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海水小环藻的分离纯化及其双壳贝类饵料效果评价

海水小环藻的分离纯化及其双壳贝类饵料效果评价

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作者：吴圆圆宁波大学

学位级别：硕士

饵料微藻培育成功与否是双壳贝类育苗成功的关键,传统饵料微藻种质退化及水域环境恶化导致的饵料微藻季节性难扩繁问题亟待解决。从育苗主产区海水池塘中,对本地优势种株进行分离纯化是发掘潜力饵料微藻的重要手段。小环藻(Cyclotella s... 详细信息

饵料微藻培育成功与否是双壳贝类育苗成功的关键,传统饵料微藻种质退化及水域环境恶化导致的饵料微藻季节性难扩繁问题亟待解决。从育苗主产区海水池塘中,对本地优势种株进行分离纯化是发掘潜力饵料微藻的重要手段。小环藻(Cyclotella sp.)是一类在海水中广泛存在的微藻,其细胞较小、能稳定扩繁,可满足贝类饵料营养需求。本研究从贝类育苗主产区自然海水中新分离纯化海水微藻,从其中选择8株生长稳定的小环藻进行营养组成分析,并开展对3种双壳贝类稚贝的饵料效果评价。获得主要结果如下:(1)从自然海水中采集水样,使用毛细管、稀释、平板划线等分离方式对微藻进行分离纯化,得到纯单种微藻;对其生长条件进行初步优化,培养至稳定传代;结合形态学鉴定方法和分子生物学鉴定方法,对已纯化微藻进行种属鉴定,共分离纯化出海水微藻80株;对其中29株新分离状态良好、细胞大小适宜的海水微藻进行18S r DNA测序,序列比对结果显示,29株新分离微藻归属4门、11属、16种,优势门类为硅藻门,其中小环藻属(Cyclotella)微藻12株。(2)对平台培养期小环藻进行脂肪酸和氨基酸组成进行测定,结果表明,小环藻含有以C16:0为代表的饱和脂肪酸以及硅藻特征脂肪酸C16:3(n-4),并含有一定量的EPA、DHA等n-3不饱和脂肪酸;在氨基酸组成方面,除8002外,其余各株新分离小环藻EAAI均>0.75,能够为双壳贝类提供优质蛋白来源,可满足贝类丰富的维生素需求。(3)以贝类繁育场传统饵料角毛藻、球等鞭金藻以及微拟球藻作为对照进行单种投喂实验,结果表明,经过14 d培养,小环藻组(除8002外)菲律宾蛤仔的重量增长率显著高于角毛藻组及微拟球藻组(P小环藻8002外,另7株新分离海水小环藻饵料效果均优于或相当于角毛藻和金藻,其中小环藻8006表现出最显著的促进贝类稚贝生长优势(P小环藻8001外,其他所有小环藻饵料效果均优于或接近角毛藻饵料效果,且均优于金藻的饵料效果。本文研究结果表明,分离纯化出的8株小环藻贝类饵料效果显著,丰富了我国贝类饵料微藻种质资源库,为贝类苗种繁育提供了更多的饵料选择。

关键词：海水小环藻分离纯化双壳贝类饵料效果

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