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磷酸化胞外信号调节激酶在小鼠海马发育过程中的表达及其意义

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吉林大学学报（医学版） 2018年第5期44卷 979-982页

作者：王天月崔晓燕吴骁王丹锦州医科大学附属第三医院血液科辽宁锦州121001 河北省药品检验研究院药理毒理室河北石家庄050011 辽宁何氏医学院实验动物中心辽宁沈阳110163 锦州医科大学人体解剖与组织胚胎学教研室辽宁锦州121001

目的:观察磷酸化胞外信号调节激酶(pERK)在胚龄(E)18d以及生后不同日龄(P)小鼠海马不同阶段的表达,探讨其在海马发育中的可能作用。方法:分别取E 18d和P 1、3、7、14、21和28d小鼠的海马组织,每个时间点均作为观察组,采用免疫组织化学... 详细信息

目的:观察磷酸化胞外信号调节激酶(pERK)在胚龄(E)18d以及生后不同日龄(P)小鼠海马不同阶段的表达,探讨其在海马发育中的可能作用。方法:分别取E 18d和P 1、3、7、14、21和28d小鼠的海马组织,每个时间点均作为观察组,采用免疫组织化学和免疫印迹法、结合图像分析技术检测各时间点海马组织中pERK蛋白表达水平。结果:免疫组织化学检测,pERK蛋白主要在海马齿状回(DG)颗粒细胞层和阿蒙角(CA)锥体细胞层神经元的细胞核中表达。E 18d,海马DG和CA区pERK表达染色浅,排列稀疏,表达水平很低;E 18d^P 7d,pERK染色逐渐加深、密集,pERK表达水平逐渐升高,与其他6个时间点比较,P 7d时pERK表达水平最高(F=34.537,P0.05)。免疫印迹检测,各时间点均有pERK表达,E 18d^P 7d,pERK表达水平逐渐升高,与其他6个时间点比较,P 7d时pERK表达水平最高(F=33.856,P0.05)。结论:小鼠生后早期阶段,即E 18d^P 7d,海马发育明显增速,pERK表达水平也随之逐渐升高,P 7d达高峰,随后逐渐下降直至稳定,pERK参与小鼠海马发育过程中的细胞增殖。

关键词：胞外信号调节激酶海马发育昆明种小鼠免疫组织化学免疫印迹法

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新型导向分子与海马内联系的发育

生理科学进展 2002年第4期33卷 339-342页

作者：范晓棠蔡文琴第三军医大学组织学与胚胎学教研室重庆400038

发育轴突向正确的靶位生长是建立精确神经环路的基础。海马内主要的传入通路是内嗅皮层-海马通路、兴奋性合缝/联合系统和中隔投射,它们以层状形式终止于齿回与Ammon角的靶神经元。在海马内部,齿回与CA3区的苔癣纤维,CA3区与CA1区之间... 详细信息

发育轴突向正确的靶位生长是建立精确神经环路的基础。海马内主要的传入通路是内嗅皮层-海马通路、兴奋性合缝/联合系统和中隔投射,它们以层状形式终止于齿回与Ammon角的靶神经元。在海马内部,齿回与CA3区的苔癣纤维,CA3区与CA1区之间均建立了特异的纤维联接系统。细胞培养测定和包括基因敲除在内的分子生物学策略研究表明,在发育过程中复杂的导向信号网络对海马内联系的形成有重要调节作用。分泌性Ⅲ型semaphorins、netrin 1和slit蛋白及局部膜或基底锚分子如ephrin A亚家族配体,共同介导了海马内联系的发育。

关键词：新型导向分子海马内联系海马发育

小鼠海马发育过程中丝切蛋白及其磷酸化调节基因表达差异分析

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动物医学进展 2013年第7期34卷 6-11页

作者：胡新德张伟刘笙腩李玲玲宋玲珍柴学军陈树林赵善廷西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100 德国弗莱堡大学医学院解剖研究所弗莱堡79104

论文旨在研究小鼠海马发育不同时期丝切蛋白及其磷酸化状态调节基因的表达量变化模式,为进一步研究丝切蛋白在海马发育过程中的功能以及其活性调节奠定基础。用半定量PCR检测不同时期丝切蛋白及其磷酸化调节基因相对表达量,通过ImageJ... 详细信息

