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鱼类消化道细菌及其作用的研究Ⅰ.黄鳍鲷

台湾海峡 1996年第1期15卷 32-35页

作者：周宗澄倪纯治叶德赞刘文华顾静瑜国家海洋局第三海洋研究所厦门361005

本文报道了从黄鳍鲷消化道中分离细菌的数量与组成。结果表明，好气异养细菌9．0×105～8．3×107个／g。其中含见丁质分解菌3．8×105～3．7×106个／g，弧菌1．1X10’～1．8×104个／g。共分离232株细菌。其种群组成为弧菌、不动杆菌... 详细信息

本文报道了从黄鳍鲷消化道中分离细菌的数量与组成。结果表明，好气异养细菌9．0×105～8．3×107个／g。其中含见丁质分解菌3．8×105～3．7×106个／g，弧菌1．1X10’～1．8×104个／g。共分离232株细菌。其种群组成为弧菌、不动杆菌、气单胞菌、假单胞菌、埃希氏菌、无色杆菌、节细菌和链球菌等8属。并测定其生。特性，表明该类菌对多种有机质具有强的分解能力，这些特姓有利于鱼类对营养物质的消化和吸收，促进其生长。

关键词：细菌黄鳍鲷消化道细菌鱼类

日本弓背蚁Camponotus japonicus消化道细菌组成及其多样性研究

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日本弓背蚁Camponotus japonicus消化道细菌组成及其多样性研究

作者：李晓萍西北农林科技大学

学位级别：硕士

弓背蚁属Camponotus是蚁科Formicidae第二大属,全世界已知2000多种,因为其消化道中存在特殊的内共生菌Blochmannia而成为蚁科昆虫消化道微生物研究的模式类群。关于Blochmannia的研究比较深入,内容涉及其在消化道的分布、与寄主蚂蚁的... 详细信息

弓背蚁属Camponotus是蚁科Formicidae第二大属,全世界已知2000多种,因为其消化道中存在特殊的内共生菌Blochmannia而成为蚁科昆虫消化道微生物研究的模式类群。关于Blochmannia的研究比较深入,内容涉及其在消化道的分布、与寄主蚂蚁的关系、功能和基因组特点等方面。但研究显示,昆虫肠道不仅存在初级内共生菌,而且还分布有次生内共生菌及其他肠道微生物。为了进一步更为全面地揭示日本弓背蚁消化道微生物的种类组成和多样性水平,本文在前期16S rRNA-RFLP研究的基础上,将传统的微生物分离培养法和基于16S rRNA基因的PCR-DGGE分析技术相结合,对日本弓背蚁消化道不同部位(嗉囊、中肠和后肠)及不同巢群日本弓背蚁工蚁消化道细菌的分布规律进行了研究。取得主要结果如下：1.日本弓背蚁消化道不同部位进行常规分离培养和纯化,得到5种不同形态的菌株,序列分析表明它们分别属于厚壁菌门Firmicutes的芽孢杆菌属Bacillus、类芽孢杆菌属Paenibacillus和肠球菌属Enterococcus。其中,中肠所含细菌种类相对丰富,包括芽孢杆菌属Bacillus和肠球菌属Enterococcus两个属的细菌,而嗉囊和后肠均只发现一个属的细菌,分别为芽孢杆菌属Bacillus和类芽孢杆菌属Paenibacillus。2.日本弓背蚁消化道不同部位进行PCR-DGGE变性梯度凝胶电泳,检测到12个DNA条带,序列分析显示这些细菌主要属于变形菌门Proteobacteria和厚壁菌门Firmicutes,包括Pseudomonas, Candidatus Blochmannia, Fructobacillus三个属和一个未知种类。所有DGGE条带在中肠和后肠均有分布,二者的细菌组成非常一致,仅代表Candidatus Blochmannia的两个DGGE条带在嗉囊中没有分布,其他与中肠和后肠一致。3.不同巢群日本弓背蚁消化道细菌的PCR-DGGE分析共检测到34个DNA条带,测序后得到25个可用序列,GenBank数据库的比对结果显示所检测到的细菌隶属于变形菌门Proteobacteria、厚壁菌门Firmicutes、拟杆菌门Bacteroidetes和放线菌门Actinobacteria,包括假单胞菌属Pseudomonas, Candidatus Blochmannia,乳杆菌属Lactobacillus,爱文菌属Ewingella,茎菌属Caulobacter,(?)白克氏菌属Burkholderia,节细菌属Arthrobacter,罗氏菌属Rothia,欧文氏菌属Erwinia九个属和两个未知种类。4.不同巢群日本弓背蚁消化道细菌组成分析结果表明：细菌多样性从高到低依次为蒿坪寺蚁巢、桃川镇蚁巢、黄堆镇蚁巢、杨凌蚁巢。不同巢群消化道细菌相似度均未超过60%,相似度最大的是采自桃川镇和杨凌的两个巢群,达57.14%,相似性最小的为采自蒿坪寺和杨凌的日本弓背蚁,仅为40%,其余均位于两者之间。不同巢群日本弓背蚁消化道相同部位进行比较,发现中肠相似度最大,后肠次之,最后为嗉囊。5.不同巢群日本弓背蚁消化道细菌优势种类分析表明：采自黄堆镇巢群消化道细菌优势种类为Lactobacillus属细菌,占肠道细菌总数的38.89%,其次为Pseudomonas和Candidatus Blochmannia属细菌,各占16.67%;采自蒿坪寺巢群消化道细菌优势种类为Pseudomonas和Candidatus Blochmannia属细菌,各占21.43%,其次为Arthrobacter属细菌,占14.29%;采自桃川镇巢群消化道细菌优势种类为Pseudomonas和(Candidatus Blochmannia属细菌,各占25%,其次为Lactobacillus属细菌,占16.67%;采自杨凌的日本弓背蚁消化道细菌优势种类为Pseudomonas和Candidatus Blochmannia属细菌,各占30%。以上结果表明,日本弓背蚁消化道内细菌多样性相对丰富,除特有内共生菌Candidatus Blochmannia外,还含有Pseudomonas等多个属的细菌;同一巢群日本弓背蚁消化道不同部分细菌多样性存在差异;不同巢群日本弓背蚁消化道细菌的多样性也存在差异。

