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麸炒僵蚕汤剂的多肽成分表征及抗GAT-1活性肽的虚拟筛选

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药物分析杂志 2024年

作者：黄雅阳刘亚雄萧晓彤罗卓雅杨志业广州医科大学药学院广东省药品检验所国家药品监督管理局药品快速检验技术重点实验室广东省生物医药科技协同创新中心

目的：分析麸炒僵蚕汤剂的多肽组成，并虚拟筛选具有GAT-1结合活性的抗癫痫多肽。方法：利用基于微升流速液相色谱-质谱联用（μLC-MS/MS）的多肽组学技术，对麸炒僵蚕汤剂的多肽成分进行广泛鉴定，通过生物信息学和计算机模拟虚拟筛选... 详细信息

目的：分析麸炒僵蚕汤剂的多肽组成，并虚拟筛选具有GAT-1结合活性的抗癫痫多肽。方法：利用基于微升流速液相色谱-质谱联用（μLC-MS/MS）的多肽组学技术，对麸炒僵蚕汤剂的多肽成分进行广泛鉴定，通过生物信息学和计算机模拟虚拟筛选潜在的抗癫痫活性肽，包括生物活性预测、血脑屏障通透性预测、毒性预测和分子对接，最后，利用分子动力学模拟分析多肽和靶蛋白的相互作用。结果：从麸炒僵蚕汤剂中共鉴定得到384条多肽，从中虚拟筛选出19条结合亲和力高于对照药物的潜在抗癫痫活性多肽，其中，多肽FDHFDFDAF的结合亲和力最高，其次是EHYAWGIK,2条多肽主要通过氢键、疏水和静电相互作用与GAT-1结合，分子动力学模拟研究验证了FDHFDFDAF和EHYAWGIK与GAT-1的结合稳定性。结论：基于多肽组学和计算机虚拟筛选技术有利于快速发现动物药的活性多肽成分，本研究对麸炒僵蚕汤剂抗癫痫活性多肽的研究有着重要参考价值，同时为动物药多肽成分研究提供新思路。

关键词：微升流速液相色谱-质谱联用麸炒僵蚕 GAT-1 癫痫活性肽多肽组学虚拟筛选

小麦胚芽活性肽通过AMPK/SIRT1改善大鼠肝脏衰老损伤的作用机制研究

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中国科学：生命科学 2024年第3期54卷 537-547页

作者：汪芳罗涛陈烩铃 Kiyoshi Itagaki 宋海昭熊玲王銮凤沈新春南京财经大学食品科学与工程学院江苏省现代粮食流通与安全协同创新中心江苏高校粮油质量安全控制及深加工重点实验室南京210023 Harvard Medical School Boston 02115USA

小麦胚芽作为小麦面粉加工过程中产生的副产品,资源极为丰富,但一直以来未能得到充分合理的利用.本研究以课题组前期获得的麦胚活性肽ADWGGPLPH(ADW)为对象,以自然增龄的SD大鼠作为肝脏老化损伤的动物模型,9月龄大鼠作为对照,用麦胚源... 详细信息

小麦胚芽作为小麦面粉加工过程中产生的副产品,资源极为丰富,但一直以来未能得到充分合理的利用.本研究以课题组前期获得的麦胚活性肽ADWGGPLPH(ADW)为对象,以自然增龄的SD大鼠作为肝脏老化损伤的动物模型,9月龄大鼠作为对照,用麦胚源活性肽持续灌胃干预至21月龄,研究麦胚源活性肽对自然增龄大鼠肝脏老化损伤的影响,并结合H2O2诱导衰老HepG2细胞模型初步探明其分子机制.结果表明,麦胚源活性肽ADW能够增加大鼠血清及肝脏中SOD,T-AOC,GSH-Px,CAT等抗氧化酶活性,同时降低MDA水平,改善大鼠肝脏中氧化应激水平;降低血清及肝脏中IL-6,IL-1β,MMP3,TNF-α水平,并且增加抗炎因子IL-10分泌,改善增龄大鼠肝脏中炎症环境;麦胚源活性肽干预后肝脏结构明显好转、脂肪空泡减少、细胞排列整齐,ALT以AST水平均显著下降.麦胚源活性肽能够有效地改善老化肝脏中细胞的结构及生长状态异常,减少增龄过程中肝脏质量损失,降低了衰老标志蛋白P53和P21的表达量,减轻肝脏老化损伤程度并减缓了肝脏的老化进程.通过加入抑制剂、激活剂、siRNA等手段,初步阐明麦胚源活性肽能够通过激活AMPK/Sirt1信号通路以调控衰老相关进程.本研究对于开发健康老龄化膳食结构以及麦胚资源的精深利用具有十分重大的意义.