论文旨在研究小鼠海马发育不同时期丝切蛋白及其磷酸化状态调节基因的表达量变化模式,为进一步研究丝切蛋白在海马发育过程中的功能以及其活性调节奠定基础。用半定量PCR检测不同时期丝切蛋白及其磷酸化调节基因相对表达量,通过ImageJ对结果进行分析,得出丝切蛋白及其磷酸化调节基因在小鼠海马发育不同时期表达量的变化趋势。结果表明,在小鼠海马发育不同时期丝切蛋白一直处于高表达状态,随着海马发育成熟丝切蛋白的表达量呈缓慢下降趋势。在这个过程中丝切蛋白磷酸化基因表达量呈明显下降趋势,P0时期LIMK1的表达量是P14时期的5.05倍(n=3)。与此相反,随着海马的发育中丝切蛋白去磷酸化基因表达量呈明显上升趋势,在P60时期CIN的表达量约是P0时期CIN表达量的2.88倍(n=3),P14时期SSH3的表达量约是P0时期的26.5倍(n=3)。其中LIMK2、TESK1、TESK2、SSH1和SSH2在这个过程中的表达量变化不明显。以上结果表明在小鼠海马发育过程中机体主要是通过调节丝切蛋白活性以满足不同发育时期对其活性的需求,其中LIMK1、CIN和SSH3是主要的丝切蛋白活性调节因子。

关键词：海马发育丝切蛋白磷酸化表达差异

孕期尼古丁暴露对子代小鼠海马发育影响的研究

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孕期尼古丁暴露对子代小鼠海马发育影响的研究

作者：范思静长江大学

学位级别：硕士

背景:孕期尼古丁暴露（Prenatal nicotine exposure,PNE）导致子代出现行为异常,其发生机制目前尚无定论。位于大脑边缘系统的海马在学习、记忆及情绪调控中起到重要作用。目前对PNE子代海马不同发育时期不同神经细胞的影响未见系统报... 详细信息