关键词：日本弓背蚁消化道细菌细菌分离培养 16S rRNA DGGE

日本弓背蚁室内饲养种群消化道细菌组成及其多样性研究

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日本弓背蚁室内饲养种群消化道细菌组成及其多样性研究

作者：朱卓琳西北农林科技大学

学位级别：硕士

蚂蚁是地球上分布最广泛、数量最多的社会性昆虫,与许多微生物建立了密切的联系,微生物在其食性进化和种群繁衍方面发挥了重要的作用。弓背蚁Camponotus是蚁科昆虫中物种最丰富、进化最成功的种属之一,其体内普遍存在专性内共生菌Blochm... 详细信息

蚂蚁是地球上分布最广泛、数量最多的社会性昆虫,与许多微生物建立了密切的联系,微生物在其食性进化和种群繁衍方面发挥了重要的作用。弓背蚁Camponotus是蚁科昆虫中物种最丰富、进化最成功的种属之一,其体内普遍存在专性内共生菌Blochmannia可以为寄主蚂蚁提供含氮类物质(主要是氨基酸、维生素和固醇类物质),激发群体的免疫反应等。近期的研究发现弓背蚁属蚂蚁消化道不仅存在专性内共生菌Blochmannia,而且还分布有其他肠道微生物。为了进一步揭示食物和生存环境对弓背蚁属蚂蚁肠道微生物的影响,本文采用T-RFLP和DGGE相结合的方法比较了日本弓背蚁室内饲养巢群和野外巢群不同发育阶段消化道细菌的组成及其多样性水平,取得主要研究结果如下:1.室内饲养巢群不同发育阶段的T-RFLP分析结果表明:幼虫、蛹和工蚁消化道细菌组成和多样性指数没有显著性差异(p>0.05),相比较而言,幼虫期的多样性指数最高,蛹期的最低;肠道微生物组成的相似性分析显示幼虫与工蚁的相似性系数为0.53,工蚁和蛹的相似性系数为0.51,幼虫和蛹的相似性系数为0.36;PCA主成分分析和聚类分析亦显示幼虫、蛹和工蚁的肠道细菌群落结构存在一定差异,但差异不显著,它们之间没有形成各自独立的细菌群落。2.利用PCR-DGGE分析方法从室内饲养巢群的不同发育阶段(卵、幼虫、蛹、工蚁和蚁后)消化道中共检测到33个DNA条带,序列比对分析显示这些细菌主要隶属于变形菌门Proteobacteria、厚壁菌门Firmicutes和泉古菌门Crenarchaeota11个属的细菌和2个未知种类。DGGE条带的序列分析结果显示卵和蚁后消化道细菌多样性指数最高,含有7个属的细菌,幼虫和蛹各含有5个属的细菌,工蚁中仅含有4个属的细菌;工蚁与幼虫、工蚁与蛹细菌组成的相似性最大,相似性系数达0.89,蚁后与幼虫的相似性系数最小,仅为0.57。3.利用PCR-DGGE分析方法从野外巢群的不同发育阶段(卵、幼虫、蛹、大工蚁、小工蚁、雄蚁和蚁后)消化道细菌中共检测到52个DNA条带,在GenBank数据库比对结果显示所检测的细菌隶属于变形菌门Proteobacteria、厚壁菌门Firmicutes和放线菌门Actinobacteria 11个属,以及1个Acetobacteraceae科和5个未知种类。不同发育阶段检测到的细菌种类存在明显差异,从卵、幼虫、蛹、大工蚁、小工蚁、雄蚁和蚁后中分别检测到5个、8个、4个、2个、3个、6个和3个属的细菌。4.室内、野外巢群不同发育阶段消化道细菌种类组成比较分析表明:野外巢群的卵、蛹、工蚁和蚁后中消化道细菌多样性较室内巢群的低,幼虫期消化道细菌多样性较室内巢群的高;室内、野外巢群不同发育阶段细菌组成差异较大,只共同含有Candidatus Blochmannia和Wolbachia两个属的细菌,其余细菌种类组成差异较大,这可能是由于食物和环境条件的变化引起的。

