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营养性贫血中bcl-2、bax、bax/bcl-2、细胞周期分布及凋亡表达的临床意义

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中华血液学杂志 2003年第4期24卷 212-213页

作者：王荣琦林凤茹河北医科大学第二医院血液科石家庄050000

营养性贫血是血液病中的常见病、多发病，我们应用流式细胞仪（FCM）检测营养性贫血骨髓中单个核细胞bcl-2、bax等参数及细胞凋亡率，以研究细胞凋亡在营养性贫血中的作用及临床意义。

关键词：营养性贫血流氏细胞仪细胞凋亡细胞周期 bcl-2 bax

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参附注射液对肾缺血/再灌注损伤的改善作用及机制

参附注射液对肾缺血/再灌注损伤的改善作用及机制

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作者：黄晓光山西医科大学

学位级别：硕士

目的观察参附注射液(Shenfu injection,SF,主要成分为人参皂甙和乌头碱)对肾脏缺血/再灌注(I/R)损伤预防性的保护作用,并探讨其可能的机制。方法120只雄性Wistar大鼠(体重250～300g)随机分成2组,即生理盐水对照组(c)和参附注射液治疗组... 详细信息

目的观察参附注射液(Shenfu injection,SF,主要成分为人参皂甙和乌头碱)对肾脏缺血/再灌注(I/R)损伤预防性的保护作用,并探讨其可能的机制。方法120只雄性Wistar大鼠(体重250～300g)随机分成2组,即生理盐水对照组(c)和参附注射液治疗组(s),每组大鼠各再随机分为6小组,每小组10只,即假手术组(SHAMc,SHAMs);单纯缺血组(Ic,Is);I/R 1h组(IR1c,IR1s);I/R 24h组(IR24c,IR24s);I/R48h组(IR48c,IR48s);I/R72h组(IR72c,IR72s)。假手术组只暴露双侧肾动脉,单纯缺血组只夹闭双侧肾动脉60min,缺血再灌注组夹闭大鼠双肾动脉60min,再灌注不同时间造成急性I/R肾损伤模型。各组分别进行:光镜观察形态学改变;应用图像分析系统计算肾小管坏死面积;观察血清肌酐(Scr)、右肾菊粉清除率变化;测定肾小管上皮细胞内游离钙离子浓度([Ca])。结果与对照组相比,I/R 24 h:参附组肾小管坏死面积明显减少(63.83%±16.61%vs26.40%±13.69%n=6);Scr升高的幅度减轻(1.08±0.33 vs 1.36±0.56 mg/dl,p＜0.01);菊粉清除率显著高于对照组(0.135±0.027 vs 0.064±0.041 ml/min,p＜0.01);肾小管上皮细胞内钙超载情况减轻(156.57±27.83 vs 213.56±31.24 nmol/ml,p＜0.05)。I/R48h,参附组肾小管上皮细胞增生明显较对照组活跃。结论参附注射液能够预防性的保护肾I/R损伤,加速受损肾小管上皮细胞再生,机理之一可能与减轻细胞内钙超载有关。

关键词：缺血/再灌注参附注射液肾小球滤过率(GFR) 菊粉清除率肾小管上皮细胞钙超载流氏细胞仪

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网织血小板检测方法的改进及其在血液疾病诊断中的应用

网织血小板检测方法的改进及其在血液疾病诊断中的应用

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作者：孙德华第一军医大学

学位级别：硕士

研究背景： 1969年Ingram和Cooper smith在对失血性Beagle犬的外周血经新亚甲蓝染色的镜检中，观察到部分清晰的浓染网状结构的血小板，被命名为网织血小板(Reticulated platelet，简称RP)。网织血小板是由骨髓巨核细胞新近释放入外周... 详细信息