关键词：小麦胚芽活性肽衰老 AMPK 肝脏

五种特色乳中活性蛋白及活性肽的生物活性功能研究进展

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畜牧兽医学报 2024年

作者：李新科高亚男王加启郑楠中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部奶及奶制品质量安全控制重点实验室中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部奶产品质量安全风险评估实验室(北京) 青岛农业大学

乳制品作为人类重要的食品之一，其中所含的活性蛋白及活性肽引起了广泛关注。本综述对五种特色乳（山羊、绵羊、驴、骆驼和牦牛）中的活性蛋白及活性肽在调节免疫功能、抗氧化、抗菌以及抗肿瘤等方面的生物活性功能进行了总结。在此基... 详细信息

乳制品作为人类重要的食品之一，其中所含的活性蛋白及活性肽引起了广泛关注。本综述对五种特色乳（山羊、绵羊、驴、骆驼和牦牛）中的活性蛋白及活性肽在调节免疫功能、抗氧化、抗菌以及抗肿瘤等方面的生物活性功能进行了总结。在此基础上，结合相关研究，对其在疾病预防和保健促进方面的潜在应用进行了前瞻性展望。本综述将有助于更全面地理解特色乳中活性蛋白及活性肽的功能机制，为未来相关研究提供有益参考。

关键词：特色乳活性蛋白活性肽生物活性

鮟鱇鱼皮活性肽的分离纯化及其对HK-2细胞损伤保护的作用

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广东海洋大学学报 2024年第4期44卷 1-10页

作者：许珂缪秉陶曹洪杰任祥雨李航婷杨最素浙江海洋大学食品与药学学院浙江舟山316022

【目的】为探讨鮟鱇(Lophius litulon)鱼皮活性肽(Monkfish skin peptides,MSP)对棕榈酸(Palmitic acid,PA)诱导人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2细胞)损伤保护的作用。【方法】以新鲜鮟鱇鱼皮为材料,选取加酶量、提取时间、pH、温度和料... 详细信息

【目的】为探讨鮟鱇(Lophius litulon)鱼皮活性肽(Monkfish skin peptides,MSP)对棕榈酸(Palmitic acid,PA)诱导人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2细胞)损伤保护的作用。【方法】以新鲜鮟鱇鱼皮为材料,选取加酶量、提取时间、pH、温度和料液比为因子,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)清除率为响应值,分别进行单因素实验和响应面实验,优化鮟鱇鱼皮肽的提取工艺;对得到的鮟鱇鱼皮肽经过超滤、葡聚糖凝胶过滤层析和全自动高压制备分离纯化得到MSP;利用液相二级质谱和多肽从头(de novo)测序技术对其进行结构分析,筛选抗氧化活性较强的肽段;通过构建PA诱导的HK-2细胞损伤模型,测定MSP对HK-2细胞中氧化应激指标、脂质代谢指标和炎症因子水平的影响。【结果】确定酸性蛋白酶与胃蛋白酶质量比2∶1的复配比例,加酶量3 800 U/g、pH 3、酶解时间4 h、温度50℃和料液比1 g∶10 mL为鮟鱇鱼皮活性肽的最佳酶解条件,此条件下制备的鮟鱇鱼皮肽对DPPH·的清除率为78.84%;经超滤,酶解多肽中活性最强,收集该组分进行凝胶色谱分离后,得到F1、F2和F3共3个峰,其中F1组分DPPH·清除率最高。F1组分经高效液相色谱法(HPLC)分离纯化后得到6个吸收峰,其中H2组分吸收峰强度最高,经氨基酸序列鉴定,从中筛选出3种寡肽,分别为Phe-Glu-Ala-Thr-Ser-Gln-Glu-Leu(FEATSQEL,FL-8)、Leu-Val-Ser-Cys-Ser-Ser-Leu(LVSCSSL,LL-7)和Pro-Leu-Glu-Asn-Tyr(PLENY,PY-5)。3条多肽在HK-2细胞脂质损伤模型中的修复作用各不相同:FL-8和PY-5能提高HK-2细胞模型的抗氧化能力,使细胞内谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和总抗氧化能力(T-AOC)显著升高,降低细胞中活性氧的荧光强度,并显著降低丙二醛(MDA)水平,而LL-7能降低GSH-Px活性与T-AOC能力,能显著降低MDA的含量;在调节细胞的脂质代谢方面,FL-8与PY-5分别在不同程度上降低总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白-胆固醇含量,并显著增加高密度脂蛋白-胆固醇含量,而LL-7则会加剧细胞内的脂质蓄积;FL-8与PY-5显著降低炎症因子白细胞介素-18(IL-18)的水平,而LL-7则相反(α=0.05)。【结论】制备的MSP对PA诱导的HK-2具有保护作用,可为鮟鱇鱼皮活性肽的利用和缓解脂质肾毒性产品的开发提供理论基础和实验依据。