关键词：日本弓背蚁消化道细菌 T-RFLP DGGE

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犬瘟热发病期消化道细菌分离鉴定

上海畜牧兽医通讯 2015年第2期 63-65页

作者：张海燕李建波张斌恺叶妍琳代飞燕杨玉艾肖啸云南农业大学动物科学技术学院云南昆明650201 大理州永平县畜牧工作站云南大理671000

为了更好地为胃肠型犬瘟热对症治疗提供更为确切的临床指导,本研究采集了昆明地区云南农业大学动物医院10份胃肠型犬瘟热粪便,进行细菌分离培养,鉴定出粪便中普遍存在的2种菌,分别为大肠埃希氏菌、甲型副伤寒沙门氏菌。药敏实验结果表明... 详细信息

为了更好地为胃肠型犬瘟热对症治疗提供更为确切的临床指导,本研究采集了昆明地区云南农业大学动物医院10份胃肠型犬瘟热粪便,进行细菌分离培养,鉴定出粪便中普遍存在的2种菌,分别为大肠埃希氏菌、甲型副伤寒沙门氏菌。药敏实验结果表明:混合感染菌对新生霉素、链霉素敏感,而对阿莫西林、氯霉素、头孢氨苄、青霉素等无效。

关键词：犬瘟热消化道细菌细菌分离鉴定药敏试验

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食用蜗牛消化道细菌的分离、培养及鉴定

上海畜牧兽医通讯 2016年第1期 52-54页

作者：田锦忠张海燕叶妍琳王江豪王广龙付偲杨子江肖啸云南省临沧市沧源县动物疫病预防控制中心云南沧源677408 云南农业大学动物科学技术学院云南昆明650201 云南农业大学动物医院云南昆明650201

蜗牛是陆地上最常见的软体动物之一,具有很高的药用和食用价值。蜗牛入药具有清热、解毒、消肿、平喘等功效。蜗牛也被誉为高蛋白、低脂肪的上等食品。为使人们放心食用蜗牛,笔者从昆明某食用蜗牛养殖场的500只法国蜗牛中随机采集10只... 详细信息

蜗牛是陆地上最常见的软体动物之一,具有很高的药用和食用价值。蜗牛入药具有清热、解毒、消肿、平喘等功效。蜗牛也被誉为高蛋白、低脂肪的上等食品。为使人们放心食用蜗牛,笔者从昆明某食用蜗牛养殖场的500只法国蜗牛中随机采集10只健康蜗牛消化道的分泌物,对其进行细菌培养、菌落形态学观察、涂片镜检、生化鉴定,结果分离到大肠杆菌30株,未见其他致病菌。

关键词：食用蜗牛消化道细菌分离培养鉴定

野生东亚钳蝎消化道可培养细菌的分离鉴定、耐药性及产消化酶活性

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中国微生态学杂志 2021年第2期33卷 144-148,153页

