检索结果-南通市图书馆

抗猪流行性腹泻病毒单克隆抗体的研制及其特性鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医学报 1998年第2期18卷 131-134页

作者：孙智锋钱永清方锡玲闻人楚唐永兰许大新陈培龙上海市农业科学院畜牧兽医研究所

以新生乳猪增殖猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ），通过蔗糖密度梯度离心将其纯化，获得较为完整的病毒颗粒。病毒ＥＬＩＳＡ效价为１∶３×１０５，蛋白含量为３．９６ｇ／Ｌ。将提纯的ＰＥＤＶ免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取免疫鼠脾细胞与Ｓ... 详细信息

以新生乳猪增殖猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ），通过蔗糖密度梯度离心将其纯化，获得较为完整的病毒颗粒。病毒ＥＬＩＳＡ效价为１∶３×１０５，蛋白含量为３．９６ｇ／Ｌ。将提纯的ＰＥＤＶ免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取免疫鼠脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞进行融合，融合率为９５．６％。用间接ＥＬＩＳＡ进行筛选，共检出３８个阳性孔，阳性率为２８．８％。对其中１５个阳性值较高的孔进行３次再克隆，阳性率达１００％，最后获得１５株稳定分泌特异性抗ＰＥＤＶ单抗（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞。ＥＬＩＳＡ阻断试验与交叉试验证明，其分泌的抗体具有高度特异性。腹水和细胞培养上清的ＥＬＩＳＡ效价分别为１∶１０３～１∶１０６和１∶１２８～１∶５１２。经鉴定，１５株ＭｃＡｂ的分子类型均为ＩｇＧ，均无免疫沉淀特性。杂交瘤细胞的染色体数目为９０～１１０，平均９５。尤为重要的是，这些杂交瘤细胞所分泌的抗体，有的对ＰＥＤＶ具有中和作用，能够阻断病毒对猪只的侵害作用。

关键词：猪流行性腹泻病毒单克隆抗体 ELISA

猪流行性腹泻病毒与圆环病毒2型复合PCR方法的建立

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

浙江农业学报 2017年第7期29卷 1086-1092页

作者：龚双燕李小璟陈瑛琪蔡瑶李雨濛徐逸飞朱玲徐志文四川农业大学动物医学院四川成都611130 四川农业大学动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川成都611130

为研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪圆环病毒2型(PCV2)在腹泻仔猪中的感染状况,建立一种能同时检测PEDV与PCV2混合感染的复合PCR方法。根据Gen Bank已发表的PEDV、PCV2的基因序列,选择保守区域分别设计、合成1对特异性引物,扩增目的片段... 详细信息

为研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪圆环病毒2型(PCV2)在腹泻仔猪中的感染状况,建立一种能同时检测PEDV与PCV2混合感染的复合PCR方法。根据Gen Bank已发表的PEDV、PCV2的基因序列,选择保守区域分别设计、合成1对特异性引物,扩增目的片段分别为530和278 bp。经反应条件优化,建立了特异性检测PEDV、PCV2的复合PCR方法。应用本试验所建复合PCR方法,对2016年4—8月采自四川省乐山、宜宾、广元和遂宁等地区的67份腹泻仔猪样品(肠系膜淋巴结、肠道黏膜及其内容物混合)进行检测。结果显示:PEDV、PCV2单一感染阳性率分别为34.33%、73.13%;PEDV+PCV2复合感染率为16.42%。经与特异性检测PCV2的PCR法和PEDV的RT-PCR法检测结果进行比较分析,符合率均为100%。

关键词：流行性腹泻病毒圆环病毒2型复合PCR

抗猪流行性腹泻病毒单克隆抗体的中和与被动保护试验

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医学报 1998年第3期18卷 221-223页

作者：孙智锋钱永清闻人楚方锡玲陈培龙唐永兰许大新上海市农业科学院畜牧兽医研究所卫生部上海生物制品研究所

应用抗猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞株诱生腹水ＭｃＡｂ，将３株单抗混合，用于实验室防治试验。结果表明，其对病毒具有中和作用，可使病猪耐过ＰＥＤＶ的侵袭；用于生产场的发病猪，初步证明疗效显... 详细信息

