛋白阳性细胞。结论大鼠尾静脉液压转基因技术可用于脂肪肝大鼠的肝脏转基因研究,转基因的适宜条件为:质粒溶液浓度33mg/L,注射量占大鼠体重的8.5%,注射速度为2ml/s,观察转基因效果的适宜时间是转基因后6～24h。

关键词：绿色荧光蛋白脂肪肝液压转基因技术大鼠

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