作者：李欣刘欣徐丛武张忠万晴董起钰何志伟刘锐山东第一医科大学(山东省医学科学院)生命科学学院山东泰安271016 山东省新发传染病溯源与防控协同创新中心山东泰安271016

目的分离东亚钳蝎消化道中的可培养细菌,并研究其产消化酶活性和耐药性,探讨消化道细菌对东亚钳蝎消化食物的影响。方法野生东亚钳蝎采用传统细菌分离培养方法分离其消化道内可培养细菌,利用16S rRNA序列进行细菌的分子鉴定;利用平板透... 详细信息

目的分离东亚钳蝎消化道中的可培养细菌,并研究其产消化酶活性和耐药性,探讨消化道细菌对东亚钳蝎消化食物的影响。方法野生东亚钳蝎采用传统细菌分离培养方法分离其消化道内可培养细菌,利用16S rRNA序列进行细菌的分子鉴定;利用平板透明圈法测定可培养细菌产淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和纤维素酶等消化酶的活性;采用药敏纸片扩散法进行消化道可培养细菌的药敏试验。结果在东亚钳蝎消化道中共分离到4个属10种细菌,其中芽胞杆菌属7种,分别为蛋白水解芽胞杆菌、解淀粉芽胞杆菌、巨大芽胞杆菌、枯草芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌、婴儿芽胞杆菌和长形赖氨酸芽胞杆菌;葡萄球菌属、纤维微菌属和短波单胞菌属各1株,分别为松鼠葡萄球菌、纤维化纤维微细菌和泡囊短波单胞菌。对10种细菌的产消化酶活性分析表明,8种细菌有产消化酶活性,占细菌总数的80%;5种细菌有产蛋白酶活性,分别为蛋白水解芽胞杆菌、枯草芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌、松鼠葡萄球菌和纤维化纤维微细菌;7种细菌有产淀粉酶活性,分别为蛋白水解芽胞杆菌、解淀粉芽胞杆菌、巨大芽胞杆菌、枯草芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌、松鼠葡萄球菌和婴儿芽胞杆菌;未筛选到产纤维素酶和脂肪酶活性的细菌;蛋白水解芽胞杆菌、枯草芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌和松鼠葡萄球菌可同时产2种消化酶。在药敏试验中,8种细菌对多粘菌素B耐药,5种细菌对四环素耐药,3种细菌对万古霉素耐药。结论东亚钳蝎消化道中可培养细菌的组成相对单一,多数细菌有分泌淀粉酶和蛋白酶的功能,说明东亚钳蝎消化道中的细菌可能有协助其进行食物消化的功能。消化道细菌对抗生素多表现为敏感,推测其生存环境中抗生素的污染较少,同时在对东亚钳蝎人工饲养的场所进行消毒时,要谨慎选择抗生素,防止抗生素使用不当致使东亚钳蝎肠道菌群紊乱引起疾病。

关键词：野生东亚钳蝎消化道细菌产消化酶细菌耐药性

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不典型重症联合免疫缺陷病的临床研究进展

中华儿科杂志 2014年第12期52卷 906-909页

作者：杜鸿强安云飞赵晓东重庆医科大学附属儿童医院肾脏免疫科 400014

重症联合免疫缺陷病（severe combined immunodeficiency,SCID）是原发性免疫缺陷病中最严重的一型,其致病基因参与淋巴细胞的发育和功能.患儿常表现为反复或持续的呼吸道和消化道细菌、病毒及机会致病菌的感染,同时可伴母源性T细胞的... 详细信息

重症联合免疫缺陷病（severe combined immunodeficiency,SCID）是原发性免疫缺陷病中最严重的一型,其致病基因参与淋巴细胞的发育和功能.患儿常表现为反复或持续的呼吸道和消化道细菌、病毒及机会致病菌的感染,同时可伴母源性T细胞的植入常导致移植物抗宿主病（graft versus host disease,GvHD）,如皮肤红色斑疹,溶血性贫血等.其致病基因有20多种,这些基因突变大多导致上述典型SCID表现[1].