背景:孕期尼古丁暴露（Prenatal nicotine exposure,PNE）导致子代出现行为异常,其发生机制目前尚无定论。位于大脑边缘系统的海马在学习、记忆及情绪调控中起到重要作用。目前对PNE子代海马不同发育时期不同神经细胞的影响未见系统报道。目的:探究PNE所致行为异常与子代海马不同时期的不同神经细胞变化之间的联系,以期证实PNE对子代海马发育的敏感时间窗及敏感细胞群,为探索其内在机制,解释PNE对子代行为学改变提供一定的理论依据。方法:60只C57BL/6小鼠（50只雌鼠10只雄鼠）,适应性喂养1周后,随机按雌雄比2:1合笼,查到阴栓当天计做妊娠期（Gestation,G）0天。G9天8:30和20:30分别皮下注射1.5 mg/kg尼古丁各一次,对照组给予等体积生理盐水,直至自然分娩。于出生后（Postnatal,P）1、7、14、21、90天取子代小鼠脑组织,进行HE染色、免疫组化以及高尔基染色实验,P90天前进行行为学检测。实验动物在室温、自然光环境下给予充足的食物及水,自然昼夜循环。结果:（1）与对照组相比,尼古丁组母鼠体重增长率和小鼠体重及基本体征情况无明显改变。（2）行为学实验中,与对照组相比,尼古丁组小鼠逃逸时间增加（p＜0.05,p＜0.01）,原平台所在象限探索时间减少（p＜0.01）,穿越原对侧平台次数减少（p＜0.05）,新物体识别系数下降（p＜0.05）,强迫游泳不动潜伏期缩短、不动时间增加（p＜0.05,p＜0.01）,悬尾不动时间增加（p＜0.05）,活动距离及直立次数增加（p＜0.05,p＜0.01）,理毛次数减少（p＜0.01）,蔗糖偏好系数下降（p＜0.05）。（3）海马组织HE染色显示,尼古丁组小鼠海马各亚区细胞大小、形态、排列层次正常,发育过程连续,未见明显病理性改变。（4）高尔基染色显示,与P7天相比,对照组和尼古丁组小鼠海马DG、CA1和CA3区神经元树突的复杂度随时间的增加而增加,树突发育的高峰期在P14-21天;与对照组相比,尼古丁组小鼠DG区神经元树突交点数、树突总长度在P21天下降（p＜0.05,p＜0.01）,神经元基底部二级树突树突棘密度在P7、P14、P21天下降（p＜0.05,p＜0.01）;CA1区神经元树突交点数、树突总长度在P14、P21下降（p＜0.05,p＜0.01）,神经元基底部二级树突树突棘密度P14、P21、P90天下降（p＜0.05,p＜0.01）,顶部二级树突树突棘密度P21、P90天下降（p＜0.05,p＜0.01）;CA3区神经元树突交点数在P21天下降（p＜0.05）,神经元树突总长度在P14、P21天下降（p＜0.01）,神经元基底部二级树突树突棘密度在P7、P14、P21天下降（p＜0.05,p＜0.01）。（5）与P1天相比,对照组和尼古丁组小鼠海马中DG、CA1和CA3区中增殖细胞标志蛋白Ki67随时间的增加而降低（p＜0.01）;与对照组相比,尼古丁组小鼠海马DG区Ki67阳性细胞数量在P1、P7天增加（p＜0.01）,P14、P21、P90 天减少（p＜0.05,p＜0.01）;CA1 区 Ki67 阳性细胞数量在 P1、P7 天增加（p＜0.05,p＜0.01）,在 P14 天减少（p＜0.05）;CA3 区 Ki67 阳性细胞数量在P7天增加（p＜0.01）,P14天减少（p＜0.01）。（6）与P1天相比,对照组小鼠海马中DG、CA1和CA3区神经元前体细胞标志蛋白DCX随时间的增加先增加后降低（p＜0.05,p＜0.01）,增殖高峰期在P7天;与对照组相比,尼古丁组小鼠海马DG区DCX平均光密度值在P1天增加（p＜0.01）,P7、P14、P21天减少（p＜0.01）,P90天DG区DCX 阳性细胞数量减少（p＜0.01）;CA1和CA3区DCX平均光密度值在P1天增加（p＜0.05,p＜0.01）,P14天减少（p＜0.05,p＜0.01）。（7）与P1天相比,对照组小鼠海马神经元标志蛋白NeuN随时间的增加在DG区增加（p＜0.05,p＜0.01）、CA1区增加后降低再增加（p＜0.01）、CA3区下降（p＜0.01）。与对照组相比,尼古丁组小鼠海马DG区NeuN阳性细胞数量在P1、P7天增加（p＜0.05,p＜0.01）,P14、P21天减少（p＜0.05,p＜0.01）;CA1和CA3区NeuN 阳性细胞数量在P1、P7天增加（p＜0.01）,P14天减少（p＜0.05,p＜0.01）。（8）与P1天相比,对照组和尼古丁组小鼠海马中间神经元标志蛋白CB随时间的增加在DG区增加（p＜0.05,p＜0.01）、CA1和CA3区降低（p＜0.05,p＜0.01）。与对照组相比,尼古丁组小鼠海马DG区CB阳性细胞数量在P7天增加（p＜0.01）,P14、P21、P90天减少（p＜0.05,p＜0.01）;

关键词：海马发育孕期尼古丁暴露行为异常神经元神经胶质细胞

双峰驼海马发育及其NGF、BDNF和SYN1的表达

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双峰驼海马发育及其NGF、BDNF和SYN1的表达

作者：张圆兰州大学

学位级别：硕士

双峰驼是一种生活在戈壁、荒漠和半荒漠地区的大型哺乳动物,其嗅觉灵敏并且有很好的方向感。双峰驼这种对方向强烈的辨识和认知特性与它在生长发育过程中学习记忆的形成密切相关。众所周知,海马在学习记忆中起着重要的作用,因此,研究双... 详细信息

