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副溶血弧菌耐热直接溶血毒素抑制人肺腺癌细胞活性的研究

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中国人兽共患病学报 2019年第1期35卷 54-58,65页

作者：马燕杨靖亚李诗怡喻文娟上海海洋大学食品学院上海201306 上海海洋大学上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心上海201306 农业部水产品贮藏保鲜质量安全风险评估试验室上海201306 上海海洋大学水产与生命学院上海201306

目的海洋细菌毒素抗肿瘤是近年来兴起的用于癌症治疗的新思路。本文旨在研究耐热直接溶血毒素(TDH)对人肺腺癌细胞SPC-A-1细胞的抑制作用。方法利用DEAE-纤维素、DEAE-Sephadex A-50、葡聚糖G-75层析的方法,从海洋细菌-副溶血弧菌ATCC33... 详细信息

目的海洋细菌毒素抗肿瘤是近年来兴起的用于癌症治疗的新思路。本文旨在研究耐热直接溶血毒素(TDH)对人肺腺癌细胞SPC-A-1细胞的抑制作用。方法利用DEAE-纤维素、DEAE-Sephadex A-50、葡聚糖G-75层析的方法,从海洋细菌-副溶血弧菌ATCC33846的代谢物中分离纯化得到纯度较高的耐热直接溶血毒素(TDH)。通过MTT法、细胞划痕试验、凋亡试验、caspase-3活性试验比较TDH作用于不同细胞的半抑制剂浓度IC50,研究了TDH对人肺腺癌细胞SPC-A-1细胞的作用。结果人结肠上皮细胞NCM460、人肝成纤维细胞LO2、人肺腺癌细胞SPC-A-1在TDH处理24h之后,细胞的半抑制剂浓度IC50分别为151μg/mL、118μg/mL和6.7μg/mL,正常细胞的IC50高出肺腺癌细胞近20倍。在低于5μg/mL浓度下,TDH能剂量依赖性抑制SPC-A-1细胞的生长、增殖和迁移能力。流式细胞法和荧光试剂检测表明:5μg/mL的TDH能诱导33%的SPC-A-1细胞发生早期凋亡,并激活caspase-3。结论 TDH可能通过激活caspase-3途径诱导细胞凋亡,从而抑制SPC-A-1细胞的生长和增殖。

关键词：海洋毒素耐热直接溶血毒素抗肿瘤

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前景诱人的海洋生物活性物质

生物学通报 1998年第3期33卷 8-9页

作者：杨洪宁黔冀山东省烟台大学应用化学系

海洋与陆地生态环境的截然不同，造就了生活在海洋的生物之间具有密切的生态关系，化学信息和化学防御机制往往起着重要作用。因此，海洋生物中相当普遍地存在着具有某些特殊作用的生物活性物质。自６０年代以来，美、日、法等国家相继... 详细信息

海洋与陆地生态环境的截然不同，造就了生活在海洋的生物之间具有密切的生态关系，化学信息和化学防御机制往往起着重要作用。因此，海洋生物中相当普遍地存在着具有某些特殊作用的生物活性物质。自６０年代以来，美、日、法等国家相继建立了一批高水平的研究机构，广泛开...

关键词：海洋毒素药用活性物质海洋活性物质海洋生物

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生物活性海洋天然产物的研究动态

化学进展 1990年第2期2卷 26-48页

作者：吴厚铭中国科学院上海有机化学研究所

海洋生物是具有各种特异生理活性和新颖化学结构的代谢产物的宝库。自1969年Weinheimer从加勒比海的柳珊瑚中发现丰富的前列腺素以来,海洋天然产物的研究一直受到世界各国的高度重视。从海洋生物中寻求生物活性天然产物的研究取得了飞... 详细信息

海洋生物是具有各种特异生理活性和新颖化学结构的代谢产物的宝库。自1969年Weinheimer从加勒比海的柳珊瑚中发现丰富的前列腺素以来,海洋天然产物的研究一直受到世界各国的高度重视。从海洋生物中寻求生物活性天然产物的研究取得了飞速的发展。主要的研究领域可以分为以下三个方面:

关键词：海洋天然产物生物活性柳珊瑚生理活性大环内醋海洋毒素前列腺素化学结构化合物结构代谢产物

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基于催化氧化还原反应的比色法的构建与应用

基于催化氧化还原反应的比色法的构建与应用

作者：王涵中国科学院大学(中国科学院烟台海岸带研究所)

学位级别：硕士

随着社会经济的迅猛发展,环境污染问题也愈发严重,尤其是水体污染备受关注。在海水等水体中的有机污染物、海洋毒素等,尽管含量较低,但已经给水生生物和人类的生存发展造成较大危害。因此,发展快速、简便、灵敏度高的分析方法来检测水... 详细信息