关键词：重症联合免疫缺陷病 immunodeficiency 临床研究原发性免疫缺陷病移植物抗宿主病致病基因消化道细菌机会致病菌

铜石龙子肠道细菌数量的变化与免疫机能的关系

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东北农业大学学报 2011年第9期42卷 111-115页

作者：朱双杰孟先科张莹陈熙滁州学院化学与生命科学系滁州安徽239000

研究肠道细菌数量的变化与免疫机能的关系。以2%的大黄和板蓝根喂饮铜石龙子(Sphenomorphus indicus),在第1、2、4、7、14、21和28天检测铜石龙子肠道细菌数量的变化、抗体效价、血液溶菌酶活性和吞噬细胞的吞噬能力的变化。结果与结论... 详细信息

研究肠道细菌数量的变化与免疫机能的关系。以2%的大黄和板蓝根喂饮铜石龙子(Sphenomorphus indicus),在第1、2、4、7、14、21和28天检测铜石龙子肠道细菌数量的变化、抗体效价、血液溶菌酶活性和吞噬细胞的吞噬能力的变化。结果与结论:肠道细菌数量第2天显著高于对照组(P道细菌数量的变化趋势和溶菌酶活性及吞噬细胞吞噬能力变化趋势之间不同,肠道细菌数量的变化对免疫机能无影响。

关键词：消化道细菌免疫力大黄板蓝根铜石龙子

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贵州地方品种鸡消化道菌群结构分析

贵州地方品种鸡消化道菌群结构分析

作者：徐茂文贵州大学

学位级别：硕士

倒毛鸡是我国优质的地方品种鸡,贵州部分山区以农村散养形式少数存在。由于倒毛鸡的羽毛向前翻卷,使其保温效果较差,导致倒毛鸡极易受天气变化的影响,出现易感染疾病、存活率低下和生长速度较慢等现象,不易实现规模化饲养。为提高倒毛... 详细信息

倒毛鸡是我国优质的地方品种鸡,贵州部分山区以农村散养形式少数存在。由于倒毛鸡的羽毛向前翻卷,使其保温效果较差,导致倒毛鸡极易受天气变化的影响,出现易感染疾病、存活率低下和生长速度较慢等现象,不易实现规模化饲养。为提高倒毛鸡的饲养效益,本研究开展了倒毛鸡消化道细菌菌群结构的研究,以及了解倒毛鸡在生长过程中消化道细菌菌群结构的变化动态,为提高倒毛鸡的饲养效益和扩大倒毛鸡的规模饲养提供一些参考依据。1.基于16SrDNA基因定量PCR检测方法建立:提取DH5α大肠杆菌全基因组,测定其浓度(1.29×10～7copies/μL)后,用灭菌双蒸水进行梯度稀释,以基于16SrDNA的细菌通用引物进行PCR扩增,以扩增产物电泳条带光密度值为判定指标,判定定量PCR检测方法的建立成功与否,结果显示:梯度稀释模板量与扩增条带光密度值存在良好的线性关系,其表达式为y=8.7562×-26.838(Y≤29.78),相关系数R为0.996,且具有良好的重复性和敏感性,可检测到浓度为166copies/μL的细菌模板。2.不同日龄倒毛鸡消化道菌群含量变化分析:于倒毛鸡5d、10d、20d、40d、60d、90d和120d时间段时,分别宰杀5～10只,收集嗉囊、腺胃、肌胃十二指肠、空肠、回肠、盲肠和直肠的适量内容物,采用上述PCR方法进行细菌含量分析,结果:随着日龄的增长,倒毛鸡消化道不同部位内容物细菌含量呈上升趋势,但到20～40日龄后消化道细菌含量变化不大;总体上,嗉囊、腺胃和肌胃内容物细菌数量最多,十二指肠、空肠和回肠内容物中细菌数量较少。3.不同日龄倒毛鸡消化道菌群结构分析:于倒毛鸡5d、10d、20d、40d、60d、90d和120d时间段时,分别宰杀5～10只,收集嗉囊、腺胃、肌胃十二指肠、空肠、回肠、盲肠和直肠的适量内容物,采用PCR-DGGE方法进行消化道菌群结构分析,结果:共检测到132个条带,回收条带进行测序并与GenBank相应序列比对发现41条不同序列条带,分属于变形菌门、厚壁菌门、放线菌门、拟杆菌门、鞭毛菌亚门、接合菌亚门和异常球菌-栖热菌门,其中包含了乳杆菌属、芽孢杆菌属、双歧杆菌属等25个菌属。其中,5～20日龄时间段倒毛鸡消化道内容物菌属以乳杆菌属、优杆菌属和葡萄球菌属为主,40～90日龄段以乳杆菌属、优杆菌属、分枝杆菌属和葡萄球菌属为主,而120日龄段以分枝杆菌属和葡萄球菌属为主。

关键词：倒毛鸡消化道细菌 16SrDNA DGGE