研究背景： 1969年Ingram和Cooper smith在对失血性Beagle犬的外周血经新亚甲蓝染色的镜检中，观察到部分清晰的浓染网状结构的血小板，被命名为网织血小板(Reticulated platelet，简称RP)。网织血小板是由骨髓巨核细胞新近释放入外周血的血小板，不含核或DNA成分，却含有少量的mRNA和粗面内质网，保留了合成少量蛋白质的能力，它反映了循环中最年轻的血小板。近年来，随着网织血小板检测方法的不断改进，流式细胞仪和网织细胞检测仪在临床上的广泛应用，使其在机体造血功能中的临床意义的得以深入研究，成为分析血小板的生成状态的有用指标。但是由于目前国内外网织血小板检测的方法还未统一，检测过程复杂，参考值也有较大的差异，临床应用受到了一定的限制。目的：在上述研究背景下，我们通过实验设计来探讨以下几个问题： 1．应用流式细胞技术检测网织血小板的方法。在现有流式细胞技术基础上，比较全血和血浆标本检测网织血小板的差异，并对检测方法进行改进，确定噻唑橙检测网织血小板的最佳条件，简化检测方法。 2．确定流式细胞技术检测网织血小板的正常人群的参考值，比较男性和女性参考值差异性。 3．对网织血小板与血小板相关参数(平均血小板体积MPV、血小板分布宽PDW、大血小板比例P-LCR)结果之间的关系进行探讨。 4．初步探讨网织血小板在血小板减少性疾病鉴别诊断中的临床意义，通过网织血小板的检测，区分不同病因引起的血小板减少性疾病，从而进行病因分析。方法： 1．探讨流式细胞仪检测网织血小板的方法;探讨流式细胞仪检测RP的方法，并对网织血小板的检测方法进行改进，通过析因设计的方差分析确定噻唑橙检测网织血小板的最适合的检测条件，用CD42b-PE单抗标记血浆及全血中的血小板，再用荧光染料噻唑橙(thiazol orange，TO)染色网织血小板内RNA。以流式细胞仪对RP百分率进行检测。分别对全血及血浆样本在不同TO浓度及孵育时间下的网织血小板进行测定，确定网织血小板测定的最佳TO浓度及孵育时间。在一定检测条件下，比较全血和血浆检测网织血小板的差异。对一样本进行10次连续性测定，检测其CV值，验证该方法的重复性。 2．确定网织血小板的正常参考值;以100例健康人做为正常对照组(其中男性50例，女性50例)，对正常对照组的RP百分率及RP绝对值进行检测。并对结果进行统计学分析，从而对男性和女性的结果差异进行比较。 3．对RP百分比与血小板相关参数(MPV、PDWP-LCR)的结果之间的关系进行分析：通过对147例样本的网织血小板与MPV、PDW、P-LCR的检测结果进行相关分析，比较他们的相关性。并将MPV＞11.0fl组的RP％与正MPV＜11.0fl组进行比较，比较两者的差异性。 4．初步探讨网织血小板对血小板减少性疾病的鉴别诊断的临床意义;对不同原因造成的血小板减少的病人进行网织血小板测定，继而对血小板减少的原因进行分析，从中找出网织血小板对血小板减少性疾病的鉴别诊断价值。入选病例为特发性血小板减少性紫瘢(idiopathic thrombocytopenic purpura，ITP)12例、再生障碍性贫血(aplastic anemia，AA)12例、急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia，ALL)36例、急性非淋巴细胞白血病(acute non-lymphocytic leukemia，ANLL)30例、骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome，MDS)5例、慢性粒细胞白血病(chronic myelocytic leukemia，CML)8例。对这些病人的血小板总数及网织血小板百分比及绝对值进行测定，对男性与女性结果进行分组与正常对照组结果进行比较。对不同类型血液疾病的网织血小板结果进行分析，对网织血小板反映骨髓血小板生成状况的情况进行评估。结果： 1．我们通过析因设计的方差分析，发现流式细胞仪测定RP的结果受到TO浓度及孵育时间的影响，随着TO浓度的提高及孵育时间的延长RP的结果呈现明显的上升趋势。通过析因设计的方差分析表明在TO1：2稀释的条件下60min与90min时间段内RP％检测结果差异较其它组小，因而选择TO1：2稀释条件下孵育60min作为测定时条件，实验条件相对较容易控制。在该条件下能够较好的区分网织血小板，且结果稳定;并且对比了18例血浆和全血的检测结果，相关系数0.997，二者显著相关，并对二者结果进行成对样本的t检验，P＞0.05，二者无显著性差异，该方法重复性CV％为1.32％，重复性好，因而适合于临床检测网织血小板。 2．检测了100例健康人RP％，结果为：9.72％±2.59％(X±SD)，其中男性50例，RP％为9.15％

关键词：流氏细胞仪网织血小板噻唑橙血液病

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鼠肺支原体抑制人肺癌细胞恶性表型的研究

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结核病与胸部肿瘤 2004年第4期 264-269页

作者：汪惠赖百塘张春彦岳文涛杨学惠刘桂芝北京市结核病胸部肿瘤研究所

目的发现和鉴定实验室污染的支原体菌株，研究被污染细胞生物学性质的变化。材料方法用细菌学、PCR及DNA测序方法，明确细胞培养污染的支原体菌株。丫啶橙、溴化乙啶染色细胞，荧光显微镜观察细胞形态学改变。透射电镜检查支原体在细... 详细信息