随着社会经济的迅猛发展,环境污染问题也愈发严重,尤其是水体污染备受关注。在海水等水体中的有机污染物、海洋毒素等,尽管含量较低,但已经给水生生物和人类的生存发展造成较大危害。因此,发展快速、简便、灵敏度高的分析方法来检测水体中的污染物、海洋毒素等就尤为重要。比色法(Colorimetry),通过读取颜色的吸光度值即可推算出待测物质的浓度,从而进行定量,具有简便、快速、低成本等优点,广泛用于检测重金属、有机污染物等。酶联免疫法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA),是一种标记物为酶的免疫分析技术,兼具抗原-抗体反应的特异性与酶的高效催化特点,大部分通过比色法来定量抗原或抗体,常用于海洋毒素、肿瘤标志物等物质的检测。本文在经典比色分析方法的基础上,引入“催化氧化还原反应”原理,构建了新型比色分析平台,无需复杂的实验步骤,通过循环扩增显著提高了比色法及ELISA的灵敏度,以达到海水等水体中对氨基苯酚(4-Aminophenol,4-AP)、海洋毒素、5-硝基-8-羟基喹啉(5-Nitro-8-Hydroxyquinoline,5-NQ)快速、简便、高灵敏、稳定、低成本检测的目的。主要研究内容如下:1.在经典的铁-邻菲啰啉显色反应的基础上,引入“催化氧化还原反应”原理,构建了一种简单、快速、高灵敏检测水样中4-AP的比色方法。4-AP将无色的三价铁-邻菲啰啉络合物(Fe(Phen))还原至红色的二价铁-邻菲啰啉络合物(Fe(Phen)),而其本身被氧化为对氨基苯醌,它随后被还原剂三(2-羧乙基)膦(Tris(2-Carboxyethyl)Phosphine,TCEP)还原为4-AP,后者再次还原三价铁络合物,形成氧化还原循环,从而显著提高了传统比色法的灵敏度。在最优条件下,4-AP在0.1–1.2μM之间具有良好的线性范围,检出限为0.03μM,能够通过肉眼观察到的浓度低至0.1μM。该方法在海水水样中的加标回收率为88.0–101.0%,在湖水、河水、井水和桶装水等淡水水样中的回收率在84.0–101.0%之间,几乎不受实际水体中盐度、阴离子、溶解氧、浮游生物、重金属等因素的影响,实现了海水水样和淡水水样中4-AP的快速、简便、高灵敏、低成本检测。2.在经典铁-红菲啰啉络合物显色反应的基础上,利用酶促产物抗坏血酸(Ascorbic Acid,AA)催化氧化还原反应以放大吸光度的信号,并应用于传统的夹心ELISA,构建了高灵敏比色ELISA分析平台。当“三明治”型夹心免疫反应结束后,微孔板上捕获的碱性磷酸酶促使底物L-抗坏血酸-2-磷酸水解产生AA,后者还原无色的三价铁-红菲啰啉络合物(Fe(BPT))至粉红色的二价铁-红菲啰啉络合物(Fe(BPT)),包裹在曲拉通-100形成的胶束中,AA本身被氧化为脱氢抗坏血酸。TCEP的存在使脱氢抗坏血酸迅速转化为AA,后者多次还原Fe(BPT),从而产生大量的Fe(BPT),可以通过酶标仪或肉眼方便地读出。因为TCEP尺寸较大且带负电,难以通过胶束,所以它对Fe(BPT)的直接还原可忽略不计。用于测定肿瘤标志物甲胎蛋白(模型抗原)的实验结果表明,这种氧化还原循环使检出限显著降低至5 pg/mL,比常规ELISA低2个数量级。此外,这种ELISA平台除了具有简单、易操作和重现性好等优点,还具有通用性,可望用于蛋白质、肽类结构的海葵毒素、芋螺毒素等海洋毒素的检测;也可以将贝类毒素、河豚毒素等小分子毒素与蛋白质载体结合成为完全抗原,对动物免疫产生克隆抗体之后,再采用本文构建的ELISA平台进行检测。3.将“催化氧化还原反应”应用于模拟酶催化,检测水样中的5-NQ。其中,5-NQ既是被检测的目标物,又是催化底物3,3’,5,5’-四甲基联苯胺与过氧化氢进行显色反应的模拟酶。该比色法对5-NQ的检测范围是0.01–1μM,检出限为0.005μM,可通过肉眼观察到的浓度低至0.05μM。其在海水、湖水等水样中的检测结果和回收率令人满意。该方法简便、快速、灵敏度高且具有很好的稳定性,为海洋毒素的ELISA分析提供了可靠的理论基础和方法依据。

关键词：催化氧化还原比色分析酶联免疫分析污染物海洋毒素

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海洋药物的研究现状

广东医科大学学报 2020年第3期38卷 251-254页

作者：张海涛广东医科大学广东湛江524023

该文围绕海洋药物研究的现状,介绍了目前海洋药物研究的研究热点和海洋药物的研究内容,评述了目前海洋药物研究的总体情况以及我国在该领域的实际情况,展望今后海洋药物研究发展方向和前景,并对我国海洋药物研究提出建议.