双峰驼是一种生活在戈壁、荒漠和半荒漠地区的大型哺乳动物,其嗅觉灵敏并且有很好的方向感。双峰驼这种对方向强烈的辨识和认知特性与它在生长发育过程中学习记忆的形成密切相关。众所周知,海马在学习记忆中起着重要的作用,因此,研究双峰驼海马发育过程中神经元的形态和超微结构变化及相关蛋白的表达,有助于揭示双峰驼较强的方向辨识和认知能力形成的原因。目的：研究双峰驼海马发育过程中两种主要神经元形态学和超微结构的变化及海马不同区域内NGF、BDNF和SYN1的表达情况。方法：应用常规石蜡切片HE染色、Nissl染色、免疫组织化学和透射电镜等研究方法,对胎驼、青年双峰驼和成年双峰驼海马CA1-CA3区锥体细胞、DG颗粒细胞的形态学和超微结构的变化进行研究,并观察了NGF、BDNF和SYN1的表达变化。结果：Nissl染色结果显示,随着双峰驼发育,海马CA1-CA3区锥体细胞层和颗粒细胞层的宽度从(38.87±7.05～53.17±7.46)μm到(58.27±8.30～67.60±13.97)μm,显著增加(P海马锥体细胞中NGF和BDNF的表达量显著高于胎驼(P海马的发育逐渐增加;从胎驼到青年双峰驼,SYN1在海马锥体细胞和颗粒细胞中的表达量明显增加(P发育到成年双峰驼,SYN1的表达量增加较少。透射电镜结果表明,青年双峰驼海马CA1区和CA3区的突触数目较胎驼明显增多且结构更完整,成年双峰驼与青年双峰驼相比,海马CA1和CA3区的突触数目变化不大;青年双峰驼海马CA1区和CA3区的线粒体数目最多,成年双峰驼海马CA1和CA3区的线粒体数目与青年双峰驼相比较少。结论：从胎驼到成年双峰驼,海马中的主要神经元不断迁移、成熟,从体积小且少有突起和分支的神经元发育成为体积较大、具有明显形态和功能的神经元。NGF和BDNF在成年双峰驼海马神经元中表达量最高,表明NGF和BDNF可调节已分化的神经元,使其形态和功能发生改变以促进双峰驼海马发育过程中学习记忆功能的逐步完善。SYNl的表达情况和海马神经元超微结构观察到的结果相一致,表明双峰驼在青年期,海马中的突触数目最多,所需能量也最多。

关键词：双峰驼海马发育锥体细胞颗粒细胞

树突状细胞来源的锌指蛋白DPZF基因缺陷小鼠海马区发育异常

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树突状细胞来源的锌指蛋白DPZF基因缺陷小鼠海马区发育异常

小鼠海马发育过程中Cofilin及其磷酸化状态调节基因表达差异分析

中国细胞生物学学会第九次会员代表大会暨青年学术大会

作者：谢志芳麻献华姬文力张海向正华胡以平章卫平第二军医大学基层医学部

小鼠大脑的海马区对学习与记忆非常重要。海马 CA 皮质区由大的锥形神经元紧密成层排列而成,而齿状回(dentate gyrus,DG)由颗粒神经细胞紧密成层排列而成。DPZF(dendritic cell-derived POZ zinc finger protein)是最早从树突状细胞中... 详细信息

小鼠大脑的海马区对学习与记忆非常重要。海马 CA 皮质区由大的锥形神经元紧密成层排列而成,而齿状回(dentate gyrus,DG)由颗粒神经细胞紧密成层排列而成。DPZF(dendritic cell-derived POZ zinc finger protein)是最早从树突状细胞中克隆到的一种的锌指蛋白。在神经系统中,从 E16．5天开始 DPZF 主要在的

关键词：转录因子海马发育基因打靶

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小鼠海马发育过程中Cofilin及其磷酸化状态调节基因表达差异分析

中国神经科学学会第十届全国学术会议

作者：胡新德张伟刘笙腩李玲玲宋玲珍柴学军陈树林赵善廷西北农林科技大学动物医学院德国弗莱堡大学医学院解剖研究所

Cofilin是一种肌动蛋白结合分子,通过调节肌动蛋白的聚合与解聚,而影响细胞骨架的稳定性。丝切蛋白的活性受其第三位氨基酸磷酸化状态的调节,非磷酸化状态的Cofilin具有切割肌动蛋白的功能,而磷酸化的Cofilin则失去切割肌动蛋白的功能... 详细信息

