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海南捕鸟蛛毒素的结构与功能研究及虎纹镇痛肽-Ⅰ（HWAP-Ⅰ）的一般药理学研究

海南捕鸟蛛毒素的结构与功能研究及虎纹镇痛肽-Ⅰ（HWAP-Ⅰ）的一...

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作者：潘建义湖南师范大学

学位级别：硕士

摘要1：海南捕鸟蛛(Selenocosmia hainana)是分布在我国海南岛一带，最近才被鉴定的蜘蛛新种，隶属捕鸟蛛科(Theraphosidae)。其生物学活性及形态特征与分布在我国云南、广西一带的虎纹捕鸟蛛极其相似，仅体色有差别。该蛛粗毒中含有多... 详细信息

摘要1：海南捕鸟蛛(Selenocosmia hainana)是分布在我国海南岛一带，最近才被鉴定的蜘蛛新种，隶属捕鸟蛛科(Theraphosidae)。其生物学活性及形态特征与分布在我国云南、广西一带的虎纹捕鸟蛛极其相似，仅体色有差别。该蛛粗毒中含有多种生物学活性成分。本文报道对其中两种活性成分进行研究的结果。 (1)利用阳离子交换色谱、反相高效液相色谱从粗毒中纯化出两种新型多肽毒素成分，分别命名为海南捕鸟蛛毒素-Ⅱ(Hainantoxin-Ⅱ，HNTX-Ⅱ)，海南捕鸟蛛毒素-ⅵ(Hainantoxin-Ⅵ，HNTX-Ⅵ)。 (2)Hainantoxin-Ⅱ能可逆的麻痹美洲蜚蠊等昆虫，其麻痹时间可长达十余小时，剂量增大时能使美洲蜚蠊致死。小鼠脑室注射该毒素亦能使小鼠死亡，但腹腔注射对小鼠无明显影响。很有可能Hainantoxin-Ⅱ只作用于小鼠的中枢神经系统，而对外周神经系统的作用不明显。Hainantoxin-Ⅵ能阻断小鼠膈神经膈肌标本的神经肌肉传递，脑室及硬膜外注射能使小鼠瘫软。这两种毒素对小鼠杂交瘤细胞细胞Na电流均无影响。 (3)质谱分析及氨基酸序列分析表明：Hainantoxin-Ⅱ为一条单一多肽链，分子量为4253.135Da。该多肽链含有37个氨基酸残基，其中有6个氨基酸残基为Cys，他们形成了3对二硫键。氨基酸全序列为：NH-LFECSVSCEIEKEGNKDCKKKKCKGGWKCKFNMCKV-COOH。同源性搜索表明HNTX-Ⅱ与虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅱ(HWTX-Ⅱ)、捕鸟蛛Eurypelma californicum中的一种毒素ESTX及蜘蛛Brachypelma smithii成分中的Venom protein 1有很高的同源性。尤其是与HWTX-Ⅱ，其同源性高达95％，37个残基中仅有3个残基不同。HNTX-Ⅵ的分子量为3998.5Da，序列为NH-ECKYLWGTCEKDEHCCEHLGCNKKHGWCGWDGTF-COOH，其中的6个Cys形成3对二硫键。该毒素与两种K通道阻断剂(智利捕鸟蛛Grammostola spatulata毒素HaTx和蜘蛛Hysterocrates gigas中的SGTx1毒素)有很中文摘要高的同源性。 (4)对1诬NTX一H的二级结构进行预测。

关键词：海南捕鸟蛛海南捕鸟蛛毒素-Ⅱ 海南捕鸟蛛毒素-ⅵ 神经毒素杀虫肽 K+通道阻断剂

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