关键词：海洋药物研究热点天然产物海洋毒素化学生态学

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嵊山岛海洋药用生物资源状况调查

氨基酸和生物资源 2006年第1期28卷 1-5页

作者：王金辉孙亚伟秦玉涛刘材材张昊飞程祥圣国家海洋局东海环境监测中心

对嵊山岛礁生物资源以及邻近海域的微藻资源调查,共发现121种潮间带生物,其中有28种海洋药用生物,包括红条毛肤石鳖(Acanthochiton rubrolineatus)、马粪海胆(Hem icentiotus pulcherrimus)、海萝(Gloiopeltis furcata)等,其中多数是海... 详细信息

对嵊山岛礁生物资源以及邻近海域的微藻资源调查,共发现121种潮间带生物,其中有28种海洋药用生物,包括红条毛肤石鳖(Acanthochiton rubrolineatus)、马粪海胆(Hem icentiotus pulcherrimus)、海萝(Gloiopeltis furcata)等,其中多数是海洋中药或可制成中成药,嵊山岛丰富的海绵资源具有筛选天然活性物质的潜力。嵊山岛邻近海域的产毒藻类包括产麻痹性贝毒(PSP)的链状亚历山大藻(Alexandrium catenatum)、塔玛亚历山大藻(Alexandrium tamarens),产腹泻性贝毒(DSP)的倒卵形鳍藻(D inophysis forti)、具尾鳍藻(D inophysis caudata);产记忆缺失性贝毒(ASP)的尖刺拟菱形藻(Pseudo-Nitzschia pungens)、多列拟菱形藻(Pseudo-Nitzschia multiseries)和多纹拟菱形藻(Pseudo-Nitzschia multistriata);产神经性贝毒(NSP)的短凯伦藻(Kerina breve)以及红色裸甲藻(Gymnodinium sangium)、米氏凯伦藻(Kerina m ikim oto)、环状异甲藻(Heterocapsa circularisqua-ma)等能产生生理活性物质的藻类,其中嵊山岛邻近海域产石房蛤毒素和神经毒素的有毒藻类可能具有药用开发价值。

关键词：海洋毒素海洋药物

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加强技术储备整合有利资源保障食品安全

食品安全质量检测学报 2014年第3期5卷 761-762页

作者：鲍蕾山东出入境检验检疫局技术中心青岛266002

生物毒素是由各种生物(动物、植物、微生物)产生的有毒物质，为天然毒素，是由生物来源并不可自复制的有毒化学物质。目前生物毒素的研究已发展成为一个与多种学科交叉的新兴学科，其发展对于生命化学、医学、药物学、环境科学等均具有... 详细信息

生物毒素是由各种生物(动物、植物、微生物)产生的有毒物质，为天然毒素，是由生物来源并不可自复制的有毒化学物质。目前生物毒素的研究已发展成为一个与多种学科交叉的新兴学科，其发展对于生命化学、医学、药物学、环境科学等均具有重要意义。由于生物毒素具有种类多、分布广、毒性强等特性，所以发展快速、高灵敏度、高特异性的生物毒素检测方法显得尤为重要。

关键词：生物毒素领域食品安全海洋毒素技术储备资源

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便携式设备可快速检测贝类毒素

渔业信息与战略 2016年第1期31卷 71-72页

作者：杨林林

一个来自美国和欧洲的科学家团队已经开发出一个便宜的便携式设备,用来更快更简单的筛选刚捕捞的贝壳类动物是否含有毒素——腹泻性贝类毒素（DSP）。DSP中毒是由食用贝壳类动物（贻贝、牡蛎、扇贝和蛤蜊等）而引起的,这些贝壳类动物会... 详细信息

一个来自美国和欧洲的科学家团队已经开发出一个便宜的便携式设备,用来更快更简单的筛选刚捕捞的贝壳类动物是否含有毒素——腹泻性贝类毒素（DSP）。DSP中毒是由食用贝壳类动物（贻贝、牡蛎、扇贝和蛤蜊等）而引起的,这些贝壳类动物会富集冈田酸（OA）或者相关的海洋毒素。水华通常也被称为赤潮,这一情况的发生会产生上述有毒物质,而这些贝壳类动物又能通过滤食将这些毒素富集在体内。因为通过烹饪并不能去除贝壳类动物体内的毒素,所以若干规定被用来防止销售和食用受污染的贝壳类动物。

关键词：贝壳类贝类毒素海洋毒素有毒物质滤食免疫层析法测试过程试纸条测试方法侧流

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海洋药物

国际药学研究杂志 1990年第4期17卷 206-207页

作者： Taqui Khan MM ,刘晓泰

海洋占地球表面近70%,生活着大量的生物,包括30门50万种。海洋药物还未进行过大规模的开发,它的资源丰富,向海洋探索药用天然产物的前景十分可观。海洋药物历史悠久,在中国、罗马、印度古医籍中均有用包括海带(Laminaria)、紫菜(Porphy... 详细信息

海洋占地球表面近70%,生活着大量的生物,包括30门50万种。海洋药物还未进行过大规模的开发,它的资源丰富,向海洋探索药用天然产物的前景十分可观。海洋药物历史悠久,在中国、罗马、印度古医籍中均有用包括海带(Laminaria)、紫菜(Porphyra)等多种海藻治疗热病、水肿、利尿、肿瘤、堕胎等多种疾病的记载。而第一个

关键词：海洋药物贝壳珍珠海洋天然产物海带角叉菜胶卡拉胶海洋毒素软体动物红藻