目的发现和鉴定实验室污染的支原体菌株，研究被污染细胞生物学性质的变化。材料方法用细菌学、PCR及DNA测序方法，明确细胞培养污染的支原体菌株。丫啶橙、溴化乙啶染色细胞，荧光显微镜观察细胞形态学改变。透射电镜检查支原体在细胞内分布。集落形成检测细胞增殖、流氏细胞仪检测细胞周期。琼脂电泳检测DNA降解。结果 1．污染物DNA经支原体通用引物扩增，测序，结果用blast DNA同源比对，明确污染菌为鼠肺支原体(***)。***侵入污染的人肺癌细胞胞浆，有的贴近细胞核，有的吸附于核膜。***抑制多个人肺癌细胞系集落形成和诱导细胞增殖周期阻滞。***诱导G1前期细胞apoptosis峰和DNA降解。结论 ***污染培养的人肺癌细胞系并侵入细胞内，可引起人肺癌细胞增殖的抑制和诱导调亡(apoptosis)。

关键词：人肺癌细胞支原体恶性表型集落形成诱导抑制鼠肺胞浆细胞增殖周期流氏细胞仪

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iNOS通路生成的NO对人成骨细胞生长影响的实验研究

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中华临床医药杂志（北京） 2002年第5期3卷 5-7页

作者：王东孙海钰等山西医科大学第二医院骨科030001

目的：探讨iNOS通路产生的NO对人成骨细胞生长的影响及其在骨愈合中的作用。方法：从流产胎儿的颅骨分离培养人成骨细胞分为3组：对照组：TNF－α、INF－r、IL－1β组；TNF－α、INF－r、IL－1β加L－NMMA组。通过细胞计数，流氏细胞仪... 详细信息

目的：探讨iNOS通路产生的NO对人成骨细胞生长的影响及其在骨愈合中的作用。方法：从流产胎儿的颅骨分离培养人成骨细胞分为3组：对照组：TNF－α、INF－r、IL－1β组；TNF－α、INF－r、IL－1β加L－NMMA组。通过细胞计数，流氏细胞仪检测DNA含量及透射电镜观察超微结构的变化。结果：细胞计数加入TNF－α、INF-r、IL-1β组数量明显少于对照组（P＜0．05）及加入L－NMMA组（P＜0．05），TNF－α、IMF-r、IL-1β组S期DNA含量明显减低；电镜可见线粒体减少，粗面内质网减少。结论：高浓度NO对成骨细胞具有明显的细胞毒性作用，而iNOS选择抑制剂L－NMMA能有效减轻NO对成骨细胞的影响。

关键词： iNOS通路细胞计数流氏细胞仪透射电镜成骨细胞诱生型一氧化氮合酶一氧化氮细胞生长

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缺氧缺血性脑病新生儿T淋巴细胞亚群、内皮素的变化

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中国优生与遗传杂志 2015年第6期23卷 76-77页

作者：李美荣穆芳刘克宇刘建娟黄书芳徐海云邯郸市人民医院内科河北056000 邯郸市第三医院儿科

目的观察新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)新生儿全血T淋巴细胞亚群(CD4+/CD8+)、血浆内皮素(ET-1)的水平变化,探讨其在HIE中的临床意义。方法足月HIE患儿59例(轻度12例,中度30例,重度17例)及35例健康足月新生儿(健康对照组)出生72h取静脉血,... 详细信息

目的观察新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)新生儿全血T淋巴细胞亚群(CD4+/CD8+)、血浆内皮素(ET-1)的水平变化,探讨其在HIE中的临床意义。方法足月HIE患儿59例(轻度12例,中度30例,重度17例)及35例健康足月新生儿(健康对照组)出生72h取静脉血,采用流氏细胞仪检测全血CD4+/CD8+及放射免疫法检测血浆ET-1,比较各组间的差异;并分析HIE组CD4+/CD8+与ET-1水平的相关性。结果 ***组CD4+/CD8+比值显著低于健康对照组,HIE组ET-1水平显著高于健康对照组(P均<0.01);***各组CD4+/CD8+比值随HIE程度加重而降低、ET-1水平随HIE程度加重而增加,各组间差异均有统计学意义(P均<0.05);***组患儿CD4+/CD8+、ET-1水平呈显著负相关(r=-0.847,P<0.05)。结论 CD4+/CD8+和ET-1水平可作为HIE新生儿病情严重程度和疗效判断的早期指标。

关键词：缺氧缺血性脑病流氏细胞仪 T淋巴细胞亚群内皮素

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