应用抗猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞株诱生腹水ＭｃＡｂ，将３株单抗混合，用于实验室防治试验。结果表明，其对病毒具有中和作用，可使病猪耐过ＰＥＤＶ的侵袭；用于生产场的发病猪，初步证明疗效显著，保护率达９１％，而未注抗体的对照发病猪全部死亡。上述结果表明，抗猪流行性腹泻病毒ＭｃＡｂ混合制剂确能缓解发病症状，减少新生猪的死亡。

关键词：猪病流行性腹泻病毒单克隆抗体防治

猪流行性腹泻病毒S蛋白多表位抗原免疫原性分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医学报 2022年第1期42卷 20-25,46页

作者：李丽唐奇马跃宇张溪妍费东亮王书全锦州医科大学畜牧兽医学院辽宁锦州121001

在猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)经典毒株CV777毒株S基因基础上,选取S抗原优势表位EP(499~638 aa、748~755 aa、764~771 aa和1368~1374 aa)和超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因,优化后通过编码柔性连接肽(GGGGS)密码子进行连接,分别构建重组质粒pET-28a-S、pET-28a-S-SEA和pET-28a-S-EP-SEA。表达纯化的重组蛋白经SDS-PAGE和Western blot鉴定后免疫小鼠,以评价重组蛋白的免疫原性。结果显示,重组质粒经IPTG诱导后获得表达,SDS-PAGE分析显示其相对分子质量分别为21,48,54 kDa,与理论值相符。Western blot结果显示,重组蛋白与PEDV阳性血清具有良好的反应原性。纯化后的重组蛋白免疫小鼠,产生了较强的体液免疫和细胞免疫,其中免疫重组蛋白S-EP-SEA产生特异性IgG高于免疫重组蛋白S和S-SEA,细胞因子IFN-γ、IL-2和IL-4水平也高于其他2组。结果表明,本试验制备的重组蛋白S-EP-SE具有良好的免疫原性,为猪流行性腹泻多表位疫苗研制提供了理论依据。

关键词：流行性腹泻病毒 S蛋白抗原表位超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A 免疫原性

穿膜肽与抗猪流行性腹泻病毒膜蛋白单域抗体融合表达和入胞活性分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

动物医学进展 2021年第6期42卷 8-13页

作者：李丽张辛铭尹双辉张涛涛杨顺利薛慧文甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃兰州730046 石家庄市兽用生物制品供应站河北石家庄050027

为获得能自主进入细胞的单域抗体(sdAb),将抗猪流行性腹泻病毒(PEDV)膜蛋白(M)的sdAb与一种细胞穿膜肽(TAT)融合表达,并纯化重组TAT-sdAb蛋白。用ELISA方法检测TAT-sdAb与M蛋白的结合活性,免疫荧光试验验证其穿Vero细胞膜活性、最适作... 详细信息

为获得能自主进入细胞的单域抗体(sdAb),将抗猪流行性腹泻病毒(PEDV)膜蛋白(M)的sdAb与一种细胞穿膜肽(TAT)融合表达,并纯化重组TAT-sdAb蛋白。用ELISA方法检测TAT-sdAb与M蛋白的结合活性,免疫荧光试验验证其穿Vero细胞膜活性、最适作用时间和剂量,并将TAT-sdAb与胞内PEDV进行共定位研究。结果证实,sdAb与TAT融合表达不影响其与M蛋白的结合活性,在使用剂量为50μg/mL、作用3 h时,能明显观察到其进入Vero细胞,并与胞内的PEDV呈现共定位分布。结果表明,融合TAT的sdAb具有抗原结合活性和穿膜活性,为基于单域抗体的药物研发提供了理论基础,为PEDV感染细胞的动态过程研究提供了可靠工具。

关键词：细胞穿膜肽流行性腹泻病毒膜蛋白单域抗体

流行性腹泻病毒强毒感染引起猪腹泻的防控策略

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

今日畜牧兽医 2012年第5期28卷 11-14页

作者：王连想叶俊平张灿菲广东温氏食品集团有限公司桂粤养猪公司广西贺州542800

自2010年年底开始,我国很多猪场发生了仔猪腹泻,流行面广,呈暴发性流行。2011年冬季至2012年流行面进一步扩大,疫情继续蔓延造成3～10日龄哺乳仔猪的大批死亡,发病率极高,病死率达到80%～100%,给我国猪场造成了严重的损失。虽然随着天... 详细信息