Cofilin是一种肌动蛋白结合分子,通过调节肌动蛋白的聚合与解聚,而影响细胞骨架的稳定性。丝切蛋白的活性受其第三位氨基酸磷酸化状态的调节,非磷酸化状态的Cofilin具有切割肌动蛋白的功能,而磷酸化的Cofilin则失去切割肌动蛋白的功能。目前的研究表明,LIMK1、LIMK2、TESK1和TESK2能使Cofilin磷酸化,而SSH1、SSH2、SSH3和CIN则能使Cofilin去磷酸化。本文旨在研究小鼠海马发育不同时期Cofilin及其磷酸化状态调节基因的表达量变化模式,为进一步研究Cofilin在海马发育过程中的功能以及其活性调节奠定基础。我们通过半定量PCR的方法检测不同时期Cofilin及其磷酸化调节基因相对表达量通过ImageJ对结果进行分析,得出Cofilin及其磷酸化调节基因在小鼠海马发育不同时期表达量的变化趋势。结果表明,在小鼠海马发育不同时期Cofilin一直处于高表达状态,随着海马发育成熟Cofilin的表达量略有下降。在这个过程中Cofilin磷酸化基因表达量呈明显下降趋势,P0时期LIMK1的表达量是P14时期的5.05倍(n=3)。与此相反,随着海马的发育Cofilin去磷酸化基因表达量呈明显上升趋势,在P60时期CIN的表达量约是P0时期CIN表达量的2 88倍(n=3),P14时期SSH3的表达量约是P0时期的25.5倍(n=3)。而LIMK2,TESK1,TESK2,SSH1和SSH2在这个过程中的表达量变化不明显。以上结果表明在小鼠海马发育过程中Cofilin的表达维持在比较高的水平,随着发育机体通过上调Cofilin去磷酸化基因的表达和下调Cofilin磷酸化基因的表达使Cofilin的活性逐渐提高,其中LIMK1,CIN和SSH3是主要的Cofilin活性调节因子。

关键词：海马发育 Cofilin 磷酸化表达差异

来源： cnki会议评论

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人胚胎脑海马发育的形态学研究

中国优生与遗传杂志 1998年第4期6卷 100-101页

作者：张兵王先荣兰州医学院组胚教研室

本文采用形态学光镜技术对不同胎龄组（４－１０月，每组５例）水囊引产胎儿的海马中段神经细胞的发育状况进行了观察、测量和统计分析。结果显示：锥体层神经细胞密度随胎龄增长呈非直线型下降，尤以６月龄组下降最为明显；锥体层神经... 详细信息

本文采用形态学光镜技术对不同胎龄组（４－１０月，每组５例）水囊引产胎儿的海马中段神经细胞的发育状况进行了观察、测量和统计分析。结果显示：锥体层神经细胞密度随胎龄增长呈非直线型下降，尤以６月龄组下降最为明显；锥体层神经细胞的体积随胎龄增长而呈非直线性增加，尤以８月胎龄组增长最为明显；锥体层胶质细胞密度随胎龄增长也呈上升趋势，增加最快的为６月胎龄组。

关键词：胚胎发育海马发育形态学神经元

TRPC6在出生后小鼠肾皮质和海马发育中的表达

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天津医药 2013年第4期41卷 333-333页

作者：许蓬娟杨卓

TRPC6，作为瞬时受体电位阳离子通道（TRPC）家族的成员之一，由于其与疾病的密切关系，目前在国内外的研究中备受关注。在大脑和肾脏中，TRPC6也参与了许多重要的生理过程。此项研究探讨了TRPC6在出生后小鼠肾皮质和海马早期发育过程... 详细信息

TRPC6，作为瞬时受体电位阳离子通道（TRPC）家族的成员之一，由于其与疾病的密切关系，目前在国内外的研究中备受关注。在大脑和肾脏中，TRPC6也参与了许多重要的生理过程。此项研究探讨了TRPC6在出生后小鼠肾皮质和海马早期发育过程中的表达及作用。研究通过免疫组织化学和免疫印迹的方法检测了TRPC6在出生后1、3、5、7、14、21、28以及49d（P1，P3，P5，P7，P14，P21，P28和P49）鼠肾皮质和海马的表达。结果表明，TRPC6在小鼠海马各区域都有表达而且表达量随出生后日龄的增加而增加，其中表达量的显着增加出现在P7和P14之间。同时，在肾小球和肾小管中也发现了TRPC6的表达，

关键词：海马发育肾皮质小鼠生后免疫组织化学阳离子通道生理过程发育过程