关键词：鮟鱇鱼皮活性肽分离纯化 HK-2细胞保护

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响应面法优化柞蚕蛹虫草活性肽提取工艺研究

中国饲料 2024年第5期 45-50页

作者：刘博佳李正钰柳叶飞王泽徐方旭沈阳师范大学生命科学学院辽宁沈阳110034 沈阳师范大学粮食学院辽宁沈阳110034 沈阳师范大学实验教学中心辽宁沈阳110034 辽宁省功能性蛹虫草重点实验室辽宁沈阳110034 沈阳市功能性蛹虫草产业技术研究院辽宁沈阳110034 辽宁省蛹虫草种质资源库辽宁沈阳110034

为优化柞蚕蛹虫草多肽提取工艺,本试验分别研究了pH、酶解时间、反应温度和加酶量对多肽得率的影响,并采用响应面法对提取条件进行了优化。结果表明:四种因素对柞蚕蛹虫草多肽得率的影响顺序为pH>酶解时间>反应温度>加酶量,最佳酶解条件... 详细信息

为优化柞蚕蛹虫草多肽提取工艺,本试验分别研究了pH、酶解时间、反应温度和加酶量对多肽得率的影响,并采用响应面法对提取条件进行了优化。结果表明:四种因素对柞蚕蛹虫草多肽得率的影响顺序为pH>酶解时间>反应温度>加酶量,最佳酶解条件为:酶解时间2.8 h、加酶量2%、pH 9.7、反应温度56℃。在此酶解条件下进行验证试验,测得柞蚕蛹虫草多肽得率平均值为86.1%,与预测值87.52%接近,表明该模型能较好地预测辅助提取柞蚕蛹虫草活性肽,可为柞蚕蛹虫草的产业性开发应用提供依据。

关键词：柞蚕蛹虫草活性肽响应面法

南极磷虾活性肽对非酒精性脂肪肝病模型的保护作用研究

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浙江海洋大学学报（自然科学版） 2024年第1期43卷 11-19,32页

作者：骆鑫鑫胡渝东王斌赵玉勤浙江海洋大学食品与药学学院浙江舟山316022

以南极磷虾活性肽作为实验材料,采用油酸(OA)诱导人肝癌细胞(HepG2)建立体外非酒精性脂肪肝细胞模型,评价南极磷虾活性肽对体外非酒精性脂肪肝(NAFLD)的保护作用。利用NAFLD细胞模型筛选具有保护作用的活性肽,发现寡肽Val-Glu能够极显... 详细信息

以南极磷虾活性肽作为实验材料,采用油酸(OA)诱导人肝癌细胞(HepG2)建立体外非酒精性脂肪肝细胞模型,评价南极磷虾活性肽对体外非酒精性脂肪肝(NAFLD)的保护作用。利用NAFLD细胞模型筛选具有保护作用的活性肽,发现寡肽Val-Glu能够极显著降低细胞内TG含量(P活性肽Val-Glu进行降脂活性评价,通过油红O染色实验观察到其能显著减轻HepG2细胞内脂质沉积;进一步对其进行抗氧化活性评价,结果表明Val-Glu能够显著抑制OA所引起的ROS生成增加,并且显著提高CAT、SOD和GSH-Px活力,降低脂质过氧化产物MDA含量。

关键词：南极磷虾活性肽非酒精性脂肪肝

大豆发酵食品毛豆腐中活性肽的制备及功效评价

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中国食品学报 2023年第3期23卷 217-228页

作者：胡晓倩桂子康邓军伟王家政郑晓慧杜金金吴永祥黄山学院生命与环境科学学院安徽黄山245041

为探究大豆发酵食品毛豆腐中活性肽的性能,研究酶解制备徽州呈坎罗氏毛豆腐活性肽的提取工艺,并对活性肽溶液进行分离纯化、体外抗氧化功效评价和氨基酸组成分析。结果显示:采用单酶酶解法制备毛豆腐活性肽,碱性蛋白酶制备的活性肽含量... 详细信息

为探究大豆发酵食品毛豆腐中活性肽的性能,研究酶解制备徽州呈坎罗氏毛豆腐活性肽的提取工艺,并对活性肽溶液进行分离纯化、体外抗氧化功效评价和氨基酸组成分析。结果显示:采用单酶酶解法制备毛豆腐活性肽,碱性蛋白酶制备的活性肽含量最高。响应曲面法优化酶解毛豆腐提取活性肽的最优工艺条件为料液比1∶50 g/mL、碱性蛋白酶用量2500 U/g、酶解温度50.78℃、pH 10.37、酶解时间2.08 h,验证提取活性肽含量为(69.441±1.033)mg/g,比未加碱性蛋白酶提取活性肽含量提高66.07%。碱性蛋白酶酶解毛豆腐活性肽溶液的总还原力,对ABTS、DPPH和羟基自由基的清除率,比未加酶的活性肽分别提高了37.80%,22.91%,31.75%和62.46%。超滤筛分获得分子质量活性肽溶液,对ABTS自由基的清除率比相同浓度酶解稀释原液分别提高了145.26%,74.71%;对DPPH自由基的清除率,比相同浓度酶解稀释原液分别提高了93.41%,72.44%。碱性蛋白酶酶解毛豆腐活性肽中蛋白质氨基酸占比73.01%,必需氨基酸占比37.74%,鲜味氨基酸占比17.39%,药用氨基酸占比43.67%。徽州呈坎罗氏毛豆腐是具抗氧化、营养和药用保健功能的食源性活性肽的优良来源,极具开发利用价值。