自2010年年底开始,我国很多猪场发生了仔猪腹泻,流行面广,呈暴发性流行。2011年冬季至2012年流行面进一步扩大,疫情继续蔓延造成3～10日龄哺乳仔猪的大批死亡,发病率极高,病死率达到80%～100%,给我国猪场造成了严重的损失。虽然随着天气的气温的升高,发病率有所下降,但一些地区还在流行,为此本刊策划了本期专题,希望对广大养殖户有所帮助。

关键词：流行性腹泻病毒仔猪腹泻防控策略强毒感染哺乳仔猪 10日龄发病率暴发性

猪流行性腹泻病毒河南流行株S基因的克隆与遗传进化分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医学报 2017年第5期37卷 781-786页

作者：乔涵李辉赵丽张宇杨兴武徐朋丽韩昊莹杨明凡陈红英河南农业大学牧医工程学院河南郑州450002 河南牧业经济学院河南郑州450003 郑州市猪重大疫病防控重点实验室郑州450002

近年来,我国大多省市暴发新生仔猪严重流行性腹泻,给养猪业造成巨大经济损失。为分析猪流行性腹泻病毒(PEDV)在河南省的流行和遗传变异情况,本研究对2014—2015年收集的30份临床腹泻样品,进行RT-PCR检测,对检测为阳性的PEDV样品进行S基... 详细信息

近年来,我国大多省市暴发新生仔猪严重流行性腹泻,给养猪业造成巨大经济损失。为分析猪流行性腹泻病毒(PEDV)在河南省的流行和遗传变异情况,本研究对2014—2015年收集的30份临床腹泻样品,进行RT-PCR检测,对检测为阳性的PEDV样品进行S基因的克隆与序列分析。结果表明,30份临床腹泻样品中,RT-PCR检测出22个PEDV阳性样品,克隆的22条PEDV S序列与GenBank中发表的29条PEDVS基因序列核苷酸同源性为93.1%~99.2%。与经典毒株相比,22株河南流行株在S1区域存在碱基的插入、缺失现象;S基因遗传进化树表明,PEDV分为2群,河南流行株均属于PEDVП群,与近年国内分离株和韩国野毒株有较近亲缘关系,而与欧洲株以及中国目前使用的疫苗株亲缘关系较远,基因差异较大。

关键词：流行性腹泻病毒 S基因遗传进化分析

间接ELISA检测猪流行性腹泻病毒的抗体水平

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

上海畜牧兽医通讯 2000年第1期 18-19页

作者：邹勇唐永兰苏万国许大新陈培龙钱永清上海市农业科学院畜牧兽医研究所 201106

本研究以猪流行性腹泻病毒 (简称PEDV)细胞培养物中提纯的抗原 ,组织毒免疫获得的高免血清建立了间接ELISA检测PEDV抗体水平。结果表明 :包被抗原浓度为 1∶2 0 0 0 0 ,酶标羊抗猪IgG浓度选用 1∶2 5 0为测定抗PEDVIgG抗体的最适工作浓度。

关键词：猪流行性腹泻病毒间接ELISA 抗体检测

检测猪流行性腹泻病毒的R-PCR方法的建立

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

畜牧与兽医 2004年第1期36卷 10-12页

作者：倪艳秀何孔旺俞正玉郭蓉利吕立新陈兆霞江苏省农业科学院农业部畜禽疫病诊断重点开放实验室江苏南京210014

根据猪流行性腹泻病毒 (PEDV)的N基因自行设计和合成了一对可扩增长度为 641bp目的片段的引物 ,成功地建立了检测的猪流行性腹泻病毒的RT PCR方法。对猪轮状病毒 (PRV)、猪传染性胃肠炎病毒 (TGEV)的RT PCR检测结果均呈阴性。对PEDV JS... 详细信息

根据猪流行性腹泻病毒 (PEDV)的N基因自行设计和合成了一对可扩增长度为 641bp目的片段的引物 ,成功地建立了检测的猪流行性腹泻病毒的RT PCR方法。对猪轮状病毒 (PRV)、猪传染性胃肠炎病毒 (TGEV)的RT PCR检测结果均呈阴性。对PEDV JS株的RT PCR产物的序列分析表明 ,与CV777株的同源性为 97 3 %。

关键词：猪流行性腹泻病毒 RT-PCR 检测方法鉴别诊断