关键词：大豆发酵食品毛豆腐活性肽提取工艺优化抗氧化氨基酸组成

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十二种食用菌蛋白及其酶解产物降血糖活性

菌物学报 2024年第6期43卷 145-155页

作者：张保生查磊赵妍张梦珂余盼玲徐保婷陈明杰上海海洋大学食品学院上海201306 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

食用菌能提供多种人体必需的营养物质,其含有丰富的蛋白质、多糖等活性物质。蛋白质水解后的小分子肽是其活性的重要表现形式。食用菌中的蛋白酶解多肽因其天然、安全,并且具有良好的降血糖作用受到广泛关注。本研究以12种常见食用菌为... 详细信息

食用菌能提供多种人体必需的营养物质,其含有丰富的蛋白质、多糖等活性物质。蛋白质水解后的小分子肽是其活性的重要表现形式。食用菌中的蛋白酶解多肽因其天然、安全,并且具有良好的降血糖作用受到广泛关注。本研究以12种常见食用菌为研究对象,采用硫酸铵沉淀法提取蛋白,将得到的蛋白使用碱性蛋白酶进行酶解,以α-淀粉酶抑制率和α-葡萄糖苷酶抑制率作为筛选指标,发现在12种食用菌中猴头菇的蛋白酶解产物对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶具有良好的抑制作用,其对α-淀粉酶抑制率为(65.70±0.33)%,对α-葡萄糖苷酶抑制率为(69.25±0.27)%,提示猴头菇可能具有良好的降血糖活性。猴头菇酶解多肽所富含的疏水性氨基酸和碱性氨基酸可能是其具有降血糖作用的重要因素。

关键词：食用菌活性肽 α-淀粉酶 α-葡萄糖苷酶

马氏珠母贝闭壳肌活性肽制备及其辅助降血糖功效评价

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南方水产科学 2022年第5期18卷 145-152页

作者：廖津林海生伍彬秦小明曹文红高加龙郑惠娜章超桦谭绮晴广东海洋大学食品科技学院/国家贝类加工技术研发分中心(湛江)/广东省水产品加工与安全重点实验室/广东省海洋生物制品工程实验室/水产品深加工广东普通高等学校重点实验室广东湛江524088 暨南大学食品科学与工程系广东广州510632 大连工业大学海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心辽宁大连116034

为挖掘贝类活性肽潜在的营养功能价值,选用复合蛋白酶和风味酶分别水解马氏珠母贝(Pinctada martensii)、华贵栉孔扇贝(Chlamys nobilis)和栉江珧(Atrina pectinate)的闭壳肌,以α-葡萄糖苷酶抑制活性为主要考察指标,探讨了蛋白酶种类... 详细信息

为挖掘贝类活性肽潜在的营养功能价值,选用复合蛋白酶和风味酶分别水解马氏珠母贝(Pinctada martensii)、华贵栉孔扇贝(Chlamys nobilis)和栉江珧(Atrina pectinate)的闭壳肌,以α-葡萄糖苷酶抑制活性为主要考察指标,探讨了蛋白酶种类、酶解时间、pH、温度以及酶添加量对酶解产物α-葡萄糖苷酶抑制活性的影响,筛选出最佳酶解产物,通过动物实验进一步验证其辅助降血糖的活性。结果显示,3种贝类的酶解产物均具有良好的α-葡萄糖苷酶抑制活性,其中,马氏珠母贝闭壳肌酶解物(Enzymatic hydrolysate of P.martensii adductor muscle,EHPA)活性最强,在酶解条件时间为3 h、酶添加量为5000 U·g^(−1)、酶解温度为50℃、酶解pH为7.0的条件下,EHPA的α-葡萄糖苷酶抑制活性为24.54%,其抑制活性与短肽浓度有一定相关性。动物实验结果显示,EHPA具有辅助降血糖的活性。综上,EHPA具有开发辅助降血糖功能食品的潜在应用价值。

关键词：马氏珠母贝活性肽降血糖 α-葡萄糖苷酶抑制活性